无精症少弱精症与生精障碍的研究进展

柏２００ｇ，山栀子２００ｇ，大黄３００ｇ，红花１００ｇ，冰片３０ｇ，地榆２００ｇ等组成治疗急性软组织损伤１２０例，治疗组治愈率、显效率和总有效率均优于对照组（Ｐ＜０畅０１），总有效率１００％。

４　热熨药熨剂的应用富胜利［１６］等用甘草２０ｇ，乳香、没药、当归、木瓜、五加皮、续断、红花、姜黄、大黄、赤芍、元胡各３０ｇ，蒲公英、双花各５０ｇ，透骨草１００ｇ等煎液中药湿敷热熨，治疗骨伤科各种病症２３０例，总有效率９９％。

５　讨论活血化瘀中药外用在软组织损伤治疗中发挥不可忽视的作用，药物直接作用受损部位，发挥作用充分，局部疗效优于内治。

在上述剂型中，各种剂型特点不同，临床的应用部位和应用形式不同，配伍用药有所不同，但都以活血化瘀药为主（其中红花、大黄、乳香、没药应用频率最高），配伍清热药（黄柏、赤芍、生山枝、侧柏叶较多用）及祛风湿药（威灵仙、伸筋草、海桐皮、五加皮较常用）均符合急性软组织损伤的中医病机，对“证”下药，故都取得了满意的治疗效果。

有实验表明［１７］中药熏洗法及中药贴敷法对急性软组织损伤都有较好的治疗作用，但中药熏洗法的疗效明显优于中药贴敷法。

中药治疗急性软组织损伤报道多以传统外用剂型为主，临床疗效确切，但由于存在着剂型落后，使用不便，躯干等部位不易包扎稳固等不足，影响着现代生活快节奏人们的选用，随着中药透皮吸收研究的深入，新剂型喷雾剂、涂膜剂、巴布剂及传统中药散剂与现代自热技术结合的氧化热透皮敷贴等的出现，治疗急性软组织损伤的验方、秘方通过运用现代制剂技术制备成新制剂，将会为临床提供更好的服务。

参　考　文　献［１］　吴惠明，张帆，王家员．速效消肿止痛膏治疗急性闭合性软组织损伤．现代中西医结合杂志，２００４，１３（１３）：１７１３－１７１４．［２］　齐尚锋．栀子跌打膏治疗急性踝关节扭伤临床观察．中医正骨，２００９，（２１）７：４４－４５．［３］　曾昭洋，张乾军，宋贵杰．敦煌消肿镇痛膏治疗急性软组织损伤临床观察．中医正骨，２００６，１８（２）：２６－２７．［４］　李杰，唐鹏飞．伤科黑膏药的制备及治疗软组织损伤的临床疗效观察．中医药导报，２００８，８（１４）：１２１－１２２．［５］　胡安静．双柏散治疗急性软组织挫伤４８例．中国中医急症，２００６，（１５）７：７９１．［６］　龙炳新，林关聪，陈少莲．双柏蜜外敷治疗急性软组织损伤８３例．中医外治杂志，２００４，１３（６）：３．［７］　时淑华，陈晓生．六消散外敷治疗急性软组织损伤３００例．中医外治杂志，２００６，１５（５）：２４－２５．［８］　赵修准．伤痛灵搽剂治疗软组织损伤３６０例疗效观察．中医外治杂志，２００３，１２（５）：１２－２３．［９］　丁贤章．活血止痛酊治疗软组织损伤２８６例．中华医学研究和实践，２００５，３（１）：５１－５２．［１０］　李楚云，陈美玲，李文斌．复方仙断跌打搽剂的制备及临床应用．中药材，２００８，１０（３１）：１５９９－１６０１．［１１］　李胜利，李同生，汤耿民，等．复方藏红花油治疗跌打损伤（急性软组织损伤）Ⅲ期临床试验总结．中国中医骨伤科杂志，２００５，１３（２）：２８－３２．［１２］　许艳花．中药熏洗治疗急性软组织损伤５０例．中医外治杂志，２００６，５（１５）：２８－２９．［１３］　陈迎春，高绍方．舒筋方熏洗治疗急性软组织损伤６０例．河北中医药学报，２００９，２４（１）：２３－２４．［１４］　李新华．中药熏洗治疗踝关节软组织损伤的疗效观察．医药月刊，２００６，３（１０）：２３－２４．［１５］　卢华琳，蒋顺琬，苗峻，等．中药浸渍治疗踝关节急性软组织损伤的疗效观察与护理．甘肃中医，２００９，８（２２）：３４－３５．［１６］　富胜利，张丽霞，冯连川．中药湿敷热熨在骨伤科中的应用．中医药学报，１９９８，３：３１．［１７］　程春生，张耘，李春游，等．中药熏洗法治疗急性软组织损伤的实验研究．中医正骨，２００５，１１（１７）：２１－２２．无精症少弱精症与生精障碍的研究进展黄建喜　彭陈岑　阿周存【摘要】　无精少弱精子症是引起男性不育的主要原因，其主要的病因是生精障碍，对生精障碍的病因学研究、从基因水平了解和治疗是目前研究的主要问题，现就这几方面的研究进展情况作一综述。

【关键词】　无精症；少弱精症；生精障碍；基因；不孕不育 作者单位：６７１０００云南省大理学院 目前全世界不育夫妇约占已婚夫妇的１５％，其中由男方原因引起的不育占５０％［１］，男性不育的精液检查主要表现为无精子症及少弱精子症。

少精子症是指禁欲２～７ｄ一份精液电脑分析中精子密度＜２０×１０９／Ｌ。

轻度少精子症：精子密度＜２０×１０９／Ｌ，但＞１０×１０９／Ｌ；中度少精子症：精子密度＜１０×１０９／Ｌ，但＞５×１０９／Ｌ；重度少精子症：精子密度＜５×１０９／Ｌ。

弱精子症是指禁欲２～７ｄ一份精液电脑分析中具有快速向前运动的精子Ａ级和慢速向前运动的精子Ｂ级（Ａ级＋Ｂ级）＜５０％或Ａ级精子＜２５％。

轻度弱精子症：Ａ级＋Ｂ级精子＜５０％，但＞３０％或Ａ级＜２５％，但＞１０％；中度弱精子症：Ａ级＋Ｂ级精子＜５０％，但＞３０％，其中Ａ级精子＜１０％；重度弱精子症：Ｂ级＋Ｃ级精子＜３０％，其中Ａ级精子为零。

无精子症则是男性不育中最严重的一种，发病率为７％～１０％，必须是育龄期男性，３次精液检查（并经射精管后尿液检查排除逆向射精）都显示无精子才能诊断为无精子症。

生精障碍引起的少弱精或无精症是男性不育的常见原因。

对生精障碍的病因分析能够进一步明确病因，指导临床治疗，现就目前生精障碍的病因研究进展作一综述。

１　无精及少弱精子症与生精障碍的遗传病因学研究１畅１　遗传因素　男性不育的影响因素较多，由遗传缺陷包括基因突变和染色体异常所引起的精子发生障碍估计占男性不育因素的３０％［２］。

遗传因素正越来越得到重视，是目前的研究重点。

１畅１畅１　ＡＺＦ基因　１９７６年，Ｔｉｅｐｏｌｏ等［３］首先提出Ｙ染色体上有多个基因参与生精过程，其后２０多年的研究表明，与生精有关的基因主要位于Ｙ染色体的ｑ１１上，称为ＡＺＦ，ＡＺＦ由４个相互不重叠的区域组成，分别为ＡＺＦａ、ＡＺＦｂ、ＡＺＦｃ、ＡＺＦｄ。

１畅１畅２　ＡＺＦａ及其候选基因　ＡＺＦａ位于Ｙｑ１１，大小为１０８４ｋｂ，其候选基困主要有ＵＳＰ９Ｙ、ＤＢＹ和ＵＴＹ。

ＵＳＰ９Ｙ大小为１５９ｋｂ，含４６个外显子；ＤＢＹ位于ＵＳＰ９Ｙ下游约４５ｋｂ处，大小约１５１５ｋｂ，含１７个外显子；ＵＴＹ位于ＤＢＹ下游３３０ｋｂ处，含２０个外显子。

现已证实ＵＳＰ９Ｙ和ＤＢＹ的缺失与生精过程相关，而ＵＴＹ与精子生成的关系尚不确定。

且有研究显示ＵＳＰ９Ｙ基因的点突变与无精子症也有关［４］。

Ｆｏｒｅｓ－ｔａ［５］等对１７３例原发不育男性患者进行ＡＺＦａ微缺失检测，发现９人存在ＡＺＦａ微缺失，其中６例有ＤＢＹ缺失，患者表现为ＳＣＯＳ或严重少精子症，１例有ＵＳＰ９Ｙ缺失，１例为ＵＳＰ９Ｙ－ＤＢＹ缺失，１例为ＤＢＹ－ＵＴＹ缺失，未发现患者存在ＵＴＹ基因的单独缺失。

经过对ＡＺＦａ基因表达分析发现，ＤＹＢ仅在睾丸组织中表达，ＤＢＹ的缺失可导致严重的生精障碍，甚至无精子，说明ＤＢＹ在精子生成过程中起到关键作用，其转录体可作为ＴＥＳＥ标记物。

但Ｐａｏ－Ｌｉｎ［６］等对３８例无精子症患者睾丸组织中ＵＳＰ９Ｙ和ＤＢＹ转录的ｍＲＮＡ水平进行检测，并比较了ＴＥＳＥ后所获得的精子数，认为ＵＳＰ９Ｙ和ＤＢＹ的转录体水平与ＴＥＳＥ后所获得的精子数无相关性。

１畅１畅３　ＡＺＦｂ及其候选基因　ＡＺＦｂ定位于Ｙｑ１１，２３，大小为４１３Ｍｂ，其主要候选基因是ＲＢＭ（ＲＮＡ－ＢｉｎｄｉｎｇＭｏｔｉｆ）。

ＲＢＭ包括３０个基因，散在分布于Ｙ染色体的长臂和短臂，应用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆ＲＢＭ基因显示ＲＢＭ基因至少存在６个亚家族，其中确定的基因主要有ＲＢＭ１和ＲＢＭ２。

ＲＢＭ基因均编码ＲＮＡ识别位点蛋白，其基因结构由１２个外显子和１１个内含子构成，其中部分基因有功能，部分基因则存在多态性（ＲＢＭ２）［７］。

Ｙ染色体ＡＺＦｂ区的缺失至少包括ＲＢＭ１功能拷贝区，包括５个单拷贝基因和２个复合拷贝基因。

ｃＤＮＡ克隆显示ＲＢＭ１基因具有转录活性，编码功能蛋白，所编码的蛋白存在于所有类型生精细胞的核中，基因的缺失可导致男性不育，但其机制尚不明确。

ＲＢＭ基因转录的ｍＲＮＢ在精细胞中合成，因此其ｍＲＮＡ的数量直接反应精细胞的功能。

１畅１畅４　ＡＺＦｃ及其候选基因　ＡＺＦｃ区大小为３１５ＭＢ，包含７个基因的家族。

其候选基因有ＤＡＺ、ＢＰＹ２、ＣＤＹ１、ＣＳＧＰ４ＬＹ、ＧＯＬＧＡ２ＬＹ、ＴＴＴＹ３和ＴＴＴＹ４［８］。

在这些基因中ＤＡＺ为主要候选基因。

ＤＡＺ编码３６６个氨基酸，分子量为４１２５３，ＤＡＺ与ＲＢＭ有相似特征，也编码１个ＲＮＡ结合蛋白，有１０个外显子，含１６４１ｂｐ，为１个启动子ＡＵＧ开始的长的开放阅读框架。

Ｒｅｉｊｏ［９］通过对３５例少精子症患者及其父亲的研究发现，ＡＺＦｃ区的缺失与少精子症关系密切，并通过基因测序发现少精子症患者ＤＡＺ基因的缺失不是遗传而是自身基因变异的结果。

ＤＡＺ主要在精子生成过程中的精原细胞和精母细胞中表达，参与精子细胞分裂周期的调节［１０］，其转录子水平与精子生成有关，在无精子症患者中转录水平明显下降，因此通过监测转录水平可以预测患者经睾丸穿刺获得精子的可能性，从而预测是否可以进行ＩＣＳＩ［１１］。

ＡＺＦｃ区是无精子症少精子症患者Ｙ染色体微缺失的热区，在发生缺失的患者群体中，ＡＺＦｃ区缺失达６０％以上。

Ｓａｗａｉ［１２］等对１５７例原发不育男性应用１６个ＳＴＳ进行ＡＺＦ筛查，ＡＺＦｃ的缺失率是１０畅２％，明显较ＡＺＦａ、ＡＺＦｂ缺失率高。

１畅１畅５　ＡＺＦｄ区　１９９９年，Ｆｉｒｓｔ［１３］等选择Ｙ染色体上的４８个ＳＴＳ位点，筛选了２７８例精子发生阻滞的患者，结果显示，除已报道的３个区域外，在ＡＺＦｂ和ＡＺＦｃ之间，也有ＳＴＳ片段的缺失，缺失率达５％，占ＡＺＦ缺失总数的１９畅６％。

提示该区域内也存在与精子发生相关的基因，将这一区域命名为ＡＺＦｄ区。

有学者认为，ＡＺＦｄ区存在多态性，但至今尚未见关于正常男性存在该区缺失的报道。

也有学者认为ＡＺＦｄ区不存在，该区是ＡＺＦｃ区的一部分，该区缺失的患者睾丸表型从ＳＣＯＳ到轻度少精子甚至精子正常均有，但精子畸形率高。

目前关于该区争论较多，但由于该区也是缺失热区，所以许多学者将该区列为筛查区。

２　其他与精子生成相关的基因２畅１　ＤＡＺＬＡ基因　ＤＡＺＬＡ为单拷贝基因，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示所有ＤＡＺＬＡ均位于哺乳动物睾丸组织３号染色体上，与小鼠的Ｄａｚｌａ基因和果蝇的ｂｏｕｌｅ基因具有同源性，小鼠的Ｄａｚ－ｌａ基因定位于１７号染色体上。