最新GMS-六胺银-真菌
重视分子病理诊断新技术提高结核病病理学诊断水平
重视分子病理诊断新技术提高结核病病理学诊断水平车南颖中国是结核病高负担国家，在结核病诊断中面临很多问题。
分析2018年WHO发布的全球结核病报告中国结核病诊断在以下3个方面需要继续加强：(1)肺结核细菌学确诊率低，仅为31%,远低于世界平均水平57%；(2)耐药结核病发现率低，不到20%耐多药或利福平耐药患者被发现；(3)肺外结核发现率低，全球报告的结核病患者中15%为肺外结核，但中国报告的肺外结核患者仅占5%。
病理学是诊断结核病的重要途径，在疑难性结核病，尤其在菌阴肺结核(痰涂片及培养阴性)及肺外结核的诊断中发挥着非常重要的作用。
近年来，分子病理学新技术发展迅猛，结合传统病理学可以做到确诊结核病、鉴别诊断结核病与非结核分枝杆菌病，以及诊断耐药结核病，为解决以上3个结核病诊断所遇到的突岀问题提供了新的途径。
如何将这些新技术应用到临床实际工作中，提高疑难性结核病的诊断水平是摆在我们面前的重要问题。
1病理学诊断结核病的方法及标准•M病理学诊断结核病的主要方法病理学诊断结核病的主要方法包括常规病理学、特殊染色、免疫组织化学染色,以及分子病理学等。
2017年发表的《中国结核病病理学诊断专家共识》p,(以下简称“《共识》”)，对上述4种方法的原理、特点及注意事项等做了详细的介绍。
1.1.1常规病理学：常规病理学通过大体和镜下观察组织细胞的病理形态学变化进行诊断，具有针对性强、准确性高等特点。
对结核病与其他一些非肉芽肿性疾病(如肺结核与肺癌)的鉴别诊断具有很好的优势「但肉芽肿或坏死等结核病常见的病理改变亦可出现在其他感染性和非感染性肉芽肿性病变中DT,《共识》中明确指出常规病理学诊断手段不能作为诊断结核病的金标准，必须通过其他方法找到明确的结核病病原学依据方可确诊。
1.1.2特殊染色：特殊染色中，抗酸染色是病理科最为常用的查找抗酸杆菌的方法，对于诊断结核病有非常重要的作用。
需要注意的是，抗酸染色无法鉴别结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌，而且除了分枝杆菌外其他一些种属的细菌也可呈抗酸染色阳性151,因此抗酸染色阳性并不能确诊结核病，形态典型的情况下只能诊断分枝杆菌病。
六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)
仅供科研版本号：180524 六胺银染色液(改良Grocott-橙黄G法)【产品组成】【保存条件】4℃，避光,6个月【产品概述】六胺银染色液是一种经典显示基底膜的方法。
经过Grocott改良之后,组织经铬酸氧化，使真菌内的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺银还原为黑色的金属银。
氯化金可使金属银转变为更稳定的金属金，同时使背景更清晰。
海波可以固定并洗去未还原的银离子。
本法采用橙黄G复染对各种真菌的显示效果都很好，特别是马尔尼菲青霉菌的显示特别好，但必须淡染橙黄G。
如需显示曲霉和白色念珠菌，可选用苏木素或者伊红复染，可看到真菌与周围组织的关系。
【使用方法】1、组织固定于甲醛固定液中，常规脱水包埋。
切片4um，脱蜡至水洗。
2、切片入氧化剂氧化20min。
流水稍洗。
3、入漂白液处理1min，以除去氧化剂。
4、流水冲洗5min，蒸馏水浸洗2次，每次30s-60s。
5、切片放入配制好的预热至60℃的六胺银工作液中，加盖60℃恒温染色大约20～60min，切片呈淡黄色即取出经水洗后显微镜观察有否有菌体出现。
如有淡棕色菌体出现，应每隔5-10min观察一次以控制菌体着色深浅，直至显色理想。
6、入蒸馏水中清洗。
7、用氯化金溶液调色1～2min。
蒸馏水洗1～2min。
8、置于海波溶液2min。
流水冲洗5min。
9、滴加橙黄G一小滴复染1s即用水冲洗。
染色时间不能过长，否则将影响最终效果。
10、流水冲洗20s-60s。
11、常规脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
南京森贝伽生物科技有限公司网址：/第1页【染色结果】【注意事项】1、实验中所用玻璃器皿，应预先用硫酸洗液浸泡并用蒸馏水冲洗干净，烤干。
2、六胺银工作液配制后应先放入温箱中预热，温度要达到60℃时，再放人切片进行染色。
如用水浴锅代替恒温箱，需将温度设定在48-50摄氏度，否则切片会很快变黑而难以掌握。
一般建议在恒温箱中孵育染色。
3、在低倍镜检时，菌体不宜着色太黑，否则在高倍镜下观察则不够清晰透亮，特别需注意菌体成堆的地方的显色。
真菌的组织病理学特殊染色
真菌的组织病理学特殊染色马天;宋月星;邹先彪【摘要】Histological evaluation is quick and easy for pathogen identification and diagnosis in fungal infections. Some common special stains and application will be discussed in this paper.%组织学检查是一种识别真菌快速、简便的方法.本文介绍真菌病的病理学诊断中最常见的特殊染色方法及应用范围.【期刊名称】《中国真菌学杂志》【年(卷),期】2011(006)006【总页数】3页(P367-369)【关键词】特殊染色;真菌病;组织病理学【作者】马天;宋月星;邹先彪【作者单位】解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048;解放军总医院第一附属医院皮肤科,北京100048【正文语种】中文【中图分类】R446.83组织学检查是识别真菌的一种快速、简便的方法。
炎性肉芽肿和风湿性肉芽肿的组织学评价必须包含特殊染色以确定或排除真菌和抗酸细菌的存在。
在病理学日常实践和工作中，Gomori六胺银染色 (Gomori＇s methenamine silver stain，GMS)和糖原染色(Periodic acid-Schiff stain，PAS)是两种较常见的寻找组织和细胞样本中真菌的染色方法。
真菌在组织切片中的存在是侵袭性感染的有力证据。
在细胞学标本中，真菌可以通过它的大小和特殊的形态得到鉴定。
但由于其多样性，仅仅使用一些常规的染色很难在组织切片中发现或鉴别真菌。
1 广谱真菌染色苏木精-伊红染色 (Hematoxylin-eosin stain，HE)是一种多用途的染色方法 (见图1)。
但诊断真菌病仅仅使用HE染色常常是不够的，即使在高倍镜下，也很难从组织中区分出被染色的病原菌。
隐球菌性脑膜炎诊治专家共识
隐球菌性脑膜炎诊治专家共识感控新青年5月14日来源丨中华内科杂志2018 年5月第57 卷第5期作者丨刘正印王贵强朱利平吕晓菊章强强俞云松周志慧刘焱斌蔡卫平李若瑜张文宏张福杰吴昊徐英春卢洪洲李太生代表中华医学会感染病学分会隐球菌性脑膜炎诊治专家共识引言2000年，美国感染病学会(Infectious Diseases Society of America，IDSA)首次发表了“隐球菌病治疗的实践指南”[1]，2010年更新为“隐球菌病治疗临床实践指南，美国感染病学会2010更新”[2]，该指南经过多年临床应用，确实发挥了规范隐球菌感染治疗的作用；但是在我国临床实施过程中，的确发现有很多不适用于中国的内容。
我国2010年由《中国真菌学杂志》编辑委员会发布的“隐球菌感染专家共识”[3]，并无专门针对隐球菌性脑膜炎诊治的共识或指南供临床医生参考，另外国内隐球菌性脑膜炎的诊治也存在一些不规范之处。
为此中华医学会感染病学分会组织全国有关专家一起制订了本“隐球菌性脑膜炎诊治专家共识”。
隐球菌性脑膜炎既可发生于艾滋病（AIDS）和其他免疫功能低下人群，也可发生在免疫功能正常者，它是AIDS患者主要机会性感染和常见死亡原因之一，随着人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的流行，隐球菌病发病呈显著增加趋势，据报道约6%～10%的AIDS患者会合并隐球菌感染，在美国AIDS高发城市旧金山、亚特兰大等地，隐球菌病的发病率约为5/100 000，其中1/5出现中枢神经系统（CNS）受累。
近年随着高效抗逆转录病毒治疗的应用，AIDS相关隐球菌性脑膜炎的发病率已显著下降；但值得关注的是，欧美、澳洲、南亚等地的流行病学数据显示，在非AIDS相关隐球菌性脑膜炎患者中，多数患者有免疫功能低下基础疾病，仅7%～32%患者免疫功能正常[4-8]；而我国内地、香港、台湾地区，以及新加坡华裔患者的数据显示，高达50%～77%隐球菌性脑膜炎患者为免疫功能正常者[9-13]。
真菌 染色
、概述真菌是指具有真正细胞核、产生孢子、不含叶绿素，以寄生或腐生方式吸取养料，能进行有性和(或)无性繁殖，具有纤维素(或其他葡聚糖)或几丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。
真菌侵犯人体常继发于其他疾患，如恶性肿瘤、TB、糖尿病等慢性消耗性疾病；大剤量X线照射；免疫抑制剂等导致免疫功能和抵抗力低下；大量应用肾上腺皮质激素的病人，其炎症反应多受抑制，也容易感染真菌；另外器官移植、导管插管、放疗等应用引起局部组织损伤，为真菌的入侵提供了条件．近年来由于免疫缺陷病毒感染者的不断出现，使原来不致病的真菌转为致病真菌。
因此，真菌感染已经成为一个日益严峻的问题。
真菌分为浅部真菌和深部真菌。
浅部真菌：主要侵犯机体皮肤，寄生和腐生于表皮，毛发和甲板的角质组织中，引起浅部真菌病，简称癣病。
临床最多见的浅部真菌病有：体癣、股癣、手癣和足癣。
深部真菌：指侵犯表皮以外组织和器官的病原菌和条件致病真菌.；按生物学性状的不同又分为：酵母型、酵母样型、丝状菌型、双相型。
深部真菌常见的有：念珠菌，隐球菌，组织胞浆菌,马尔尼菲青霉菌，曲霉，毛霉菌,孢子菌丝等。
二、常见真菌的形态特征真菌的大小差异悬殊，大者如碗口，不属微生物范畴，例如灵芝；小者肉眼看不到，只能用显微镜观察。
真菌的形态分单细胞和多细胞两种类型，单细胞真菌呈圆形或卵圆性，常见于酵母菌和酵母样菌；多细胞真菌多呈丝状，分枝交织成团，也称为丝状菌，即一般通称为霉菌。
三、真菌的基本结构真菌由菌丝和孢子构成。
孢子是真菌的生殖结构，分为有性孢子和无性孢子。
在适宜条件下，菌丝是由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状，生物学上把真菌的每一根细丝叫做菌丝。
四.真菌的染色方法真菌用H-E染色一般着色不良，因此需用特殊的染色方法来显色，六胺银法（GMS）用铬酸氧化真菌壁的多糖而暴露出醛基，醛基还原六胺银内的银离子为黑色的金属银而显色。
PAS法用高碘酸氧化真菌菌壁的多糖游离出醛基，后者与无色品红结合生成新的品红色复合物而被显色。
几种常用特殊染色操作过程中的要点
一、网状纤维染色 ——氢氧化银氨法（Gomori法）
5
（一）网状纤维的形态结构
较细的纤维组织、短、分支多，交织成网状
（与胶原纤维共同为细胞丰富的器官起到支撑作用）
HE呈淡红色，银氨液浸染、甲醛还原后呈黑色
（嗜银性/嗜银纤维：黑色）
主要由Ⅲ型胶原蛋白构成，表面被覆糖蛋白
（PAS染色：淡紫红色）
6
＋蒸馏水，洗涤沉淀（50-100ml蒸馏水） <反复/3次，沉淀不浑浊>
留下沉淀及少许上清液（4ml）
<保留沉淀物质>
逐滴＋氢氧化铵（一次1-2滴加入）
<边加摇晃>
至沉淀逐渐完全溶解
<无色溶液>
逐滴＋10%硝酸银，至刚出现浑浊 加氢氧化铵一至数滴，使沉淀消失
＋蒸馏水至40ml，2-8°C冰箱
<浑浊状态>
2
四、淀粉样物 刚果红法（甲醇刚果红、碱性刚果红）、甲基紫法 五、色素 含铁血黄素（Perls）、黑色素（Masson-Fontana）铜（罗 丹明、红氨酸） 六、糖类物质 糖原（PAS）、黏液物质（AB-PAS、AB） 七、脂内物质 中性脂肪（苏丹Ⅲ、Ⅳ、油红O）
3
八、神经组织 尼氏体（硫瑾、甲苯胺蓝）、神经髓鞘（变色酸2R、砂罗 铬花青） 九、肝脏穿刺 Masson、网状纤维、含铁血黄素、PAS、铜等。 十、肾脏穿刺组织 Masson、六胺银、PAS、刚果红等
1.氧化（KMnO4）：使网状纤维内羟基转变为醛基。<选择性> 2.漂白（H2C2O4）：棕色变为无色。 3.媒染（铁明矾）：增加网状纤维对银氨液的选择性。 4.浸银（氢氧化银氨）：银氨液中Ag（NH3）2+被组织吸附后与醛基结合。 5.还原（甲醛）：与网状纤维结合的银氨配位化合物还原成黑色的金属 银。
侵袭性真菌感染的常规微生物学检测
侵袭性真菌感染的常规微生物学检测邵海枫【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2010(028)002【总页数】4页(P90-93)【关键词】真菌;侵袭性感染;微生物学检查【作者】邵海枫【作者单位】南京军区南京总医院临床中心实验科微生物室,南京,210002【正文语种】中文【中图分类】R446.5真菌引起的侵袭性感染在临床呈上升趋势，对这类感染的实验室诊断技术也在不断地发展，并受到广泛的重视。
常规检测方法主要是通过直接染色镜检和培养，根据真菌的表型特征对真菌进行鉴定。
虽然存在不足，但仍是实验室最普遍使用的方法。
迄今多数微生物实验室的工作主要以细菌的分离培养、耐药性检测等为主；医学院校的微生物教学也以细菌检验的相关知识为主，以致微生物室的技术人员对真菌的鉴定技术知之甚少，甚至存在盲区和误区。
鉴于侵袭性真菌感染(invasive fungal infection, IFI)的发病率逐年升高，提高微生物实验室工作人员对可引起IFI的真菌的认知和检测能力是目前形势下的需要。
本文主要介绍IFI相关真菌的知识和常规检测要点[1-3]。
1.1 致病性酵母菌包括念珠菌属、隐球菌属、其他致病酵母菌和地霉属。
念珠菌属是引起人类IFI最主要的致病性真菌，主要包括白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌和葡萄牙念珠菌等。
隐球菌属大约有78个种，新生隐球菌是主要的致病菌，也有浅黄隐球菌、浅白隐球菌和罗伦隐球菌引起人类致病的报道，但很少。
其他致病酵母菌包括红酵母属和毛孢子菌属。
红酵母属中只有深红酵母被肯定能引起人类感染，黏红酵母引起的感染更加罕见；毛孢子菌属中可引起系统性毛孢子菌病的主要有阿萨希毛孢子菌。
地霉属虽然不是酵母，但其产生的关节孢子与毛孢子菌的关节孢子非常相似，所以一般归于酵母菌中讨论，致病的主要有白地霉和头状地霉。
1.2 丝状真菌一般将在培养基上生长丝状型菌落的真菌称为丝状真菌，在光学显微镜(光镜)下可见各种类型的菌丝。
隐球菌性脑膜炎诊治专家共识
隐球菌性脑膜炎诊治专家共识隐球菌性脑膜炎是由隐球菌属真菌引起的一种严重的感染性疾病。
该疾病在全球范围内发病率不断上升，特别是在免疫功能低下人群中更为常见。
随着HIV感染的增加，隐球菌病的发病率也在不断增加。
在美国，隐球菌病的发病率约为5/100 000，其中1/5出现中枢神经系统（CNS）受累。
在我国，隐球菌性脑膜炎患者有其一定特殊性，高达50%～77%的患者为免疫功能正常者。
因此，对于隐球菌性脑膜炎的病原学和实验室检查的认识十分重要。
第二部分诊断标准隐球菌性脑膜炎的诊断主要依靠临床表现、实验室检查和影像学检查。
对于临床表现，隐球菌性脑膜炎患者常表现为头痛、发热、恶心、呕吐等症状，同时还可能出现意识障碍、癫痫等中枢神经系统症状。
实验室检查方面，隐球菌菌抗原检测、真菌培养和PCR检测等方法可以用于诊断。
影像学检查方面，脑脊液检查、头颅CT和MRI检查可以帮助确定诊断。
在诊断隐球菌性脑膜炎时，需要综合考虑临床表现、实验室检查和影像学检查等方面的信息。
第三部分治疗原则隐球菌性脑膜炎的治疗主要包括抗真菌治疗和对基础疾病的治疗。
对于抗真菌治疗，目前推荐使用两种药物联合治疗，包括氟康唑和阿莫西林/克拉维酸钾。
在治疗过程中，需要注意药物的剂量和疗程，以及可能出现的不良反应。
对于基础疾病的治疗，需要根据患者的具体情况进行综合治疗，包括免疫调节治疗、抗病毒治疗等。
在治疗期间，需要密切观察患者的临床症状和实验室检查结果，及时调整治疗方案。
结论隐球菌性脑膜炎是一种严重的感染性疾病，对于其诊断和治疗需要进行规范和科学的管理。
本文介绍了隐球菌性脑膜炎的病原学、诊断标准和治疗原则，希望对临床医生在诊治该疾病时有所帮助。
同时，需要注意的是，针对我国隐球菌性脑膜炎患者的特殊性，我们需要进一步加强对该疾病的研究和管理。
隐球菌性脑膜炎是由隐球菌引起的疾病，隐球菌属包括至少30多个种类，其中大多数有致病性，如新型隐球菌和格特隐球菌（过去分别称之为新型隐球菌新生变种和新型隐球菌格特变种），其他种类如罗伦隐球菌、浅白隐球菌等则很少引起人类感染。
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G M S-六胺银-真菌GMS –六胺银- GROCOTT'S改良法目的：鉴别真菌。
原理：真菌细胞壁的粘多糖成分被氧化形成醛基。
醛基与硝酸银反应，再将银还原成可见的金属形式。
对照：含有真菌的组织。
由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。
固定：10%甲醛技术：4-5m石蜡切片。
设备：酸清洗玻璃器皿，染色缸，微波炉。
试剂：2% 铬酸：三氧化铬Chromium trioxide 10.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。
1% 偏重亚硫酸钠Sodium Metabisulfite:偏重亚硫酸钠Sodium metabisulfite 5.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
5% 硼砂：四硼酸钠Sodium borate 5.0 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
六胺银备用液：3% 六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0 ml5% 硝酸银Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。
警告：腐蚀性，可能致癌。
工作液：六胺银备用液Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸馏水Distilled water 25.0 ml5% 硼砂Borax 2.5 ml使用前新鲜配制，用后丢弃。
0.5%氯化金：氯化金Gold chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
0.2%亮绿：亮绿Light green SF yellow. 0.2 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml冰醋酸Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
安全：穿戴手套、护目镜和白大衣。
保持所有打开盖的热溶液于通风橱中。
避免接触和吸入染料和化学品。
铬酸：对皮肤和粘膜有腐蚀性，高度毒性，影响靶器官为肾。
致癌物质。
偏重亚硫酸钠：侵入途径为摄入，能引起胃肠道不适，对皮肤、眼睛和粘膜有刺激性。
硝酸银：剧烈的皮肤和眼睛刺激，氧化剂。
摄入将导致严重的胃肠道不适。
可能致癌：可疑的肿瘤发生因素。
硫代硫酸钠：摄入毒性。
能引起胃刺激，接触对皮肤、眼睛和呼吸系统有刺激性。
亮绿SF Yellowish：可能致癌。
程序：1. 脱蜡至无水酒精。
2. *2% 铬酸微波高火 45 seconds，放置 5 minutes。
3. 流水冲洗蒸馏水稍洗。
4. 1% 偏重亚硫酸钠温室1 minute。
5. 流水冲洗，蒸馏水稍洗3 changes。
6. *六胺银工作液微波高火70seconds，在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸袋色。
7. 蒸馏水稍洗 2 changes。
8. 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。
9. 蒸馏水稍洗。
10. 5% Hypo, 3 minutes.11. 流水冲洗，蒸馏水稍洗。
12. 亮绿液1 minute.13. 蒸馏水稍洗。
14. 脱水、透明和封固。
*传统方法：5% 铬酸 60°C 水浴 1 hour。
银液： 60°C 水浴 1 hour 或直至棕色。
结果：真菌：黑色背景：绿色注意：1.如果铬酸变褐色是需要更换，传统方法5%铬酸胜于2%，高浓度的铬酸容易在微波处理时引起组织掉片。
2. 如果微生物不变黑色，检查：a. 铬酸是否新鲜。
b. 偏重亚硫酸钠是否新鲜。
c. 硼砂是否新鲜f。
3. 如果银液出现混蚀或在染色缸上出现银镜时，重新配制溶液。
参考文献：Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp243-246, Battelle Press, OhioLuna L, Manual of Histologic Staining Methods of the AFIP, 3rd Ed,1968, pp 230-231, McGraw-Hill,NYCrookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech程序卡GMS - METHENAMINE SILVER, GROCOTT'S, MODIFIED对照：含有真菌的组织。
由曲霉病和肺结核病的组织块是首选的。
技术：4-5m石蜡切片。
程序：1. 脱蜡至无水酒精。
2. *2% 铬酸微波高火 45 seconds，放置 5 minutes。
3. 流水冲洗蒸馏水稍洗。
4. 1% 偏重亚硫酸钠温室1 minute。
5. 流水冲洗，蒸馏水稍洗3 changes。
6. *六胺银工作液微波高火70seconds，在热溶液中摇动玻片，直至组织应呈褐纸袋色。
7. 蒸馏水稍洗 2 changes。
8. 0.5% 氯化金1 minute 或直至灰色。
9. 蒸馏水稍洗。
10. 5% Hypo, 3 minutes.11. 流水冲洗，蒸馏水稍洗。
12. 亮绿液1 minute.13. 蒸馏水稍洗。
14. 脱水、透明和封固。
*传统方法：5% 铬酸 60°C 水浴 1 hour。
银液： 60°C 水浴 1 hour 或直至棕色。
结果：真菌：黑色背景：绿色安全：所有打开盖的热溶液于通风橱中。
避免接触和吸入染料和化学品。
2% 铬酸：三氧化铬Chromium trioxide 10.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。
1% 偏重亚硫酸钠:偏重亚硫酸钠Sodium metabisulfite 5.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
5% 硼砂：四硼酸钠Sodium borate 5.0 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
六胺银备用液：3% 六亚甲基四胺Methenamine(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0 ml5% 硝酸银Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。
警告：腐蚀性，可能致癌。
工作液：六胺银备用液Stock Silver Methen. 25.0 ml蒸馏水Distilled water 25.0 ml5% 硼砂Borax 2.5 ml使用前新鲜配制，用后丢弃。
0.5%氯化金：氯化金Gold chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
0.2%亮绿：亮绿Light green SF yellow. 0.2 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml冰醋酸Glacial acetic acid 0.2 ml混合溶解。
保存期6个月。
5%硝酸银备用液：硝酸银Silver nitrate 25.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml用酸清洗过的瓶。
冷藏，保存期6个月。
警告：腐蚀性，可能致癌。
日期：技师：使用限期：3% 六亚甲基四胺六亚甲基四胺Methenamine 30.0 gm蒸馏水Distilled water 1000.0 ml用酸清洗过的瓶。
冷藏，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
日期：技师：使用限期：1% 偏重亚硫酸钠：偏重亚硫酸钠Sodium metabisulfite 5.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
日期：技师：使用限期：1% 偏重亚硫酸钠日期：技师：六胺银备用液：3% 六亚甲基四胺(四氮六甲圜hexamethylenetetramine)100.0 ml5% 硝酸银Silver nitrate 5.0 ml混合，盛于酸清洗过的棕色瓶中，冷藏，保存期3个月。
警告：腐蚀性，可能致癌。
日期：技师：使用限期：5% 硼砂：四硼酸钠Sodium borate 5.0 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，保存期6个月。
日期：技师：使用限期：2% 铬酸：三氧化铬Chromium trioxide 10.0 gm蒸馏水Distilled water 500.0 ml混合溶解，保存期6个月。
警告：腐蚀性酸，可能致癌，避免接触和吸入。
日期：技师：使用限期：2% 铬酸日期：技师：0.5%氯化金：氯化金Gold chloride 0.5 gm蒸馏水Distilled water 100.0 ml混合溶解，盛于酸清洗过的瓶中，冷藏，保存期1年。
警告：避免接触和吸入。
日期：技师：使用限期：0.5%氯化金日期：技师：0.2%亮绿：亮绿Light green SF yellow. 0.2 gm 蒸馏水Distilled water 100.0 ml冰醋酸Glacial acetic acid 0.2 ml 混合溶解。
保存期6个月。
警告：避免接触和吸入。
日期：技师：使用限期：0.2%亮绿：日期：技师：。