BY4741酿酒酵母菌使用说明

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酵母菌表面展示的前期准备步骤

酵母菌表面展示的前期准备步骤

酵母菌表面展示的前期准备步骤酵母菌表面展示是一种常用的生物学实验技术,用于研究酵母菌表面蛋白的功能和相互作用。

在进行酵母菌表面展示之前,需要进行一系列的前期准备步骤,以确保实验的顺利进行和结果的准确可靠。

下面将详细介绍酵母菌表面展示的前期准备步骤。

1. 酵母菌培养基的准备:首先需要准备适合酵母菌生长和表面展示的培养基。

常用的酵母菌培养基包括YPAD培养基(酵母菌粉末、蔗糖、酵母氮碱基、复方氨基酸、蛋白胨等成分)和SD培养基(葡萄糖、酵母氮碱基、蛋白胨、酵母胺基酸等成分)。

将培养基按照配方准确称量和制备,严格控制pH值和温度。

2. 酵母菌菌种的制备:从冷冻保存的酵母菌库中取出所需的菌株,接种在含有相应选择性抗生素(如草地绿藻素或新霉素)的培养基上,通过连续传代使其稳定生长。

定期检测菌种纯度并保存备用。

3. DNA片段的构建与插入:选择目标蛋白的DNA片段,根据需要进行重组或修饰,并通过PCR扩增得到目标片段。

将目标片段与表达载体进行连接,经过酶切和连接反应,获得重组表达载体。

将重组表达载体转化到E.coli菌株中进行扩增,并经酶切和测序验证构建正确。

4. 酵母菌转化:将合适的酵母菌菌种(如酵母菌菌种BY4741)接种到YPAD培养基中,经过培养至对数生长期,收集培养的酵母菌细胞。

使用合适的方法(如化学法、电转法或冷冻法)将目标DNA转化到酵母菌细胞中。

5. 选择性培养与筛选:将转化后的酵母菌细胞以适当稀释度涂布在含有选择性抗生素的培养基上,使得只有带有目标基因的酵母菌形成克隆。

经过选代培养,将表达目标蛋白的酵母菌菌落筛选出来。

6. 酵母菌培养与表达:从筛选出的酵母菌菌落中挑选出单克隆,接种到新的培养基中进行扩增培养。

培养过程中需要注意温度、pH值和培养基的氧气供应等因素,以促进酵母菌生长和蛋白的表达。

7. 酵母菌菌落PCR鉴定:从培养的酵母菌中取出DNA,通过PCR扩增目标基因和随机选取的对照基因,根据扩增产物的大小和阳性对照确定表达目标基因的酵母菌菌落。

BY4742酵母菌使用说明

BY4742酵母菌使用说明
BY4742 酵母菌
编号
名称
北京华越洋生物 NRR01120 BY4742 酵母菌
基 本 信 息 :
名称:BY4742 酵母菌
规格:300ul 甘油菌
储 存 温 度 :-­‐80℃
类别:毕赤酵母表达菌
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量
增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓
慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注 意 事 项 :
1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放
的增加,细菌的活力会逐渐下降。
2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 :
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌 株 复 溶 :
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取 1ml 左右复溶液,加入到冷冻
管中。轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培
养。细菌在 30-­‐35℃培养箱中培养 24-­‐48h,真菌在 23-­‐28℃培养箱中培养 24-­‐72h
(必要时,可适当延长培养时间)。
菌 株 传 代 :
诱 导 方 式 :甲 醇
培 养 方 式 :28℃, 有 氧 保 存 方 式 :来自0%甘 油 , -­‐80℃
操作说明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数

酿酒酵母使用方法

酿酒酵母使用方法

酿酒酵母使用方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊酿酒酵母这小家伙的使用方法。

你可别小瞧这酿酒酵母,它就像是一个神奇的魔法小精灵,能在酿酒的过程中施展出奇妙的魔法呢!咱先说这选酵母吧,就跟挑朋友似的,得找个合适的。

不同的酵母有不同的脾气和特点,有的能让酒变得香甜醇厚,有的则能带来独特的风味。

这可得好好琢磨琢磨,不然选错了,那不就像找了个不靠谱的朋友,把事情给搞砸啦!然后就是活化酵母啦!这就像是叫醒一个还在睡大觉的小精灵,得给它点温暖,给它点营养,让它活跃起来。

把酵母放在温水里,加上点糖,看着它一点点苏醒、膨胀,就好像看到一个小生命在慢慢复苏,那种感觉可奇妙啦!接下来就是把酵母加入到原料中啦!这就像是把小精灵放入了一个大舞台,让它开始尽情表演。

要注意哦,可不能太粗鲁,得轻轻的、温柔的,不然把小精灵惹生气了咋办?在发酵的过程中,你可得好好照顾这些小精灵。

温度不能太高,也不能太低,就像人一样,得有个舒适的环境。

还要时不时地去看看它们,看看它们有没有在努力工作。

要是发现有啥不对劲的地方,可得赶紧想办法解决,这可关系到最后酿出的酒好不好喝呢!你说这酿酒酵母是不是很神奇?它能把普通的原料变成美味的酒。

就好像一个魔法师,用它的魔法棒轻轻一挥,就变出了让人陶醉的美酒。

等酒发酵好了,那扑鼻的香气,啧啧,真是让人陶醉啊!就好像是小精灵们给你送上的一份珍贵礼物。

这时候,你就可以尽情享受自己的劳动成果啦!想想看,自己亲手酿出的酒,和朋友们一起分享,那该是多么开心的一件事啊!大家一起喝着酒,聊着天,笑着闹着,多惬意啊!所以啊,朋友们,别犹豫啦!赶紧去试试这神奇的酿酒酵母吧,让它为你的生活增添一份别样的乐趣和美味!让我们一起在酿酒的世界里尽情遨游,感受那份独特的快乐和满足!。

酵母实验-学生版

酵母实验-学生版

酵母实验-学⽣版酵母系列⼤实验设计PCR介导的酿酒酵母基因敲除1、实验⽬的学习理解酿酒酵母中PCR介导的基因⼀步敲除法的原理,掌握酵母的转化⽅法,了解酵母⽣长及遗传学特性。

2、实验原理酵母菌作为最简单的真核⽣物,能以单倍体和⼆倍体两种形式稳定存在,其中单倍体含有两种交配型,可以⾃由的在单倍体和⼆倍体之间进⾏转换,在⽣物学研究中有着得天独厚的优势。

⾸先酵母菌⽣长速度很快。

对数期⽣长的单倍体菌株在YPD(富营养天然培养基)90分钟分裂⼀代,在合成培养基中140分钟分裂⼀代。

其次,酵母的基因组很⼩,遗传背景相对简单,是⼀种很容易进⾏遗传操作的模式⽣物。

酿酒酵母的基因组只有12052 Kb,其基因组序列早在1996年测序完成,已有约6000个超过100个氨基酸的ORF被报道,只有不到5%的ORF含有内含⼦,其中有约5700个蛋⽩编码基因,分散在16条染⾊体上。

上世纪90年代末,由数个实验室联合进⾏的酿酒酵母基因组敲除项⽬的完成是酵母遗传学研究的⾥程碑事件。

在这个项⽬中,四个基因敲除菌株库被成功构建:两种交配型的单倍体菌株库、杂合⼦⼆倍体菌株库以及⾮必需基因的纯合⼦⼆倍体菌株库。

这个项⽬⼏乎完成了全部ORF的敲除,为⽣物学研究,特别是组学研究,提供了⼗分强⼤的系统性研究⼯具,为后续基因功能的研究奠定了坚实的基础。

此外,酵母作为真核⽣物,与⾼等⽣物在很多代谢通路和蛋⽩表达调节等⽅⾯是⾼度保守的,为⾼等⽣物相关基因,例如疾病基因,功能研究具有提供了简单、易于操作的系统。

⽬前,酿酒酵母已经具有⼀套⼗分灵活快速的遗传操作体系。

酵母允许外源质粒以独⽴复制⼦游离于基因组之外存在,也允许其整合到基因组中。

但跟其他⽣物相⽐,酵母⽐较独特且强⼤的特点是外源序列的整合依赖于同源重组机制。

之前提到的基因组敲除项⽬的完成就是依赖于⾼效率的同源重组,如图-1所⽰。

⼈们利⽤PCR的⽅法,在筛选标记基因两侧引⼊待敲除基因(YFG,your favorite gene)特异性序列;随后将PCR产物通过转化传递到酵母细胞内部;在同源重组的作⽤下,⼀些细胞的对应基因位点的内源性序列被含有同源臂的外源序列直接取代,并通过选择培养基筛选出来。

啤酒专用酵母安全操作及保养规程

啤酒专用酵母安全操作及保养规程

啤酒专用酵母安全操作及保养规程
前言
啤酒酵母作为制作啤酒的重要原材料,是啤酒酿造的关键之一。


了保障啤酒酿造过程中酵母的品质和稳定性,以及人员的安全,在操
作酵母时需要注意一些规范和安全措施。

本文档就啤酒专用酵母的安
全操作和保养进行详细介绍,以供生产或者爱好者参考。

一、酵母的存储和保养
1.将啤酒专用酵母置于干燥、阴凉、通风的地方,避免阳光
直射和潮湿环境。

2.使用前,应先查看酵母的保质期限及生产日期,如已超过
保质期限或者使用前期限请勿使用。

3.开封前应先检查包装袋或瓶盖是否完好,以便于在使用前
判断是否已经受到污染。

4.收到酵母后,应立即放置于低温下保存,如有长时间未使
用,则需要在保存条件下定期进行活化。

二、酵母的活化
在投入酵母前,需要进行酵母的活化处理,以保障酵母的发酵能力。

酵母活化的方法如下:
1.可将酵母膏涂在培养基的部位上进行活化。

2.制备定量的酵母悬浮液进行活化,并保证该悬浮液的浓度。

酵母使用方法

酵母使用方法

酵母使用方法
酵母是一种常见的发酵剂,广泛应用于面包、蛋糕、酒类等食
品的制作过程中。

正确的使用酵母可以使食品更加美味和有口感,
下面将介绍一些关于酵母的使用方法。

首先,选择合适的酵母是非常重要的。

市面上常见的酵母有干
酵母和鲜酵母两种。

干酵母保存时间长,使用方便,适合于家庭烘焙;而鲜酵母活性高,适合于大批量面包生产。

在选择酵母时,要
根据自己的需求和实际情况进行选择。

其次,正确的储存酵母也是至关重要的。

干酵母应保存在阴凉
干燥处,避免阳光直射和高温;鲜酵母则需要冷藏保存,避免冷冻。

储存酵母时,要注意密封,以防止潮气和异味的侵入,从而影响酵
母的活性。

接下来,是正确的使用酵母。

在使用干酵母时,可以将其直接
加入面粉中,然后与其他原料一同揉面;而鲜酵母需要先用温水或
者温牛奶搅拌至完全融化,再加入面粉中。

在揉面的过程中,要注
意不要直接将酵母与盐接触,以免影响酵母的发酵效果。

最后,是关于酵母的发酵时间和温度。

一般来说,酵母的发酵
时间和温度是成正比的,温度越高,发酵时间越短。

在冬季或者低
温环境下,可以适当延长发酵时间,或者选择在温暖的地方进行发酵。

而在夏季或者高温环境下,要注意控制发酵时间,以免过度发
酵导致面团松软度不足。

总之,正确的使用酵母可以使食品更加美味和有口感。

在选择
酵母、储存酵母、使用酵母以及控制发酵时间和温度时,都要注意
细节,以确保酵母的活性和发酵效果。

希望以上内容对您有所帮助,祝您烘焙愉快!。

酿酒酵母养殖

酿酒酵母养殖

酿酒酵母养殖酿酒酵母是一种重要的微生物资源,广泛应用于酿酒工业。

酿酒酵母的养殖是指通过合理的培养条件和方法,使酵母菌体快速增殖和繁衍,以提高酿酒工艺的效率和产品质量。

酿酒酵母的养殖需要合适的培养基。

培养基是酵母生长和繁殖的基础,它应包含足够的营养物质,如碳源、氮源、矿物质等。

常用的培养基有麦芽提取物、葡萄糖、酵母粉等。

为了提高培养基的效果,还可以添加一些生长因子,如维生素、氨基酸等。

此外,控制培养基的pH值和温度也是重要的因素,一般来说,酿酒酵母的适宜pH 值为4.0-6.0,适宜温度为25-30摄氏度。

酿酒酵母的养殖需要合适的氧气供应。

酿酒过程中,酵母需要大量的氧气来进行呼吸作用,以提供能量和生长所需。

因此,在酿酒酵母的养殖中,需要提供足够的氧气供应。

一般来说,可以通过搅拌或通气的方式增加培养液中的氧气含量,从而提高酿酒酵母的生长速度和产酒效果。

酿酒酵母的养殖还需要适当的环境条件。

光照、湿度和环境卫生等因素都会对酵母的生长和繁殖产生影响。

一般来说,酿酒酵母的养殖宜在无菌条件下进行,以避免杂菌污染。

在酿酒酵母的养殖过程中,还需注意一些技巧和方法。

首先,要合理控制酵母的密度,以免过高或过低造成酵母的死亡或生长不良。

其次,要注意培养液的搅拌,以保持培养液中的酵母均匀分布和氧气供应。

此外,酿酒酵母的养殖还需定期检测和调整培养液的营养物质和环境条件,以保证酵母的生长和繁殖。

总结起来,酿酒酵母的养殖是一项复杂而重要的工作,需要合适的培养基、充足的氧气供应和适宜的环境条件。

只有通过科学的方法和技术,才能培养出高质量的酿酒酵母,提高酿酒工艺的效率和产品的质量。

因此,在酿酒酵母的养殖中,我们需要不断学习和探索,以满足酒类市场的需求,推动酿酒工业的发展。

混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法

混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法

混合型饲料添加剂酿酒酵母的使用方法下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

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BY4741酿酒酵母菌
BY4741Strain
BY4741菌信息:
培养基:YPD
菌株类别:酵母菌
培养条件:28℃,有氧,YPD
质粒转化:电激
保存方式:30%甘油,-20℃
基本应用:用于蛋白表达
BY4741菌使用说明:
四区划线培养,挑单菌落接种培养使用并保存甘油菌。

BY4741操作说明:
1,本品包含一份甘油菌,使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。

也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。

2,为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板,然后再挑单克隆菌落进行后续操作。

冷冻管开封:
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。

BY4741菌株复溶:
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻管中。

轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。

BY4741菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。

做好标识,在适宜温度下培养。

细菌在30-35℃培养箱中培养24-48h,真菌在23-28℃培养箱中培养24-72h(必要时,可适当延长培养时间)。

BY4741菌株传代:
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量增大接种量:如用无菌吸管吸取≥50μl新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。

注意事项:
1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会导致
菌种衰退;
2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行;
3、一些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,部分需连续两次继代培养才能正常生长;
4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基,敬请正确选择,不清楚时来电询问;
5、某些厌氧菌的培养,自开封到接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态;培养过程中亦要保持厌氧状态;
6、某些菌种,如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2促进生长;
7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况,应停止使用对应产品。

8、部分菌种有致病性、扩散性,请专业人员在专业环境下有保护性操作。

BY4741菌保藏条件:
-20℃保存(复溶液于2-8℃保存)
保藏时间:
2-10年,应根据菌种状况及时转接。

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