沙门菌属
沙门菌属
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2.菌血症或败血症
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3.食物中毒
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4.肠热症
• 免疫性：病后免疫力牢固，以细胞免疫为 主。
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微生物学检验
• 标本采集：
• 根据不同疾病，不同病程取不同标本，最 好在使用抗生素前采集。
• 肠热症的标本采集 • 第一周取血液 • 第2~3周取粪便和尿液 • 全程可取骨髓
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以上者，才有诊断意义。 • O与H抗体的诊断意义： • O、H效价均升高：已感染伤寒 • O、H效价均低于正常值：未感染沙门菌或免疫低下 • O升高、H正常：某型沙门菌感染早期 • H升高、O正常：以往接种过疫苗或非特异性回忆反应
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• （三）生化特性
• 可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤寒 沙门菌产酸不产气外，其余沙门菌均产酸 产气；
• 不发酵乳糖和蔗糖（亚利桑那菌除外）； • 不分解尿素； • 大多可产生H2S； • 动力阳性； • IMVIC试验结果为++--，MIU试验为+--。
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IMVIC试验
• I:吲哚（indol）试验 • M:甲基红（methyl red）试验 • V:V.P（Voges-Proskauer）试验 • C:柠檬酸（citrate utilization）实验
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• 在中国蓝，麦康凯，EMB等选择性培养基上， 呈透明或半透明琥珀色，边缘整齐，中等 大小的菌落。
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• 在SS平板上形成中心为黑褐色的菌落
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• 在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色，大 部分菌落中央呈黑色。
• 在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色 • 在液体培养基中均匀混浊生长。
沙门氏菌基本知识及检测方法
沙门⽒菌基本知识及检测⽅法沙门⽒菌基本知识及检测⽅法沙门⽒菌属(Salmonella)是肠杆菌科的⼀个⼤属，有2000多个⾎清型，我国发现的约有100个。
沙门⽒菌⼴泛存在于猪、⽜、⽺、家禽、鸟类、⿏类等多种动物的肠道和内脏中。
1880年Eberth⾸先发现伤寒杆菌，1885年Salmon分离到猪霍乱杆菌，由于Salmon发现本属细菌的时间较早，在研究中的贡献较⼤，遂定名为沙门⽒菌属Salmonella 。
本属细菌绝⼤多数成员对⼈和动物有致病性，能引起⼈和动物的败⾎症与胃肠炎，甚⾄流产，并能引起⼈类⾷物中毒，是⼈类细菌性⾷物中毒的最主要病原菌之⼀。
根据沙门⽒菌的致病范围，可将其分为三⼤类群。
第⼀类群：专门对⼈致病。
如伤寒沙门⽒菌、副伤寒沙门⽒菌(甲型、⼄型、丙型)。
第⼆类群：能引起⼈类⾷物中毒——⾷物中毒沙门⽒菌群，如⿏伤寒沙门⽒菌、猪霍乱沙门⽒菌、肠炎沙门⽒菌、纽波特沙门⽒菌等。
第三类群：专门对动物致病，很少感染⼈，如马流产沙门⽒菌、鸡⽩痢沙门⽒菌。
致病性最强的是猪霍乱沙门⽒菌(Salmonella cholerae)，其次是⿏伤寒沙门⽒菌(Salmonella typhimurium)和肠炎沙门⽒菌(Salmonella enteritidis)。
⼀、沙门⽒菌属的⽣物学特征：1.形态染⾊特性：G-⽆芽孢杆菌。
⼤⼩通常为0.7～1.5µm ×2.0～5.0µm，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，⽆荚膜，除鸡⽩痢沙门⽒菌和鸡伤寒沙门⽒菌外均有周⾝鞭⽑，能运动，绝⼤多数菌株有菌⽑。
需氧或兼性厌氧菌，⽣长温度范围为10～42℃，最适⽣长温度为37℃，适宜pH为6.8～7.8，对营养要求不⾼，在普通培养基中⽣长旺盛，胆盐可促进其⽣长。
2.培养特性：需氧或兼性厌氧菌；⽣长温度范围为10～42℃，最适⽣长温度为37℃；适宜pH为6.8～7.8；对营养要求不⾼，在普通培养基中⽣长旺盛；胆盐可促进其⽣长。
10-3沙门菌属
近有学者采用SPA协同凝集试验、对流免疫电泳、腔乳凝集试验和EI_1sA法等，来快速早期诊断粪便、血清或尿液中的沙门菌等可溶性抗原。
核酸杂交和PcR法等分子生物学技术也可用于沙门菌感染的快速诊断。
在流行病学调查和传染源追踪t}J．V1噬菌体分型也是一种常用方法。标准V?噬菌体有33个型，其特异性比血清学分型更为々一。
4无症状带菌者约有1％～5％伤寒或副伤寒患者，在症状消失后1年仍可在其粪便中检出有相应沙门菌，转变为无症状(健康)带菌者。无症状带菌者也可能是感染后唯一的临床表现。这些细菌留在胆囊中，有时也可在尿道中，成为人类伤寒和副伤寒病原菌的储存场所和重要传染源。年龄和性别与无症状带菌关系密切。20岁以下，无症状带菌率常小于l％，而50岁以上者，可达10。朋以上。女性转变为无症状带菌状态是男性的2倍。其他沙门菌感染，50％患者在5周内停止排菌，90％在感染后9周培养阴性，转变为无症状带菌者很少，不到1％，在人类的感染中不是主要的传染源。
3抗原构起沙门菌属细菌的抗原主要有。和H两种抗原，少数菌中尚有一种表面抗原，功能上与大肠埃希菌的K抗原类同。一般认为它与毒力(v—rul…e)有关，故称vi抗原(表lO 5)。
沙门菌0抗原为细菌细胞壁脂多糖中特异性多糖部分，以阿拉伯数字顺序排列。每个沙门菌血清型吉一种或多种。抗原。凡含有相同抗原组分的归为一个组，引起人类疾病的沙门苗大多数在A～E组。
沙门菌属中少数血清型如伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌是人的病原菌，对人类有直接的致病作用，引起肠热症，在非人类宿主不致病。绝大多数血清型宿主范围广泛，家畜、家禽、野生脊椎动物以及冷血动物、软体动物、环形动物、节肢动物(包括苍蝇)等均可带菌，其中部分沙门菌是人畜共患病的病原菌，可引起人类食物中毒或败血症。动物感染太多无症状或为自限性胃肠炎。
沙门菌属
胆囊炎 或带菌 状态
发热、 肾和其 他器官 感染
胸导管 初次菌血症
菌血症
病菌
胃
小肠粘膜上皮，巨噬C吞噬
第 1周
淋 巴 管
肠壁、肠系膜淋巴结
胸 导 管
发热、全身不适 乏力，血培（+） 出现抗体
血流（第1次菌血症）
全身、器官和组织
第 2、 3周
肝脾肿大 皮肤玫瑰疹
菌-肾-尿（尿检菌）
菌-胆囊-粪便（粪检菌） 小肠肠壁Ⅳ变态反应 肠坏死、穿孔
• 玛丽当时反应激烈，因为在她那个年代，“健 康带菌者”还是一个闻所未闻的概念，她自己 身体棒棒的，说她把伤寒传染给了别人，简直 就是对她的侮辱。
后来，索柏试图通过地方卫生官员说服玛 丽，没想到，这更惹恼了这个倔脾气的爱尔兰 裔女人，她将他们骂出门外，宣布他们是“不 受欢迎的人”。 最后，当地的卫生官员带着一辆救护车和5 名警察找上门。这一次，玛丽又动用了大杈子。 在众人躲闪之际，玛丽突然跑了。警察后来在 壁橱里找到了她，5名警察把她抬进救护车送往 医院。一路上的情景就像“笼子里关了头愤怒 的狮子”。 医院检验结果证实了索柏的怀疑。玛丽被 送入纽约附近一个名为“北边兄弟”的小岛上 的传染病房。
• 房主深为焦虑，他想方设 法找到了有处理伤寒疫情 经验的工程专家索柏。
• 索柏将目标锁定在玛丽身 上。他详细调查了玛丽此 前7年的工作经历，发现7 年中玛丽换过7个工作地 点，而每个工作地点都暴 发过伤寒病，累计共有22 个病例，其中1例死亡。
• 索柏设法得到玛丽的血液、粪便样本，以验证 自己的推断。但这非常棘手，索柏对此有过精 彩的描述：他找到玛丽，“尽量使用外交语言， 但玛丽很快就作出了反应。她抓起一把大杈子， 朝我直戳过来。我飞快地跑过又长又窄的大厅， 从铁门里逃了出去”。
临床微生物学检验：第五节 沙门菌属
抗原成份
2. H抗原：
▪ Vi抗原位于菌体的最表层，包围了O抗原，可阻碍 O抗原的血清学凝集试验。
▪ 破坏Vi抗原：100 ℃ 10min ▪ 含有Vi 抗原的沙门菌：
伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、都柏林沙门菌
变异性
• S-R变异： 光滑型-粗糙型 • H-O变异： 有鞭毛-无鞭毛 • 位相变异：双相型-单相型 • V-W变异： 失去Vi抗原
橼
名
糖
氢
红
酸
盐
甲型副伤寒沙门菌 + + — — —/+ — + — —
乙型副伤寒沙门菌 + + — — +++ — + — ±
鼠伤寒沙门菌
+ + — — +++ — + — +
丙型副伤寒沙门菌 + + — — + — + — +
猪霍乱沙门菌
+ + — — +/— — + — +
伤寒沙门菌
+ + — — —/+ — + — —
去氧胆酸钠、酚红指示剂等
伤寒沙门菌菌落特征 （血平板）
伤寒沙门菌菌落特征 （SS平板）
不产H2S的沙门菌落特征：无色、 半透明、小菌落（MAC平板）
XLD平板：不发酵乳糖的沙门菌志贺菌（红色菌落）； 产生硫化氢的沙门菌（黑色菌落）； 发酵糖类产酸的大肠杆菌（黄色菌落）
沙门菌属ppt课件
甲型、肖氏、希氏血清型副伤寒沙门菌(S.paratyphi)。 细菌随污染的食物和水进入人体。发病与否，取决于 侵入的菌量与人体的免疫状况。发病过程
伤寒和副伤寒的致病过程
伤寒沙门和副伤寒沙门菌 胆囊-----肠道-------粪排菌 皮肤----血栓出血--玫瑰疹 肾-----尿 肝脾-----肿大 骨髓
按 O 抗原分组后，每一组沙门菌再根据 H抗原分成
不同的种或血清型(表1)。
常见沙门菌的O、H及Vi抗原
组 别 （group） A （O 2 ） B （O 4 ） 菌 种 O 抗 原 第1 相
甲型副伤寒沙门菌 乙型副伤寒沙门菌
H
抗
原
第2 相 1,2 1,2
1,2,12 4,5,12 1,4,5,12
抗原性弱，刺激机体产生低效价抗体 伴随活菌一起存在
所 以
测定Vi抗体有助于检出带菌者
致病性与免疫性
致病因子
1.侵袭力 耐酸应答基因（acid tolerance response, atr） O抗原、Vi抗原、菌毛 2.内毒素 3.肠毒素 类似大肠埃希菌肠毒素
所致疾病
人类沙门菌病(salmonellosis)包括：
抗原构造和分类
1．O抗原 O抗原有许多组成成分，每组细菌带有数种O抗 原；不同种的细菌可有共同的 O 抗原。将具有共同抗原的沙门 菌归为一组(group)，引起人类沙门菌病的细菌多属A-E组。 2．H抗原 沙门菌属的H抗原有两种，称第1相（特异相）
和第2相（非特异相）。具有两种相抗原的细菌叫双相菌；仅 有其中一相者称单相菌。
新一代疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗
治疗伤寒以氯霉素效果较好。 对氯霉素耐药者可用氨苄西林、阿莫西林或用 TMP—SMZ 伤寒和副伤寒 食物中毒 第1,2周取血、骨髓 可疑食物 呕吐物 第2周起取粪、尿 粪 菌血症 血
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程1.概述沙门菌属是一大群寄生于人和动物肠道中的形态、培养特性、生化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌，其血清型别繁多、抗原复杂的肠道病原菌，分为6个亚属、2200种以上的血清型。
伤寒沙门菌属亚属I，多价O抗血清D群，是临床上最为重要的沙门菌。
2.标本类型粪便、血液等额标本。
3.鉴定3.1 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，大小为（0.7~1.5um）×（2~5um）。
有周鞭毛，无芽胞，无荚膜。
3.2 培养特性：在麦康凯琼脂平板上形成无色、透明的菌落；SS琼脂平板上呈无色、透明，但大部分菌落中央呈黑色（产H2S）；在XLD琼脂平板上也产生中央黑色的菌落（产H2S）；HE琼脂平板上菌落呈蓝绿色。
CHROMagar显色培养基上呈紫色菌落。
半固体琼脂中均匀混浊生长，无穿刺线。
3.3 生化反应：氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖，不发酵乳糖；IMViC-+--或-+-+，H2S试验阳性或阴性，动力、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶、尿素酶试验阴性，氰化钾（KCN）培养基不生长。
3.4 鉴别要点：3.4.1 本菌特征：鉴别平板上无色透胆或半透明的菌落，TSI为K/A，H2S阳性或阴性，有动力，IMViC-+--或-+-+，尿素酶试验阴性。
符合上述特性者，可通过血清凝集试验）作出诊断。
3.4.2 与志贺菌属的鉴别：少数伤寒沙门菌在TSI上H2S阴性，动力不明显，易与志贺菌属混淆，可用血清凝集反应相鉴别。
3.5 操作步骤3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。
参见细菌鉴定标准操作构规程。
3.5.2 血清学鉴定参见沙门菌血清学检测标准操作规程。
3.5.3 鉴定从SS琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。
4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。
5. 质量控制参见质量管理程序。
沙门菌属防治方法
沙门菌属防治方法嘿，咱今儿就来好好唠唠沙门菌属防治这档子事儿！沙门菌属啊，那可不是好惹的主儿，稍不注意它就可能给咱惹出大麻烦。
你想想看，要是吃了不干净的东西，里面有沙门菌属，那可不得了。
就好像家里进了个捣蛋鬼，把你身体这个“家”给弄得乱七八糟。
所以啊，咱得从源头抓起。
首先就是吃的方面，咱可得把好关。
那些不干净的、来源不明的食物，千万别往嘴里塞。
就好比你买个水果，上面还有泥巴呢，你能直接啃吗？肯定得洗干净了呀！做饭的时候也是，生熟食物得分开，别让它们“亲密接触”，不然沙门菌属就容易趁机捣乱。
还有啊，储存食物也得讲究。
该放冰箱的就放冰箱，别让食物在外面“裸奔”太久，不然沙门菌属就容易盯上它们。
你说要是大夏天的，你把肉放在外面一整天，那还能吃吗？沙门菌属肯定在那上面乐开了花呢！再说说个人卫生，这可太重要啦！饭前便后要洗手，这可不是随便说说的。
你想想，你的手啥都摸，要是不洗干净，那不就等于把沙门菌属直接往嘴里送吗？就跟你出门不洗脸一样，能行吗？在外面吃饭也得多个心眼儿。
找个干净卫生的餐馆，要是那地方脏兮兮的，你还敢吃？那不是自找麻烦嘛！而且，吃的时候也别太“豪放”，细嚼慢咽，这样也能给肠胃减轻点负担，让沙门菌属没那么容易得逞。
万一不小心真感染了沙门菌属，那也别慌。
赶紧去看医生呀！就像你生病了要找医生开药一样，医生会给你出主意，怎么把这个“捣蛋鬼”给赶跑。
咱可不能小瞧了沙门菌属，它虽然看不见摸不着，但真能给咱带来大麻烦。
就像一只小老鼠，不注意的时候它就到处乱窜。
但只要咱做好预防措施，把该注意的都注意到了，它也没法兴风作浪呀！咱可得好好保护自己的身体，别让沙门菌属有可乘之机，大家说是不是这个理儿呢？。
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MIU试验
• 为动力、吲哚及脲酶复合试验 • 原理：培养基为含尿素、蛋白胨的半固体
培养基，指示剂为酚红。具色氨酸酶的细 菌能分解色氨酸产生吲哚，加入吲哚试剂 后，培养基上层的吲哚会变红；具脲酶的 细菌能分解尿素产氨，使整个培养基变碱 呈红色；有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。 • 作用：常用于肠杆菌科细菌的鉴定。
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IMVIC试验
• I:吲哚（indol）试验 • M:甲基红（methyl red）试验 • V:V.P（Voges-Proskauer）试验 • C:柠檬酸（citrate utilization）实验(枸橼酸
盐) • 作用：这4个试验主要是用来快速鉴别大肠
杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检查。
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• （四）抗原构造
• 沙门菌的抗原结构较复杂，主要包括菌体O 抗原，鞭毛H抗原，少数的菌种有表面Vi抗 原，均具有分类鉴定的意义。
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• 1.菌体抗原（O抗原） • 化学成分是脂多糖，耐热，它刺激机体产
生的抗体以IgM为主，与相应的抗体结合出 现颗粒状凝集。 • 是沙门菌分群的依据，每个沙门菌的血清 型可具有一种或树种O抗原，将具有共同O 抗原成分的归为一个群。临床上常见的是 A~F群。
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• 在SS平板上形成中心为黑褐色的菌落
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• 在HE琼脂平板上菌落呈蓝色或蓝绿色，大 部分菌落中央呈黑色。
• 在XLD琼脂平板上菌落呈红色或中央黑色 • 在液体培养基中均匀混浊生长。
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• （三）生化特性
• 可发酵葡萄糖、麦芽糖和甘露醇，除伤寒 沙门菌产酸不产气外，其余沙门菌均产酸 产气；
• 不发酵乳糖和蔗糖（亚利桑那菌除外）； • 不分解尿素； • 大多可产生H2S； • 动力阳性； • IMVIC试验结果为++--，MIU试验为+--。
以上者，才有诊断意义。 • O与H抗体的诊断意义： • O、H效价均升高：已感染伤寒 • O、H效价均低于正常值：未感染沙门菌或免疫低下 • O升高、H正常：某型沙门菌感染早期 • H升高、O正常：以往接种过疫苗或非特异性回忆反应
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• 2.鞭毛抗原（H抗原） • 化学成分为蛋白质，不耐热，刺激机体产
生的抗体以IgG为主，与相应抗体结合出现 絮状凝集。 • 是沙门菌分型的依据。H抗原分两个相：第 一相为特异相；第二相为沙门菌所共有， 称非特异相。 • 仅具有一相H抗原的为单相菌，具有两相H 抗原的称为双相菌。
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• 3.表面抗原（Vi抗原） • 位于菌体外层，抗原性强，相应抗体可作
• 沙门菌属为需氧或兼性厌氧菌，最适生长 温度35~37℃，最适pH6.8~7.8。能在普通 培养基上生长。
• 在血平板上孵育24小时，可呈灰色或灰白 色中等大小的圆形、湿润菌落，菌落直径 2~4mm
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• 在中国蓝，麦康凯，EMB等选择性培养基 上，呈透明或半透明琥珀色，边缘整齐， 中等大小的菌落。
• 肥达反应 • 原理：肥达反应是用已知伤寒沙门菌O、H
抗原以及甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌H 抗原与受检者血清进行凝集试验，测定受 检者血清中有无相应抗体及其效价。
• 意义：辅助诊断伤寒和副伤寒（肠热症）
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肠热症病人血清抗体出现情况
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• 肥达反应结果判定： • O凝集效价达到或超过1:80 • H抗体效价达到或超过1:160 • 副伤寒H抗体效价达到或超过1:80 • 病程中逐周检查效价递增或恢复期达到初次效价的4倍或
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2.菌血症或败血症
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3.食物中毒
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4.肠热症
• 免疫性：病后免疫力牢固，以细胞免疫为
主。
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微生物学检验
• 标本采集：
• 根据不同疾病，不同病程取不同标本，最 好在使用抗生素前采集。
• 肠热症的标本采集 • 第一周取血液 • 第2~3周取粪便和尿液 • 全程可取骨髓
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检验方法——血清学鉴定
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• 1.吲哚试验 • ①试验菌用蛋白胨水培养基37℃培养24小时. • ②在培养液中加入乙醚1ml(使呈明显的乙醚层)充
分振荡,使吲哚试剂溶于乙醚.静置片刻,待乙醚浮 于培养液上面时沿管壁慢慢加入吲哚试剂10滴.呈 玫瑰红的为阳性,不变色的为阴. • (注:加入吲哚试剂后,不可再摇动,否则红色不明显) • 2.甲基红试验 • ①试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37℃培养24小时. • ②沿管壁加入M.R.(甲基红)试剂3-4滴.红的为阳性, 黄的为阴性.
• 首先用A~F多价O血清进行玻片凝集。 • 再用单价O因子血清鉴定到具体的群。 • 再用第一相与第二相H因子血清定型。
• 若细菌生化反应符合沙门菌属，但与A~F多 价O血清不产生凝集现象，应考虑是否有表 面抗原（Vi）存在，可将细菌悬液水浴加热 30分钟后再进行凝集试验。
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检验方法——免疫学诊断
为筛选带菌者指标; • 不耐热； • 能阻止O抗原与相应抗体发生凝集反应，影
响沙门菌的血清学鉴定。
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• （五）抵抗力
• 对理化因素抵抗力弱 • 尤其对酸敏感 • 对消毒剂敏感 • 易产生耐药性 • 对胆盐和煌绿等抑制剂有抵抗力
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临床意义
• 致病物质：菌毛、内毒素、Vi抗体
• 所致疾病：1.胃肠炎
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• 3.V.P试验 • ①试验菌用葡萄糖蛋白胨培养基37℃培养24小时. • ②加入40%KOH 10-20滴,再加入等量α-茶酚,用力
振荡(拔去棉塞)再放入37℃4h后再观察,仍无色产 生为阴.
• 4.柠檬酸实验 • ①将试验菌培养在柠檬酸盐培养基斜面上37℃培
养24-28小时.
• ②观察有无细菌生长与培养基颜色变化.如果含有 溴麝香草酚蓝的斜面蓝色者为阳性反应,呈绿色的 为阴性反应;含苯酚红的斜面如果呈红色为阳性反 应,呈黄色为阴性反应.
沙门菌属
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分类与命名
沙门菌属隶属于细菌域，变形菌门，γ-变形 菌纲，肠杆菌目，肠杆菌科。
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二、生物学性状
（一）形态与染色
• 沙门菌属细菌为革兰阴性杆菌，菌体大小 为（0.7-1.5）um x （2.0-5.0）um。
• 无芽孢，无荚膜（除个别菌株如鸡沙门菌 等外），一般都有周鞭毛。
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பைடு நூலகம்
• （二）培养特性