细胞重组技术及克隆
克隆技术在生物医药研发中的应用
克隆技术在生物医药研发中的应用克隆技术是指利用DNA重组技术和细胞培养技术，从一个个体中获得一个或多个基因，再将其导入另一种基因组细胞中，使之能够表达所需蛋白质的一种技术。
克隆技术可以在生物医药领域中发挥重要作用，包括疾病诊断、治疗以及药物研发等方面。
本文将探讨克隆技术在生物医药研发中的应用。
一、克隆技术在制备蛋白质药物中的应用蛋白质药物是以蛋白质为主要靶向药物，如肿瘤靶向治疗药物、血液凝固因子替代治疗药物、免疫调节蛋白、酶替代治疗药物等。
蛋白质药物的制备需要通过基因工程技术将人类源或自然源中的基因进行克隆，之后在实验室中将其与真核细胞或质粒载体整合，制备出可量产的蛋白质药物。
克隆技术可以更为准确地获取目标蛋白质的基因序列，从而制备出更为纯净、高效的蛋白质药物。
二、克隆技术在切除病毒中的应用疫苗是预防疾病传染的一种重要手段。
而一些疾病病毒在重组DNA技术反复的地存储和传染中发生恶性突变，在繁殖中产生了大量的突变子病毒。
其病毒表面抗原变异后，质子基基因的序列也发生了变异。
因此，生产用于疫苗克隆，研究和开发新的切除病毒疫苗对生物医学研究和应用发挥了很大的作用。
三、克隆技术在疾病基因诊断中的应用许多疾病都是由基因突变引起的，对这些基因进行克隆再序列化可以确定导致疾病的突变，并且能够对相关的家族成员进行基因诊断，有效预防该疾病。
四、克隆技术在实现个性化医学中的应用克隆技术可以针对个体不同的基因序列，为每个人提供个性化医学治疗。
个性化医学是根据每个人的遗传信息、生活方式和临床表现等因素，量身定制治疗方案。
在克隆技术的帮助下，医生可以过基因序列信息有效地制定个性化治疗方案，为每个病人提供最佳治疗效果。
五、克隆技术发展的前景和挑战克隆技术的广泛应用是生物医药研发和临床治疗的重要进展。
未来，克隆技术的应用将进一步完善和创新，包括基因治疗、药物免疫疗法、干细胞研究、智能化和大数据挖掘等。
不过，克隆技术在实践中的应用也面临着挑战。
实验室克隆技术解析
实验室克隆技术解析实验室克隆技术是一种重要的生物技术手段，被广泛应用于生物学研究、医学领域以及农业生产中。
通过克隆技术，科学家们可以复制出与原始生物基因完全相同的个体，为研究和应用提供了便利。
本文将对实验室克隆技术进行深入解析，包括其原理、方法和应用等方面。
一、克隆技术的原理实验室克隆技术的原理主要是利用细胞核移植技术，将一个个体的细胞核移植到另一个细胞内，使得受体细胞具有与供体细胞相同的遗传信息。
具体而言，克隆技术包括以下几个步骤：1. 选择供体细胞：通常选择成熟的体细胞作为供体细胞，如皮肤细胞、肌肉细胞等。
2. 提取细胞核：通过细胞核抽提技术，将供体细胞的细胞核提取出来。
3. 受体细胞准备：选择另一种细胞作为受体细胞，去除其原有的细胞核，留下空间待细胞核移植。
4. 细胞核移植：将供体细胞的细胞核移植到受体细胞内，形成克隆胚胎。
5. 植入母体：将克隆胚胎植入母体子宫内，发育成新个体。
二、克隆技术的方法实验室克隆技术主要有三种方法，分别是基因克隆、细胞克隆和生物体克隆。
1. 基因克隆：通过重组DNA技术，将感兴趣的基因片段插入到载体DNA中，形成重组DNA，再将其导入宿主细胞内，使宿主细胞表达该基因。
2. 细胞克隆：利用体细胞核移植技术，将供体细胞的细胞核移植到受体细胞内，形成克隆胚胎，再植入母体子宫内发育。
3. 生物体克隆：通过体细胞核移植技术，将供体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞内，再植入母体子宫内发育成新个体。
三、克隆技术的应用实验室克隆技术在各个领域都有重要的应用价值，主要体现在以下几个方面：1. 生物学研究：克隆技术可以帮助科学家研究基因功能、生物发育等重要问题，为生物学研究提供重要手段。
2. 医学应用：克隆技术可以用于治疗一些遗传性疾病，如克隆基因用于治疗疾病、克隆器官用于移植等。
3. 农业生产：克隆技术可以用于改良农作物品种、畜禽繁殖等，提高农业生产效率。
4. 繁殖保护：对于濒危物种的保护和繁殖，克隆技术也发挥着重要作用。
细胞重组与克隆技术
8.14细胞重建
细胞重建的概念是我国贝时璋院士提出的。 定义：体内已经存在的某种物质，可以由细胞质，甚
至细胞外的某种基质为基地，通过自组织、自装配过 程，一步步地形成完整的细胞。 早在20世纪30年代，贝教授在一种甲壳类动物—南京 丰年虫的二倍体雌虫卵母细胞中首次发现了细胞重建 的现象。 细胞重建的发现，证明细胞分裂不是细胞繁殖的唯一 途径，它可能是现代生物体内对地球细胞起源的反映， 是简单的生命形态进化为细胞的漫长过程的一个缩影， 有助于对生命进化过程的阐述
8.13细胞核移植
核移植起始于用微吸管对阿米巴等原生动物进 行的核操作。
在1952年，美国人罗伯特·布里格斯和T·J·金， 首先利用两栖类卵细胞建立细胞核移植技术。 由于两栖类的蛙卵数量较多，体积较大，容易 获得，操作方便。
1958—1962年，英国剑桥大学的约翰·格登教 授和麦金尼尔利用瓜蟾原肠内胚层细胞核移植， 培育出可育的非洲瓜蟾。
首先是核移植过程中要分离得到供体细胞和作 为受体细胞的卵细胞 。
其次要取处在适当发育阶段及细胞周期的受体 和供体细胞，受体细胞和供体细胞处于细胞周 期中的同一时期 ，核移植成功的几率最大。
受体细胞在细胞周期中所处的时间对转核实验 成功与否的影响要大于供体细胞所处的时间的 影响，一般取G2期进行核移植的效果都较好。
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另外，细胞诱导分裂成熟的因子（MPF）的活 性有关。
分子克隆的步骤及原理
分子克隆的步骤及原理分子克隆是利用重组DNA技术复制特定的DNA片段并将其插入到另一个DNA分子中的过程。
它是许多生物学和医学研究中常用的技术，例如用于研究基因结构和功能、制备重组蛋白以及研发基因治疗等。
第一步是选择并提取目标DNA片段。
一般情况下，需要从生物体中提取DNA，例如通过PCR扩增或酶切来获取所需片段。
PCR是一种酶链反应技术，通过引物引导DNA的聚合酶在一系列温度循环中合成DNA。
酶切是利用限制性内切酶切割特定的DNA序列来获得目标DNA片段。
第二步是将目标DNA片段插入载体DNA中。
载体DNA是一段能够自主在细胞中复制的DNA分子。
常用的载体包括质粒和噬菌体。
目标DNA片段需要与载体DNA进行连接，形成重组DNA。
连接主要通过DNA连接酶的作用，与连接酶反应的连接体包括连接酶本身、大肠杆菌DNA连接酶I（T4 DNA连接酶由细菌染色体T4噬菌体中提取的）、T4 ligation buffer （限制性内切酶的缓冲液通用成分+乙醇和内切酶）。
连接后的重组DNA 可以通过转化作用导入到宿主细胞中。
第三步是将重组DNA导入宿主细胞。
转化是将外源的DNA片段导入到细胞中的过程。
常用的转化方法包括化学转化和电转化。
化学转化是通过改变细胞的物理状态和细菌细胞表面的荷电状态，使其能够非特异性地吸附DNA质粒。
电转化则是通过电场作用使DNA穿透细胞膜，进入细胞。
最后一步是筛选和分离重组的细胞。
由于重组细胞中带有插入的目标DNA片段，因此可以通过筛选技术来判断哪些细胞中含有目标DNA。
常用的筛选方法包括抗生素耐药筛选和荧光蛋白筛选。
在抗生素耐药筛选中，重组细胞会在含有特定抗生素的培养基中生长，而未转化的细胞则会被抑制。
在荧光蛋白筛选中，以荧光蛋白为报告基因，使转化的细胞能够呈现出荧光信号。
分子克隆的原理主要依赖于DNA的重组和复制。
DNA连接酶通过其黏末端连接酶活性，可以将目标DNA片段连接到载体DNA中形成重组DNA。
细胞核移植技术与基因克隆技术
细胞核移植技术与基因克隆技术细胞核移植技术和基因克隆技术是当今生命科学领域两项重要的技术。
它们的出现对于人类的医学和农业都有着非常重要的意义，无论是通过细胞核移植技术克隆出的多个克隆动物还是通过基因克隆技术得到的许多基因工程产品都对人类的生产生活带来了巨大贡献。
本文将分别介绍细胞核移植技术和基因克隆技术的基本概念、原理和应用。
一、细胞核移植技术细胞核移植技术是近年来发展起来的一项重要技术。
它是指将一个细胞的细胞核移植到另一个已去掉其细胞核的细胞内，然后培养成一个全新的细胞体。
由于细胞核保存了一个生命体细胞中所有的基因信息，因此新的细胞体将具有与原细胞相同的基因型。
（一）原理细胞核移植实验中的一般步骤包括：（1）提取供体细胞准备其细胞核；（2）去除受体卵细胞的细胞核；（3）将供体细胞的细胞核移植到去掉细胞核的卵细胞内；（4）进行电融合、激活和培养等操作。
（二）应用细胞核移植技术的应用非常广泛。
最著名的应用就是克隆动物的制造，如羊—多利、牛—大福、猫—CC等。
此外，细胞核移植技术还可以用于繁殖值得保护的犬种、猫种等濒危物种。
此外，目前细胞核移植技术已经普遍应用于生物医学研究领域，如干细胞、治疗遗传病等。
二、基因克隆技术基因克隆技术是指通过基因工程手段将一个具有特定功能的基因复制到另一处靶位点中的技术。
最常见的基因克隆技术是利用DNA重组技术分离和复制获得某个基因的DNA序列，并将其引入另一个或者同一种生物的其他位点中，使得该基因在目标生物体中表达出来。
（一）原理基因克隆技术基本原理可用以下几个步骤来概括：（1）获得DNA片段；（2）粘接DNA片段；（3）将重组后的DNA插入宿主细胞中；（4）筛选和鉴定。
（二）应用基因克隆技术的应用被广泛应用于生命科学、医学和农业，如优良种质育种、特定蛋白的合成和生物医学研究等等。
具体的应用包括基因工程农业、基因工程医学、疫苗工程、药物研发等等。
总结细胞核移植技术和基因克隆技术可以说是两项开创性的技术，它们的应用涉及到很多方面，如农业生产、医学研究和生物学基础研究等等。
细胞分子生物学研究中常用的技术和方法
细胞分子生物学研究中常用的技术和方法细胞分子生物学是指研究细胞内发生的生物分子互作及其调控的学科。
随着生命科学技术的不断发展和完善，许多技术和方法得以应用于细胞分子生物学的研究中。
本文将从多个方面介绍细胞分子生物学研究中常用的技术和方法。
一、基因克隆技术基因克隆技术是一种常用的细胞分子生物学研究方法。
它可以通过将感兴趣的DNA序列插入载体DNA上，构建含有特定目的基因的重组DNA，最终将重组DNA引入宿主细胞中来研究某一基因的生物学功能。
基因克隆技术的核心是重组DNA技术，其中最常用的重组DNA方法包括限制性内切酶切割、DNA连接、转化及放大等步骤。
特别是在近年来的分子克隆技术中，基因编辑技术的应用使得基因克隆技术更加得到精细化和精确化。
二、蛋白质结构分析技术蛋白质是生物体中极其重要的分子之一，其结构对蛋白质的生物学功能有着至关重要的作用。
蛋白质的功能在很大程度上取决于其三维结构，因此蛋白质结构的研究是细胞分子生物学的重要研究领域。
蛋白质结构分析技术包括X射线晶体学、核磁共振、电子显微镜等。
其中，X射线晶体学是目前分析蛋白质最为常用的方法之一，其原理是利用X射线的衍射来确认蛋白质的三维结构。
三、荧光素酶标记技术酶标记技术是研究酶在细胞中的分布和功能的重要方法，其中荧光素酶标记技术则成为近年来应用最广泛的方法之一。
荧光素酶由日本学者O. Shimomura于1962年首次发现，可以发出明亮的荧光，被广泛应用于生物学研究中。
目前，荧光素酶标记技术被用来研究蛋白质的定位和运动等生物学过程，其原理是将荧光素酶标记的免疫球蛋白等物质与荧光素底物结合，从而通过荧光显微镜来研究生物分子的动态变化。
四、蛋白质互作筛选技术蛋白质在细胞中的互作是细胞分子生物学研究的重要问题之一。
蛋白质互作筛选技术则可以用来鉴定蛋白质之间的相互作用关系。
目前常见的蛋白质互作筛选技术包括酵母双杂交法、共免疫共沉淀、荧光共聚焦显微镜等。
重组DNA-分子克隆技术
重组DNA技术 Recombinant DNA Techniques
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主要内容
CONTENTS
基本知识
实验流程
实验操作
01
相关问题
02
03
04
克隆与克隆化
01
克隆：指同一副本或拷贝的集合
02
克隆化：获取同一拷贝的过程称为克隆化。
03
分子克隆：为某一研究目的，从众多不同的分子群体中分离的某一感兴趣分子，继而经无性繁殖（扩增）产生的很多相同分子的集合。
粘端连接
CCGG CCGG
GGCC GGCC
CGG C
C GGC
CGG C
C GGC
08
上幸存并形成菌落。
09
标志补救：若克隆的基因能够在宿主菌
01
表达，且表达产物与宿主菌的营养缺陷
02
互补，那么就可以利用营养突变菌株进
03
行筛选，这就是标志补救筛选。
04
01
挑取单菌落，于液体培养基中培养；
03
对质粒进行限制性内切酶酶切；
05
根据酶切产物的大小，鉴定阳性克隆。
02
收集菌体，提取纯化质粒；
在有模板DNA、引物及dNTP存在时，向
DNA合成体系中引入热稳定的Taq DNA聚
合酶。反应体系经变性、退火及扩增循环
自动。反复进行感兴趣DNA片段的酶促合
成，使目的基因按指数增长。
变性、退火、延伸三步曲
变性：双链DNA解链成为单链DNA
退火：部分引物与模板的单链DNA的特定互
补部位相配对和结合
04
琼脂糖凝胶电泳检测；
酶切和电泳
挑取平板上生长的单菌落直接进行PCR；
克隆技术知识点总结
克隆技术知识点总结克隆技术是现代生物技术领域中的重要分支，通过对细胞或生物体进行复制，可以获得与原始个体遗传信息相同的克隆个体。
本文将从克隆技术的定义、分类、应用，以及伦理道德等方面对克隆技术的知识点进行总结。
一、克隆技术的定义克隆技术是指通过人工手段复制或产生与原始个体遗传信息相同的生物个体。
克隆技术可以分为两种形式：基因克隆和生物体克隆。
基因克隆是指通过重组DNA技术获得具有相同遗传信息的DNA分子，而生物体克隆则是通过复制细胞或胚胎来获得与原始个体相同基因组的生物个体。
二、克隆技术的分类根据克隆技术的不同方法和手段，可以将其分为以下几种类型：1. 重组DNA技术克隆：通过将目标基因插入到载体DNA中，进而将其转化到宿主细胞中，使得宿主细胞表达目标基因并进行大量复制。
2. 基因工程克隆：通过DNA分子的重组和转化，将外源基因导入到受体生物体中，使得受体生物体表达和遗传外源基因。
3. 细胞克隆：通过体细胞核移植或分裂的方法，复制出与原始细胞基因相同的细胞，实现细胞的无性繁殖和扩增。
4. 动物体克隆：通过体细胞核移植等方法，复制出与原始生物体基因相同的生物个体。
5. 植物体克隆：通过组织培养、离体培养等方法，将植物组织进行分裂和再生，得到与原始植株基因相同的新个体。
三、克隆技术的应用克隆技术在各个领域都有广泛的应用。
以下是其中一些主要领域的应用：1. 医学研究：克隆技术在医学研究中可以用于制备大量含有特定基因的重组蛋白，用于疾病的诊断和治疗研究。
2. 农业领域：通过克隆技术可以获得优良农作物的纯合株系，提高农作物的产量和抗病虫害能力。
3. 物种保护：对于濒危物种而言，克隆技术可以通过细胞克隆或动物体克隆的方式，复制出与原始物种基因完全相同的个体，以保护珍稀物种。
4. 药物研发：通过克隆技术可以制备大量含有特定基因的动物模型，用于药物研发和毒性测试。
5. 人类生育领域：体细胞核移植技术为不育夫妇带来了希望，使得他们可以通过克隆技术获得自己的后代。
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Ⅲ.细胞核移植：常用的核移植方法有两 种，即胞质内注射和透明带下注射。胞质 内注射是用一个外径5～8μm 的注核针吸 取供体核后直接注射进卵母细胞胞质内的 方法。透明带下注射则是把供体细胞核注 射在透明带与卵母细胞之间的卵周隙中， 核移植后用电刺激进行细胞融合。
直接注射法制作重组胚过程
Ⅳ.激活：卵母细胞的激活涉及的因素 很多，无论是受精引起的卵母细胞激活 还是人工的激活，都会引起卵母细胞发 生一系列的反应，这些反应是胚胎发育 所必需的。其激活原理是通过电刺激、 钙离子载体等方法，使卵母细胞从MII 期中解放出来，并转到“受精”的状态
近年来我国核移植技术的发展
克隆的层次
A.分子水平上的-----基因克隆 重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增， 再用某探针选取、钓取目的基因。 B.细胞水平上的------细胞系的培养（制备单克隆 抗体） 单克隆抗体：利用动物细胞融合技术将骨髓瘤细胞和 能产生抗体的B淋巴细胞融合得到杂交瘤细胞，再去 培养，筛选到杂交瘤细胞系。 C.在个体水平上------繁殖出生物个体 不通过两性细胞的结合，从一个单一的细胞繁殖出生 物个体。即细胞 ------- 个体
Ⅰ.促进生物学基础问题的研究 Ⅱ.加速良种繁育，保护濒危动物 Ⅲ.培育转基因克隆动物，生产生物 药品 Ⅳ.与基因和干细胞技术结合，开展 治疗性克隆
14.3 动物克隆技术的意义及展 望
治疗性克隆
长期以来，围绕克隆的争论主要在两种 目的不同的克隆研究之间展开，也就是 生殖性克隆和治疗性克隆。生殖性克隆 是指克隆出一个完整的人，大多数国家 和地区都旗帜鲜明地予以反对。然而对 于治疗性克隆这种以治病救人为目的的 研究，虽然有着比较高的支持率，但也 存在着不同的声音。
Ⅴ.重组胚的培养：经融合和激活的重组 胚移入中间受体作体内或体外培养，观察 重组胚的发育率。羊、牛、猪的核移植胚 常采用体内培养方法获得桑椹胚和囊胚， 即羊和牛的重组胚用琼脂包埋后移入休情 期的母羊结扎的输卵管中体内培养4-7d， 发育至桑椹胚和囊胚。猪的核移植重组胚 移入同期化受体母猪输卵管内作体内培养 7d，发育为囊胚。大鼠、小鼠和兔的核移 植胚多作体外培养，发育至桑椹胚或囊胚。
1996年，英国人IanWilmut成功获得体细胞克隆羊 “多利”，这是世界上第一例利用成年体细胞核获得 的克隆动物。 1997年，中国学者孟励在美国用胚胎细胞克隆猴获得 成功。 1998年，一个多国联合科学小组用1个人的腿部体细 胞与1个奶牛的卵细胞结合，成功克隆了1个人的胚胎， 但只“生活”发育了12d就被有意毁掉。 1998年～1999年，美国人White用珍稀动物盘羊的 体细胞核与牛卵结合；韩国的黄禹锡将白头山老虎体 细胞核与牛卵结合；我国学者陈大元将大熊猫体细胞 核与兔卵结合，均成功克隆出早期胚胎。 2000年，美籍华裔学者杨向中领导的研究小组利用17 岁公牛耳部皮肤的成纤维细胞成功获得克隆牛。
异种克隆：也叫异种核移植，是指将某一动物的细胞核 通过显微操作移植到另一种动物的去核卵母细胞中，并 使之发育的过程，可用于探索细胞核在异种动物卵母细 胞中分化的潜能。
14.2.4 异种克隆
2003年中国首例种间北山羊在新疆诞生
异种克隆动物诞生的意义
进一步说明已经分化的细胞核保留有发育为完整个 体所需的全部遗传信息，动物异种体细胞核移植技 术具有可行性，该技术为珍惜濒危动物保护繁殖展 示了新的希望。
胚胎细胞核移植培育克隆鼠的过程
14.2.3 体细胞克隆
在20世纪50年代利用体细胞克隆成蛙， 其后科学家一直在努力期望利用体细胞 克隆出哺乳动物。
在1997年，Wilmut等利用成体绵阳的 乳腺细胞进行核移植，克隆出了-----Dolly.
Dolly的产生过程
动物克隆的大记事
1938年，德国科学家HansSpemann建议用成年的细 胞核植卵子的方法进行哺乳动物克隆。 1952年，英国的Briggs和King开始克隆青蛙，虽未 能成功，但开始寻找克隆技术。 1962年，英国剑桥大学的Gurdon宣布他用1个成年蛙 细胞克隆出1只蝌蚪，从而引发了关于克隆的第一轮辩 论。 1965年，中国实验胚胎学家童第周完成了金鱼核移植 并获得成功。 1983年，美国科学家Mcgrath和Solter克隆出小鼠。 1984年，丹麦科学家Willadsen用胚胎细胞克隆出1 只羊，这是第一例得到证实的通过核移植技术克隆出
你如何看待克隆人
思考题
1.什么是胞质体、核体、微细胞？概述他们 的制备方法。 2.试述哺乳动物细胞核移植的一般操作程序。 3.动物克隆技术的应用前景如何？还存在哪 些问题？ 4.你对克隆人极其组织有何感想？
-
基因水平的克隆
细胞水平上的克隆-----切下根尖
无菌培养
形成愈伤组织
组织分化形成器官
发育成新个体
植物细胞的全能性
14.2.1核移植技术的一般操作程序
Ⅱ.和供体细胞的准备：在核移植操作中， 细胞核供体细胞首先必须是完整的二倍体， 该细胞必须保持有供体动物完整的基因 组； 其次，供体细胞核必须能够在受体 细胞质的作用下，产生细胞分化过程的倒 转，变得如同刚刚受精的合子一样，能重 新完成从受精到发育成一个正常动物个体 的全过程。 供体细胞主要有两大类：胚胎卵裂球和体 细胞。另外，核供体细胞的来源还有胚胎
细胞重组及动物克隆技术
动物细胞重组及物克隆技术
14.1 14.2 14.3 细胞重组技术 细胞核移植和动物克隆技术 动物克隆技术的意义与展望
细胞重组的概念：
细胞重组(cell reconstruction)是指从活细 胞中将细胞器及其组分分离出来，再在体外 一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重 新组合，使之重新装配成为具有生物活性的 细胞或细胞器的一种实验技术。
如果在胚胎已经成为生命之后，是否可 以剥夺其生命再去救治一个已在人世的 生命？ 如今多数观点同意治疗性克隆研 究中培养胚胎不得超过14天，认为这 期间胚胎尚未成为“人”，而如何对这 一底线进行严格控制和监管，依然是摆 在人们面前的一个问题。
克隆技术存在的问题
理论问题 分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细 胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重 新恢复全能性的过程）的机理还不清 楚； 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄。 克隆动物的连续后代是否会累积突变基 因。 在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作 用等问题还没有解决。
利用细胞融合技术得到的重组细胞
微细胞的制作过程
14.2 细胞核移植和动物克隆技 术 A.细胞核移植技术：所谓核移植技术就是利
用显微操作技术将一个细胞的细胞核移植到 另一个细胞中，或者将两个细胞的细胞核 （或细胞质）进行交换，从而可能创造无性 杂交生物新品种的一项技术。
B.动物克隆技术：是指一个细胞或个体以无 性繁殖方式产生遗传物质完全相同的一群细 胞或一群个体。 在动物繁殖学中，它是指不通过精子和卵子 的受精过程而产生遗传物质完全相同新个体 的一门胚胎生物技术。
14.1.1 细胞重组的方式
（1）胞质体与完整细胞重组形成胞质杂种
（2）微细胞与完整细胞重组成微细胞异核体 （3）胞质体与核体重新组合形成重组细胞
14.1.2 细胞重组的原料
（1）胞质体：除去细胞核后由膜包裹的无 核细胞； （2）核体: 与细胞质分离的细胞核； （3）微细胞：又称微核体，由一条或几条 染色体、 少量细胞质和完整质膜包 裹而成； （4）胞质杂种细胞：将胞质体与另一完整 细胞融合得到的细胞。 （5）杂种细胞：核体与完整细胞融合。
治疗性克隆指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中 形成重组胚，把重组胚体外培养到囊胚，然后从囊 胚内分离出ES细胞，获得的ES细胞使之定向分化为 所需的特定细胞类型(如神经细胞，肌肉细胞和血细 胞），用于替代疗法。 这种方法的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到 克隆个体。运用克隆技术获得人体早期胚胎，但目 的不是将胚胎培育成人，而是为了提取全能型的胚 胎干细胞，然后在合适的条件下，使其发育成为人 体的任何一个器官，包括大脑、肌肉、血液和神经， 这些器官组织将用于医疗。 目前治疗性克隆已获得不少国家的默许。
Ⅵ.重组胚的移植：重组克隆胚胎移植的 受体母畜要选择皮毛颜色与供体品种不同、 繁殖性能强、体格稍大的当地品种，进行 同期发情处理，按常规方法移植代孕母畜 （寄母）的子宫中，待其发育到产仔。 Ⅶ.核移植后代的鉴定：一般可以从形态、 性别上鉴定，还可以采用分子生物学技术 进行鉴定。
14.2.2胚胎细胞核移植
实践问题 克隆动物的成功率还很低 生出的部分个体表现出生理或免疫缺陷。 即使是正常发育的“多莉”，也被发现 有早衰迹象
如何迎接“克隆时代”的挑战
⒈人类从有性生殖回到了无性生殖，无疑 是一个巨大的倒退。 ⒉“克隆人”没有父母，没有亲情，社会将 会变得冷酷无情。 ⒊“克隆人”成年后也有可能会通过有性繁 殖来繁衍后代，不知不觉地就可能造成大量 的近亲结婚，其后果是不堪设想的。 人兽胚胎、基因测序、克隆人、换脸术、设 计婴儿……
2000年，美国科学家成功地克隆出首例灵长类动物—— 一只恒河短尾猴“泰特拉（Tetra）”。与其它动物克 隆不同的是，“泰特拉”未用细胞核移植技术，而是采 用胚胎分解的方法，将受精卵培育卵裂至8个细胞时将 其分离，每2个细胞分为一部分，共分为4部分，并分别 植入4个“代理母亲”子宫中，结果有一个“代理母亲” 成功生下了“泰特拉”，这意味着克隆人类已没有技术 障碍。 2000年6月22日，我国生物胚胎专家张涌在西北农林科 技大学种羊场顺利接生了1只雌性体细胞克隆山羊“阳 阳”。“阳阳”经自然受孕后，并于2001年8月8日产 下一对混血儿女，雄性叫“欢欢”，雌性叫“庆庆”， 都是体细胞克隆山羊“阳阳”与世界首批胚胎克隆山羊 交配的后代。“阳阳”的生产可以证明体细胞克隆山羊 和胚胎克隆山羊具有与普通山羊一样的生育繁殖能力。 2001年，美、意科学家联手展开克隆人的工作，但遭到 国际社会的普遍反对。