测蛋白、多糖的方法
检验蛋白质的方法及现象
检验蛋白质的方法及现象检测蛋白质的方法有：1、分子量测定法：通过把蛋白质以某种介质流动，使其迅速穿越一定粒径的离子交换层，然后采取液相色谱法测定相应蛋白质的分子量，从而求出特定蛋白质的特征分子量。
2、凝胶电泳：是将蛋白质在 LED-偶联法分子量鉴定，是采用激光电子捕获和驱动，蛋白质和急性偶联物组合结合，以生产一种特殊的类聚多糖化合物，达到电泳分离蛋白质的目的。
3、蛋白质的细胞测定：通过把蛋白质放到不同浓度的离子条件下，以细胞技术手段测定蛋白质的稳定性和可被抑制的性能。
4、体外模拟实验：将不同比例的蛋白质与某种固定化剂混合，模拟体内条件，以测定蛋白质的稳定性和特异性。
5、放射性标记：把蛋白质结合放射性标记的药物标记物，然后使用凝胶电泳，紫外可见光谱等方法测定放射性标记的标记物显示的服用蛋白质的分布和定量，从而评价蛋白质的质量。
6、 DNA 分子测定：采用高效液相色谱法，把蛋白质代谢到个体 DNA 分子中，测试DNA 分子的碱性度，判断蛋白质含量。
7、蛋白质安定性分析：利用数据库软件（如Bridge），研究蛋白质在体外条件及温度、pH值、盐浓度、有机溶剂含量及催化剂等共表征环境中作用时，结构安定性的变化。
蛋白质性现象：1、可均质性降解及易损质：蛋白质对热、酸、碱、抗生素等有不同的稳定性，受物理化学作用的刺激，无论是天然的还是添加的成分，均可使其酶聚及脱氨键，影响溶解性。
2、亲和性：蛋白质分子由于其胞内的环境不同，构成不同的分子结构状态，各种实验条件的变化，均会影响蛋白质的亲合力，从而导致其亲合性的变化。
3、可流动性：蛋白质分子和结构会受到它们离子和结构性结合能力等因素的影响，当环境条件改变时，蛋白质分子之间的排斥力发生增大，从而减少可流动性。
4、免疫原性：由于蛋白质本身的分子结构和结合特性，出现不可逆的结构变化尤其是连锁反应，导致其免疫原性大大增强，从而产生特异性抗体。
5、细胞毒性：在一定条件下，蛋白质被细胞直接吸收，可抑制细胞的生理和代谢活动，使细胞破坏，从而产生细胞毒性。
多糖含量测定的几种不同方法比较
多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。
并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。
这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。
关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。
鉴定多糖纯度的方法
鉴定多糖纯度的方法鉴定多糖纯度的方法有许多，主要包括化学方法、生物方法和物理方法。
这些方法可以单独使用，也可以结合使用，以确保结果的准确性和可靠性。
化学方法在多糖纯度鉴定中是最常用的方法之一。
其中，比较常见的方法包括色谱法、光谱法、色素结合法和酶解法等。
1. 色谱法：色谱法是最常用的多糖纯度鉴定方法之一。
常见的色谱方法有气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC、IC、GFC）等。
通过色谱法可以分离和鉴定多糖样品中的各种组分，并根据各组分的相对峰面积或峰高来计算多糖的纯度。
2. 光谱法：光谱法是通过测量多糖在特定波长下吸光度的变化来确定纯度的方法。
常见的光谱法包括紫外-可见光谱法（UV-Vis）、红外光谱法（IR）、核磁共振光谱法（NMR）等。
通过这些光谱方法，可以鉴定多糖的结构特征和纯度。
3. 色素结合法：色素结合法是通过将某些选择性结合多糖或特定结构单糖的染料加入到多糖样品中，并测定剩余染料的浓度来确定纯度。
常见的色素结合法有甲基磺酸法、亚甲基蓝法、石蕊试剂法等。
4. 酶解法：酶解法是利用特定酶对多糖进行降解，并通过测定酶解产物的含量来计算多糖的纯度。
常见的酶解法有混合酶消化法、酶联免疫吸附实验（ELISA）法等。
生物方法是通过利用生物学特性来鉴定多糖纯度的方法，主要包括凝胶电泳法和生物活性测定法。
1. 凝胶电泳法：凝胶电泳法是通过将多糖样品在电场中进行分离和检测，根据迁移率和带电量的不同来鉴定多糖的纯度。
常见的凝胶电泳法有蛋白凝胶电泳法、琼脂糖凝胶电泳法等。
2. 生物活性测定法：某些多糖具有特殊的生物活性，例如抗氧化活性、抗炎活性等。
通过测定多糖样品的生物活性，可以初步判断多糖的纯度。
常见的生物活性测定方法有DPPH自由基清除法、还原力测定法等。
物理方法主要是通过测定多糖样品的物理性质来推断其纯度，包括密度测定法、流变学测试、比旋光度测定法等。
1. 密度测定法：密度是物质单位体积质量的测量，可以通过测定多糖样品的体积和质量来计算其密度。
多糖除蛋白的方法
多糖除蛋白的方法多糖除蛋白是一种常见的实验技术，用于制备纯化的多糖样品。
它适用于许多不同类型的多糖，包括淀粉、聚葡萄糖、海藻酸等。
在本文中，我们将详细介绍多糖除蛋白的方法。
多糖除蛋白的方法有多种，其中最常用的是酶法和重组蛋白亲和层析法。
下面我们将详细介绍这两种方法。
1.酶法：酶法是最常用的除蛋白方法之一。
多糖通常会与蛋白质结合在一起形成复合物，通过酶法可以将这种复合物分解成单独的多糖和蛋白质。
酶法分为两步：预处理和酶处理。
预处理：首先将多糖样品与一定体积的缓冲液（如PBS缓冲液）混合，使其达到适宜的pH值和离子强度，并加入一定量的还原剂（如二硫代乙酸）以破坏多糖的分子间氢键。
然后加入一定浓度的蛋白酶抑制剂（如苯甲酸硼酸盐）以保护多糖不受蛋白酶降解。
酶处理：选择适合的酶对多糖进行处理。
常用的酶有葡萄糖酸酶、淀粉酶等。
将酶加入预处理好的多糖样品中，并在适宜的温度和pH条件下进行酶解反应，通常持续数小时至数天。
酶解反应结束后，将样品进行离心分离，上清液中即可得到纯化的多糖样品。
2.重组蛋白亲和层析法：重组蛋白亲和层析法利用多糖和结合多糖的蛋白质之间的特异性相互作用来分离蛋白质。
这需要使用带有特定亲和标签（如Histidine 标签）的重组蛋白来结合多糖。
以下是该方法的具体步骤：制备多糖亲和柱：在柱子中填充具有亲和标签的重组蛋白（如融合了Histidine标签的亲和素树脂）。
样品处理：将多糖样品与一定浓度的缓冲液混合，并加入适量的离子强度调节剂（如NaCl），使其达到适宜的pH和离子强度。
样品加载：将样品加载到多糖亲和柱中，并进行一定的洗脱步骤以去除非特异结合的蛋白质。
洗脱：使用具有高亲和性的络合剂（如带有希尔斯标签的络合剂）来洗脱绑定的多糖和蛋白质复合物。
这样，多糖和蛋白质将分开，并且纯化的多糖样品将固定在亲和柱上。
重组蛋白亲和层析法是一种有效的多糖除蛋白方法，因为它可以通过特异性相互作用来分离多糖和蛋白质，从而获得高纯度的多糖样品。
生物大分子的研究方法和测量技术
生物大分子的研究方法和测量技术是现代生物学研究的重要内容之一。
大分子是指高分子化合物的总称，包括蛋白质、核酸和多糖等。
研究大分子可以了解生物体的结构、功能和相互作用，探究生命科学的奥秘。
本文将介绍几种常用的生物大分子研究方法和测量技术。
一、X射线晶体学X射线晶体学是一种通过测量物体对X射线的散射模式来确定物体结构的方法。
在生物学中，X射线晶体学是研究蛋白质和其他生物大分子结构的重要手段。
这种方法的原理是将蛋白质或其他大分子结晶并放入X射线束中测量其对X射线的反射和散射情况。
通过解析散射模式，可以确定生物大分子的3D结构，了解其具体功能和相互作用机制。
目前，世界范围内已经解析了大量的生物大分子结构，为生命科学的研究提供了重要的支持。
二、核磁共振核磁共振是一种利用原子核的自旋来测定物质性质的物理技术。
在生物学中，核磁共振被广泛应用于研究蛋白质和其他大分子结构。
这种方法的原理是将蛋白质或其他大分子样品置于强磁场中，然后通过加入特定的干扰信号使得样品中的原子核发生共振。
通过测量原子核共振时向磁场加强的能量，可以分析样品的组成和结构。
核磁共振技术对于研究生物体的代谢和运动过程、分子生物学及其它生命科学领域都产生了关键性的作用。
三、电泳电泳是一种利用电场影响物质迁移的化学分析技术，广泛应用于生物学中。
在电泳中，通过将蛋白质或其他生物大分子穿过电场中的介质，可以根据它们的大小、形状和电荷的差异使它们在电场中发生迁移，从而实现分离。
通常电泳法是将生物大分子溶解在缓冲液中，涂于电泳器中的凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电动输移的技术。
通过电泳的分离，可以研究某些特定蛋白质或其他生物大分子的组成和相互作用等生物学问题，为后续研究提供更多的信息。
四、质谱质谱是一种利用分子离子的质量和荷电量来鉴别和分析化合物的技术。
在生物学中，质谱被广泛应用于研究蛋白质和其他生物大分子。
这种方法的原理是将生物分子样品转化为气态，通过质谱仪对其进行分析，以得到样品分子的质谱图。
临床常用蛋白检测方法
测定蛋白质含量的方法有凯氏定氮法、双缩脲法、考马斯亮蓝法等。
1、凯氏定氮法：准备4个50mL凯氏烧瓶并标号，向1、2号烧瓶中加入定量的蛋白质样品，另外两个烧瓶作为对照，在每个烧瓶中加入硫酸钾-硫酸铜混合物，再加入浓硫酸，将4个烧瓶放到消化架上进行消化，之后进行蒸馏。
全部蒸馏完毕后用标准盐酸滴定各烧瓶中收集的氨量，直至指示剂混合液由绿色变回淡紫红色，即为滴定终点，结算出蛋白质含量。
2、双缩脲法：是一种用于鉴定蛋白质的分析方法。
双缩脲试剂呈蓝色，是一种碱性含铜测试溶液，它由几滴1%硫酸铜，1%氢氧化钾和酒石酸钾钠制成。
3、考马斯亮蓝法：基本原理是基于蛋白质可以与考马斯亮蓝G-250定量结合。
多糖蛋白结合cdap 法
多糖蛋白结合cdap 法
多糖蛋白结合CDAP法是一种常用的实验方法，用于研究多糖与蛋白质之间的相互作用。
CDAP是Carbodiimide Activation of Polysaccharides的缩写，意味着利用碳二亚胺激活多糖分子表面上的羟基，使其能够与蛋白质发生共价结合。
具体步骤如下：
1. 准备多糖溶液：将多糖溶解在适当的缓冲液中，使其浓度达到所需浓度。
2. 激活多糖：加入碳二亚胺（通常是N-乙基-N'-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺甲硫酸盐，EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）到多糖溶液中，反应一定时间使多糖表面的羟基与碳二亚胺发生反应。
3. 添加蛋白质：将待测蛋白质加入已激活的多糖溶液中，充分混合，使其与多糖发生共价结合。
4. 离心洗涤：用适当的缓冲液洗涤共价结合的多糖蛋白复合物，去除未结合的蛋白质和其他杂质。
5. 分析：可以使用各种方法来分析多糖和蛋白质的结合情况，如SDS-PAGE、Western blot等。
多糖蛋白结合CDAP法可以用于研究多糖与蛋白质之间
的结合亲和力、结合位点以及结合动力学等信息。
它在生物医学研究、药物开发等领域具有广泛应用。
多糖与胞内蛋白相互作用实验方法
哎呀，这个话题听起来就挺专业的，不过我尽量用大白话给你讲讲，咱们就当是闲聊。
首先，咱们得知道多糖和胞内蛋白这俩货是啥。
多糖，就是那种一串一串的糖分子，胞内蛋白呢，就是细胞里面的一种蛋白质。
它们俩能相互作用，这事儿挺重要的，因为这种相互作用可能会影响到细胞的功能，甚至和一些疾病有关。
咱们要研究它们怎么相互作用，就得用到实验方法。
这里头，我得提一个挺常用的方法，叫做“共沉淀实验”。
这个实验的步骤大概是这样的：1.准备阶段：首先，你得有纯化的多糖和胞内蛋白。
这俩货得是干干净净的，不能有别的杂质掺和进来，不然实验结果就不准了。
2.混合阶段：把多糖和胞内蛋白混在一起，让它们有机会“认识”一下。
这个混合的过程得控制好条件，比如温度、pH值，这些因素都可能影响到它们之间的相互作用。
3.沉淀阶段：接下来，就是让它们“抱团”的时候了。
通常我们会用一些化学试剂，比如硫酸铵，来帮助沉淀。
这个步骤的目的就是让那些和多糖结合的蛋白沉淀下来，没结合的就留在上清液里。
4.分离阶段：沉淀下来的东西，咱们得把它们从溶液里分离出来。
这通常用离心机来完成，高速旋转，让沉淀物沉到管子底部。
5.检测阶段：最后，就是看看到底哪些蛋白和多糖结合了。
这可以通过Western blot或者质谱等方法来检测。
这个实验听起来挺简单，但实际操作起来还是挺复杂的。
你得小心操作，不然很容易出错。
比如，混合的时候温度高了，可能就把蛋白给变性了；沉淀的时候，如果硫酸铵加多了，可能就把蛋白给沉淀过头了。
而且，这个实验还有个问题，就是它只能告诉你哪些蛋白和多糖结合了，但具体是怎么结合的，这个实验就看不出来了。
所以，你还得用其他的方法，比如X射线晶体学或者核磁共振，来进一步研究它们之间的结合细节。
总之，研究多糖和胞内蛋白的相互作用，是个挺有意思的事儿，但也得下一番功夫。
希望我说的这些，能给你一点启发。
咱们下次再聊别的吧！。
多糖含量测定的方法综述
多糖含量测定的方法综述多糖是生命体中常见的一类生物大分子，包括淀粉、糖原、纤维素、半乳糖等。
多糖的含量测定是生物学、医学、食品科学等研究领域中基础而重要的实验技术，已经形成了成熟的测定方法体系。
本文将综述多糖含量测定的方法，包括光度法、比旋光度法、甘氨酰胺检测法、酚硫酸法、酸水解法、Kjeldahl法等。
一、光度法光度法是多糖含量快速测定方法之一，它基于不同种类的多糖对于不同波长光的吸收度的不同。
目前多数测定方法都采用酚-硫酸法，它是一种标准化测定方法。
该方法基于多糖与酚和浓硫酸反应，生成紫色物质，该紫色物质在450nm处有最大吸收。
该方法测定范围广泛，适用于淀粉、糖原、低聚糖等多糖的快速测定。
但该方法需要有高浓度的硫酸，操作过程中有安全隐患，同时准确测定也需要考虑到可能存在的干扰物。
比旋光度法是一种在多糖含量测定领域中常用的测量技术。
该技术旨在通过测定糖溶液旋光度来测定其中的多糖含量。
比旋光度法测得的含量可以较为准确地反映样品中的多糖含量。
该方法广泛应用于果蔬、谷物、草药、保健食品等多种食品、药材的多糖含量快速测定。
但该方法需要使用较为昂贵的比旋仪，同时操作门槛较高，需要具备专业操作技能。
三、甘氨酰胺检测法甘氨酰胺检测法是一种新近开发的多糖含量测定方法，该方法还可以用于多糖含量的快速筛查。
该方法通过加入一种叫做8-羟基喹啉的酶标物质，使多糖和甘氨酰胺通过酶反应形成发光信号。
该方法测定时间极短，仅需几分钟钟便可出结果，同时也具有较高的准确性，目前已经在多糖含量测定领域中得到广泛应用。
四、酚硫酸法五、酸水解法酸水解法是通过在酸性介质的条件下将多糖分解成糖分子来测定其中多糖含量的方法。
该方法需要将样品加入酸性介质（通常是1M或2M的硫酸或盐酸），经过一定时间的加热水解后，将水解后的糖分离出来，通常通过糖谱法、高效液相色谱等方法来分析其中的单糖成分，从而得到多糖含量。
在样品加入酸性介质以前，其它组分（如蛋白质、脂肪等）需先去除，否则将干扰多糖水解产物的分析。
多糖和蛋白分离
多糖和蛋白分离多糖和蛋白是常见的生物大分子，在许多生物学、生物化学实验中都有重要的应用。
在实验中，分离多糖和蛋白也是我们必须掌握的基本技能之一。
本文将分步骤阐述多糖和蛋白的分离方法。
多糖的分离一、离心法：是利用离心机离心来分离多糖的方法，但这种方法不能应用于相对分子质量较小的多糖，因为相对分子质量较小的多糖在离心过程中会与蛋白质一起沉淀。
二、沉淀法：将含有多糖和蛋白的混合液中加入热硫酸，使多糖脱水缩合成硫酸多糖，并与蛋白质分离。
此外，也可以通过有机溶剂如乙醇或醋酸与多糖溶液混合，使多糖沉淀而分离出来。
三、离子交换色谱法：是利用化学亲和性来分离多糖和蛋白质的方法。
通过让多糖和蛋白质在不同离子交换树脂上的亲和性不同，从而实现它们分离的目的。
四、凝胶过滤法：通过在凝胶内生成网络状结构，阻滞分子的通过，从而实现对不同分子量的分子的分离。
其原理是：分子量大的多糖难以穿过凝胶的孔隙，因此，分子量大的多糖在凝胶的上方，分子量小的多糖在凝胶的下方。
蛋白的分离一、盐析法：利用电荷的变化，实现蛋白质的分离。
将含有蛋白和其他物质的混合液中加入盐类，使蛋白发生电荷中和现象，从而沉淀出来。
二、凝胶过滤法：通过在凝胶内生成网络状结构，阻滞分子的通过，从而实现对分子量差异较大的大分子蛋白和小分子杂质的分离。
三、离子交换色谱法：利用某些离子对蛋白形成稳定化合物的特性，使它们在离子交换树脂上具有不同的离子亲和性，从而实现蛋白分离的目的。
四、氢氧化铝沉淀法：将含有蛋白质的溶液中加入氢氧化铝，使其变得不稳定，从而让蛋白质和氢氧化铝发生复合作用，沉淀到底部，从而分离出蛋白质。
总之，多糖和蛋白的分离方法各有特点，我们可以根据实验需要和样品的特性，选择最为合适的方法。
在实践中，我们应该掌握以上各种方法的操作技巧，以便在研究多糖和蛋白的生物学功能、性质、结构等领域中得到更为准确可靠的实验结果。
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一、硫酸苯酚法测多糖含量
1、试剂配制
①浓硫酸：分析纯，95.5%
②80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）
③5%苯酚：取苯酚100 g，加铝片0. 1 g和碳酸钠0. 05 g，常压蒸馏,收集182℃馏分。
称取
该馏分(100%苯酚)5 g，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀后，置棕色试剂瓶中，
冰箱中冷藏储存备用。
④标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）或分析纯葡萄糖。
准确称取20m g经105℃干
燥至恒重的葡萄糖标准品于500ml容量瓶中，蒸馏水溶解定容。
2、制作标准曲线
准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8及0.9ml，各以蒸馏水补至1.0ml，然后加入6%（5%，9%）苯
酚0.5ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20min以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同
样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
1 2 3 4 5 6 7 8 0 标准葡萄糖溶液（mL）0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 蒸馏水（mL）0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 1.0 6%苯酚（mL）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 浓硫酸（mL） 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5
3 注意事项
（1）此法简单、快速、灵敏、重复性好，对每种糖仅制作一条标准曲线，颜色持久。
（2）制作标准线宜用相应的标准多糖，如用葡萄糖，应以校正系数0.9校正μg数。
（3）对杂多糖，分析结果可根据各单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算
（4）测定时根据光密度值确定取样的量。
光密度值最好在0.1——0.3之间。
比如：小于0.1之下可以考虑取样品时取2克，仍取0.2ml样品液，如大于0.3可以减半取0.1ml 的样品液测定。
（5）正常的反应溶液是深棕色。
糖越多颜色越深。
注意硫酸的纯度。
空白的颜色很深，说明你的空白中的苯酚被氧化了深红是醌（苯酚氧化生成）的颜色颜色过深的话说明你的酚的难度过大，一般是5%但是没遇到你说的那么严重，不是深红色的做的好的时候颜色很浅，颜色深点也有肯能。
操作的时候有几条你需要注意的，这些对你的检测结果影响极大
1、苯酚需要重蒸，配制的苯酚溶液需要妥善保存。
2、样品检测的时候，向样品中加了苯酚溶液需要迅速摇匀，加入硫酸基本操作：硫酸沿壁加，最好能旋转比色管，让硫酸能均匀的沿壁流下。
3、加完硫酸需要立即摇匀，前提是塞子要配套，不怕烫热、冷水浴，要准确。
二、考马斯亮蓝测蛋白含量
1 材料
1.1、设备：分光光度计（752、752N、UVmini-1240）、旋涡混合器（QL-901）、微量移液器（自备1000微升、200微升、10微升）
1.2、材料：试管、试管架、记号笔、枪头（10-1000微升）、5mL移液管、吸耳球、擦镜纸、滤纸、洗瓶、烧杯
1.3、试剂：、考马斯亮蓝试剂、标准蛋白质溶液？
2 标准曲线的制作
取9支试管，1支作空白，6支作标准曲线，2支留作测胰蛋白酶样品，分别标记为1-9号。
按照表1所示顺序加入各试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合均匀，第8、9管为胰蛋白酶样品的加样量。
表1 考马斯亮蓝法测蛋白质含量程序表
管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
标准蛋白(1.0mg/ml)/ml 0 0.01 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.05 0.1 蒸馏水/ml 0.1 0.09 0.08 0.06 0.04 0.02 0.0 0.05 0.0 考马斯亮蓝试剂/ml 5 5 5 5 5 5 5 5 5
2、加完各试剂2~5min后，即可开始用比色皿在752或752N分光光度计上测定各样品
在595nm处的光吸收值A595nm，空白对照为第1号试管。
3、以标准蛋白含量（mg）为横坐标，吸光度值A595nm为纵坐标，绘制标准曲线。
根据
测出的未知样品的A595值，计算蛋白质浓度。