犬源粪肠球菌的分离与鉴定
家畜肠球菌病的分析诊断和治控要点
1病原肠球菌曾经被分类为D群链球菌。
与大多数链球菌属的真正成员不同，这些微生物拥有可用于区分其表型特征（对于盐、胆汁和亚甲基蓝具有抗性，并且在逐步升高的温度下生长）。
分子遗传分析表明，其是独特的，并促使了一个新属的建立——肠球菌。
该属有28个种，大部分生长在哺乳动物和鸟类的肠道。
肠球菌从球形到短杆形变化，直径约1μm。
肠球菌是宿主正常菌群的一部分，与机会性疾病有关。
对于耐久肠球菌、肠肪球菌和威氏肠球菌是否也是如此，还不能确定。
2病机肠杆菌通过机会性感染损伤部位而使动物致病。
一些（耐久肠球菌、肠肪球菌、威氏肠球菌）与新生动物（猪、驹、犊牛、犬和猫），以及成年犬和猫的肠道疾病有关。
肠球菌在含有牛或绵羊红细胞的血琼脂板上为α-溶血或γ-溶血。
除了耐久肠球菌、肠肪球菌和威氏肠球菌相关的疾病外，内源性肠球菌感染受到损伤的部位（如膀胱、潮湿的外耳道和尿路）。
细胞壁肽聚糖和脂壁酸启动一种炎症反应，荚膜、溶细胞素和过氧化物控制着炎症过程。
耐久肠球菌和肠肪球菌与威氏肠球菌感染动物的小肠绒毛（从顶到隐窝）有关。
相关的腹泻似乎不是由内毒素或者上皮细胞损伤引起的。
3流行大多数从感染过程中分离到的肠球菌，源于被正常菌群成员的污染。
医院环境（如污染物、看护者的手和鞋底）向损伤部位的传播是一个重要问题。
腹泻相关肠球菌（耐久肠球菌、肠肪球菌与威氏肠球菌）的流行病学仍是未知的。
肠球菌的万可霉素抗性株是人医临床上的一个重要问题，因为该属的成员（尤其是粪肠球菌和屎肠球菌）是医院内获得性感染的主要来源。
肠球菌是一群对抗微生物因子具有很强抗性的微生物。
万古霉素（一种糖肽类抗生素）是少数几种对这样的感染过程的治疗有效的药物之一。
肠球菌的万古霉素抗性株出现于欧洲，起始于用另一种糖肽类阿伏霉素（生长促进剂）饲喂食源性动物。
尽管最初的万古霉素抗性株局限于饲喂这种抗生素动物的肠道，但其很快传播开来，类似于获得人的肠道中编码万古霉素抗性的基因。
在美国（不允许使用阿伏霉素），万古霉素在人类医院的不加判断地使用导致了同样的效应。
鸽源屎肠球菌的分离鉴定及药敏试验
切胶 送 生 工生 物 工 程 （ 上海 ） 股份有限公司进行测序 ； 将 测 定
进 行 同 源 性对 比 。
球菌 （ Ｅ ． ｆ ａ ｃ ａ ｌ ｉ ｓ ） 、 屎肠球 菌 （ Ｅ ． ｆ ａ ｅ ｃ ｉ ｕ ｍ） 、 鸡肠 球菌 （ Ｅ． ｇ ａ ｌ ｌ ｉ ｎ ａ ｒ ｕ ｍ） “ 。肠 球 菌 可 以 感 染 各 种 年 龄 阶 段 的禽 ， 其中
屎 肠 球 菌 临 床 上 能 引 起 禽 的 败 血 症 。 屎 肠 球 菌 在 鸡 的 饲 养 环 境 中也 普 遍 存 在 ， 能 够 引 起 各 种 日龄 的 鸡 发 病 。本 次 屎 肠 球 菌 感 染 鸽 主 要 表 现 为 精 神沉 郁 、 食欲下 降、 机 体 消瘦 、 腹 泻、 零星死亡 ， 可 初 步 断 定 为 慢 性感 染 的 表现 形 式 。 本实验从鸽的肝脏分离到 ２ 株 肠 球 菌 属 中 的屎 肠 球 菌 ， 并 对 其 生 物 学 特 性 进 行 了相 关 研 究 ， 现将其报告如下 。
１ ． ２ ． ４ 药敏试 验 ： 采用 纸片琼脂扩 散法 ， 药敏纸 片有 ： 菌 必 治（ ３ ０ Ｆ ｇ ／ 片） 、 氟哌酸 （ １ ０ ｇ ／ 片） 、 氯霉 素 （ ３ ０， ｔ ｔ ｇ ／ 片） 、 卡 那 霉素 （３ ０ ｕ ｇ ／ 片） 、 左 氟沙 星 （ ５ ｇ ／ 片） 、 丁 胺 卡 那 霉 素
１ ０ ａｉ ｒ ｎ ， 置 于 冰上 １ ０ ｍｉ ｎ ， １ ２ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ０ ｍｉ ｎ ， 取 上 清 液作 为 Ｐ Ｃ Ｒ模 板 ； 根据 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ Ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ Ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｐ Ｃ Ｒ Ｋ ｉ ｔ 说 明 书进 行 Ｐ Ｃ Ｒ扩增 ， 经 琼 脂 糖 凝 胶 电泳 鉴 定 后 ，
动物饲料中粪肠球菌的分离鉴定
２ ±０． ２。
１１２试 剂 ．．
其 他 化 学 试 剂 均 为 分 析 纯 １１３仪 器 与 设 备 ．． ＤＹ ６ 电泳 仪 Ｙ－Ｃ 广州 广一科学 仪器有 限公司
Ｔ Ｌ １Ｍ 台 式 高速 冷 冻 离 心 机 Ｇ 一８ Ｐ ．５ 密 Ｐ ＨＳ２ 精 Ｈ计
的 我 能 说 能 动 能 站 ．尽 管 医 院 里 的 医生 看 我 连 一 点 皮 外 伤 也 没
有 说 不 要 检 查 ． 外 婆 坚 持 着 要 一 一 检 查 。检 查 完 后 ， 婆 把 我 称 儿 就 是 一 个 听 话 的孩 子 ．是 一 个 爱 学 习 的宅 宝 外 婆 不要 紧 但 外 明 然 外 抱 在 怀 里 ． 着 我 的 小 手 ， 着 我 的 脸 ， 不 成 声 ，称 呀 … … 都 的 ． 天 就 回家 了 啊 ” 后 ． 婆抖 抖 索 索 地 掏 出一 个 银 戒 指 ， 拉 亲 泣 “ 怪 我 … … 如 果 万 一 有 个 好 歹 …… 我 怎 么 对 得 起 我 的 宝 贝 呀 放 到 我 手 心 里 ． 这是 外 婆 的嫁 妆 ， 了 奖 励 宝 宝 听 话 ， 婆 送 给 “ 为 外 接 把 “ 和 ” 爸 妈 妈 赶 来 了 ． 大 叫 ：妈 妈 ， 舅 买 娃 哈 哈 给 我 吃 ， 爸 我 “ 舅 还 我 的称 儿 ” 着 ， 我 的手 和 妈 妈 的 手 拉在 一 起 ， 宅 宝 ， 妈 妈
据 兰 氏 （ ａｃｎ １） 清 学 分 类 ， 将 链 球 菌 分 成 许 多 群 。 链 球 紫 Ｏ０ ５ ， 脂 １ｇ 水 １０ ｍＬ 用 ＨＣ 或 Ｎ Ｏ 调 ｐ 值 至 ７ Ｌ ｎｅ ｅｄ 血 可 粪 ．１ ｇ 琼 ３， ００ ， １ ａＨ Ｈ ． 菌 属 于 Ｄ群 粪 肠 球 菌 （ ｎｅＯ ｏ ｃ ｓｆ ｃ ｌ １ 目前 专 用 的微 生 物 青 贮 接 Ｅ ｔ＂ ｃ ｕ ｅ ａｉ 是 １ｃ ａ ｓ 种 剂 主 要 菌 种 之一 ． 具 有 防治 动 物 肠 道 菌 丛 区 系 紊 乱 ， 解 淀 还 分 粉 为 葡 萄 糖 和 合 成 Ｂ族 维 生 素 等 功 效 。 可 用 作 饲 料 添 加 剂 ， 既 也 可用作医用药品 ． 其适用于猪 、 和牛等动物 。 尤 鸡
犬源大肠杆菌分离鉴定及耐药性分析
ＡＢＳＴＲＡＣＴ： Ｔｈｅ ｏ ｃ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｎｃ ｅ ｏ ｆ ａ ｎｔ ｉ ｍｉ ｃ ｒ ｏｂ ｉ ａ ｌ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎｃ ｅ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎｃ ｅ ｐ ａ ｔ ｔ ｅ ｒ ｎｓ ｏ ｆ Ｅｓ ｃ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｈｉ ａ ｃ ｏ ｌ ｉ ｆ ｒ ｏ ｍ ｄ ｏｇｓ ｗａ ｓ ｉ ｎ ｖｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈｉ ｓ ｓ ｔ ｕｄ ｙ． Ａ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ １ ９ １ ａ ｎａ ｌ ｓ ｗａ ｂ ｓ ａ ｍ ｐｌ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｄｏ ｇｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄｉ ｎｇ ５ ９ ｗｏｒ ｋｉ ｎ ｇ ｄ ｏ ｇｓ ． Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ ｗｅ ｒ ｅ ｉ ｓ ｏｌ ａ ｔ ｅ ｄ ａ ｎ ｄ ａ ｎａ ｌ ｙｚ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｐ ｈｙｌ ｏ ｇｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｇ ｒ ｏｕｐ ｓ ａ ｎｄ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ ｏ １ ３ ａ ｎｔ ｉ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂｉ ａ ｌ ａ ｇ ｅ ｎｔ ｓ ． Ａ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｏｆ ２ ５４ Ｅｓ ｃ ｈ ｅ ｒ ｉ ｃ ｈｉ ａ ｃ ｏｌ ｉ ｉ ｓ ｏｌ ａ ｔ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ １９ １ ａ ｎａ ｌ ｓ ｗａ ｂ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｏｆ ｄ ｏ ｇｓ ． Ａｍ ｏｎ ｇ ｃ ａ ｎｉ ｎ ｅ Ｅ． ｃ ｏｌ ｉ ｉ ｓ ｏｌ ａ ｔ ｅ ｓ ，７ ７． ５６ ７ ５ ．９ ８ ｔ ｏ ａ ｍ ｐｉ ｃ ｉ ｌ ｌ ｉ ｎ ． Ｒｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎｃ ｅ ｔ ｏ ｍｅ ｒ ｏｐ ｅ ｎｅ ｍ ａ ｎ ｄ ｐ ｏｌ ｙ ｍ ｙｘ ｉ ｎ Ｂ ｗａ ｓ ｏｂ ｓ ｅ ｒ ｖｅ ｄ ｉ ｎ ３． ５４ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ ｏ ａ ｍｉ ｋａ ｃ ｉ ｎ ａ ｎｄ ｏ ｆ ｔ ｈｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｓ，ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ —
肠炎型细小病毒犬肠道内细菌分离鉴定及药敏试验
养 基、 Ｓ Ｓ琼 脂 培 养 基 、 三糖铁培养基等 。 １ ． １ ． ３ 试验 药物 ： 庆 大霉素 ， 氟 苯尼考 ， 林 可霉素 ， 复 方 新 诺
明， 菌必治等 。
山梨 醇
水杨 素
＋
一
麦 芽 糖
吲 哚
④
＋
１ ． ２
试 验 方 法
木 糖
蔗 糖
ＶＰ试 验
＋
一
一
棉 籽 糖
赖 氨 酸
明胶
＋
＋
～
１ ． ２ ． １ 粪样采集 ： 用灭菌棉签采集直肠 深部粪便 ， 放 入 严 格
灭菌的小瓶 中， 置 于 ４℃冰 箱 备 用 。
１ ． ２ ． ２ 接种培养 ： 在 超净 工 作 台 上 将 样 品分 别 接 种 到 营 养 琼 脂 培 养 基 和麦 康 凯 培 养 基 上 ， 标 明接 种 的 编 号 。接 种 时 用 采
甘 露 醇
甲基 红
①
＋
三糖 铁
④
样 的棉 签轻 轻 涂 抹 于 培养 基 的 一 头 ， 之 后 用 接 种 环 以“ ｚ ” 字 形
划开 ， 每 涂 过 培 养 皿 的一 半 时 旋 转 ９ Ｏ 。 ， 接 种 环 烧 白灭 菌 后 继
宠物犬源致病性大肠杆菌鉴定血清型检测与耐药性分析
宠物犬源致病性大肠杆菌鉴定血清型检测与耐药性分析吴萍萍【摘要】为了分析安徽池州地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型及耐药性,使用无菌肛门拭子采集26家宠物医院腹泻宠物粪便样品63份进行细菌分离鉴定,获得了30株大肠杆菌.对分离的30株大肠杆菌用灌胃方式攻毒小鼠验证其致病性,结果显示,20株为致病性大肠杆菌.利用玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别测定20株致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性,结果显示,20株致病性大肠杆菌分离株共有10种血清型,以O8和O13为优势血清型;20株致病性大肠杆菌分离株均对头孢克肟、头孢曲松、恩诺沙星、丁胺卡那霉素4种药物高度敏感;对其他药物存在不同程度的耐药.本试验为该地区的宠物犬大肠杆菌病的防治提供基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2018(054)007【总页数】3页(P74-76)【关键词】宠物犬;大肠杆菌病;血清型;耐药性【作者】吴萍萍【作者单位】池州职业技术学院,安徽池州247000【正文语种】中文【中图分类】S858.292随着人们生活质量的提高，城市及农村宠物犬的养殖数量越来越多，宠物犬成为人们日常生活中重要伴侣动物，宠物犬的健康受到人们的关注。
宠物犬的腹泻为临床中常见的疾病之一，引起宠物犬腹泻的病原主要有致病性大肠杆菌、沙门菌、绿脓杆菌、巴氏杆菌等，其中，致病性大肠杆菌是引起宠物犬腹泻为临床中常见的疾病。
宠物犬大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起初生幼犬急性肠道传染性疾病，初生幼犬主要表现腹泻败血症症状，成年犬感染致病性大肠杆菌后可引起泌尿系统感染、子宫炎和睾丸炎，还可以导致公犬的精子数量下降，致病性大肠杆菌严重危害宠物犬的健康[1-2]。
大肠杆菌广泛存在环境中，是一种重要的人兽共患病原菌，且该菌血清型众多，许多动物具有相同的血清型，但不同地区流行的血清型不同[3-4]。
在宠物犬源大肠杆菌病治疗过程中，由于不合理使用抗生素，宠物犬源大肠杆菌对抗生素也产生很强的耐药性，应引起重视[6]。
粪肠球菌检验操作规程
粪肠球菌检验操作规程1、质量标准来源：Q/ZOK006-20122、名称：粪肠球菌汉语拼音：Fenchang Qiujun3、检验过程3.1、感官：取本品适量，置于非太阳光直射条件下的明亮处，目视检测，本品色泽为灰白色至淡棕黄色，固体外观为粉状或颗粒状，略带腥味，无发霉变质、结块及异味、异臭。
；液体外观为淡黄色至淡棕黄色，无悬浮物。
3.2、成品粒度：精密称取本品100g，置于1.19mm金属丝编制筛中，手动或机械振摇10分钟，本品应100％通过1.19mm孔径的筛网。
3.3、水分：取本品1g，精密称定，置于经105℃烘干至恒重的扁形称量瓶中，在105℃条件下干燥至恒重，减失重量应不得过9.0%。
3.5、粪肠球菌：3.5.1、试剂和培养基3.5.1.1、稀释液：0.85%生理盐水经121℃高压灭菌20分钟3.5.1.2、MRS培养基：称取蛋白胨10.0g、牛肉粉5.0g、酵母粉4.0g、葡萄糖20.0g、吐温80-1.0ml、七水磷酸氢二钾2.0g、三水醋酸钠5.0g、柠檬酸三铵2.0g、七水硫酸镁0.2g、四水硫酸锰0.05g、琼脂粉15.0g，将上述各组分置于1000ml纯化水中，加热搅拌使溶解，调pH值为7.2，经121℃高压灭菌20分钟，在无菌条件下注入灭菌后的平皿中，每个平皿约注入15ml培养基。
3.5.2、检测方法：在无菌条件取样25g，置于含225ml灭菌稀释液的锥形瓶中，其中置玻璃珠数颗，振摇使样品完全分散于溶液中，即为1:10的稀释液；用移液器或灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml，置于含灭菌稀释剂9ml的离心管（或试管）中，密封，摇匀；按上述稀释次序递次稀释至适宜的稀释倍数；取2-3个适宜稀释倍数离心管，用移液器或灭菌吸管吸取0.1ml，接种至MRS培养基平皿上，每个浓度接种两个平皿，使用灭菌后的涂布棒小心涂布接种液于培养基表面，涂布好的平皿盖好后室温静置15分钟，密封并倒置平皿于37±1℃培养箱中培养48±2小时观察。
犬源粪肠球菌的分离与鉴定
第25卷 第2期 天 津 农 学 院 学 报 V ol. 25，No. 2 2018年6月 Journal of Tianjin Agricultural University June ，2018收稿日期：2018-01-30基金项目：天津农学院大学生创新创业项目（201710061193）；天津自然科学基金项目（07JCYBJC16000）；天津农学院附属动物医院项目（ZH004903） 作者简介：陆璐（1997-），女，本科在读，主要从事预防兽医学方面研究。
E-mail：1043146254@。
通信作者：杨建德（1969-），男，教授，博士，主要从事预防兽医学方面的教学与研究。
E-mail：jiandeyang@。
文章编号：1008-5394（2018）02-0047-04 DOI：10.19640/ki.jtau.2018.02.012犬源粪肠球菌的分离与鉴定陆璐，张希墨，刘燕霏，杨建德通信作者（天津农学院 动物科学与动物医学学院，天津300380）摘 要：随着都市宠物业的发展，伴侣动物的化脓性疾病日趋增多。
为探究其影响病原，本研究对一例犬子宫蓄脓的浓汁进行了病原学鉴定。
利用细菌学检测方法对采集到的病料进行分离纯化、涂片染色、镜检和生化鉴定，然后采用16S rRNA 基因序列分析鉴定，发现该分离株的形态特征、生化结果与粪肠球菌一致，分离菌株的16S rRNA 也与参考的粪肠球菌菌株同源性高达99%。
药敏试验检测发现，该菌株对四环素、青霉素G、米诺环素、红霉素、诺氟沙星、环丙沙星、万古霉素、左氟沙星、克林霉素、多粘菌素B、氯霉素、复方新诺明和克拉霉素表现为耐药，对苯唑西林和呋喃妥因敏感。
这些研究结果可为治疗此类多重耐药性肠球菌感染提供参考。
关键词：粪肠球菌；生化鉴定；进化树分析；药敏试验中图分类号：S852.611 文献标识码：A Isolation and identification of canine Enterococcus faecalisLU Lu ，ZHANG Xi-mo ，LIU Yan-fei ，YANG Jian-de Corresponding Author（College of Animal Science and Veterinary Medicine,Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China ）Abstract: With the development of the urban pet industry, suppurative diseases of companion animals are increasing day by day.To explore its associated pathogens, this study was performed on etilolgical identification from a case of a canine uterus with pus. Bacteriological detection method was used to isolate and purify the collected disease materials, such as smear staining, microscopic examination and biochemical identification. Then, 16S rRNA molecular sequence analysis was used to identify the the isolated strain. It was found that the morphological features of the isolated strain and the biochemical results were consistent with the Enterococcus faecalis . The 16S rRNA of the isolated strain was also as high as 99% homologous with the reference stains. Drug susceptibility test showed that the isolate was resistant to tetracycline, penicillin G , minocycline, erythromycin, ciprofloxacin, norfloxacin, vancomycin, levofloxacin, clindamycin, polymyxin B, chloramphenicol, compound sulfamethoxazole, and clarithromycin, and only sensitive to oxacillin and nitrofurantoin. These results provided a reference for the treatment of this type of multidrug-resistant enterococcal infection.Key words: Enterococcus faecalis ; biochemical identification; evolutionary tree analysis; drug sensitive test粪肠球菌又称粪链球菌，革兰氏染色为阳性，是人和动物肠道内主要菌群之一[1]。
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犬源粪肠球菌的分离与鉴定
陆璐;张希墨;刘燕霏;杨建德
【期刊名称】《天津农学院学报》
【年(卷),期】2018(025)002
【摘要】随着都市宠物业的发展,伴侣动物的化脓性疾病日趋增多.为探究其影响病原,本研究对一例犬子宫蓄脓的浓汁进行了病原学鉴定.利用细菌学检测方法对采集到的病料进行分离纯化、涂片染色、镜检和生化鉴定,然后采用16S rRNA基因序列分析鉴定,发现该分离株的形态特征、生化结果与粪肠球菌一致,分离菌株的16S rRNA也与参考的粪肠球菌菌株同源性高达99％.药敏试验检测发现,该菌株对四环素、青霉素G、米诺环素、红霉素、诺氟沙星、环丙沙星、万古霉素、左氟沙星、克林霉素、多粘菌素B、氯霉素、复方新诺明和克拉霉素表现为耐药,对苯唑西林和呋喃妥因敏感.这些研究结果可为治疗此类多重耐药性肠球菌感染提供参考.【总页数】4页(P47-50)
【作者】陆璐;张希墨;刘燕霏;杨建德
【作者单位】天津农学院动物科学与动物医学学院,天津300380;天津农学院动物科学与动物医学学院,天津300380;天津农学院动物科学与动物医学学院,天津300380;天津农学院动物科学与动物医学学院,天津300380
【正文语种】中文
【中图分类】S852.611
【相关文献】
1.一株水貂源致病性粪肠球菌分离与鉴定 [J], 葛俊伟;夏爽;赵丽丽;魏成威;崔文;姜艳平;张萍;陈洪岩
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