HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量
药物分析辅导：头孢氨苄及其制剂含量测定方法
⾊谱条件与系统适⽤性试验：⽤⼗⼋烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以⽔-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（742：240：15：3）为流动相；检测波长为254nm。
头孢氨苄⼲混悬剂、头孢氨苄⽚、头孢氨苄胶囊和头孢氨苄颗粒含量测定⽅法同头孢氨苄。
⽂献报道的⽅法（HPLC法），试验条件除药典的⽔-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液系统外，其它的如：周嘉等⽤HPLC法测定头孢氨苄胶囊的含量。
仪器：导津LC-10AD 液相⾊谱仪。
⾊谱柱为Spherisorb C18柱（5µm，4.6mm×250mm）；流动相为0.025mol/L磷酸溶液（⽤三⼄胺调pH3.0±0.1）-⼄腈（88：12）；流速为 0.9ml/min；检测波长为240nm；柱温为室温。
王建宁等⽤HPLC法测定头孢氨苄⽚的含量。
仪器：⽇⽴L-6200A⾼效液相⾊谱仪。
⾊谱柱为C18(250mm×4.6mm，5µm)；流动相：0.04mol/L磷酸溶液(⽤三⼄胺调pH3.0)-⼄腈(75：25)；流速：1mL/min；检测波长：240nm；柱温：室温。
程成等⽤HPLC法测定头孢氨苄胶囊的含量。
Waters⾊谱系统，⾊谱柱采⽤Nova Pak ODs柱(4µm，4.6mm×250mm)；流动相为0.01mol/L醋酸铵溶液(冰醋酸调pH4.0)-甲醇(70：30)；流速： 0.8ml/min；检测波长262nm；柱温25℃。
周静安等⽤HPLC法测定头孢氨苄胶囊的含量。
仪器：导津LC-10AD 液相⾊谱仪。
⾊谱柱为Shim-pack CLC-ODS柱（150mm×6mm）；流动相为甲醇-⽔（70：30）；流速为1.0ml/min；检测波长为262nm。
邓永辉等HPLC法测定头孢氨苄的含量。
仪器：导津LC-10AD 液相⾊谱仪。
⾊谱柱：250mm×4.6mm 不锈钢柱，填料为Hypersil ODS；磷酸⼆氰钾溶液(0.01mol/L)-⼄氰-甲醇(90：8：2)，并⽤磷酸溶液调节PH ⾄4.5±0.1；检测波长：254mm。
高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的含量
高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的含量摘要：在医学领域当中，孢氨苄胶囊属于一种半合成的抗生素，在临床治疗过程中具有突出的疗效，由于其具有良好的稳定性，而且内部不含有过多的毒性成分，在治疗过程中，病人也不会有副作用产生，因此得到了广泛的应用，该药品蛋白结合率较低，可以稳定葡萄球菌产生的青霉素酶，同时可以忍受革兰氏阳性菌产生的内酰胺酶。
以往经常使用碘量法测量药品的成分，但该方法操作繁琐，而且费时费力，检验过程中容易受到外在因素的影响，因此在药品检测过程中很少使用这种方法，而是使用高效液相色谱法。
关键词：高效液相色谱法；头孢氨苄胶囊；药品检测复方头孢氨苄胶囊主要有头孢氨苄和甲氧苄啶两种成分组成，由于该药品是通过化学加工过的方式制成，因此传统方法在检验的过程中会受到外在因素的影响。
头孢氨苄和甲氧苄啶共同使用可以起到断细菌在生长繁殖的作用而且可具有良好的抗菌作用，其抗菌性能要远远优于头孢氨苄。
为了能够了解该药品内部组成结构以及详细成分，本文采用高效液相色谱法，以乙酰苯胺为内标测定其含量，这种检测方法不仅操作便捷，检测结果的准确性能够得到保证，而且可以对其进行重复检测。
1仪器与试药1.1仪器由于该药品属于化学产物，仅仅依靠人力无法分辨其内部成分，因此必须使用相关的检测仪器才能够保证检测结果的准确性，常用的检测仪器有DIONEX P680AISO型高效液相色谱仪、UVD17OU型HPLC检测器、XS 225A分析天平。
除了检测仪器之外，还需要用到一些试剂以及药品，例如色谱纯，分析过程中用到的甲醇以及双蒸水，为了保证检测结果具有说服力，因此需要选取某些药物作为对照品，最后需要头孢氨苄胶囊，以上所述的药品以及检测器械其规格和质量必须与有关机构指定的标准相符合。
2方法与结果2.1色谱条件与系统适应性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂水-甲醇-3.85%醋酸钠溶液-4%醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相；检测波长为254nm；理论塔板数按头孢氨苄峰计算不低于1500；2.2对照品储备液的制备根据检测要求，选取适量的头孢氨苄对照液，记录其重量放置于专门的容器当中，向其中加入流动液体，达到稀释对照液的目的，摇匀，将稀释过后的对照液储存起来。
高效液相色谱法测定头孢氨苄的含量
赵远征 钱小平 李珠华
（ 大连市药品检验所 １６２） １０１
头孢氨苄即先锋 号， 其含量测定现多采用剩余 碘量法［］ 该法的测定结果受多种因素的影响［ １ ， ， ２ ３ ］如
水解时 间、 温度 ｐ 、 Ｈ 放置时 间、 碘量 等）实验条件须 ，
１０ｍ ０ ０ ｌ）
（ 样品和试药 内标物： 二） 咖啡因； 对照品： 头孢 氨苄， 中国药品生物制品检定所， 批号 ８ ００ ６ ８３样
品： 检的进 口样品 ， 送 经试验 ， 证明样品溶 液在室温下
严格控制。本文采用反相高效液相色谱法， 以咖啡因
为 内标 ， 用峰面积 比值 对头孢氨苄进 行定量测定 ， 结 果令人满意。
２ 小时内稳定； ４ 乙腈、 乙酸钠、 乙酸均为 Ａ Ｒ重蒸馏
水。
实验部分
（ 仪器和色谱条件 Ｌ －Ａ高效 液相色谱仪 ， 一） Ｃ４ Ｓ Ｄ ２ Ｓ紫外检 测器 ，－２ Ｘ 数据 处理机 （ Ｐ －Ａ ＣＲ Ａ 日本 岛
１ ６０ １ ２１
Ｃ ｐａｅｉ ｗ ｓ ｔ ｍｉｅ ｂ ｈｇ ｐｒｏｍ ｎｅ ｅｈ ｌ ｎ ａ ｄ ｅ ｎｄ ｘ ｅｒ ｙ ｉ ｈ ｆｒ ａ ｃ ｅ ｌ ｕｄ ｒｍ ｔ ｒ ｈ ｕｉｇ ａａｙｉ ｌ ｕ （０ ｉ ｉ ｃ ｏ ａｏ ａ ｙ ｎ ａ ｎｌｔａ ｃｌｍｎ ｑ ｈ ｇｐ ｓ ｎ ｃ ｏ ３
蕃茄红素（ｆ ．４ 、 罗 卜 Ｒ＝０６ Ｒ＝０４ 胡 素 ｆ ．６及几乎停
准确称取 １０ｇ ．０蕃茄酱样品和事先研细的５ 无 ｇ 水硫酸钠及０５ 无水碳酸钠混和， ．ｇ 在研钵中研磨均
匀 ， 加入 ５ ｌ 然后 ｍ 石油醚 ６ ９ ０ ０ ， 研磨数分钟后 ，
留在原点的其它色素分开， 并以双波长薄层扫描测定
高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的含量
高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的含量头孢氨苄(cefalexin)为半合成抗生素，口服吸收良好，体内稳定，毒副作用较小，蛋白结合率低，对葡萄球菌产生的青霉素酶稳定；对革兰氏阳性菌产生的β-内酰胺酶有一定耐受性［1］，在临床上广为使用。
其含量测定中国药典(1995年版)采用碘量法［2］。
但此法操作繁琐，费工费时，影响因素多；还有采用高效液相色谱法的报道［3］，但内标物保留时间过长。
本文采用高效液相色谱法，以乙酰苯胺为内标测定其含量，方法简便、准确，重复性好，灵敏度高。
获得了较为满意的结果。
1 仪器与试药日立L-6200A高效液相色谱仪，L-4200H检测器，D-2500数据处理器。
头孢氨苄对照品(含量91.7%)、乙酰苯胺(内标物)、α-苯甘氨酸、7-氨基去乙酰胺基头孢烷酸(7-ADCA)，由中国药品生物制品检定所提供。
2 色谱条件色谱柱：YWG C18(250 mm×4.6 mm,10 μm)，流动相：0.015 mol。
L-1醋酸盐缓冲液(称取无水醋酸钠1.23 g，加水至1 000 mL，用醋酸调pH为4.0)-乙腈-甲醇(60∶6∶34)，检测波长：254 nm，流速：1.0 mL。
min-1。
3 线性范围精密称取头孢氨苄对照品约60 mg，置25 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10 mL置50 mL量瓶中，稀释成约为450 μg。
mL-1的溶液作为对照品溶液。
另精密称取乙酰苯胺适量，置25 mL量瓶中，加水溶解并稀释成约为550 μg。
mL-1的溶液，作为内标溶液。
精密量取对照品溶液0.1，0.5，0.75，1.0，1.5，3.0 mL，分别加入内标溶液2 mL，以流动相稀释至25 mL使内标最终浓度为44 μg。
mL-1［3］，摇匀，取20 μL 进样，色谱图见图1-A。
试验表明头孢氨苄浓度在18～535 μg。
mL-1范围内与对照品峰面积和内标物峰面积比呈良好的线性关系，回归方程为：A=0.015 81+0.009 83C r=0.999 9图1 对照品(A)与样品(B)高效液相色谱图1.头孢氨苄(3.98 min)2.乙酰苯胺(8.56 min)4 重复性和稳定性试验用样品进行6次试验测得平均含量为99.8%，RSD为1.7%。
药物分析实验：实验六 HPLC测定头孢氨苄胶囊的含量
五、注意事项
• 1．将配好的流动相接到流路中，开启泵起动开关，检测 是否漏液
• 2．流动相必须预先脱气，可用超声波、机械真空泵或水 力抽气泵脱气。
• 3．严格防止气泡进入系统，吸液软管必须充满流动相， 吸液管的过滤器始终浸在溶剂中，如变换溶剂，必须先停 泵，再将过滤器移到新的溶剂瓶内，然后才能开泵使用。
实验六 HPLC测定头孢氨苄胶囊的含量
一、实验目的
• 学习高效液相色谱分析的原理 • 学习外标法测定组分含量的方法 • 了解高效液相色谱仪的结构及正确使用方
法
二、实验原理
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同 极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱， 经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内， 在柱内依据不同原理分离后，各成分先后 进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪 记录，从而达到分离分析的目的。
• 4．溶剂的变换必须注意溶剂的极性和互溶性。
• 5. 爱护实验器材
实验报告
1、 按要求填好实验报告，下次实验课前班 长统一收上来。
2、实验课成绩主要包括课堂表现和实验报告 两大部分。
• 色谱仪：岛津高效液相色谱仪 • 色谱柱：ODS柱（4.6250mm，5m） • 柱温：室温 • 流动相：水-甲醇-3.86%醋酸钠溶液-4%
醋酸溶液（742：240：15：3） • 检测波长:25（约相当于头孢氨苄0.1g），置 100ml量瓶中，加超纯水溶解，定容，摇匀，滤 纸过滤，取滤液10ml，置50ml量瓶中，用超纯水 定容。摇匀后用滤头过滤1-2ml溶液。取20µl注入 色谱仪，记录色谱图。
高效液相色谱流程
高效液相色谱法测定头孢氨苄含量
高效液相色谱法测定头孢氨苄含量
邓永辉;史权;姜咏梅
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2002(015)005
【摘要】本文采用HPLC法测定头孢氨苄含量，以乙酰苯胺为内标，色谱柱为Hypersil ODS柱，流动相为甲醇—乙氰—0.01mol／L磷酸二氢钾溶液(2:8:90)，按内标法计算头孢氨苄含量。
方法简便，重现性好，灵敏度高，专属性强。
头孢氨苄在0.26～10ug范围内线性良好(r=0.9999)，RSD=0.57％。
【总页数】2页(P338-339)
【作者】邓永辉;史权;姜咏梅
【作者单位】哈药集团制药总厂，150086;哈药集团制药总厂，150086;大庆市石化总厂
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定头孢氨苄甲氧苄啶胶囊的含量均匀度 [J], 戚继红
2.高效液相色谱法测定头孢氨苄干混悬剂中头孢氨苄的含量 [J], 彭婷婷;王卫华
3.高效液相色谱法测定复方头孢氨苄片中头孢氨苄和甲氧苄啶的含量 [J], 龚道芬;邱海蕴
4.高效液相色谱法测定头孢氨苄片的含量 [J], 廖庆番
5.用反相高效液相色谱法测定复方头孢氨苄胶囊中头孢氨苄和甲氧苄啶的含量 [J], 皮立
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高效液相色谱法测定含量示例的方法再确证
高效液相色谱法测定含量示例的方法再确证目的：确证用反相高效液相色谱法测定头孢氨苄含量的方法有效性和准确性。
方法：以Diamonsil CLC-ODS（150mm x 6mm，10 lm）为色谱柱，水-甲醇- 3.89% 醋酸钠溶液- 4% 醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相，检测波长为254 nm，外标法定量。
结果：头孢氨苄浓度线性范围为0.02～0.20mg / ml，相关系数r= 0.9991，方法重复性试验RSD为1.42%。
结论：该方法可简单高效地完成，结果准确性好、稳定可靠，确证高效液相色谱依然为头孢氨苄制剂的质量控制中有效可靠的方法。
标签：头孢氨苄高效液相色谱法头孢氨芐（Cefalexin，又译先锋霉素Ⅳ、头孢力新等）是一种半合成的第一代口服头孢霉素类类抗生素药物，化学名（6R，7R）-3-甲基-7-[（R）-2-氨基-2-苯乙酰氨基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸，化学式C16H17N3O4S，在临床上广为使用。
其含量测定在旧版的中国药典（1995年版）采用碘量法○1。
但此法不仅操作步骤繁多，费工费时，干扰因素多；然后人们发明采用高效液相色谱法内标法测定的方法，但内标物保留时间过长，依然存在问题。
最后人们又发现采用高效液相色谱法，用外标法测定其含量，方法操作简单方便、数据准确可靠，灵敏度较高，重复性好，最终获得了较为满意的结果○2。
现在本文对这个方法进行确证，以确定该方法的有效性和准确性。
1.仪器与试药分析天平（precisa instrument ltd switzer land xs 225a precisa ），高效液相色谱柱（diamonsic C18 250 * 46mm），检测器（UVD 170v），泵（P680 HPLC pump），头孢氨苄胶囊（广州白云山制药总厂批号：2110102）2. 色谱条件用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂：水-甲醇- 3.89% 醋酸钠溶液- 4% 醋酸溶液（700：300：15：3）为流动相；检测波长为254nm；理论塔板数按头孢氨苄峰计算不低于1500。
头孢氨苄胶囊混合工艺HPLC验证分析方法
头孢氨苄胶囊混合工艺HPLC验证分析方法摘要：目的：为了证明头孢氨苄胶囊混合配料在hplc条件下适合该产品的检查要求，证明在生产工艺过程中各混合时间点对其含量的影响以及头孢氨苄的专属性。
方法：hplc。
结果：该hplc条件可以检测出在混合工艺过程中，各混合时间点对药品含量的均匀性有多大影响，检测出在5分钟、10分钟、15分钟各上中下、左中右的取样点头孢氨苄配料样品的峰面积，时间较长的混合点的含量较均匀。
另外头孢氨苄胶囊配料样品的供试溶液在加热情况下头孢氨苄峰与其相邻的杂质峰完全分离。
因此可以确定该方法对头孢氨苄胶囊有专属性。
结论：利用高效液相色谱法可以检测出生产过程中，总混各阶段的各个时间点对头孢氨苄胶囊的含量也有一定影响，对混合过程中各个时间点的检测，以确保药物各组分布均匀，含量均匀，做到对药品含量均一性的控制，从而保证药品质量符合要求。
关键词：头孢氨苄混合hplc【中图分类号】【文献标识码】【文章编号】1008-1879（2012）12-0391-01为了证明在生产过程中总混阶段不同时间点对配料的混合程度及均匀性的考察，利用hplc对其混合各个时间点的配料含量的检测，使药物各组分在制剂中混匀，保证药物剂量准确，从而做到对药品质量的检测。
检测出样品在加热情况下破坏出来的杂质可以与头孢氨苄峰完全分离，由此可知，该方法对头孢氨苄胶囊有专属性。
1材料1.1仪器。
series 1500高效液相色谱仪，ar224cn分析天平，auw220d电子天平，液相专用柱c18。
1.2试剂。
流动相（水：甲醇：3.86%醋酸钠溶液：4%醋酸溶液，742：240：15：3）、头孢氨苄对照品，批号130408-200710，来源中国药品生物制品检定所。
1.3方法。
洗脱顺序：等度洗脱，检测波长：254，进样量：20ul、10ul。
2分析验证方法2.1头孢氨苄对照品含量。
取对照品约25mg，精密称定，置25ml 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml 量瓶中，用流动相稀释至刻度，精密量取10ml注入液相色谱仪，记录色谱图。
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HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量
HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量
周静安
【期刊名称】《中国现代应用药学》
【年(卷),期】1999(016)005
【摘要】目的:介绍一种用反相高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的方法.方法:以Shim-Pack CLC-ODS(150mm×6m,10μm)为色谱柱,甲醇-水(70:30)为流动相,检测波长262nm,外标法定量.结果:头孢氨苄浓度线性范围为100～900μg/ml,相关系数r=0.9999,方法回收率为99.9%,RSD为0.72%.结论:方法简便快速,结果准确可靠,可作为头孢氨苄制剂的质量控制方法.
【总页数】2页(47-48)
【关键词】头孢氨苄;高效液相色谱法
【作者】周静安
【作者单位】衢州,324002,浙江衢州市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R92
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