INVSC1酿酒酵母菌株使用说明
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)酶联免疫分析试剂盒 说明书
人抗酿酒酵母抗体（ASCA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中抗酿酒酵母抗体（ASCA）含量。
实验原理用纯化的抗原包被微孔板，制成固相载体，往包被抗原的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗原、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ASCA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100U/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成100U/ml，50U/ml，25U/ml，42.5U/ml，6.25U/ml，3.12U/ml，1.56U/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0U/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50U/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）100U/ml 的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml。
4.检测稀释液A：1×10ml。
5.检测稀释液B：1×10ml。
6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
酵母文库工作菌液使用指南
产品编号:CA T：RY8002产品概述：本产品由ds cDNA和pGADT7-Rec（Smal-lineared）载体同源重组构建文库质粒，含有多个克隆位点和限制性内切酶，可用于酵母单杂、酵母双杂筛库，可以与诱饵载体共转化酵母菌株筛选相互作用蛋白。
载体信息：保存条件：-80℃~-70℃保存，运输条件：干冰。
产品质检参数：文库库容量>1*108，重组率>95%，空载率<5%，平均长度0.8-1kb。
案例实验流程:文库菌株与诱饵菌株交配融合(1) 活化AH109诱饵培养物，挑取单克隆于5 mL的SD/-Trp培养基中摇菌，30℃，200 rpm，1-2d；(2) 将摇培好的AH109诱饵培养物(≥1x109 cfu/mL)800 g离心5 min，再用5 mL 2×YPDA 重悬诱饵菌，并和1 mL的Y187文库细胞(≥2x107 cfu/mL)混合在2 L无菌烧瓶中；注意：烧瓶的大小至少2 L才能在低速旋转时对交配培养物进行充分的通气。
(3) 用1 mL的2×YPDA冲洗文库小瓶中的细胞，冲洗2次；(4) 加入45 mL 2×YPDA，轻轻旋转，于30 ℃，30-50 rpm恒温摇床上孵育20-24 h；注意：低速旋转是必要的，以防止细胞沉淀到烧瓶的底部。
但是，以> 50 rpm的速度摇动培养物会显著降低交配效率。
(5) 800 g，10 min收集Mating产物，用50 mL ddH2O冲洗烧瓶并重悬沉淀两次，在离心收菌；(6) 最后将细胞沉淀重悬于6 mL ddH2O中。
从中取20 ul培养物进行梯度稀释后涂SD-TL 平板，用于检测文库转化效率。
其余涂三缺、四缺平板20块。
注意事项酵母工作菌液避免反复冻融，使用时请在冰上解冻。
技术支持南京瑞源生物技术有限公司坐落于南京市栖霞区生命科技园，专注于基因组高通量研究领域，致力于生物高科技研发，目前产品的技术水平已达到省级实验水平，瑞源生物立足于生命科学，为基础研究领域科学工作者提供生物学技术服务，自2019年创立以来，全体员工致力于利用酵母系统研发新药物靶点，专注于生物学研究，长期与全国各大农林/医药院校在大型科研技术研发上紧密合作。
所有质粒载体汇总
酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEFpY15TEF, pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424,酵母双杂交系统：酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7 ;对照质粒pGBKT7-53 , pGBKT7-lam , pGADT7-T , PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,丫187,丫190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ aA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc ,配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33, KM71 , KM71H , GS115,原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62等原核表达载体，包括pET系列，pET-GST, pGEX 系列(含GST标签)，pMAL 系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis 系列，pQE 系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB 系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA(分泌型表达系列),pQBI63 (原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPi nPoi nt-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF (+) , pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK(+) ,pBlueScript SK (-) pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C,大肠杆菌冷激质粒：pColdI pColdII pColdIII pColdTF原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1, pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣：pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞：DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 TopIO ToplOF BL21 ( DE3) HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21 (AI ) BL21 (DE3) plysS TG1 TB1 DH5a (pir) Tuner (DE3) Bl21 codonplusRIPL Novablue (DE3) Rosetta Rosetta(DE3) Rosetta (DE3) plys Rosetta-gami (DE3)Rosetta-gamiB(DE3) , Rosetta-gamiB( DE3) plysS Orgami(DE3) OrgamiB (DE3) HMS174 (DE3)植物表达/RNAi 载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381 Z,1391 Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNA载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体(随机突变体库)pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽抱杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01 ,配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi 基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0, pSilencer 2.1-U6 hygro, pSilencer 3.1-H1 hygro, pSilencer 3.1-H1 neo pSilencer 4.1-CMV neo, pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi 载体(oligoengine) pSuper-puro RNAi 逆转录病毒载体(clontech) : RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen ( Luciferase shRNA Ann ealed Oligo nucleotide) RNAi 慢病毒载体(addgene : pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B , pSecTag2 A, pVAX1 , pBudCE4.1,pTracer CMV2, pcDNA3.1 (-) /myc-His A , pcDNA6-Myc/His B , pCEP4, pIRES, pIRESneo, pIRES hyg3, pCMV-myc, pCMV-HA , pIRES-puro3, pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT , pBIND , pACT-MyoD , pBIND-ld , pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-HybridSystem:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II 哺乳动物诱导表达系统：pOPRSVI , pOPI3CAT, pCMVLacl,GeneSwitch System:pSwitch 哺乳动物表面展示系统:pDisplay,四环素调控系统(Invitrogen): pcDNA4/TO/Myc-HisA ，pcDNA4/TO/Myc-HisB ，pcDNA4/TO/Myc-HisC ，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR 四环素调控系统(Clontech) : pTet-On, pTet-Off，pTRE2,pRevTRE, pRevTet-On, pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc ，pI K B-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-senso, pAP1 (PMA) -Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc，pNF- K B-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统(invitrogen) pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY300PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.pla ntarum,L.rham no susGG,B.coagula ns,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infan tis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444 (GFP) ,pHY300PLK,pRT102,pRL1063a,转座子载体pUT-mi niT n5,pMGS100,pWHM10,pKC1139,pSET152, pOJ260,pPG611.1,pPG612.1腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统(Stratagene : pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ, pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3,配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cell line 腺相关病毒系统(Stratagen© : pAAV-MCS , pAAV-RC , pHelper, pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP , pCMV-MCS ,慢病毒载体:pLVX-DsRed-Mo no mer-N1,pLVX-IRES-ZsGree n1,pLVX-AcGFP1-N1 丄en ti6/v5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLe ntilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGree n, pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV- neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry 质粒载体。
s17-1lamppir大肠杆菌使用说明
s17-1lamppir大肠杆菌使用说明s17-1 lamp pir大肠杆菌编号名称规格单位北京华越洋生物NRR00790 s17-1 lamp pir大肠杆菌300ul 支s17-1 lamp pir大肠杆菌基本信息：s17-1 lamp pir大肠杆菌菌种来源于ATCC28188，引进后视为第0代。
用接种环接种至3ml沙氏葡萄糖蛋白胨液体培养基中28℃培养至OD600=0.50，视为第1代，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管300μl的量分装至1.5ml的EP管中。
长期保存于-80℃。
s17-1 lamp pir大肠杆菌使用方法：s17-1 lamp pir大肠杆菌为甘油菌，内含培养基。
使用时只需要用接种环在菌种处挑去一定量的菌，接种至培养基中即可。
可以划线，也可以直接接种至液体培养基中。
1、PDA液体配方：土豆200g/L，葡萄糖20g/L2、用接种环接种至3ml PDA液体培养基中28℃培养至OD600=0.50，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管300μl的量分装至1.5ml的EP管中。
3、按照10%的接种量接种至100ml PDA培养基中28℃培养至OD600=0.50，按照1:1的体积加入50%甘油，按照每管1ml的量分装至1.5ml的EP管中。
4、推荐保存2代，视为安全保菌的方式s17-1 lamp pir大肠杆菌操作说明：1.使用s17-1 lamp pir大肠杆菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。
也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2.为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
s17-1 lamp pir相关菌株:TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE3)大肠杆菌乙型溶血性链球菌TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE4)大肠杆菌阴沟肠杆菌TB1(DE3)大肠杆菌菌株，TB1(DE5)大肠杆菌粘质沙雷氏菌断发毛癣菌株，断发毛癣菌金黄色葡萄球菌ATCC6538肺炎克雷伯氏菌株，肺炎克雷伯氏菌AD494(DE3)大肠杆菌菌株粪产碱杆菌株，粪产碱杆菌AGL-1根癌农杆菌粪肠球菌粪链球菌株，粪肠球菌粪链球菌ATCC15834发根农杆菌弗氏柠檬酸杆菌株，弗氏柠檬酸杆菌BJ5183菌株福氏志贺氏菌株，福氏志贺氏菌BL21 Gold PlysS(DE3)大肠杆菌菌株光滑念珠菌株，光滑念珠菌BL21 PlysS（DE3）大肠杆菌菌株红色毛癣菌株，红色毛癣菌BL21 Trxb大肠杆菌菌株桔青霉菌株，桔青霉菌BL21-AI（DE3）大肠杆菌菌株克柔假丝酵母菌株，克柔假丝酵母菌BL21-Trxb(DE3)大肠杆菌菌株痢疾志贺氏菌株，痢疾志贺氏菌BL21(DE3)-Condon Plus-RIPL 大肠杆菌菌株马红球菌株，马红球菌BL21(DE3)大肠杆菌菌株马拉色菌株，马拉色菌BL21（DE3）PlysS 大肠杆菌菌株裴氏着色真菌株，裴氏着色真菌BL21大肠杆菌菌株普通变形杆菌株，普通变形杆菌BY4742酵母菌奇异变形杆菌株，奇异变形杆菌C41(DE3) PlysS大肠杆菌菌株缺陷假单胞菌株，缺陷假单胞菌C41(DE3)大肠杆菌菌株热带念珠菌株，热带念珠菌C43(DE3)大肠杆菌菌株生孢梭菌株，生孢梭菌C43(DE3)PlysS大肠杆菌表达菌株石膏样小孢子菌，石膏样小孢子菌株DB3.1大肠杆菌宋内志贺氏菌，宋内志贺氏菌株DH5a大肠杆菌克隆菌株汤卜逊沙门氏菌，汤卜逊沙门氏菌株DH5α大肠杆菌菌株鲜绿青霉，鲜绿青霉DH10B大肠杆菌克隆菌株小肠结肠炎耶尔森氏菌，小肠结肠炎耶尔森氏菌株DH10Bac杆状病毒表达菌株须癣毛癣菌，须癣毛癣菌株EGY48双杂交酵母菌蕈状芽孢杆菌EHA105根癌农杆菌猪霍乱沙门氏菌，猪霍乱沙门氏菌株GS115毕赤酵母表达菌A4发根农杆菌,a4农杆菌株GV3101根癌农杆菌AD494（DE3）PlysS大肠杆菌菌株INVSC1酿酒酵母菌株AH109酵母双杂交菌株,AH109 JM109 大肠杆菌菌株ArcticExpress? (DE3)RP大肠杆菌菌株JM109(DE3)大肠杆菌白念珠菌JM110大肠杆菌菌株阪崎肠杆菌K-12 MG1655大肠杆菌鲍曼不动杆菌LBA4404根癌农杆菌变形链球菌ATCC25175 LBA9402发根农杆菌表皮葡萄球菌M15 大肠杆菌菌株产气肠杆菌金黄色葡萄球菌ATCC25923肠炎沙门菌MC1061大肠杆菌菌株大肠埃希菌ATCC25922 NMY51双杂交酵母菌单增李斯特菌Origami B (DE3) 大肠杆菌菌株短小芽孢杆菌Origami2(DE3)大肠杆菌菌株腐生葡萄球菌Rosetta-gami 2（DE3）PlysS大肠杆菌表达菌株副溶血性弧菌Rosetta-gami-B pLysS大肠杆菌黑曲霉Rosetta-gami(DE3)PlysS大肠杆菌菌株金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003 Rosetta-gami2(DE3)大肠杆菌菌株蜡样芽孢杆菌Rosetta-gamiB(DE3)大肠杆菌菌株酿酒酵母菌Rosetta(DE3) PlysS大肠杆菌菌株犬小孢子菌ATCC32903 Rosetta(DE3)大肠杆菌表达菌株嗜热脂肪芽孢杆菌Rosetta2(DE3) PlysS大肠杆菌菌株苏云金芽孢杆菌Rosetta2(DE3)大肠杆菌菌株铜绿假单胞杆菌s17-1 lamp pir大肠杆菌菌株Top10大肠杆菌菌株SMD1163酵母菌Top10F'大肠杆菌菌株Stbl2大肠杆菌菌株Trans110 大肠杆菌克隆菌株Stbl3大肠杆菌TransB 大肠杆菌菌株SURE大肠杆菌克隆菌株Tuner（DE3）大肠杆菌菌株T1大肠杆菌克隆菌株WB800枯草芽孢杆菌TG1大肠杆菌克隆菌株XL1-Blue 大肠杆菌菌株Y1HGold单杂交酵母菌株XL2 blue MRF' 大肠杆菌菌株Y2Hgold酵母双杂交菌株XL2-Blue大肠杆菌克隆菌株Y187酵母双杂交菌株XL10-Gold 大肠杆菌菌株拟南芥种子KM71酵母表达菌藤黄微球菌无乳链球菌。
酵母菌鉴定试剂盒(比色法)说明书
1.A 2KG 2-酮基葡萄糖酸钾
含量 (mg/杯)
0.70 0.014 0.66 0.64 0.64 0.70 0.66 2.34 0.70 0.66 1.09
培养基
API C 培养基 7ml
(NH4)2SO4 KH2PO4 K2HPO4 Na2HPO4 NaCl
5.0g 0.31g 0.45g 0.92g 0.1g
y 盖上试条的盖子。 y 29℃±2℃需氧培养 24-48 小时。 注意：有些通气式培养箱会挥发掉试验杯内所有的 菌悬液，遇此情况，将鉴定试条放在一个盛有少量 水的密封盒中，形成潮湿环境以避免干燥。
试条判读 y 使用 ATB ExpressionTM 仪或 miniAPI 仪自动判读：
− 检查试剂条中间部分是否干净，以保证读数 器可以 识别试条的代码。
该生化反应谱是经沙保弱培养基上分离到的菌株孵育４８小时后自动读取结果。按照当地相应的规定进行质 量控制是使用者的责任。
[检验方法的局限性] • ID 32 C 试条只能用于对含在该数据库以内的酵
母菌(菌名列表见本说明书的真菌鉴定表)进行自 动鉴定，超出其范围的细菌本试剂条不能鉴定。 • 此方法只能用于单个细菌的纯培养物的鉴定。
REF 32200
酵母菌鉴定试剂盒（比色法）说明书
IVD
[产品名称] 通用名称：酵母菌鉴定试剂盒（比色法） 英文名称：ID 32 C
[包装规格] 25 测试/盒
[预期用途] 该产品用于可导致阴道炎、口腔炎、败血症等的酵母 菌的鉴定，临床常见样本来源有泌尿生殖道标本、呼 吸道标本、血等。该系统能鉴定的真菌范围见使用说 明书后的真菌鉴定表。
接种试条 y 自动接种：
− 分别将鉴定试条、已接种好的 API C 安瓿和 Tip 头放在 ATB 接种器的架子上。
二色补血草LbGRP基因的克隆及抗逆能力分析
二色补血草LbGRP基因的克隆及抗逆能力分析潘妍;王玉成;张大伟;杨传平【期刊名称】《遗传》【年(卷),期】2010(32)3【摘要】富含甘氨酸RNA结合蛋白(Glycine-rich RNA-bindingproteins,GRP)是植物中重要的转录后调控蛋白,在植物的生长发育及对胁迫的抗性调控等过程中起重要作用.文章从二色补血草(Limonium bicolor(Bunge)O.)cDNA文库中克隆出了富含甘氨酸RNA结合蛋白基因(LbGRP)的全长cDNA序列(GenBank登录号:GQ398238).为了研究LbGRP的抗逆功能,将其构建到酵母表达载体pYES2中,转化到酿酒酵母INVSc1菌株中,获得重组酵母INVSc1(pYES2.LbGRP),同时将转空pYES2质粒的酵母INVSc1(pYES2)作为对照.对重组酵母INVSc1(pYES2-LbGRP)和对照INVSc1(pYES2)进行NaCl、KCl、NaHCO_3、Na_2CO_3、干旱和冷冻胁迫,比较它们在不同胁迫下的存活率.结果表明,INVSc1(pYES2-LbGRP)在各种胁迫下的存活率明显高于对照INVSc1(pYES2),证明LbGRP基因具有抗NaCl、KCl、NaHCO_3、Na_2CO_3、干旱和冷冻等胁迫的能力,推测该基因参与了二色补血草的抗逆调控过程.【总页数】9页(P278-286)【作者】潘妍;王玉成;张大伟;杨传平【作者单位】东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040;东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室,哈尔滨,150040【正文语种】中文【相关文献】1.二色补血草硫氧还蛋白过氧化物酶基因LbTPx的克隆及其表达 [J], 刁桂萍 ;杨传平 ;王玉成2.二色补血草海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶基因的克隆及分析 [J], 马辉;刘桂丰;徐晨曦;王玉成;杨传平3.二色补血草中2个金属硫蛋白基因的克隆及分析 [J], 李红艳;杨传平;王玉成;王丙锋4.二色补血草LbARP基因的克隆及其表达分析 [J], 刁桂萍;柳燕;宋佳;林佳忱;刘志华5.一个新的二色补血草金属硫蛋白基因LbMT2的克隆及其表达分析 [J], 班巧英;刘桂丰;王玉成;张大伟;蒋丽丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK（-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。
所有质粒载体汇总
酿酒酵母表达载体pYES2,ｐYES２／NT,ｐYＥS２/CT,pYES3,pYES6,pYCｐlａｃ2２-GＦP,酵母载体pAUR12３,pRS３03TEF,pRS30４, pRS305,pRS306,ｐY13ＴEF,ｐY14TEＦ,pY１５TEF,pＹ16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6,pＳH４７,酵母单杂载体pHISｉ,pLacZi,pHIＳ2, pGＡD4２4, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187,酿酒酵母AＨ109;质粒pGADＴ7,pGBＫT７;对照质粒pGBKT7－5３,pGBKT７-lam,pGＡDＴ７-T,PCＬ1,酿酒酵母菌株ＩＮＶＳc1,YM42７1, AH109,Y1８７,Y１９0,毕赤酵母表达载体pPＩＣ9K,pPIC9Ｋ-His,pPＩＣ3.5K,ｐＰICZalｐhaＡ,B,C,ｐP ＩCZA,B,C,ｐGAPZαA,ｐAＯ8１5,pPIC9k-Hｉs,pＨIL-S1,pＰink ｈc,配套毕赤酵母Pｉcｈiaｐiｎk,毕赤酵母宿主Ｘ33,KＭ７１,KM71H,GS115,原核表达载体pQＥ30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括ｐET系列,ｐＥT-GST,pGEX系列(含GＳT标签),pMAL系列pMＡL-c2x,－c4x,－c4e,-c5x,-p5x,pＢＡD,pBAＤHis,ｐＢADmycHis系列,ｐQE系列,pＴｒｃ9９a,pTrcＨis系列,pＢV２2０,22１,222,pTＸＢ系列,ｐLＬP-oｍpA,pIN-III-ompA(分泌型表达系列),pQBI6３(原核表达带荧光)pEＴ3a, pET 3d, pET 11a,ｐEＴ12a, ｐEＴ14b, ｐＥT 15b, pＥT 16b, pＥT 17b,pET 19b, pET 2０b, pET 21a,b,d, pET ２2b,ｐET ２3a,ｐET 23b, pET24a,b,pET ２5ｂ, pET 2６b, ｐEＴ27b, pET ２8a,b, pET 29a,pET 30a, pET 31b, pET32a, pEＴ35b, pET 38b, pEＴ３９b,pET 40b, pEＴ４１ａ,b pET 42a,pＥT 43、1ａ,b pET 44ａ, ｐEＴ49ｂpEＴ３０2,303 pET His,pET Dsｂ,ｐET GST,ｐＥT Trx pＱE2, ｐQE9 pQE30,31,32, pQE 4０ｐQＥ７０pQE80L pＱＥTirs sｙstem pR ＳET-A pRSEＴ-B pRSET－C pGEX4T-1,-2,－3,５ｘ-１,6p-1,６p-2,2ｔk,3c ｐＢV22０,221,222 ｐTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAＤＨｉsＡ,B,C pPinPoiｎｔ-Ｘa1,Xa2,Xａ3 pMALc2x, p2x pＢV220 pGEM Ex1, pGEＭ7ZF(+), pＴrｃ99Ａ,ｐTwin1, pEZZ18ｐkk232－８,pｋk ２33-３,pAＣYＣ１８4,pBR３２2,ｐUC119 pＴYB1,pTYB2,pTYB4,pTＹB11 pＢlueＳcript SK(+),pＢlueSｃript SK(－) ｐLＬP ompA, ｐＩNIIIomｐA,ｐMＢP-P,pＭBP-Ｃ, 大肠杆菌冷激质粒: p ＣｏｌdＩpColｄII ｐColdIIＩpCｏldTF 原核共表达质粒:pＡCYCｄuet－1,ｐＥTｄuet-1,pＣＤFdｕｅt-1,ｐＲＳFduet－1 Ｔakara公司大肠杆菌分子伴侣: p Ｇ-KＪＥ8 ｐGro7 pKJE7 pＧＴｆ２ｐTf１6 大肠杆菌宿主细胞: DH5a JM101 JＭ103 ＪＭ105 JM107 JＭ１０9JM110Top1０Toｐ１０F ＢL21(ＤE３) HB１01 ER252９Ｅ２５66 C256６MＧ1655XL－10goｌd ＸＬblue Ｍ15 JＦ11２5K802 SＧ111７BL21(ＡI) BL21(DＥ3)plysS TG1 TB1 DH5ａ(ｐir) Tuner(DＥ3) Bl21 codonplusRIPL Novablue(ＤE3)RosettａＲｏsetｔa(DE3) Ｒoseｔｔa(DＥ３)plysＲosetta－ｇamｉ(ＤＥ3) Ｒｏseｔta-ｇａmiＢ(DＥ3), Ｒｏsettａ-ｇａmiB(DＥ3)plysS Orｇami(DＥ３)ＯrｇamiB(DE3) HMS174(DＥ3)植物表达／ＲNＡi载体农杆菌pＢI121,pBＩ12１-ＧFＰ,pBI101,pＢI2２1,pSN1301, pＵN1３01,pRTL２, pRＴL2-GFP ,pRTL2-CFP,pRTL2-RFＰ, pRＴL2-YFP,pCAMＢIＡ１３00, １301, １３0２,１303,１304,１305, 1３8１Z,13９1Z,230０, 2301,330０,３301,pＣAMBIA suｐer13００,ｐCAMBIＡsupeｒ1300－GFＰ,pPZＰ212,pＰＺP２1２1,pPZP21２-ＧＦP,pGDG,RNAi载体pART2７,ｐHAＮＮIBAL,pＫAＮNIBＡL,pＦGＣ５9４1,pTＣK303, pTRV１,pＴRV ２, T－ＤNＡ插入载体(随机突变体库)pSKＩ0１5,ｐSKI07４,真菌ＡTＭT载体p ＢＩG2RHPＨ2-GUＳ-GFＰ,ｐＢHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,ｐＨT4３,pHP１３,pHＰ４3, pBE2,pMUTＩN4,pUB11０,ｐＥ1９4,ｐMA5, pMＫ３,ｐＭK４,pHT304,pHY300PLK, pＢest5０2,pDＧ1363,pSG1154,pＡX01, ｐＳAS1４4,ｐDＬ,ｐDG148-stu,pDG641,ｐA Ｌ12,ｐUＣX０5-ｂgaB,pHT0１,配套菌株ＢS １６８,WＢ60０,ＷB800,WB7００, WB800N,1０１2,FZB42,1A7４７,广宿主质粒ｐＶＬT３3RNＡi基因沉默干扰敲除载体pSilenｃer1、0,pSｉlencer ２.１-U６hｙｇｒo, pSｉlenｃer 3.1-H1hygｒo,pSilencer 3、１-H1 neo,ｐSileｎcer 4、1-CMＶne ｏ, pSileｎｃｅｒ4、1－CMV puro pMIR－RＥPORT Lｕciferase RNＡi载体(olｉｇoｅngine) pSuｐer-puro RＮＡｉ逆转录病毒载体(cloｎtｅｃh): RＮＡi －Ｒｅady pＳＩREN-Retro Q, RNAi-Reａdy ｐＳIＲEN-ＲｅtroQ-ZsGreeｎ(LuｃiferasｅshRNＡAnneａlｅdＯlｉgonucｌeotiｄe) RNＡi慢病毒载体(addgeｎe): pLKO.1哺乳动物表达载体ｐｃDNA3、1＋/-,pｃDNA4/HｉsＭax B,pSecTaｇ2 A,pVAＸ1,pBｕdCE4.1,pTrａcer CMＶ２,pcＤNＡ３、1(-)/ｍyc－Ｈis A ,pcDNA6-Ｍｙc/His Ｂ,pＣEＰ4,ｐIRES,pIRＥSnｅo,pIRES hyg3,pCMＶ-ｍyc,pCMV－HA,pＩRES-puｒｏ３,ｐIＲＥS-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACＴ,ｐBIND,pACＴ-MyｏD,pBＩND-Ｉd,pG5luc,pＣMＶ-BD,pCMV－AD, pBD-p5３, ｐＦR-ｌuｃ,CｙtotraｐＴwo－HybrｉｄSysｔem:ｐSｏs, pSoｓMAFＢ, ｐMｙr蜕皮激素诱导系统ｐＩND, ｐVｇＲxR,LacSwith ＩI哺乳动物诱导表达系统:ｐOPＲＳVI ,pOPI3ＣＡＴ,pCMVLacI,GｅneSwitcｈSyｓtｅm:pＳwiｔｃh哺乳动物表面展示系统:pDiｓplａy, 四环素调控系统(Invitrｏｇeｎ):pcＤNA4／TＯ／Myｃ-HiｓA,pcDＮA4/TO/Myc-HiｓB,ｐcDNＡ４/TO/Myc-Ｈis C,ｐｃDNA4/ＴO/Mｙｃ－His/ＬacＺ,pcDNA６/TR四环素调控系统(Cｌｏntech):pTeｔ-On,pTeｔ-Ｏff,ｐTRE2,pRevTRE,pReｖTｅｔ-On,ｐRevTet-off 信号通路报告载体:pＧAS-TA-Ｌｕc,ｐＳTAＴ3-TＡ-Ｌｕc,ｐISRE-TA－Lu ｃ, pTＡ-Luc,pIκB－EＧFＰ,pNFＡＴ-TA－Luc,pCasｐase3-sensor,pAP１(PMA)－Luc;pGL4.26[lｕc2P/ｍｉnＰ/Hｙgro],pGL4.２9[lｕc2Ｐ/ＣＲＥ/Hygｒｏ],pGL４.３0[luc2P/NFAT-RＥ/Ｈygｒo],pGL4、75;p５3-Luc,pAP-1-Lｕc, pNF-κB－Lｕc,pSRE-Lｕc,pFＡ２-Elk１,pFC-ＭＥKK,pFR-luc,Gaｔeｗａy系统(inviｔrｏｇen)pcDNＡ6、2－GＷEmＧFP-miR ｎegａtive, pＬeｎｔi6／TR,pcDNＡ6、２-GＷEmＧFP-mｉR,乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株,pNZ8148,pLEISS,pMG3６e,ｐBB Ｒ1ＭCＳ-5,pBBＲ1MCＳ－6,ｐＲV61０,pLＥＭ4１5,ｐＨY300ＰLＫ,分泌型乳酸菌表达载体pVＥ5523,pＰG611、1,pＰG６１２.1等与乳酸杆菌菌株宿主菌NZ ９００0,ＭG13６3,Laｃtoｂaｃｉｌluｓcaｓei １.539,Ｌacｔｏbacｉｌｌuｓcasei,acidophilｕsＮCFM,1、2,Lactobaciｌｌus sａkei 23K,Ｌ、planｔaｒuｍ,L.rh ａmnosus GG,B、ｃoaguｌans,Biｆidobactｅrium ｂiｆiduｍ,Ｂifidｏbactｅrｉｕｍinfantis,Laｃtococcus lacｔｉs M17,1663,Lactobａcillus reuｔｅrii广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MＣS-2,3,4,5,6, ｐJＲD2１５,pJN105,ｐＭE60３２,Ｃos载体pLＡＦR３,pMP2444(ＧFＰ),pHY３00ＰLＫ,pＲT1０２,pRＬ１0６3a, 转座子载体ｐUT-minｉＴn ５,pMＧS100,pWHＭ10,pKＣ1139,pＳＥT１52,pOJ260,pPＧ６11、1,ｐPG6１2、1,腺病毒载体/慢病毒,逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒,腺病毒系统(Strａtagene): pAdEａsy-1,pSｈuttle-CＭＶ,pShutｔｌe,pAdTrack,pAdＴracｋ-CＭV, ｐＳhuttle-ＩRＥS-ｈrＧＦP-１、pShuttle-IRＥS－hｒＧＦP-2、pShuttlｅ-CMV-lacZ, pShuｔtｌe－CMV-EGＦP-Ｃ,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BＪ5183,2９３,２93T cｅll ｌｉｎe 腺相关病毒系统(Strataｇene):ｐAAＶ-MCS,pAＡＶ-RＣ,pHｅｌｐer,pAAV-LacZ,pAAＶ-IRES-hrＧFP,pＣMV-MCS,慢病毒载体:ｐLVX-DsRed-Ｍoｎomｅr－N1,pLVX－IREＳ－ZｓGreen1,pLVＸ-AcＧFP1-N1,Lｅｎti6/v5-EDST－EＧFP,pＷPXL, FＵGW,pLeｎｔilox 3、7,ＲNＡｉ－ReａｄｙpＳIREN-Reｔro Ｑ, RNＡi-Ready pSIREN－Retro Q－ＺsGreen, ｐSUＰEＲ、Rｅtro-ＧＦP／Neo,ｐＳUPER-Ｒetrｏ-Ｎeo, pSUPＥR.Retro-puro,PLＮＣＸPLNＣX2 pMＳＣV-HYG pMSCＶ-ｎeo ｐＭSCＶ-puro pLEGFP-C1 ｐLＯX-CW-CRE pＬOＸ-GFP-IＲＥS-TK pRｅtｒoＸ－IREＳ-ＤsＲｅdExprｅsｓ, pLVX-ＩRＥS-ｍＣherry质粒载体。
酵母菌 灭活条件
酵母菌灭活条件
酵母菌的灭活条件可以采用多种方法，以下是一些常见的方法：
1.高压蒸汽灭菌法：在103.4千帕蒸汽压和121.3摄氏度的条件下，
维持15-20分钟，可以杀死所有的微生物，包括酵母。
2.巴氏消毒法：通过低温维持法来灭活酵母。
3.热处理：在发面过程中，如果温度超过54℃，酵母会失去活性。
此外，酒装瓶后，用玻璃瓶密封并在65-70℃下灭菌20分钟，既可以达到杀菌的效果，又能将酵母灭活。
4.紫外照射：采用紫外灯照射酵母约12小时也可以实现灭活。
5.辐照：辐照处理对酵母的杀菌灭活效果很好，但需要注意的是，
如果果酒包装采用玻璃材质，可能会因为辐照导致玻璃颜色发生改变。
6.试剂法：使用0.9%的碘乙酰胺溶液也可以灭活酵母。
所有质粒载体汇总
所有质粒载体汇总酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF, 酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190,毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZαA,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA （分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk233-3,pACYC184,pBR322,pUC119pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK （+）,pBlueScript SK （-）pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3）HB101 ER2529 E2566 C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF1125 K802 SG1117 BL21（AI）BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir）Tuner（DE3）Bl21 codonplusRIPL Novablue （DE3）Rosetta Rosetta（DE3）Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3）Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami （DE3）OrgamiB（DE3）HMS174（DE3）植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301,pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA 1300, 1301, 1302,1303,1304,1305, 1381Z,1391Z,2300, 2301,3300,3301,pCAMBIA super1300,pCAMBIAsuper1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2,T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43,pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5,pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK,pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641,pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01，配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700,WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro，pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo，pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine）pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide）RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1 哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevT et-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pIκB-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc;pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL 4.30[luc2P/NFA T-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc，pNF-κB-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY3 00PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosusGG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii 广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos 载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152,pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ,pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJ5183,293,293T cellline 腺相关病毒系统（Stratagene）：pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS，慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v 5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen,pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。
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（必要时，可适当延长培养时间）。
菌 株 传 代 ：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量 增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓 慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。 注 意 事 项 ： 1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放 置会导致菌种衰退； 2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行； 3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能 正常生长； 4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来 电询问； 5、某些厌氧菌的培养，自开封到接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧 状态；培养过程中亦要保持厌氧状态； 6、某些菌种，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌等需要 5-‐10%CO2 促 进生长； 7、如发现冷冻管盖松动、复溶液浑浊等异常情况，应停止使用对应产品。 8、部分菌种有致病性、扩散性，请专业人员在专业环境下有保护性操作。 保 藏 条 件 ： -‐20℃保存（复溶液于 2-‐8℃保存） 保 藏 时 间 ： 2-‐10 年，应根据菌种状况及时转接
ura3-‐52
简 介 ：
INVSC1 是酿酒酵母菌株，属于真核细胞。一般的针对原核生物的抗生
素例如卡那和氨苄对酵母是无效的，因此为了防止大肠杆菌等原核生物对
酵母培养菌株污染，往往会在培养基中加入一些氨苄和卡那霉素的抗生素，
pYES2 系列载体。INVSC1 酿酒酵母可在 YPD 培养基上生长，用电转化的
方法可将质粒转入酵母细胞中，用半乳糖诱导蛋白表达。用 30%的甘油与
培 养 物 混 合 可 保 藏 菌 种 。
操作说明：
1，本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表
和尿嘧啶的 SC minimal media 中无法生长。INVSC1 酿酒酵母是非常理想
的蛋白表达菌株，但是不应该用于遗传分析研究，因为该菌株的孢子形成
不好。在制作 INVSC1 酿酒酵母甘油菌的时候，请不要使用 4 天以上的平
板挑菌保存，尽量使用新鲜的平板。INVSC1 的配套载体是 pYES3/CT, pYC2,
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数
的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 ：
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
储 存 温 度 ： -‐80℃
基 因 组 ：
MATa his3Δ1 leu2 trp1-‐289 ura3-‐52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-‐289
INVSC1 酿酒酵母菌株
编号
名称
北京华越洋生物 NRR01000 INVSC1 酿酒酵母菌株
基 本 信 息 ：
名称：INVSC1 酿酒酵母菌株
规格：300ul 甘油菌
菌 盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻
管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h，真菌在 23-‐28℃培养箱中培养 24-‐72h
来抑制细菌菌的污染和生长。酿酒酵母适宜的生长温度是 28-‐30 度，一般
使用 30 度培养，温度超过 32 度可能导致细胞的死亡。INVSC1 酿酒酵母
是生长快速的双倍体酵母细胞，是蛋白表达的理想菌株。INVSC1 酿酒酵母
是 His, Leu, Trp 和 Ura 营养缺陷型菌株，在缺乏组氨酸，亮氨酸，色氨酸