血清白蛋白测定标准操作规程
血清总蛋白测定标准操作规程
血清总蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清总蛋白测定(缩写TP)；组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结合而成的，肽键在碱性溶液中，能与铜离子作用产生紫红色络合物，在540nm有吸收峰，并与蛋白含量成正比。
通过与同样处理的标准蛋白比较可求出血清总蛋白含量。
碱性蛋白质 + 铜离子 ------------ 紫红色络合物4 试剂及其他用品4.1试剂：总蛋白试剂盒（货号TP6020，80ｍl*5），由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。
血清前白蛋白测定标准规程
血清前白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清前白蛋白（缩写PAB)测定，组合项目申请：血生化中肝功能项目测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定24h。
-20℃保存稳定30天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。
3 方法原理人血清PA与其相应抗体在液相中相遇，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度。
该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
通过与同样处理的校准比较，计算未知样品的PA含量4 试剂及其他用品4.1试剂：前白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存：未开瓶的试剂储存在2～8℃可稳定至有效期。
白蛋白的测定
生理盐水(ml) 生理盐水(ml) 0.20 —— 上述1~4管标 上述1~4管标 —— 0.20 准稀释液（ml) 准稀释液（ml) BCG应用液 BCG应用液 （ml) 5.0 5.0
实验试剂
1.溴甲酚绿（BCG）贮存液 1.溴甲酚绿（BCG）贮存液 取BCG 419mg，用10ml 419mg，用10ml 0.1mol/L NaOH溶解，加NaN3 100mg ，定容至1000mL。 NaOH溶解，加NaN3 ，定容至1000mL。 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 贮于棕色瓶备用。如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水 溶解。 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH 4.2）分别配制0.1mol/L柠 2.0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH 4.2）分别配制0.1mol/L柠 檬酸和柠檬酸钠溶液，然后按12.3：7.7的体积比例混合。 檬酸和柠檬酸钠溶液，然后按12.3：7.7的体积比例混合。 每1000ml混合液加入NaN3 100mg。 1000ml混合液加入NaN3 100mg。 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 3.30%聚氧化乙烯月桂醚(Brij-35)溶液 取Brij-35 30g,加 Brij- 30g,加 少量水，60℃水浴溶解，加水至100ml（此可用Tween少量水，60℃水浴溶解，加水至100ml（此可用Tween-20 或Tween-80代替)。 Tween-80代替) 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml，0.1mol/L柠檬酸缓冲液 4.BCG应用液 BCG贮存液250ml，0.1mol/L柠檬酸缓冲液 （pH4.2)750ml,30%Brij-35 8ml(也可以用Tween-20 8ml pH4.2)750ml,30%Brij- 8ml(也可以用Tween或Tween-80 10ml代替）混合而成。 Tween- 10ml代替）混合而成。 5.标准蛋白溶液（10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g，用生 5.标准蛋白溶液（10mg/ml) 称取人白蛋白1.00g，用生 理盐水
血清白蛋白测定标准操作规程
血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清白蛋白测定(缩写ALB)；组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH=4.2白蛋白 + 溴甲酚绿 --------------- 绿色复合物4 试剂及其他用品4.1试剂：溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术XXX出品。
4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。
血清前白蛋白测定标准规程(知识资料)
血清前白蛋白测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清前白蛋白（缩写PAB)测定，组合项目申请：血生化中肝功能项目测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定24h。
-20℃保存稳定30天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。
3 方法原理人血清PA与其相应抗体在液相中相遇，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度。
该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。
通过与同样处理的校准比较，计算未知样品的PA含量4 试剂及其他用品4.1试剂：前白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。
4.2试剂盒保存：未开瓶的试剂储存在2～8℃可稳定至有效期。
白蛋白检测操作程序
白蛋白检测操作程序白蛋白（albumin ，ALB ）是一种仅含有氨基酸的单纯蛋白质,在血浆中发挥多种生理功能。
溶于水和中性盐，易与阴离子染料结合，故本试验采用溴甲酚绿（阴离子染料）法测定,在反应中加入丁二酸缓冲液能够避免溶液混浊，降低空白吸光度。
主要用于肝、肾等疾病的诊断。
实验原理在pH4.2条件下，白蛋白与溴甲酚绿结合形成蓝绿色结合物,蓝绿色结合物与样本中白蛋白浓度成正比,在630nm 处测定吸光度值，即可求得样本中白蛋白的浓度。
试剂与仪器1. 试剂1.1. 白蛋白试剂盒（由上海复兴长征医学科学有限公司提供）化学组成：溴甲酚绿0.35mmol/L 丁二酸缓冲液50mmol/L工作参数：在开展项目之前或更换试剂品牌时，将以上工作参数输入到仪器内，并按要求进行调整后，方可进行实验。
技术性能指标:试剂空白起始吸光度（630nm37℃）≤0.20A 。
线性范围：50g/L ±10%。
准确度：相对偏差(RE%)≤±10%。
精密度：批内精密度变异系数(CV%)≤5%；批间精密度相对极差(%)≤5%。
储存条件、有效期：储存于2～25℃，避光可稳定18个月。
以蒸馏水为空白在630nm 处光吸收值高于0.3A时，则不能使用。
计算公式： 白蛋白深度(g/L )= ×校准液浓度(g/L )样品管吸光度校准管吸光度以上是依据化学实验计算测试结果的公式，全自动分析时将校准液浓度值（Conc值）输入仪器即可。
1.2. 英国郎道（RANDOX）质控品，每次采用正常和异常两个水平，并参照质控品测试要求进行。
1.3. 校准液2. 仪器采用日立（HITACHI）7060型全自动生化分析仪。
选择波长340-800nm之间，能对终点、速率、两点、免疫比浊等方法的实验进行测定。
标本测定程序1. 开机：开机前要加清洗液、上打印纸、接蒸馏水等。
然后打开电源及中文计算机信息管理系统。
2. 试剂准备：开机后将所需试剂置于试剂盘相应位置。
血清(浆)总蛋白含量测定操作规程
1.目的和适用范围：1.1.为保证血液检测的结果正确性，规范实验操作，特制定本操作规程。
1.2.适用于本实验室，全体工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
2.术语：无3.职责：3.1.实验室工作人员都必须严格按照本操作规程进行操作。
4.工作程序4.1.操作说明4.1.1.实验原理：不同物质的折射系数是不同的。
折射率随物质浓度的变化而变化。
使用蛋白折射仪，根据光线通过血清中的折射率可以测得一定的值（即血清总蛋白含量）。
4.1.2.实验所需设备和材料：蛋白折射仪、100ul加样器、吸头、柔软一次性纸。
4.1.3.折射仪的零点调节4.1.3.1.使用高质量的放在密封玻璃管中的蒸馏水（如注射用水）。
把折射仪及蒸馏水置于22℃－25℃的室温中。
然后在折射仪上放上蒸馏水。
4.1.3.2.观察结果：准线应在 1.000处（Urine Specific Gravity Scale）或 1.333处（Refractive Index Scale）如误差达1/2格，则应调准零点。
用小螺丝刀调节零点。
顺时针方向增加读数，逆时针方向减少读数（即降低分界面的位置）。
最后的调节方向应是顺时针方向的。
4.2.实验操作步骤：4.2.1.从标本中（避开红细胞）吸取血清或血浆50ul。
4.2.2.打开覆盖棱镜的盖板。
4.2.3.将血清滴到棱镜于盖板之间的棱镜表面（靠近后部的地方），切勿使吸管接触到棱镜表面。
4.2.4.盖上盖板。
4.2.5.棱镜对准一光亮的窗口或一光源，使观察镜中亮的和暗的有一明显的对比和一清晰的分界面。
4.2.6.旋转目镜，调节并对准焦距，使分界面清晰。
通过亮暗交界线，直接读出总蛋白数值。
4.2.7.记下供血浆者总蛋白值。
4.2.8.翻起盖在棱镜上的盖板，先用软纸或专用纸吸干血清，然后用蒸馏水及软纸或专用纸洗擦盖板与棱镜的表面，如果棱镜表面潮湿会使下一标本检测时不准确。
不要用硬的东西洗擦棱镜表面及盖板，也不要用酒精洗擦。
白蛋白检测作业指导书
白蛋白检测作业指导书
1 检验目的
规范白蛋白（ALB）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法
溴甲酚绿法。
3 检测原理
白蛋白在PH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴甲酚绿（BCG）结合形成蓝绿色复合物，在波长630nm处有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比例。
4 样本
血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。
稳定性：2～8℃稳定6天
5 仪器和试剂
5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。
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血清白蛋白测定标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：血清白蛋白测定（缩写ALB）;组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2。
1标本采集
2。
1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2。
1。
2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2。
1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2。
1。
5下列标本为不合格标本
2。
1。
5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本,或少于0。
1ml的血清或血浆。
2。
1。
5。
2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2。
1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的.
2。
1。
5。
4其他如标识涂改、标本试管破裂等.
2。
2标本保存
2.2。
1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清.
2.2.2标本保存时间：室温(15～25℃)下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.3标本采集的注意事项
2.3。
1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2。
3.2不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3 方法原理
血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。
PH=4.2
白蛋白 + 溴甲酚绿—-—-—-------———绿色复合物
4 试剂及其他用品
4.1试剂:溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品.
4。
2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。
开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天.开盖后避免污染。
变质指示：当试剂有浊度时,表明有细菌污染，不能继续使用.
4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备
4.4试剂盒主要成分:缓冲液（pH 4.2）50 mmol/L，溴甲酚绿0.25 mmol/L,其中含有稳定剂与保护剂＜0.1%。
5 校准品与校准模式
5.1校准品： Beckman-Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液（P/N 442600),其白蛋白浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所(NIST)标准参考材料。
5。
2校准类型和校准点数目:线性模式，1个校准点.
5。
3校准周期：校准间隔时间不限。
但在:①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器
进行全面保养后;③仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准.
5.4 校准液重建方法：Beckman —Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液即开即用,无需特殊准备。
6 质控品与室内质控规则
6。
1 质控品采用由Beckman-Coulter 公司提供的两个不同水平未定值质控血清。
6。
2 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。
6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。
6.4 质控规则：采用Westgard 多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。
7 适用仪器
适用AEROSET 和C16000全自动生化分析仪器。
8 标本检测步骤:装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 → 标本测定 → 结果复核 → 报告。
9 主要分析参数
参见说明书. 10 结果计算
计算公式：白蛋白浓度(g/L ）＝
g/L)A nm
800600nm
800600校准液白蛋白浓度（校准液标本）（）（⨯--A
仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。
11 检验结果的报告及范围 11。
1 结果的报告
11。
1。
1 结果经审核确认准确无误后发出报告.
11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签
名,并有与申请单相同的医学信息。
11。
1。
3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
11。
2报告范围：10~60g/L,超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。
12 操作性能
12。
1精密度：批内CV为〈3。
0％，总CV <3.0％。
12.2线性范围：10～60g/L。
12。
3方法的有限性及干扰因素:甘油三酯达11。
3mmol/L时影响小于10％，血红蛋白达4.5g/L时影响小于10％，胆红素达684umol/L时影响小于2%.
13 参考范围及医学决定水平
参考范围:40～55 g/L。
医学决定水平：
20 g/L:低于此值,肝病患者提示严重预后不良.还应测定尿蛋白,以查明有无过多的蛋
白丢失。
35g/L:此亦为参考值下限，凡低于此值时，各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范围，如肾病、肝功不全、严重的营养不良、急、慢性炎症、恶性肿瘤等。
55g/L:在此值以上的，应考虑脱水的可能性，并进行红细胞比积测定，以检查其是否增高。
14 临床意义
14.1血浆白蛋白的生理功能很多,包括营养、维持渗透压、是血管内多种物质的运输载体等。
白蛋白在肝脏中合成，是监测肝脏疾病的一个重要指标。
14。
2肝脏疾病使白蛋白的合成减少表现为血清白蛋白降低浓度，并与肝脏病变的严重
程度成比例，白蛋白是对肝功能作分级的评价指标之一。
14。
3血清白蛋白降低还见于严重的吸收不良、肠梗阻、风湿热、恶病质、以及多种全身性疾病。
14。
4当有蛋白质丢失过多的情况，如大面积烧伤、肾病综合征、慢性肾炎、糖尿病、慢性肠炎、肿瘤、充血性心力衰竭等,血清白蛋白也常降低。
14。
5血清白蛋白增高的情况较少见，高白蛋白血症偶见于脱水所致的血液浓缩。
15 结果审核以及分析与相关项目的联系
15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。
15。
2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名.
15.3相关项目：审核与总蛋白、血清蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等的关系,如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。
.
16威胁生命的“紧急值”及报告规定
(本项不作规定)
17 有关引用程序与文件
17.1 Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。
17.2生化检验室内质控标准操作程序。
17.3检验结果审核程序。
17.4标本送检和接收程序。
18 参考文献
18。
1陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程。
杭州:浙江大学出版社， 2004. 18。
2北京利德曼生化技术有限公司白蛋白测定试剂盒说明书。
行业标准WS/T404.2—
2012。