酶活力的测定-课件

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第6课时
4．如图是果胶酶在不同温度条件下的酶活性变化曲线，请回 答下列问题。
本 课 栏 目 开
关 (1)在 35 ℃时，果胶酶的活性________。 (2)在________和________时，果胶酶的活性都降为 0，但恢 复至 35 ℃时，________图的催化活性可能恢复，请在图中 画出恢复曲线，由此表明________图中所示酶的结构未受 到破坏。
越高；反之，酶的活力越低。
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第6课时
2．下列关于果胶酶活力的测定的说法中，错误的是 ( A )
本
A．果胶酶活力测定过程中与温度、pH 无关
课
栏
B．果胶酶可将果胶水解生成 β­半乳糖醛酸
目
开
C．β­半乳糖醛酸可用次碘酸钠法进行定量测定
关
D．根据测定得到的 β­半乳糖醛酸的量可以计算出果胶酶的
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第6课时
3．关于探究果胶酶浓度的实验，叙述错误的是
( C)
A．配制不同浓度的果胶酶溶液，并在各组中加入等量的该
本 课
溶液
栏 目
B．调节 pH，使各组中的 pH 相同而且处于适宜状态
开 关
C．用玻璃棒搅拌加酶的果泥，搅拌时间可以不同
D．在相同且适宜的温度条件下进行实验
解析 根据单一变量的原则，除了果胶酶的浓度外，其他 因素都要保持相同且适宜。
② 加
反应液加入两个碘量瓶中，碱性条件下(碳酸钠
加热煮沸，冷却后分别加入 提供碱性条件)，碘可
碘 氧
1 mL1mol/L 的_碳____酸___钠_____溶 以和果胶酶的水解 液和 5 mL0.1 mol/L 的 碘 产物 β半乳糖醛酸
化
液，混匀
作用，生成糖酸盐
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第6课时
分别加入 2 mL1 mol/L 的硫 滴定时加入硫酸的目
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答案 (1)最高 (2)0 ℃ 100 ℃ 甲 如下图 甲
第6课时
本 课 栏 目 开
关 解析 从图中可以看出，果胶酶在 35 ℃时催化效率最高， 当温度降至 0 ℃或升高至 100 ℃时，催化效率均降至 0。果 胶酶的化学本质是蛋白质，当温度升高至 100 ℃时，果胶酶 的分子结构发生改变，从而使酶变性失活，当温度再恢复到 35 ℃时，酶也不会恢复活性。而温度降至 0 ℃时，酶的结构 并没有发生变化，再恢复到 35 ℃时，活性还会恢复。
×1÷2 ×20÷5
表示反应液 总体积 ；5 表示检测时所 取 反应液 的毫升数
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第6课时
归纳提炼
1．为了得到一种高纯度、高活力的酶制剂，往往要经过一系列
本 课
复杂的分离纯化过程，而各个过程中采取的手段可能很温
栏 目
和，也可能很激烈，这些手段都或多或少地影响到酶的活性。
开 关Leabharlann 为了掌握了解每一个过程中的酶活力的损失程度以及所采
胶、 果胶酶 ；2 号试管内加 保温的目的是使酶
目 开
①保 入等量的果胶和 蒸馏水 ， 对底物很好地发挥
关
温 均用冰乙酸将 pH 调至3.5 ，作用，温度和 pH
放在恒温水浴锅中 50 ℃保 都应是 最适宜 的
温2h
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第6课时
从 1、2 号瓶中分别取 5 mL 这一步的目的是在
本 课 栏 目 开 关
度，酶催化的反应速度越大，说明酶活力 越高 ；反之，酶
活力 越低 。
2．果胶酶活力的测定
本 课
(1)实验原理
栏 果胶酶可将果胶水解生成 β半乳糖醛酸 ，产物可用次
目
开 碘_ 酸钠_法进行定量测定，从而计算出果胶酶的活力。
关
(2)方法步骤
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第6课时
步骤 操作
提示
本
两个锥形瓶，1 号内加入果
课 栏
活力
解析 果胶酶活力受温度、pH 等的影响。
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第6课时
探究点二 探究果胶酶作用的最佳条件
本 课
酶的活性受多种因素的影响，实际应用中为了最大限度
栏 地利用酶，就要先确定酶的最佳作用条件，结合下列实
目
开 验体会探究酶最佳作用条件的方法。
关
1．探究温度对果胶酶活性的影响
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本 课 栏 目 开 关
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第6课时
4．下图一表示温度对酶促反应速率的影响示意图，图二的实线
表示在温度为 a 的情况下生成物量与时间的关系图。则当温
度增加一倍时生成物量与时间的关系是
本 课 栏 目 开 关
(B )
A．曲线 1 B．曲线 2 C．曲线 3 D．曲线 4
解析 从图一可以看出，当温度由 a 变为 2a 时，酶促反应 速率提高，所以能在更短的时间内达到图二中的饱和值。
本
B．酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力
课 栏
C．酶的活性受温度、pH 等因素的影响
目 开
D．酶活性高低与反应物浓度无关
关
解析 酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力，其高低可
以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来
表示。酶的催化作用受外界条件影响，温度、pH 等对酶的
催化作用都有较大影响，反应物浓度与酶的活性高低无关。
第6课时
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第6课时
(1)果胶酶的最适温度为 45～50 ℃。设置温度梯度时，要以这个
范围为 中心 设置，上图实验中的温度梯度为 5 ℃。
(2)为什么在混合苹果泥和果胶酶之前，要将果泥和果胶酶分装
在不同的试管中恒温处理？
本 课
答案
将果泥和果胶酶分装在不同的试管中恒温处理，可以保
栏 目
证底物和酶在混合时的温度是相同的，避免了果泥和果胶酶混
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第6课时
本 课 栏 目 开 关
酶活力
B 表示 空白 滴定消耗的硫代硫酸钠毫升 数；A 表示 样品 滴定消耗的硫代硫酸钠
④
(单位) ＝(B－
毫升数； M 表示 硫代硫酸钠 的摩尔浓
计 算
A)×M
度；1 表示 1 mol 硫代硫酸钠相当于 1 mol
β_半__乳__糖__醛___酸___；2 表示作用时间 ；20
的条件下)
本
课
栏
目 开
3．极端条件对酶活性的影响区别
关
酶的结
影响因素 酶的活性
构
低温
降低 未破坏
高温 降低或失活 破坏
过酸
失活
破坏
过碱
失活
破坏
活性恢复情况
可恢复 不可恢复 不可恢复 不可恢复
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第6课时
活学活用
3．探究温度对果胶酶活性的影响、pH 对酶活性的影响、果胶
酶的用量三个实验中，实验变量依次为
本 课
酸，用 0.05 mol/L 硫代硫酸钠 的是使酶促反应 终 ③ 滴定至溶液呈淡黄色，再加入 止，然后用硫代硫酸
栏
目
滴 质量分数为 0.5%的 淀粉 指 钠滴定剩余的 碘 ，
开 关
定 示剂，继续滴定至 蓝 色消失 根据化学反应中的定
为止，记录所用硫代硫酸钠的 量关系即可求出半乳
体积，分别用 A 和 B 表示 糖醛酸的量
目 编组”之后，有下面两种操作：
开
关 方法一：将试管中的果胶酶溶液和烧杯中的苹果泥相混合，再
把混合液的 pH 分别调至 4、5、6、7、8。
方法二：将试管中果胶酶溶液和烧杯中苹果泥的 pH 分别调到
4、5、6、7、8，再把 pH 相等的果胶酶溶液和苹果泥相混合。
请 问 哪 一 种 方 法 更 为 科 学 ： ________ ， 并 说 明 理 由 ：
本
B．酶活力大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应
课 栏
的反应速度来表示
目 开
C．酶催化的反应速度越大，酶的活力越高
关
D．酶催化的反应速度越大，酶的活力越低
解析 酶活力又叫酶活性，是指酶催化某一化学反应的能
力，酶活力大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反
应的反应速度来表示，酶催化的反应速度越大，酶的活力
第6课时
酶活力的测定
本 课
[学习目标定位]
栏 目
1.识别酶活力和酶反应速度的关系。2.解释果胶酶活力测定
开 关
原理及方法。3.探究果胶酶作用的最佳条件。
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第6课时
1．果胶酶是能够分解果胶的 多种 酶的总称，除了含有_果__胶__
本 课
_分解_酶外，还含有少量的_纤__维__素__酶__、__半__纤__维__素__酶__、__淀__粉___酶_
D．果胶酶就是果胶分解酶的简称 解析 果胶是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物；果
胶被果胶酶分解后的产物是半乳糖醛酸；果胶酶是一类酶的总
称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。
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第6课时
2．下列与酶的活性有关的说法，不正确的是
( A)
A．酶的活性是由蛋白质结构决定的，不受外界条件的影响
取的手段是否合适，以决定是否进行下一步操作，就必须在
完成了每一步操作后都要对酶活力进行测定。
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第6课时
2．果胶酶可以将果胶水解成 β­半乳糖醛酸，而半乳糖醛酸具有
还原性糖醛基，可用次碘酸钠法定量测量，其原理如下：碘
本 在碱性溶液中可以生成具有强氧化性的次碘酸盐，次碘酸盐
课
栏 能与醛糖反应，从而使醛糖氧化成糖酸盐。
关
(1)酶活力单位是指在一定条件下，1min 内能转化1μmol 底
物的酶量。测定过程中温度保持在 25 ℃，其他条件如pH 和
底物浓度等均应采用最适条件。
(2)测定方法