罗丹明B快速检测胶体金
食品中罗丹明B测定(BJS,201905)
食品中罗丹明B测定（BJS,201905）食品中罗丹明B的测定BJS2019051范围本方法规定了食品中罗丹明B的液相色谱测定方法及液相色谱-质谱/质谱确证方法。
本方法适用于半固态调味料、花椒及花椒粉、花椒油、牛肉干、蜜饯、水果干制品中罗丹明B的测定和确证。
2原理试样中罗丹明B用含酸的甲醇水溶液提取后，经混合型阳离子固相萃取小柱净化，采用液相色谱荧光检测器检测，外标法定量。
试样中检出罗丹明B 后采用液相色谱质谱/质谱法进行确证。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
3.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。
3.2乙腈（C2H3N）：色谱纯。
3.3甲酸（CH2O2）：色谱纯。
3.4氨水（NH₃·H₂O）：色谱纯。
3.5含0.1%甲酸的水溶液:取甲酸（3.3）1mL用水稀释至1000mL，用滤膜（0.22μm，水相）过滤后备用。
3.650%甲醇水溶液:准确量取500mL甲醇（3.1）于1L容量瓶中，用水定容至刻度。
3.7含0.1%甲酸的甲醇水溶液：取1mL甲酸（3.3），用甲醇水溶液（3.6）稀释至1000mL。
3.8含0.1%甲酸的乙腈溶液：取1mL甲酸（3.3），用乙腈（3.2）稀释至1000mL，滤膜（0.22μm，有机相）过滤后备用。
3.9含0.1%甲酸的乙腈水溶液：取0.1mL甲酸（3.3）和35mL乙腈（3.2），用水稀释至100mL，混匀。
3.10含5%氨水的甲醇溶液：取5mL氨水（3.4），用甲醇稀释至100mL，混匀。
（临用现配）3.11罗丹明B标准品：罗丹明B标准品的分子式、相对分子量、英文名称、CAS登录号见表1，纯度≥99%。
表1罗丹明B标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子量罗丹明BRhodamineB81-88-9C28H31ClN2O3479.013.12罗丹明B标准储备液：准确称取罗丹明B标准品10mg（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的标准储备液。
胶体金比色法测定矿石中的金
胶体金比色法测定矿石中的金
张肇宏
【期刊名称】《理化检验：化学分册》
【年(卷),期】1989(025)004
【摘要】利用胶体金比色法测定金是"经典"方法。
方法采用无机或有机试剂将金（Ⅲ）还原成金胶体用比色法进行测定。
金胶体的颜色与溶液的酸度、还原剂的种类等因素有关,此法多用于精炼银、铂、电镀层及钛合金等材料中金的测定,尚未见到应用于地质样品中的报道。
本文采用活性炭或泡沫塑料预富集矿石中的金,用邻氨基苯甲酸还原金（Ⅲ）成单体并形成胶体溶液,其最大吸收峰在440nm处,金在0.5～40μg·ml-1浓度范围内符合比耳定律。
研究了胶体金形成的酸度、缓冲溶液和还原剂用量、胶体金稳定性及共存离子的影响等。
10g取样可测定矿石中0.5～400g·T-1的金。
测定1～20g·T-1金标样时变异系数为0.7～7.3%。
【总页数】2页(P32-33)
【作者】张肇宏
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】P585.3
【相关文献】
1.泡沫塑料吸附硫代米蚩酮比色法测定矿石中痕量金 [J], 戴安
2.胶体金在DNA分子识别中的应用-胶体金对罗丹明B与单双链DNA识别作用的
影响 [J], 李生勇;龚声瑾;王雪梅
3.活性炭动态吸附-硫代米蚩酮显色萃取比色法测定矿石中痕量金 [J], 汪洪静
4.聚丙酰胺富集—液珠萃取目视比色法测定矿石中微量金 [J], 赵永凤;韦罗云
5.胶体金免疫比色法测定血清h-FABP水平的初步研究 [J], 孙宇;王茹;顾李霖;李佳林;王会中
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
罗丹明B的危害及其在食品中快速检测方法的建立
净化萃取柱。
其平均添加物质的回收率在 90.3% ~ 96.8%，相对标准偏差
2.3 标准曲线和检出限
（RSD）全部低于 5%。结果可以看出，此方法具备理想的准
罗 丹 明 B 其 浓 度 需 要 保 持 在 1.0 ～ 100.0 ng/mL 的 确性以及可靠性。
表 1 精密度和回收率
化合物 罗明丹 B
AB SCIEX QTRAP 4500 型 三 重 四 级 杆 串 联 质 谱 仪； Waters e2695 型高效液相色谱仪；AB204-S 型电子分析天平； H1850R 型台式高速离心机；Fotector Plus 型高通量全自动 固相萃取仪；AutoEVA-60 型全自动平行浓缩仪 [2]。
109-111.
本文简述了罗丹明 B 的毒性，并且使用高效液相串联
[2] 王传现 , 韩丽 , 方晓明 , 等 . 食品中罗丹明 B 的高效液
质谱的检测方式，对比多种溶剂在提取获得的效果，并且使 相色谱荧光检测 [J]. 分析仪器 ,2008(1):27-30.
用 MCX 固相萃取柱对其进行净化后，减少了样品产生的基
速、精准及灵敏度高的优势，因此适合针对食品中的罗丹明 检测豆制品中 4 种红黄色系工业染料 [J]. 食品安全质量检测学
B 进行定性及定量的分析，也能够为其他相似工业染料提供 报 ,2012,3(3):190-194.
一种比较理想的检测方式。
[5] 薛昆鹏 , 金小青 , 余冲 , 等 . 固相萃取 - 高效液相色谱 -
103 Oct. 2021 CHINA FOOD SAFETY Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
甲醇和乙腈，丙酮和正己烷，色谱级；罗丹明 B 标准品， 纯度 95%；Oasis MCX 固相萃取柱和 Oasis HLB 固相萃取 柱都需要控制在 60 mg/3 mL，3 μm。 1.2 实验方法 1.2.1 提取
罗丹明B介绍
罗丹明B - 物理性质性状：深红色结晶或红棕色粉末。
溶解性：易溶于水、乙醇，微溶于丙酮、氯仿、盐酸和氢氧化钠溶液；水溶液为蓝红色，稀释后有强烈荧光，醇溶液为红色荧光；最大吸收波长552nm，最大荧光波长610nm，激光峰值波长610nm，调谐范围 578～610nm。
[1]罗丹明B - 用途测定锑、铋、钴、铌、金、锰、汞、钼、钽、铊、钨等试剂；造纸工业染蜡光纸、打字纸、有光纸等，也可用于腈纶、麻、蚕丝等织物以及麦秆、皮革、羽毛制品的染色。
罗丹明B在溶液中有强烈的荧光, 常用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。
用于纸张、晴纶、丝绸、皮革、羽毛染色，并可用于食品和某些金属分析试剂罗丹明B - 检测原理罗丹明B1、罗丹明B具有脂溶性，被用作调味品（主要是辣椒粉和辣椒油）染色剂。
使用了被污染的调味品制作食品时会造成残留。
调味品使用罗丹明B染色时含量较高，甚至直接掺入，可进行现场检测。
食品中因其含量较低，需送实验室检测。
2、现场检测中使用非极性有机溶剂（例正己烷、正己烷+丙酮等）将其溶解并提取出，提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B，用非极性有机溶剂（例正己烷）淋洗小柱，洗脱样品油脂和食品内源性干扰物，用肉眼可观测到在小柱上出现鲜亮的粉红色条带，判定为可疑样品，该样品需送实验室作进一步确证检验。
3、实验室检测法仍然采用非极性有机溶剂（例正己烷、正己烷+丙酮等）将罗丹明B从食品中溶解并提取出，提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B，用非极性有机溶剂（例正己烷）洗脱样品油脂和食品内源性干扰物，再用极性有机溶剂（例甲醇）将罗丹明B从小柱上洗脱并收集，用反相高效液相色谱仪-紫外/可见光检测器进行定性定量检测。
低共熔溶剂萃取荧光法快速检测辣椒油中的罗丹明B
科技与创新┃Science and Technology&Innovation·32·2017年第21期文章编号：2095－6835（2017）21－0032－02低共熔溶剂萃取荧光法快速检测辣椒油中的罗丹明B林纯忠1，王韦达2，陈美婷2，刘慧强2，张清1，杜业刚2（1.深圳市龙华区动植物检验检测中心，广东深圳518131；2.深圳市计量质量检测研究院，广东深圳518100）摘要：罗丹明B是一种碱性工业染料，由于它对人体具有潜在的致癌毒性而被禁止添加在食品中。
然而，一些不法商贩用罗丹明B作为食品着色剂掺杂在辣椒油中。
利用由氯化胆碱和乙二醇（摩尔比为1∶3）合成的低共熔溶剂作为提取介质，酶标仪作为荧光信号检测器实现了辣椒油中罗丹明B的快速定性检测。
关键词：罗丹明B；低共熔溶剂；酶标仪；氧杂蒽染料中图分类号：R187文献标识码：A DOI：10.15913/ki.kjycx.2017.21.032罗丹明B又称碱性玫瑰精（分子结构如图1所示，pKa= 3.7），是一种人工合成的氧杂蒽染料，作为荧光试剂被广泛应用在金属离子识别，蛋白标记等领域，但由于它对人体存在潜在的致癌、致畸性，被欧洲食品安全局禁止应用于食品中。
然而，一些不法商家在利益的诱惑下将罗丹明B用作着色剂对辣椒油进行染色，以增加产品的色泽。
尽管食品中罗丹明B的检测方法已有众多的报道，例如高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法、酶联免疫分析法等，但这些方法检测周期长，不适用于对大批量的辣椒油进行快速筛查。
因此，有必要建立一种可以对罗丹明B进行快速定性的检测方法。
近年来，低共熔溶剂作为一类新型绿色环保溶剂在分离技术领域引起了广泛的关注。
杨国武等人发现，由氯化胆碱和乙二醇按照摩尔比1∶3组成的低共熔溶剂（DES-1）可以从辣椒油中选择性萃取罗丹明B。
考虑到罗丹明B的荧光特性，我们产生了通过直接读取提取液荧光信号对罗丹明B进行定性检测的想法。
辣椒粉中罗丹明B液相色谱检测方法的研究
农产 品加工 － 学刊
Ａｃ ｄ ｍｉ ｒｏ ｉ ａ ｆＦａｍ ｒ ｄ ｃｓ Ｐ ｏ ｅ ｓｎ ａ ｅ ｃ Ｐｅ ｉｄ ｃ ｌｏ ｒ Ｐ ｏ ｕ ｔ ｒ ｃ ｓ ｉ ｇ
ＮＯ １ ．１ ＮＯ ． Ｖ
文 章 编 号 ：１７ — ６ ６ （０ ２ １－ １７ ０ ６ １９ ４ ２ １） ０ ５ － ２ １
辣椒 粉 中罗丹 明 Ｂ液相 色谱检 测方的研究
林 清荷 ，陈 鑫 ，吴忠兴
（ 福州市产 品质量检验所 ，福 建 福州 ３ ０ ２ ） ５０ ５ 摘 要 ：研究 了辣 椒粉中罗丹明 Ｂ的液相色谱检测方法 。试样 中的罗丹明 Ｂ用体积分数 ８ ％甲醇 提取 ，液相色谱一荧 ０ 光检测器测定 ，外标峰面积法定量 。罗丹明 Ｂ在 ５ ５ ０ｎ／ ～０ ｇ ｍＬ呈良好的线性关系 ，３ 个水平 （ ．，３ ． ０ ｇ ｇ １ ０ ０ ，５． ｐ ／ ）添 ０ ０ ０ ￣ｋ
ＨＰ Ｃ Ｄｅｅ ｍｉ ａｉ ｎ ｏ ｏ ａ ｎ ｎ Ｃ ｉ ｉ ｏ ｅ Ｌ ｔｒ ｎ ｔ ｆＲｈ ｄ ｍｉ ｅ Ｂ ｉ ｈ ｌ ｗｄ ｒ ｏ ｌＰ
ＬＮＱｎ － ｅ Ｃ Ｅ ｉ， ｈｎ －ｉｇ Ｉ ｉｇ ｈ， Ｈ ＮＸ ｎ ＷＵ Ｚ ｏ ｇｘｎ （ｕｈｕ ｒｄ ｃＱ ａｔＭｏｉ ｒ ｇ ｕｅｕ ｕｈ ｕ ｕｉ ５ ０ ５ ｈｎ） Ｆ ｚｏ ｏｕ ｔ ｕｌｙ ｎｔ ｉ ｒａ ，Ｆ ｚｏ ，Ｆ ｊ ｎ ３０ ２ ，Ｃ ｉａ Ｐ ｉ ｏｎ Ｂ ａ
加罗丹 明 Ｂ的回收率为 ８ ． ８ ％ １９０ ７ ０ ．％，相对标准偏 差 （Ｓ ）为 ４３ ＲＤ ．％～５７ ． ％，检出限为 ５ｔ ／ｇ ｇ 。此方法简便 、快 ｘｋ
捷 ，适用于辣椒粉 中罗丹明 Ｂ的检测 。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用摘要：随着中国经济的快速发展，人们的生活质量显著提高，食品质量和安全越来越受到关注。
胶体金免疫层析技术是层析与免疫分析技术相结合的一种技术，能对现场食品开展快速免疫检测，有效地确认食品的质量安全，从而保证人们日常饮食的健康和安全。
基于此，本文总结了胶体金免疫层析技术的原理及特征，并对食品快速检测中胶体金免疫层析技术的应用进行介绍和分析。
关键词：胶体金免疫层析技术；食品；检测引言随着时代的发展，粮食安全已成为社会各领域的高度优先事项。
当前粮食安全形势的特点是世界各地存在各种粮食安全问题，造成重大经济损失。
为了提高食品安全，保护人们的健康，各种食品安全检测技术被广泛应用。
快速便捷的食品安全检测技术使人们能够在最短的时间内检测出食品，从而减少食品安全事故的发生。
免疫层析技术是20世纪80年代初首次出现的一种独特的免疫测定方法。
胶体金是由绿原酸组成，绿原酸与柠檬酸协同作用。
白磷和金颗粒在静电作用下聚合，形成稳定的胶体溶液，免疫层析法简便、灵敏。
一、胶体金免疫层析技术分析胶体金，也称为氯尿酸水溶液，在还原剂如柠檬酸三钠和白磷的影响下进行联合反应，形成一定尺寸的颗粒。
因此，红点就会在粒子上显现出来，这样，观察者就能轻易的用肉眼看到。
还原剂的性能各不相同，其性能及作用效果各不相同。
由于胶体金的这一特性，胶体金也成为免疫色谱测试中常用的指示剂。
还原剂具有不同的性质，不同还原剂的性质和效果也不同。
这样，所生成的胶体颗粒就会呈现出明显的差别，从而可以满足对食品检测多元化的需求，并可以在食品检测中得到较好的结果[1]。
二、胶体金免疫层析技术的特点胶体金免疫层析技术具有高灵敏度、操作简便和安全性高等优势，因此，在此基础上，通过在此基础上，利用这项技术帮助食品行业制定可持续的食品控制标准。
免疫色谱法的优势如下：1、检测灵敏度和预期相符由于目前的免疫层析法以单抗为主要特征，因此其具有高灵敏、高选择性、高通量、低成本、低成本、低成本等优点。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用摘要：在社会经济迅速发展的条件下，人们生活水平在不断提升的同时，食品的质量安全也日益受到社会各界的重视。
胶体金免疫层析技术是一种将层析与免疫分析技术融合在一起的现代化科学技术，它可以对现场的食品进行快速的免疫检测，可以有效地确定食品的质量和安全，保障人民的日常饮食的健康和安全。
本文对胶体金免疫层析技术进行了研究，并对其在食品检验方面的应用进行了探讨。
关键词：胶体金免疫层析技术；食品检测技术；食品安全策略引言随着人民生活质量水平的提升，食品卫生与安全受到了人们的关注。
为了提高食品的质量与卫生安全，我们必须对食品进行有效和精确的检测，以保证人的生命安全与生活品质。
在目前已有的快速检测技术中，最具有代表意义的是胶体金免疫层析技术，它可以被用于对食品品质和安全性进行检测，为了充分地发挥它的优点，文章对胶体金免疫层析技术的使用重点进行了研究，希望为后期食品安全的检测提供保障。
一、胶体金免疫层析技术的内涵胶体金指的是一种氯金酸水溶液，在白磷、柠檬酸钠、还原剂的影响下会产生一种特定尺寸的胶体，并在静电的影响下会产生一种可以用眼睛看到的、具有较高电子密度的胶体溶液。
该特性满足了免疫色谱法测定样品中蛋白质含量的需要，可以用来测定样品中蛋白质含量。
根据各种还原剂的类型，制备出的胶体粒子也会有所不同，因此可以在多种条件下，实现对食品样品的高灵敏探测。
相关研究人员利用中毒胶体金条形码，以抗氟喹诺酮类单克隆中毒抗体为材料，研制出了一种能在乳制品中对11种类抗氟喹诺酮类的抗体残留进行免疫检测的纸条，一般检测反应的时间为5分钟，若该试纸的温度检测结果与其它试纸的温度检测结果一致，检测的重复性相对高，那么该试纸在4℃下能可以保存12个月以上。
而且这种方法对样本进行简单的预处理、快速的检测、高的敏感性、高的专一性、高的假阳性率和假阴性率都为0，并且经过了液相第二质谱的方法的测试和验证，这胶体金免疫层析技术在试剂和纸条的品质检测方面，具有很好的稳定性和可靠性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
附件3
食品中罗丹明B的快速检测
胶体金免疫层析法（KJ201703）
1范围
本方法规定了食品中罗丹明B的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于辣椒粉和辣椒酱中罗丹明B的快速测定。
2原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中罗丹明B经有机试剂提取，固相萃取小柱净化，浓缩复溶后，罗丹明B与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中罗丹明B进行定性判定。
3试剂和材料
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1试剂
，用水溶解并稀释至刻度，制成0.2mol/L溶液A；称取31.21g磷酸二氢钠(，用水溶解并稀释至刻度，制成0.2mol/L溶液B。
将溶液A与溶液B按照体积比67:33混匀，制成pH7.1磷酸盐缓冲液。
3.2参考物质
罗丹明B参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥98.6%
表1 罗丹明B参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量
注：或等同可溯源物质。
3.3标准溶液配制
，置于10mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成浓度为1mg/mL的罗丹明B标准储备液。
冷藏，有效期6个月。
，置于100mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成1μg/mL的罗丹明B标准中间液A。
临用新制。
，置于10mL容量瓶中，用甲醇（，摇匀，制成100ng/mL的罗丹明B标准中间液B。
临用新制。
3.4材料
，1000mg/6ml。
，在产品有效期内使用）。
4仪器和设备
4.1移液器：200μL、1mL和10mL。
4.2涡旋混合器。
4.3离心机：转速≥4000r/min。
4.4电子天平：感量为0.01g。
4.5振荡器。
4.6样品浓缩仪：如有需要。
4.7环境条件：温度：15℃—25℃，相对湿度≤60%。
5分析步骤
5.1试样制备
取具有代表性样品约500g，充分粉碎混匀，均分成两份，分别装入洁净容器作为试样和留样，密封，标记，于常温保存。
5.2试样提取和净化
准确称取试样2g（精确至0.01g）置于50mL具塞离心管中，依次加入20mL提取剂（，振荡提取3min，以5000r/min离心5min。
上清液待净化。
吸取5mL提取剂（，流出液弃去。
将上清液全部转移至固相萃取小柱中，流出液弃去。
再加入20mL提取剂（，流出液弃去。
用5mL甲醇洗脱小柱，收集洗脱液吹干。
精密加入500µL复溶液（，涡旋混合1min，作为待测液。
5.3测定步骤
吸取200µL样品待测液于金标微孔（，抽吸5—10次使混合均匀，室温温育5min；温育结束后，将试纸条（，室温温育5—8min，从微孔中取出试纸条，去掉试纸条下端的吸水海绵，进行结果判定。
吸取全部样品待测液于金标微孔（，抽吸5—10次使混合均匀，室温温育5min；温育结束后，将金标微孔中溶液滴加到检测卡（，室温温育5—8min，进行结果判定。
5.4质控试验
每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。
称取空白试样，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
准确称取空白样品2g或适量（精确至0.01g）置于50mL具塞离心管中，加入100μL或适量罗丹明B标准中间液B（100ng/mL）（，使罗丹明B浓度为5μg/kg，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
6结果判定要求
通过对比控制线和检测线的颜色深浅进行结果判定。
由于长时间放置会引起检测线颜色的变化，需在规定时间内进行结果判定。
目视结果判读依据如图1所示。
6.1无效
控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。
6.2阳性结果
检测线（T线）不显色或检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅，表明样品中罗丹明B 含量高于方法检测限，判定为阳性。
6.3阴性结果
检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当，表明样品中罗丹明B含量低于方法检测限，判定为阴性。
6.4质控试验要求
空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。
7结论
当检测结果为阳性时，应对结果进行确证。
8性能指标
8.1检测限：罗丹明B为5μg/kg。
8.2灵敏度：灵敏度应≥99%。
8.3特异性：特异性应≥85%。
8.4假阴性率：假阴性率应≤1%。
8.5假阳性率：假阳性率应≤15%。
注：性能指标计算方法见附录A
9其他
本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不做限定。
方法使用者在使用替代试剂、试剂盒或操作步骤前，须对其进行考察，应满足本方法规定的各项性能指标。
本方法参比标准为SN/T 2430-2010《进出口食品中罗丹明B的检测方法》(包括所有修改单)。
附录A
快速检测方法性能指标计算表
表A.1 性能指标计算方法
本方法负责起草单位：山西省食品药品检验所。
验证单位：陕西省食品药品监督检验研究院、四川省食品药品检验检测院。
主要起草人：杨国伟、张烨、王媛媛、李倩。