AZF微缺失与生精障碍症
Y 染色体微缺失快速检测系统 说明书
Y染色体微缺失快速检测系统说明书 ２５人份／盒z概述本试剂盒用于快速检测人（男性）Y染色体AZF座位（Azoospermia Factor）的缺失。
多项研究发现，AZF基因家族共有AZFa、AZFb、AZFc三个座位（在AZFb与AZFc之间还存在AZFd座位，中等程度的少精和精子数目正常却形态异常多会与该区域的缺失有关），其中任何一个座位的微缺失都可导致生精障碍。
本试剂盒共设计15对引物和一对内控（内部质量控制）引物，利用PCR（Polymerase Chain Reaction）技术可从Y染色体上特异性扩增出15条非多态性短片段的序列标签位点（Sequence Tagged Sites，STS）和一条内控基因片段。
这些引物对分别组合成4套多重PCR系统，在相同条件下，进行4管PCR扩增反应，通过电泳结果判定15个序列标签位点（STS）的存在与否。
主要特点：1.可对15个STS序列标签位点进行检测，这15个位点覆盖了所有的AZF区域，其中AZFa有3个位点，AZFd有2个，AZFb有6个，AZFc 有4个位点；2.高特异引物确保结果的可靠性，并具有内控（内部质量控制）基因片断的检测；3.独特的防污染设计，有效避免假阳性的产生；4.符合并超过欧洲生殖学会推荐的检测标准。
应用：胞质内单精子注射（ICSI）技术辅助生育治疗前的检测、少精症与无精症男性患者遗传学检测、精子库的入库前筛查等。
z试剂盒组成组成成分数量保存条件PCR反应液Ⅰ（紫色） 25管(每管14μL ) -20℃PCR反应液Ⅱ（无色） 25管(每管14μL) -20℃PCR反应液Ⅲ（蓝色） 25管(每管14μL) -20℃PCR反应液Ⅳ（黄色） 25管(每管14μL) -20℃纯水z有效期六个月z需自备的仪器及试剂PCR仪（推荐使用PTC-100或PTC-200, M J Research Co.或其它国际知名品牌PCR仪）DNA电泳系统z操作步骤1.基因组DNA的获取使用本公司全血DNA快速提取试剂盒从抗凝全血中抽提人（男性）基因组DNA，按操作说明进行。
原发生精障碍者Y染色体AZF区域微缺失基因诊断
Ｙ ｕｌ ｎ ＷＥＪＸｉ ＤＩ ａ — ｉｇ，ｔ １ Ｐ ｏ ｌ ｓ ｉ ｌ ｆ Ｐ ｎ ｚ ｏ ， ｉ ｕ ｎ６ １ ３ ， ｈ ｎ ｏ —ｉ ｇ， ａ ａ， ＮＧ Ｘｉｎｐ ｎ ｅ ａ ． ｅ ｐ ｅ Ｈｏｐ ｔ ｅ ｇ ｈ ｕ Ｓ ｃ ａ １ ９ ０ Ｃ ｉａ ｓ ＇ ａ ｏ ｈ ［ ｂｔａ ｔ ０ ｊｃｉ Ｔ ｖ ｌａ ｅ ｔｅ ｒｌｔ ｎ ｈｐ ｂ ｔ ｅ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｍｉ ｏ ｅｅｉ ｎ Ａ ｓｒｃ ］ ｂｅ ｔ ｅ ｖ ｏ ｅ ａｕ ｔ ｈ ｅ ｉ ｓ ｉ ｅｗｅ ｎ Ｙ ｃ ｒｍｏ ｏ ｃ ｄ ｌｔ ｎ ａ ｄ ａｏ ｒ ｏ
ｍａ ｅ ａ ｏ ｓ ｅ ｍｉ． ｅｈ ｄ Ｍ ｕ ｔ ｌｘ Ｐ ｌ ｚ ｏ ｐ ｒ ａ Ｍ ｔ ｏ ｓ ｌｉ ｅ ＣＲ ｓ ｕ ｅ ｏ ｄ ｔ ｃ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｍｉｒ ｄ ｌｔ ｎ ｉ ｐ ｗａ ｓ ｄ ｔ ｅ ｅ ｔ Ｙ ｃ ｒ ｍｏ ｏ ｃ ｏ ｅ ｅ ｉ ｎ ５ ｏ １ ａ ｏ ｓ ｅ ｍｉ ｐ ｔ ｎ ｓ ａ ｄ ７ ｈ ａｔ ｙ ｃ ｎ ｒ ｌ．Ｒｅ ｕ ｔ ｚ ｏ ｐ ｒ ａ ａ ｉ ｔ ｎ ｅ ｌ ｏ ｔｏ ｓ ｅ ｈ ｓ ｌｓ Ｙ ｃ ｒ ｍｏ ｏ ｉｒ ｄ ｌ ｔ ｎ ｗａ ｏ ｎ ｎ １ ｈ ｏ ｓ ｍｅ ｍ ｃ ｏ ｅｅ ｉ ｓ ｆ ｕ ｄ ｉ ｏ １
男性不育患者Y染色体AZF基因微缺失检测和染色体核型分析
男性不育患者Y染色体AZF基因微缺失检测和染色体核型分析"张丽洁，赵园，赵乔佳杰，王九菊，李艳春，魏绪仓（陕西省人民医院血液遗传研究所，西安710068）摘要：目的探讨男性不育的遗传因素。
方法采用多重荧光定量PCR方法对60例严重少、弱精症和无精症的不育患者进行Y染色体AZF基因微缺失检测，同时用G显带方法分析染色体核型。
结果60例患者中有5例染色体核型异常，检出率为833%,且异常核型均为47,XXY，即克氏综合征。
Y染色体AZF基因微缺失检出2例患者，检出率为3.33%，缺失类型均为AZFc区缺失。
30例精液常规正常的健康志愿者未检出Y染色体AZF基因缺失。
结论染色体核型异常及Y染色体AZF基因微缺失与男性不育密切相关，且克氏综合征和AZFc区缺失为常见的异常类型。
关键词不育；遗传因素；染色体核型异常；Y染色体微缺失中图分类号：R69&2;R394-33文献标志码：A文章编号：16717414（019）0305903doi：10.3969/j.issn.1671-7414.2019.03.014Detection of Y Chromosome AZF Gene Microdeletionand Karyotype Analysis in Male Infertile Patients ZHANG Li-ie,ZHAO Yuan,ZHAO Qiao-jia-jie,WANG Jiu-u,LI Yan-chun,WEI Xucang(Institute of Hematoge/ietics,Shaanzi P厂ouincia/People's Hospital,Xi'a”710068,China) Abstract：Objective To explore the genetic factors of male infertility.Methods Multi-fluorescence quantitativePCR was used to detect AZF gene microdeletion of Y chromosome in60infertile patientswith severe oligozoospermia and azoospermia,andG-banding method was adopted to analyze the karyotype.Results Among the60infertile patients,patients bore the abnormal chromosome karyotype of47,XXY,and the detection rate was8.33%.Two patients with AZFc region deletion in Y chromosome were detected by AZF gene microdeletion assay,and the detection rate was3.33%.AZF gene deletion of Y chromosome was not detected in the30healthy volunteerswith normal sperm routine.Conclusion Abnormal chromosome karyotype andmicrodeletion onY chromosome were closely correlated withmale infertility,and the Klinefelter syndrome and AZFcmicrodeletion are common abnormal types.Keywords:infertility；genetic factors；abnormal chromosomal karyotype;Ychromosomemicrodeletion目前越来越多的育龄夫妇患有不孕不育症，其中男性方面因素约占30%〜50%，由遗传因素导致精子生成障碍约占男性不育症的30%「口。
Y染色体微缺失导致男性不育专家讲座
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来。如性反转综合症：46，XX 男性主要临床表现有睾丸发育不良，隐睾，有尿道下裂，精子少或无精子。三是精索静脉曲张患者无精子因子微缺失发生率与特发性严重睾丸病变发生率相近。对于这类病人进行 AZF 微缺失筛查，既能够帮助诊疗又能够防止试图提升静脉曲张患者精子数量无谓如外科手术等。
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些缺失又被称为无精子因子。
因为男方原因，夫妻间不能正常经过受孕，就只好借助“辅佐生育技术”来完成繁育下一代任务。倪斌博士介绍说，辅佐生育技术，确切名称为卵浆内单精子注射技术，这种技术应用确实给无精子症或少精子症患者带来生育希望，但使用时假如不进行相关基因检验，可能会把带有相关基因缺失精子注射到卵子
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育，不妨查查 Y 染色体。”湖南省当代优生技术重点试验室主任、研究员倪斌博士说。
Y 染色体到底是怎么一回事?它在夫妻生育中它饰演什么角色?5 月 28 日，记者和倪斌博士聊起了这个话题。倪斌博士说，Y 染色体向世人透露信息除了生男生女秘密外，还有男性不育很多方面资讯。
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中去，未来若发育为男孩话，长大以后也可能成为无精子症或少精子症患者。这么，就会给后代带来新烦恼和不幸。要防止这种情况，对不明原因无精子症或少精子症患者就要进行基因检验，尤其是无精子因子检验。
无精子因子检验不但能够明确病因，防止进行睾丸活检等创伤性检验，或者一些无效，更主要是能够防止将有缺点基因遗传给下一
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代。当前，国内上海、广州、长沙等地部分医疗机构已开展这项。
男性不育患者Y染色体AZF区微缺失分析
男性不育患者Y染色体AZF区微缺失分析刘祥印;薛百功;刘睿智;戴汝琳;常燕;高久春【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2008(34)2【摘要】目的:探讨Y染色体上无精子因子(AZF)微缺失与男性不育的关系.方法:应用多重PCR技术,采用AZF区9个序列标签位点(STS).对107例男性不育患者(83例无精子症和24例严重少精子症)和20例正常生育男性外周血进行微缺失分析.结果:在107例无精症和少精子症不育患者中11例AZF区域微缺失,缺失率10.3%,其中无精症组缺失率为9.6%(8/83),少精子症组缺失率为12.5%(3/24).11例微缺失患者中,单独AZFc区缺失患者5例(45.5%),AZFc+d区缺失患者4例(36.4%),AZFb+C区、AZFb+c+d区缺失患者各1例(9.1%);位点sY254和sY255缺失患者分别为72.7%(8/11)和100%(11/11).20例正常生育男性未检测出Y染色体微缺失.结论:Y染色体AZF微缺失是导致男性不育患者精子发生障碍的重要原因.【总页数】4页(P305-308)【作者】刘祥印;薛百功;刘睿智;戴汝琳;常燕;高久春【作者单位】吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院细胞生物学教研室,吉林省生殖医学研究所,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R698.2【相关文献】1.150例男性不育患者Y染色体AZF基因微缺失分析 [J], 莫毅;梁方方;檀大羡;吕福通;陈美佳;何科峰;谢丹尼2.东莞地区男性不育患者Y染色体AZF基因微缺失分析 [J], 曹金如;陈寿云3.男性不育患者Y染色体AZF区域微缺失的STS位点分析 [J], 周友泉;王厚照;刘芳;史彩虹;史化民4.男性不育患者Y染色体AZF区微缺失的临床研究 [J], 陈俊丰;殷玮琪;王恺赟;马超;王力;马琪5.男性不育患者Y染色体AZF基因微缺失检测和染色体核型分析 [J], 张丽洁;赵园;赵乔佳杰;王九菊;李艳春;魏绪仓因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
精子生成障碍者染色体异常和无精子因子微缺失分析
表 1 Y 染色体微缺失多重 PCR检测分析
位点
引物序列
长度 (bp)
ZFX / Y
Primer F: ACCR (A, G) CTGTACTGACTGTGATTA2 CAC
495
Primer R: GCACY (C, T) TCTTTGGTATCY (C, T) GA GAAA GT
sY84 (AZFa)
常规精液分析及无精子症和少精子症诊断按 世界 卫生组织 (WHO ) 推荐方法和诊断标准进行 。50 例正常生育男性为对 照组 。
112 外周血染色体核型分析 取外周血进行淋巴细胞培养
后 , 常规制备染色体标本 , G显带分析计数 30个中期分裂相 , 分析 3～5个核型 , 异常者加倍计数和分析 , 结果按人类细胞 遗传学国际命名体制 ( ISCN , 1985) 进行表达 。
11314 PCR扩增产物的电泳检测 取 PCR 产物点样于 115%
琼脂糖凝胶 ( 015 μg/m l EB ) , 90V 电泳 30 m in。通过紫外透 射仪 ( Tanon 1600) 观察结果 , 使用图像处理系统记录结果 。
AZFb区缺失 1 例 , AZFb + c缺失 2 例 , AZFb + c + d缺失 6 例 , AZFc + d缺失 10例 ;严重少精子症组 91例 ,发现 12例缺失 ,缺 失率为 13119%。AZPc缺失 2例 , AZFc + d缺失 5例 , AZFb + c + d缺失 5例 。无精子症组和严重少精子症组总缺失率为 11111% (37 /333) 。AZFc区和 AZFd区缺失率较高 。见表 3。
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Primer R: GAACCGTATCTACCAAAGCAGC
Y染色体AZF区域微缺失与男性生殖健康
Y染色体AZF区域微缺失与男性生殖健康Y染色体微缺失是指无精子因子（Azoospermia factor，AZF）区域的缺失，该区域不同程度的缺失可引起生精功能障碍，造成无精子或少精子症。
目前，Y染色体AZF微缺失，是已知的导致男性不育的最重要的遗传因素之一。
在精子的发生过程中，细胞快速的分裂，导致精子比卵子有更大的概率发生异常。
如果精子发生过程中存在引起遗传突变的因素，则Y 染色体一直处在这个环境中。
Y染色体是男性所独有的染色体，由于Y 染色体是单倍体，无法像常染色体一样进行修复，即便是一个小小的基因缺失，也有可能导致明显的效应。
无精子因子区域被划分为AZF a，AZF b及AZF c区三个区域。
三个区域的任一段异常都会导致严重的后果。
一般来说，a区缺失的患者，常表现为唯支持细胞综合征，常规检查男性精液时基本显示为无精子症；b区缺失的患者，常表现为生精阻滞，精液分析结果大多也为无精子症；c区缺失则具有多样化，可出现无精子症、严重少弱精子症，甚至会出现精子数量正常的表现。
AZF区域的分子遗传特点AZFa 仅编码单拷贝基因，并且由单拷贝、广泛表达的基因构成，其中X 同源序列可以逃避失活。
四个基因已被定位到AZFa 区，有USP9Y、DBY、UTY和 TB4Y。
AZFb基因座位于Yq11的中心区（间隔5-6MB），跨越3.2Mb，其中1.5Mb与AZFc重叠。
AZFb区域具有复杂的基因组结构并且包含三个单拷贝区域，Y染色体特异性重复DNA家族（DYZ），19卫星重复阵列和14个称为扩增子的多拷贝序列单位。
这些扩增子被组织成6个序列家族，家族内同源性水平> 99％。
AZFb中丰富的扩增子的存在造成复杂的重排。
精母细胞成熟所必需的关键AZFb区间从回文中心P5延伸到RBMY1簇内P3的近端边缘，间隔超过4 Mb，含有13个编码基因。
AZFb与AZFc易发生NAHR（非等位基因同源重组），导致两种常见缺失，分别为6.23和7.7 Mb。
y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨
·论 著·Y染色体无精子症因子微缺失的筛查与临床探讨欧妙玲，陈志华，刘丽雅，朱晓丹（广东省佛山市妇幼保健院检验科 ５２８０００） 【摘要】 目的 筛查男性不育患者Y染色体无精子症因子（AZF）微缺失发生率，并分析缺失类型与临床表型的关系。
方法 选取２０１３年１～１２月于佛山市妇幼保健院男科就诊的男性不育症患者２００例，其中非梗阻性无精子症１４１例，重度少精子症５９例；另选取１００例正常孕育男性作为阳性对照；１００例正常孕育女性作为阴性对照。
采用聚合酶链反应分析男性Y染色体AZF微缺失。
结果 特发性不育组AZF微缺失率显著高于非特发性不育组，差异有统计学意义（P＜０．０５）。
在所有AZF微缺失类型中以AZFc最常见，占５５．６％；非梗阻性无精子症组与重度少精子症组微缺失率及微缺失类型分布情况比较，差异无统计学意义（P＞０．０５）。
结论 Y染色体AZFa、AZFb、AZFc区微缺失与男性不育具有密切的相关性。
【关键词】 男性不育症； Y染色体； 无精子症因子DOI：10．3969／j．issn．1672‐9455．2015．03．031文献标志码：A文章编号：１６７２‐９４５５（２０１５）０３‐０３６５‐０３Screening and clinical phenotype explore of Y chromosome microdeletions of azoospermia factor in male infertility pa‐tients OU M iao‐lin g，C H EN Zhi‐hua，L IU L i‐y a，ZH U X iao‐dan（De p artment o f Clinical L aborator y，M aternaland Children H ealth Hos p ital o f Foshan Cit y，Foshan，Guan g dong５２８０００，China）【Abstract】 Objective To investigate incidence of Y chromosome microdeletions of azoospermia factor（AZF）in male infertility patients，and to analyze the relationship between types of gene deletion and clinical phenotype．Methods A total of２００cases of patients with male infertility were recruited in this study from January to December２０１３，including１４１cases with non‐obstructive azoospermia and５９cases with severe oligozoospermia．Another１００healthy males were enrolled as positive control group，and１００healthy females were enrolled as negative controlg roup．M ale Y chromosome AZF microdeletions were analyzed by using polymerase chain reaction method．Results The incidence of AZF microdeletions of idiopathic infertility group was significantly higher than that of non‐idiopathic infertility group（P＜０．０５）．In all types of AZF microdeletions，AZFc was the most common type，accounting for５５．６％．No significant differences of AZF microdeletions incidence and distribution of types of AZF microdeletions were found between non‐obstructive azoospermia group and severe oligozoospermia group（P＞０．０５）．Conclusion Y chromosome AZFa，AZFb and AZFc microdeletion could be closely correlated to male infertility．【Key words】 male infertility； Y chromosome； azoospermia factor 大约有１０％～１５％育龄夫妇存在不育情况，其中男性因素大约占了５０％，在男性不育中３０％是因为遗传因素所导致。
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。