GCMS内标定量法
GC-MS法测定地下水中28种半挥发性有机物
二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷均为农残级。氯 化钠和无水硫酸钠均为优级纯 （使用前均于 ４００ ℃烘干 ６ｈ）。 １２ 标准物质
２８种 ＳＶＯＣｓ标 准 物 质 （ｏ２ｓｉ，１００ ｍｇ／Ｌ）： 萘、敌敌畏、２，４，６ 三 氯 酚、２，４ 二 硝 基 甲 苯、２，６ 二硝基甲苯、α ＢＨＣ、六氯苯、乐果、 莠去津 、β ＢＨＣ、五氯酚、δ ＢＨＣ、百菌清 、 蒽、γ ＢＨＣ、甲基对硫磷、七氯、马拉硫磷 、毒
摘要：本文针对地下水监测网运行维护规范 （ＤＺ／Ｔ０３０７ ２０１７） 中的半挥发性有机物，建立了一种液 ／液萃取 气相色谱质谱联用法，可同时测定 ２８种半挥发性有机物 （ＳＶＯＣｓ），涵盖规范中除多氯联苯外全部的 ２７个 ＳＶＯＣｓ。方法采用二氯甲烷萃取，ＳＩＭ模式经气相色谱质谱联用仪 （ＧＣ ＭＳ） 对样品进行测定，内标法定量， 可实现 ２８种半挥发性有机物的定性和定量分析。在 ００５～２０μｇ／ｍＬ质量浓度范围内，相关系数均大于 ０９９９， 线性响应良好。对吉林省内三个地区送检的地下水样品进行了测定，结果表明长春、四平、通化的地下水基本 未受到 ２８种 ＳＶＯＣｓ的污染。该方法投入少，简便且回收率、检出限、精密度、准确度均满足我国现行标准的要 求，为相关检测工作提供了技术参考。 关键词：吉林省地下水监测；半挥发性有机物；气相色谱质谱联用 中图分类号：Ｘ８３２ 文献标识码：Ｂ
GC-MS内标法测定纺织品中富马酸二甲酯及控制点分析
GC内标定量
GC－solution定量操作（内标法）一、定性操作（定性表的编辑）1.打开所要定量的标准品文件2.点击wizard，进入定性表编辑向导3.点击下一步4.输入所用的定量方法、定量校正水平数（以下以3水平为例）、定性的置信区间（window/band）5.点击下一步，选择要定量的峰及内标峰6.如是内标峰，在Type列中选择ISTD；如是目标峰则在Type列下选择Target7.点击下一步，在name列中命名内标峰及目标峰的名字8.在conc1～conc3各列中输入内标物的浓度及目标物的浓度9.点击完成后将方法另存如出现询问是否要改变当前的方法，单击“是”如出现询问是否要删除旧的校正表及定性表，单击“是”方法另存为calib.lcm二、定量操作（编辑batch表）1.点击助手栏中的top键2.再点击助手栏中的batch processing键3.出现batch表后，选中batch表的第一行，单击右键选择add row加入一行，同法操作加入三行4.定义样品类型，在sample Type列中选择样品的类型校正的第一个水平的Sample Type选择如下图所示校正的第二、第三水平的Sample Type选择如下所示选择完后结果如下5.定义校正计算的方法点击method file列右角下拉箭头出现下框选择所用的校正计算方法6.定义校正的标准品文件依次打开所用的标准品文件7.定义水平数8.在完成Batch表的编辑后应将表另存9.点击助手栏中的START开始校正计算1.校正结束后点击助手栏中的top2.再点击助手栏中的calibration curve键3.打开Data Explore，选择所用的校正方法并将它拖入右边的窗口中，生成校正曲线点击如图的箭头可以查找所定量的目标物的校正曲线。
GC中归一化法和内标法定量优缺点,适用于什么情况？
GC中归一化法和内标法定量优缺点，适用于什么情况？答：归一化法
优点：简便、定量结果与进样量无关、受操作条件变化影响较小。
缺点：必须所有组分在一个分析周期内都能流出色谱柱，检测器对它们都产生信号。
不适用于微量杂质的测定。
内标法：以一定量的纯物质（内标物），加入到准确称定的试样中，根据试样和内标物的重量及其峰面积比，求出某组分的含量。
优点：只需内标物及欲测组分出峰，操作条件变化而引起的误差小。
缺点：内标物选择难。
GC_MS内标法测定大豆渣油中维生素E的含量_周健
第39卷第12期2010年12月应 用 化 工A pp lied Che m ica l IndustryV o.l 39N o .12D ec .2010收稿日期:2010-09-10 修改稿日期:2010-10-12基金项目:江西省高校重点实验室科技计划项目资助(赣教技字09640号)作者简介:周健(1981-),女(土家族),湖南湘西人,宜春学院讲师,硕士,从事应用化学教学与研究工作。
电话:159********,E -m a i:l thb l z@j GC -M S 内标法测定大豆渣油中维生素E 的含量周健1,汤洪波2(1.宜春学院化学与工程学院,江西宜春 336000;2.江西省天然药物活性成分研究重点实验室,江西宜春 336000)摘 要:建立气相色谱-质谱联用仪内标法测定大豆渣油中维生素E 的方法。
以A g ilent -5M S 5%Phenyl M ethy l S il oxane(30m @0.25mm @0.25L m )毛细管气相色谱柱为分析柱,柱温230e ,进样口230e ,检测器230e ,内标法计算维生素E 的含量。
维生素E 线性范围是0.1~2m g /mL,回收率为95.95%,RSD 为3.52%。
该方法快速、简便,是测定大豆渣油中维生素E 含量的一种较好的方法。
关键词:GC-M S ;维生素E ;大豆渣油中图分类号:O 657 文献标识码:A 文章编号:1671-3206(2010)12-1934-02Deter m i nation of vita m i n E i n soybean resi due w ithGC -M S by usi ng i nter nal st andar d m ethodZHOU J ian 1,TANG H ong-bo2(1.Co ll ege o f Chem i stry and B i oeng ineer i ng,Y ichun U n i versity ,Y ichun 336000,China ;2.T he K ey Laboratory of R esearch on A cti ve Ing red i ents i n N a t uralM edic i ne o f Jiangx i P rov i nce ,Y ichun 336000,Ch i na)A bstract :A m ethod fo r deter m ining v ita m i n E i n soybean residue w ith GC -M S w as established by usi n g interna l standar d m ethod .The chr o m atography column w as Ag ilen-t 5M S 5%Pheny l M ethy l Siloxane(30m @0.25mm @0.25L m )quartz capillar y co l u m n .Column te m perature w as 230e ,the te mperature o fM S detector w as 230e ,the te m perature o f i n jecti o n w as 250e .The li n e range o f t h e deter m inati o n v ita m i n E w as 0.1~2m g /mL ,the recovery w as 95.95%and RSD w as 3.52%.The m ethod has been proved to be reliable and accurate .K ey words :gas chro m atog raphy -m ass spectr o m etry (GC /M S);v ita m i n E ;soybean residue 大豆渣油中含有天然维生素E ,维生素E 又名生育酚,包括生育酚和三烯生育酚两类共8种化合物,即A ,B ,C ,D 生育酚和A ,B ,C ,D 三烯生育酚。
气相色谱的内标法定量相关材料
气相色谱的内标法定量相关材料气相色谱（GC）是一种广泛应用于化学分析领域的分离技术，它通过将样品中的化合物挥发成气体并通过柱子进行分离，再利用检测器对其进行定性和定量分析。
为了提高GC的定量准确性，常常引入内标法进行定量分析。
本文将介绍气相色谱的内标法定量相关材料。
内标法是一种将内标物添加到样品中的方法，它与待测化合物具有相似的物理化学性质，可以在样品制备、进样和分离过程中与待测化合物共同存在，通过比较内标物与待测化合物的响应信号，实现对待测化合物的定量分析。
1.内标物的选择内标物的选择应基于以下几个因素：a.与待测化合物具有相似的物理化学性质，能够在样品准备、进样和分离过程中与待测化合物共同存在；b.在GC柱和检测器中产生峰与待测化合物的峰分离度足够好；c.内标物的纯度高，不与待测化合物发生化学反应。
常用的内标物包括同系物、同分异构体和结构类似的化合物。
内标物的选择要综合考虑它们与待测化合物的相似性、可获得性和稳定性等因素。
2.标准溶液的制备制备标准溶液是进行内标法定量分析的前提。
首先需要准备含有已知浓度的待测化合物的标准溶液，然后向其中加入已知浓度的内标物，将其稀释至适当的浓度范围。
标准溶液的制备过程需要精确称量和容积，以确保浓度的准确性。
3.样品制备样品制备是内标法定量分析的关键一步。
样品制备的注意事项包括：a.样品的提取方法：根据待测化合物的物理化学性质选择适当的提取方法，以提高提取效率；b.内标物的加入量：根据待测化合物和内标物的浓度范围确定内标物的加入量，以确保待测化合物与内标物的信号比例在合理范围内；c.样品的净化处理：对含有干扰物的样品进行净化处理，以消除对分析结果的干扰；d.样品的进样体积和进样方式：根据待测化合物和内标物的浓度确定进样体积和进样方式，以保证分析结果的准确性。
4.GC分析条件的优化GC分析条件的优化是内标法定量分析的重要步骤。
优化分析条件可以提高内标物与待测化合物的分离度和检测器的响应。
安捷伦GCMS内标法定量简介
安捷伦GCMS内标法定量简介（以5975为例）一、内标法基础回顾（包括外标法的概念）1. 定量响应值不同的物质，由于其物理性质，化学性质（化学结构）的不同，在气相色谱检测器（FID，TCD，FPD，ECD，MSD等）上的响应会不同。
相同量的同种物质对不同检测器响应不同。
相同量的不同物质对于同一种检测器响应不同。
在质量选择检测器（MSD）上，物质的化学结构不同，电离电位不同，需要的电离能量不同，裂解碎片不同，裂解碎片丰度不同，这样得到的质量离子色谱图的峰面积或峰高也不同（当然总离子色谱图的峰面积也不同）。
直接用响应信号定量，必然导致较大误差。
故引入响应因子或校正因子。
定量响应因子或校正因子对检测器产生的信号加以校正，校正后的峰面积可以定量的代表物质的含量。
例如图1中A, B, C三个化合物的有不同的含量和峰面积。
图1响应值S，即为某一物质（组分）在检测器所产生的信号强度（电信号，峰高，峰面积等，本篇均采用峰面积为例，包括下面的校正因子计算，内标法计算等），例如一定质量（m）的某一物质通过检测器在工作站或积分仪上产生峰面积为A，则可用下式表示：绝对响应值S’ i = A i / m i(式中：m i -----i组分的量；S’i -----i组分的校正因子；A i----i组分的峰面积)绝对响应值S就是单位量物质通过检测器时产生的信号强度（电信号，峰高，峰面积等），也成为绝对灵敏度。
一个化合物的绝对响应值就是该化合物的含量除分析这个校正混合物时该化合物的峰面积（或峰高）的值。
绝对响应值校正了检测器对不同化合物的响应能力。
当校正样和未知样品在同样的条件下分析时，外标法是基本的定量方法。
未知样品的结果与校正样的结果相比较从而计算出未知物的含量。
外标法使用绝对响应。
响应因子从校正表中得到并可储存。
在分析后面的样品时，响应因子被用于计算化合物的含量。
使用这种计算方法必须注意一点，即每次运行的进样量必须是一致的。
gc-ms分析方法如何定性定量
gc-ms分析⽅法如何定性定量质谱仪种类很多，不同类型的质谱仪主要差别在于离⼦源。
离⼦源的不同决定了对被测样品的不同要求，同时，所得信息也不同。
质谱仪的分辨率同样⼗分重要，⾼分辨质谱仪可给出化合物的组成式，对于未知物定性⾄关重要。
，在进⾏质谱分析前，需要根据样品状况和分析要求选择合适的质谱仪。
今天我们⼀起来学习GC-MS如何进⾏定性与定量的知识。
GC-MS定性分析⽬前，⾊质联⽤仪数据库中，⼀般贮存有近30万个化合物标准质谱图。
因此，GC-MS最主要的定性⽅式是库检索。
由总离⼦⾊谱图可以得到任⼀组分的质谱图，由质谱图可以利⽤计算机在数据库中检索。
检索结果，可以给出⼏种最可能的化合物。
包括：化合物名称、分⼦式、分⼦量、基峰及可靠程度。
下图是由计算机给出的某未知物谱图检索结果。
某未知化合物检索结果利⽤计算机进⾏库检索是⼀种快速、⽅便定性⽅法，但是，在利⽤计算机检索时应注意如下⼏个问题：数据库中所存质谱图有限，如果未知物是数据库中没有的化合物，检索结果也给出⼏个相近的化合物。
显然，这种结果是错误的。
由于质谱法本⾝的局限性，⼀些结构相近的化合物其质谱图也相似，这种情况也可能造成检索结果不可靠。
由于⾊谱峰分离不好以及本底及噪⾳的影响，使得到的质谱图质量不⾼，这样所得到的检索结果也会很差。
因此，在利⽤数据库检索之前，应⾸先得到⼀张很好的质谱图，并利⽤质量⾊谱图等技术判断质谱中有没有杂质峰；得到检索结果之后，还应根据未知物的物理、化学性质以及⾊谱保留值、红外、核磁谱等综合考虑,才能给出定性结果。
GC-MS定量分析GC-MS定量分析⽅法类似于⾊谱法定量分析，由GC-MS得到的总离⼦⾊谱图或质量⾊谱图，其⾊谱峰⾯积与相应组分的含量成正⽐，若对某⼀组份进⾏定量测定，可以采⽤⾊谱分析法中的归⼀化法、外标法、内标法等不同⽅法进⾏。
这时，GC-MS法可理解为将质谱仪作为⾊谱仪检测器。
其余均与⾊谱法相同，与⾊谱法定量不同的是，GC-MS法除了可利⽤总离⼦⾊谱图进⾏定量之外，还可利⽤质量⾊谱图进⾏定量，这样做可最⼤限度去除其它组份的⼲扰。
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安捷伦GCMS内标法定量简介（以5975为例）一、内标法基础回顾（包括外标法的概念）1. 定量响应值不同的物质，由于其物理性质，化学性质（化学结构）的不同，在气相色谱检测器（FID，TCD，FPD，ECD，MSD等）上的响应会不同。
相同量的同种物质对不同检测器响应不同。
相同量的不同物质对于同一种检测器响应不同。
在质量选择检测器（MSD）上，物质的化学结构不同，电离电位不同，需要的电离能量不同，裂解碎片不同，裂解碎片丰度不同，这样得到的质量离子色谱图的峰面积或峰高也不同（当然总离子色谱图的峰面积也不同）。
直接用响应信号定量，必然导致较大误差。
故引入响应因子或校正因子。
定量响应因子或校正因子对检测器产生的信号加以校正，校正后的峰面积可以定量的代表物质的含量。
例如图1中A, B, C 三个化合物的有不同的含量和峰面积。
图 1响应值S，即为某一物质（组分）在检测器所产生的信号强度（电信号，峰高，峰面积等，本篇均采用峰面积为例，包括下面的校正因子计算，内标法计算等），例如一定质量（m）的某一物质通过检测器在工作站或积分仪上产生峰面积为A，则可用下式表示：绝对响应值S’ i = A i / m i(式中：m i -----i组分的量；S’i -----i组分的校正因子；A i----i组分的峰面积)绝对响应值S就是单位量物质通过检测器时产生的信号强度（电信号，峰高，峰面积等），也成为绝对灵敏度。
一个化合物的绝对响应值就是该化合物的含量除分析这个校正混合物时该化合物的峰面积（或峰高）的值。
绝对响应值校正了检测器对不同化合物的响应能力。
当校正样和未知样品在同样的条件下分析时，外标法是基本的定量方法。
未知样品的结果与校正样的结果相比较从而计算出未知物的含量。
外标法使用绝对响应。
响应因子从校正表中得到并可储存。
在分析后面的样品时，响应因子被用于计算化合物的含量。
使用这种计算方法必须注意一点，即每次运行的进样量必须是一致的。
或者讲每一组分的检测面积除以其已知的含量得到各自的响应值。
例如图1中A化合物的绝对响应值S’ A=3000(假如单位为pA*sce)/100(假如单位为ng或ppm)=30B化合物的绝对响应值S’ B=2500/80=31.25C化合物的绝对响应值S’ C=4000/200=20组分的面积乘以响应值得到其含量（或浓度）, 即外标法：m i = A i S’ i m i = A i/S’ i外标法优点是：快速简单, 只要待测组分出峰且完全分离即可。
但要求：进样量、色谱质谱分析操作条件严格不变。
是属于绝对法。
绝对响应值的使用也是要求进样量、色谱质谱分析操作条件严格不变。
所以引入相对响应值，用于内标法的计算（进样量，操作条件没有外标法那样严格要求，是相对测定法，下面会谈到）。
化合物i的绝对响应值为S’ i = A i / m i化合物s(基准物或内标物)的绝对响应值为S’s = A s / m s则化合物i对于内标物s的相对响应值：S i/s= S’ i/S’s = A i m s /（A s m i）(或者讲内标物的相对响应值等于1)例如图1中，假如化合物B为基准物（或内标物），则相对于B，化合物A的相对响应值是：S A/s = 3000*80/(2500*100) = 0.96 或 S A/s = 30/31.25 = 0.962. 定量校正因子校正因子是定量计算公式中的比例常数，其物理意义是单位面积所代表的被测组分的量。
可用下式表示：绝对质量（或重量）校正因子f’i = m i/A i可以导出 m i = f’i A i式中：m i -----i组分的量；f’i -----i组分的校正因子；A i----i组分的峰面积例如图1中A化合物的绝对质量校正因子f’A = m A/A A = 100/3000 = 0.033(与组分性质、仪器灵敏度等有关，例如外标法采用绝对质量校正因子进行计算)相对质量校正因子 f i/s= f’i/f’s = m i A s/(m s A i)例如图1中，假如化合物B为基准物（或内标物），则相对于B，化合物A的相对校正因子是：f A/s = 2500*100/(3000*80) = 1.04响应值和校正因子的关系是互为倒数：即 S = 1/f 或 f =1//S 或Sf=1。
实际上一般多采用校正因子来进行定量计算。
注：安捷伦的仪器使用绝对响应因子（用RF表示）进行外标法定量，别的仪器是绝对校正因子。
实际上安捷伦的RF就是一般的校正因子。
3. 内标法简单的讲，内标法就是在待测的样品中准确加入一定量的内标物，根据被测物和内标物的量及其在（在质谱中是质量色谱图）色谱图相应的峰面积比取出此被测定组分的含量。
样品中加入内标物，利用被测物与内标物校正因子的比值不变来进行定量的。
首先用被测物标准品和内标物配制标准溶液，求得定量响应因子或校正因子：S i/s= S’ i/S’s = A i m s /（A s m i）或 f i/s= f’i/f’s = m i A s/(m s A i)请参考上面的相对响应值和相对校正因子的例子。
在样品中准确加入内标物后，再由它和样品的峰面积来计算：m i =（A i /A s）*m s/ (S’ i/S’s)= （A i /A s）*m s /S i/s(在安捷伦上是m i =（A i /A s）*m s * RF‘i/s）或 m i =（A i /A s）*m s* f’i/f’s = （A i /A s）*m s * f i/s例如，在含未知物A，C的样品中加入100ppm*的内标物B，进样后得到图2的色谱图：（注：*例如，准确称取1.0000样品，加入1000ppm（即0.1%）的内标物化合物B 标准液0.1000g，即在样品中的内标含量为: 1000ppm*0.1000/1.0000 = 100ppm）图2则A化合物的含量为：m iA = （A A /A s）*m s * S A/s = 2900/2400*100/0.96 = 126 (pp m)或 m i =（A i /A s）*m s * f i/s =2900/2400*100*1.04 = 126 (ppm)内标法的优点：进样量不严格要求. 内标的加入消除了由于进样量、仪器不稳定等因素带来的系统误差。
只对欲分析的组分峰做校正内标法的缺点：每次需要准确称量内标物和样品。
必须加一个组分进到样品，有可能增加面积测量误差。
作为内标的化合物其化学性质和保留时间最好都应和目标化合物相似（理想状态）。
但它必须能按保留时间或 m / z 值来和样品区分。
同位素标记目标化合物是一个理想的内标物，它可以由其离子和目标化合物的M/ Z值区别开。
选择内标物的标准1.样品中不存在2.化学性质与样品相似3.与样品有相同的浓度范围4.不会与样品发生反应5.在感兴趣组分附近流出6.可得到分离良好的、干净利落的峰*7.色谱性质稳定8.可迅速容易得到*GC/MS对于第6项不要求。
如果有条件，运用同位素标记化合物做内标物，其化学性质、色谱特性等都与目标化合物一致，因此校正精度更高。
二、积分要准确定量，必须对色谱峰正确积分。
质谱工作站通过两种积分方式，即RTE 积分器（RTE Integrator）和化学工作站积分器(ChemStation Integrator)。
RTE 积分器对相对简单的色谱图（其中的峰很窄且已完全解析）提供了一种非常快速的积分。
尤其适用于 target compound analyses(目标化合物分析)。
缺省参数假设待积分的数据是在整个色谱图范围内使用毛细管色谱柱色谱仪扫描到的数据的总离子流 (TIC)。
如果选择适当的积分参数，则 RTE 积分器即可处理采集 (SIM) 和积分目标，如在较小的保留时间窗口中检测内标化合物。
化学工作站积分器可以满足各种类型色谱图的积分，包括那些带有难于处理的基线和负峰的色谱图。
通过设置积分参数（通常称作积分事件）可以控制积分过程。
根据需要，在数据分析（Data Analysis）的色谱（Chromatogram）菜单的Select Int egrator下面选择RTE或ChemStation积分。
在MS Signal Integration Parameters…设置积分参数。
我喜欢用ChemStation积分器。
处理各种各样的峰较为方便且积分准，直观，特别峰型复杂时。
但自动编辑定量时，用RTE较好。
有关两种积分方法的各项参数的意义及使用方法请参考工作站中有关内容。
这里就不罗嗦了。
总之，在编辑定量校正表，建立校正曲线，进行内标法计算时，要设置合理的积分参数，正确积分（必要时，采用手动积分）以得良好的结果。
三、建立内标定量数据库(单级校正)示例以演示数据文件 C:\MSDCHEM\1\DATA\EVALDEMO.D为例说明如何使用自动定量设置创建定量数据库。
调用(load)evaldemo.d质谱数据文件。
并选用合适的积分参数积分。
图3检索的结果为：图4这里假定四个化合物的含量如下：保留时间RT（min）化合物含量（ppm）5.28 十二烷（dodecane） 206.43 联苯 (diphenyl) （内标） 307.74 4-氯联苯 (4-chlorodiphenyl) 269.78 十六酸甲酯 (methyl palmitate) 23使用自动定量设置创建定量数据库，选择Calibate/AutoQuant Setup 图5图6如果使用RTE积分，就在Use RTEINT前面打钩。
如果选用ChemStation积分，则去掉√。
图7定量数据库全局参数 (Quantitation Database Globals) 窗口用来编辑在当前的分析中所有化合物的有关信息。
在这儿可以设置定量报告、峰位置、新化合物资料等参数。
这些参数设置是针对所有化合物的，但对某具体化合物可以改变设置。
Calibration Title（校准标题）：如果愿意输入一个标题（可选）。
这个标题将显示在每个定量报告的标题栏中。
Default Multiplier（缺省的乘数）：在打印报告前，所有未知样品定量计算结果乘以这一给定的乘数。
Default Sample Concentration（缺省的样品浓度）：在打印报告前对未知样品的计算结果要除以这个浓度再乘100。
在最后的报告中浓度单位换成％，输入 0 值说明在报告中样品浓度用绝对值表示而不是用百分数。
Reference Window / Non-Reference Window（参考峰窗口/非参考峰窗口）：用来确定在定量数据库中指定的峰是否在要处理的数据文件中，单位是％或分钟。
如果设定值是5% 表示要处理的峰其保留时间必须是在定量数据库中保留时间的 +/- 2. 5%之内。