试管苗的驯化和移栽
组织培养苗移栽操作技术流程及注意事项
组织培养苗移栽操作技术流程及注意事项壮苗培养：在继代培养过程中，细胞分裂素浓度的增加有助于增殖系数的提高。
但伴随着增殖系数的提高，增殖的芽往往会出现生长势减弱，不定芽短小、细弱，无法进行生根培养的现象；即使能够生根，移栽成活率也不高，必须经过壮苗培养。
生根培养：试管内生根是将成丛的试管苗分离成单苗，转接到生根培养基上，在培养容器内诱导生根的方法。
试管苗生根的优劣主要体现在根系质量（粗度、长度）和根系数量（条数）吸收方面。
移栽驯化：本阶段为组培苗从组培瓶转入温室驯化培养。
本阶段至关重要，如果操作不当，会造成大量损失。
主要的原因有两个：组培苗容易失水死亡和组培苗以蔗糖为碳源且处于低光强下，光合能力较弱。
注意事项：在组织培养苗移栽的过程中，需要注意以下几点：
保持小苗的水分供需平衡。
选择恰当的种植介质。
防止菌类滋生。
注意一定的光、温条件。
驯化移栽
3.光照
试管苗在培养瓶内光合作用微弱，因此移栽前应逐 渐加强光照，使叶片恢复光合作用能力。但初期不 宜长时间照射强光，光照强度以1500-2000lx为宜， 特别注意避开中午强光，以免损伤叶肉组织，致使 小苗随着蒸腾失水而萎蔫。后期光照可加强到 4000-5000lx，光线不足就会造成茎叶细长徒长， 不利于培育壮苗。冬季光照弱，光照时间短，应加 设光源来补充光照。
移栽的基质要根据不同植物 的栽培习性来进行配制
2.嫁接移栽
选取生长良好的同一植物的实生苗或者幼苗做砧 木，用试管苗作接穗进行嫁接的方法。
优点: （1）试管苗移栽成活率高， （2）适用范围广泛， （3）所需要的时间短， （4）有利于移栽植株的生长发育。 3.直接移栽法：指直接将试管苗移栽到盆钵体中的方法
一、炼苗
（一）闭瓶强光练苗。 当生根后或根系得到基本发育后（生根培养后7~15 天），将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭 瓶练苗7~20天左右，遮阴度宜为50%~70%。 （二）开瓶强光练苗。 将培养容器的盖子或塞打开，在自然光下进行开瓶练 苗3~7天，正午强光或南方光照较强地区要注意采取措 施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。如果在开盖容器中 培养不超过1周，一般不会引起含蔗糖培养基的污染问 题。开瓶炼苗可以分阶段进行，即首先松盖（或塞） 一两天，然后部分开盖一两天，最后完全揭去盖。这 种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。培养容 器的开口大小也影响开盖的速度，开口大的瓶盖应比 开口小的瓶盖除去的速度慢一些。
移栽 株数
100 350 200 150
成活 株数
47 230 170 142
成活率 /%
47.00 65.71 86.00 94.67
试管苗的驯化移栽
试管苗的驯化移栽一、试管苗的生态环境组织培养出来的苗通称试管苗或组培苗。
试管苗长期生活在密闭容器中，形成其独特生态系统，与外界环境相比，有四大差异。
⑴高恒温试管苗整个生长过程中采用的是恒温培养，温差很小。
并且温度一般控制在25+2℃。
外界环境条件温度不断变化，其调节由太阳辐射决定，温差很大，而且一般不会达到25+2℃。
⑵高湿试管瓶内水分移动途径有两条：试管苗水分从气孔蒸腾，培养基水分向外蒸发，凝结后又进入培养基。
水分移动循环造成瓶内相对湿度接近100%，远远大于瓶外空气湿度，故试管苗蒸腾小。
⑶弱光试管瓶内光照一般比太阳光弱，幼苗生长也较弱，不能受太阳光直接照射。
⑷无菌试管苗所在环境无菌，与外界有菌环境不同，试管苗也无菌，同时，培养瓶内气体环境较为特殊，与外界环境有很大差异。
⑴试管苗生长细弱、茎叶表面角质层不发达。
⑵叶绿体的光合作用较差。
⑶叶片气孔数目少，活性差。
⑷根的吸收功能差。
⑸对逆境的适应性和抵抗能力较差。
二、试管苗的特点：⑴试管苗生长细弱、茎叶表面角质层不发达。
⑵叶绿体的光合作用较差。
⑶叶片气孔数目少，活性差。
⑷根的吸收功能差。
⑸对逆境的适应性和抵抗能力较差。
三、试管苗的驯化1、驯化的目的提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高光合能力，使试管苗健壮，提高试管苗移栽成活率。
2、驯化原则调节温湿光和无菌等环境要素，开始和培养条件相似，后期与预计栽培条件相似。
3、驯化方法将长有完整试管苗的培养瓶由培养室转到伴遮荫的自然光下锻炼，并打开瓶盖注入少量自来水使幼苗逐渐降低温度，转向有菌，根据材料不同驯化天数有异。
四、试管苗的移栽a、常规移栽法将已诱导出大量根的试管苗，驯化3-5天，移到无菌基质（蛭石、珍珠岩、泥炭土或其混合物）中，当长出2-3片新叶时，栽到田间或盆钵中。
b、直接移栽法直接将试管苗移栽到盆钵的方法。
c、嫁接移栽法用试管苗做接穗嫁接在同一植物的实生苗上。
嫁接移栽优点：1、移栽成活率高。
2、适用范围广，嫁接移栽也适用于弱苗或污染苗。
第四章试管苗的训化与移栽
• 二、试管苗与常规苗相比有如下特点 • （1）组培苗生长细弱，茎、叶表面角质层 不发达； • （2）茎、叶虽呈绿色，但叶绿体的光合作 用较差； • （3）叶片气孔数目少，活性差； • （4）根的吸收功能弱。
• 二、移栽 • 1、常规移栽法 • 在生长浓度高的培养基上诱导生根，获得 大量不定根后，打开瓶，注入少量自来水， 半遮光下驯化3-5天。洗去基质，移栽到基 质中去，当长2-3片新叶时即可移入田间或 盆钵中。
• • • •
2、直接移栽法 直接将试管苗移栽到盆钵的方法 3、嫁接移栽法 取生长良好的同一植物的实生苗或幼苗作 砧木，用组培苗作接穗进行嫁接的方法 。
• 二、基质的选用与消毒 • 1、基质的类型 • （1）有机基质：泥碳、炭化稻壳、花生壳、 椰糠、木屑等 • （2）无机基质：炉渣、河沙、蛭石、珍珠岩 等。 • 河砂分为粗砂和细砂两种类型。直径1-2mm 为粗砂；直径为0.1-0.2mm为面砂或细砂。 河砂粒径以0.1-2.0mm为宜。
• 2、基质的混配 • 一般情况下，河砂、草碳土、腐殖土等不能 单独来栽植试管苗，需与其它基质混合起来 使用。 • 常用配方： • 泥碳：蛭石=1：1
• 异养大于自养
三、驯化的目的
• 通过人工控水、 控肥、增光、降 温等措施，使试 管苗对外界环境 条件的适应性提 高，达到提高成 活率的目的。
第二节 驯化设施与设备
• • • • • 一、保护栽培设施 1、现代化温室 2、日光温室 3、遮阳防雨拱棚 4、防虫纱网棚（以30-40目尼龙纱网为覆 盖物） • 5、容器：可用6×6cm-10×10cm的软塑料 钵也可以用育苗盘。
任务五：试管苗的驯化与移栽综述
试管苗首先移栽到基质中，因为基质具备透气 性、保湿性和一定的肥力，容易灭菌处理，并 不利于杂菌滋生的特点 ，常见基质有： 1、河砂 ：河砂分为粗砂、细砂两种类型 2、草炭土：草炭土是由沉积在沼泽中的植物 残骸经过长时间的腐烂所形成，其保水性好， 蓄肥能力强 3、腐殖土：腐殖土是由植物落叶经腐烂所形 成。
试管苗的苗期管理?1保持小苗的水分供需平衡内应给予较高的空气湿度条件使叶面的水分蒸发减少尽量接近培养瓶的条件让小苗始终保持挺拔的状态?2防止菌类滋生对基质进行高压灭菌或烘烤灭菌?3环境条件适宜的生根温度是1820度在光照管理的初期可用较弱的光照后期可直接利用自然光照
园艺植物快繁与脱毒技术
任务五：试管苗的驯化和移栽
复习思考题
(1)试管苗与栽培苗有何差别? (2)组织培养中，怎样尽量避免出现褐变 和玻璃化苗? (3)试管苗驯化中应注意调节什么因素?
学习目标：学习组培苗的驯化移栽操作 流程。 能力要求：能对生根试管苗实施正确驯 化移栽、能严格按照操作流程进行科学 管理。 学习内容：理解组培苗的生态环境与温 室环境的差异以及组培苗的特点，组培 苗的驯化移栽操作流程，组培苗的科学 、试管苗的驯化 子情景一：试管苗的特点 子情景二：试管苗的培育 情景二：试管苗的移栽 子情景一：试管苗的移栽 子情景二：试管苗的苗期管理 子情景三：提高试管苗移栽成活率的途 径
子情境二：试管苗的苗期管理
1、保持小苗的水分供需平衡 在移栽后5-7d 内，应给予较高的空气湿度条件，使叶面的水 分蒸发减少，尽量接近培养瓶的条件，让小苗 始终保持挺拔的状态 2、防止菌类滋生 对基质进行高压灭菌或烘 烤灭菌 3、环境条件 适宜的生根温度是18-20度，在 光照管理的初期可用较弱的光照 ，后期可直接 利用自然光照。促进光合产物的积累，增强抗 性，促其成活 4、保持基质适当的通气性 要选择适当的颗 粒状基质，保证良好的通气作用。
（完整版）组培苗的炼苗方法
（完整版）组培苗的炼苗方法试管苗的炼苗和移栽一、目的要求熟练掌握组培苗移栽驯化技术。
二、用品1、材料：生根组培苗；2、器具用品：镊子；水盆；蛭石、珍珠岩、草木灰；育苗盘；喷雾器；竹签等。
三、方法与步骤（一）练苗将生根的组培苗从培养室取出，将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右，遮阴度宜为50%~70%。
然后打开瓶口，再放置3~7天。
（二）基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好，在高压灭菌锅中灭菌20分钟，或者采用高温干热灭菌法灭菌，灭菌后冷却备用。
（三）育苗盘准备取干净的育苗盘，将蛭石和珍珠岩按1：1混合，然后倒入育苗盘中，用木板刮平。
将育苗盘放入1－2cm深的水槽中，使水分浸透基质，然后取出备用。
（四）试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后涝出，放入干净的小盆中。
（五）移栽用竹签在基质上打孔，将小苗栽入育苗穴盘中，轻轻覆盖、压实。
待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。
最后将育苗盘摆入到驯化室中，正常管理。
四、作业记录试管苗移栽驯化步骤，统计移栽成活率。
解释：1、闭瓶强光练苗。
当生根后或根系得到基本发育后，将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右，遮阴度宜为50%~70%。
2、开瓶强光练苗。
将培养容器的盖子或塞打开，在自然光下进行开瓶练苗3~7天，正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。
如果在开盖容器中培养不超过1周，一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。
开瓶炼苗可以分阶段进行，即首先松盖（或塞）一两天，然后部分开盖一两天，最后完全揭去盖。
这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。
培养容器的开口大小也影响开盖的速度，开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。
3、试管苗的移栽。
试管苗移栽是组织培养过程的重要环节，这个工作环节做不好，就会造成前功尽弃。
试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出，彻底清洗干净根部。
S8实验八试管苗的驯化与移栽（理论）
S8实验八试管苗的驯化与移栽（理论）实验八试管苗的驯化与移栽（理论）一、植物种质资源保存概念及类型植物种质资源保存是指利用天然或人工创造的适宜环境保存种质资源，使个体中所包含的遗传物质保持其遗传完整性和活力，并能通过繁殖将其遗传特性传递下去。
其保存类型有两种，即原生境保存和非原生境保存。
1、原生境保存是将植物的遗传材料保存在它们的自然环境中。
原生境保存的地方多是植物保护区，是保存植物整个群落的最好方法。
另一种方法为农田种植保存，即将原生境植物种植在农田中进行保护。
如云南水稻。
2、非原生境保存是将植物的遗传材料保存在不是它们的自然生境的地方。
非原生境保存方式有植物园、种子库、种质圃、试管苗库、超低温库等，具体保存方法有四种，即种植保存、贮藏保存、离体保存和基因文库保存。
二、种质资源离体保存离体保存方法有低温保存、超低温保存和生长抑制剂保存三种方法。
（一）低温保存是一种缓慢生长保存方法，是通过控制培养温度来限制培养物各种生长因子的作用，使培养物生长减少到最低限度。
低温保存的基本特征是保存材料的定期继代培养，不断繁殖更新；基本措施是控制保存材料所处的温度和光照。
一般，5—10℃适宜保存温带起源植物的试管苗，15—18℃可用于热带植物试管苗的保存。
除了温度的控制之外，适当缩短光照时间，降低光照强度，也能减缓材料的生长速度，延长保存时间。
延缓保存材料生长速度的另一项措施是改变培养基的成分。
种质库要定期检查，保持清洁，及时清除污染材料，并注意积累资料。
（二）超低温保存也叫冷冻保存，一般以液N2为冷源，使保存温度维持在-196℃。
1、保存原理低温冰冻过程中，如果生物细胞内水分结冰，细胞结构就遭到不可逆的破坏，导致细胞和组织死亡。
植物材料在超低温条件下之所以可以长期保存并能在离开保存环境后正常进行细胞分裂和分化就是在冰冻过程中避免了细胞内水分结冰，并且在解冻过程中防止细胞内水分次生结冰而达到植物材料保存目的。
植物细胞含水量大，冰冻保存难度大，投放液N2中易引起组织和细胞死亡，故须借助于冷冻防护剂，防止细胞冰冻或解冻时引起过度脱水而遭到破坏，保护细胞。
试管苗的移栽咸宁职业技术学院
基质灭菌方法：
高压灭菌 至少3h烘烤灭菌 培养基质中掺人75％的百菌 清可湿性粉剂200-500倍液
2、栽培容器
可用6×6cm-10×l0cm的软塑料钵 或育苗盘。
3、移栽场所
日光温室 塑料大棚 驯化室
（三）移栽注意事项
1.保持小苗水分供需平衡 1周内环境高湿，遮光。 2.防止菌类滋生 培养基质进行灭菌； 移栽时少伤苗；
二、试管苗的驯化 1、驯化的目的
提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高光合 能力，使试管苗健壮，提高试管苗移栽成活率。
2、驯化的原则
调节温湿光和无菌等环境要素，开始和培养条件
相似，后期与预计栽培条件相似。
3、驯化方法
即炼苗。移栽前将培养 物不开口移到自然光照下锻 炼2-3d，让试管苗接受强光 的照射，使其长得壮实起来， 然后再开口练苗5-7d，经受 较低湿度的处理，以适应将 来自然湿度的条件。
芦荟炼苗
三、试管苗的移栽
1、移栽工艺流程
基质先 浇透水 洗掉根部 培养基 基质中 插孔 小苗 栽入孔
取出小苗
移入 高湿环境
轻浇水
苗周基质 压实
（二）移栽条件要求
1、移栽用基质要求
透气性好
保湿性强
一定的肥力
容易灭菌 不利于杂菌滋生
几种常用移栽基质及其配比
珍珠岩，蛭石，草炭土或腐殖土：1：1 ：0.5 砂子：草炭土或腐殖土：1 ：1
喷水加0.1%尿素或1/2MS大量元素液追肥， 加快苗生长。
（三）移栽注意事项
3.给予一定温光条件
适宜生根温度：18－20℃，温度低可加 地热线； 移栽初期弱光，后逐渐加强光照，过渡 到自然光照。
四、组培苗苗期管理
栽培基质：要选择适当的颗粒状基质，保证 基质良好的通气作用。
大花蕙兰试管苗的驯化及移栽技术
供试 材 料 系 红 色 系 大 花 蕙 兰 品 种 ， 商 品 名 为 来 福 神 （ Ｃ ｙ ｍ． Ｆ ｕ ｋ ｕ ｎ ｏ ｋ ａ ｍ） ， 以健壮母株假 鳞茎上新生 侧芽作 为外植 体诱 导出的原球茎 ， 经增殖 、 壮 苗和生根三大过程得到待 出瓶
中图分类号 ： ￥ ６ ８ ２ ． ３ １ ０ ． ４ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ７－ ０ １ ８ ７— ０ ２
大花蕙 兰 （ Ｃ ｙ ｍｂ ｉ ｄ ｉ ｕ ｍ ｈ ｕ ｂ ｒ ｉ ｄ ｕ ｍ） 别 称虎 头兰 ， 是一 种 观 赏价值很 高的洋兰 ， 其 花朵 硕大 ， 枝 叶俊 秀 ， 深受 兰花爱好者 的欢迎 ， 也是春节消费的高档盆花 …。但是 ， 由于大花蕙兰多
石（ ３ Ｏ ％） 、 兰花土、 腐熟药渣 ５ 种材料。移栽前 ， 所有基质均经 过高温消毒 ， 以防感染。每个试验组 ２ ０株试管苗 ， ３次重复 ， 温室管理 ， ３ ０ ｄ后调查成 活率 、 叶片增 量及 生长情况。成 活率
及 叶片增量按 以下 公式计 算 ： 成 活率 ＝成 活 移 栽 总数 ×
为杂交品种 ， 种子繁殖无法保持其 品种特性 ， 且 结实率也相 当 低， 分株能力又很弱 ， 因而繁殖系数极 低 ， 繁殖速度慢 ， 远远不
Ｉ ． ２ ． Байду номын сангаас ． ３ 管理方法
保持温室 内温度为 ｌ ５— ２ ８℃ ， 最低不
低于 １ ５℃ ， 最 高不能高 于 ３ ２℃ ； 照度为 ５ ０ ０ ０—８ ０ ０ ０ Ｉ ｘ ； 移 栽后用喷雾器喷水 １— ２次／ ｄ ， 前 ２周湿度为 ８ ０ ％～ ９ ０ ％， 以
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⑵高湿 植物组织培养中试管或培养瓶内的水分移动有两条途径: 一是试管苗吸收的水分，从叶面气孔蒸腾； 二是培养基向外蒸发，而后水汽凝结又进入培养基。 这种循环就是培养瓶内的水分循环，其循环结果造成培养瓶内空气相对湿度接近于100%，远远大于培养瓶外的空气湿度，所以试管苗的蒸腾量极小。可见培养瓶内的水分状态直接影响着试管苗的生长和各种生理活性。
（4）驯化的方法 试管苗驯化的方法通过增加小环境湿度、减弱光照、降低温度等变化，然后逐渐降低湿度、增加光照、增加温度至自然状态。通过这样的湿度由高至低、光照由弱至强、温度由低至高的炼苗过程，使它们在生理、形态、组织上发生相应的变化，逐渐地适应外界的自然环境。
具体做法移栽前将培养物不开口移到自然光照下锻练2－3天，让试管苗接受强光的照射，使其长得壮实起来，然后开口练苗1－2天，经受较低湿度的处理，以适应将来自然湿度的条件。
在试管苗驯化过程中其最大的障碍是湿度。 因为试管苗叶片角质层不发达，叶片通常没有表皮毛，或仅有较少表皮毛。叶片上甚至出现了大量的水孔，此外，气孔的数量、大小也往往超过普通苗。当将它们直接移栽到自然环境中，试管苗蒸滕作用极大，失水率很高，非常容易死亡。所以驯化过程中要精心照看，加强水分管理，确保驯化成功。
移栽过程中常遇到的问题： 有小苗移栽后，环境条件突然聚变（比如营养物质、生长调节剂、温度、光照等方面）以至死亡； 移栽后失水变干； 真菌病害引起污染死亡； 移植时正值小苗进入休眠，不易成活。 因此要采取有效方法来提高成活率。
解决这些问题： 进行炼苗。炼苗的方法过程要人为精心的控制管理。 选择好的定植的场所。应选择通风良好，灌溉方便，光照充足的温室或塑料大棚。配制好的基质要疏松、透水、透气。为防治病虫害还可以事先对基质进行高温灭菌。 要严格掌握移栽技术。保证试管苗根的质量高，清洗时根上的琼脂要洗干净，并且不要用力过重以至伤根。 移栽后要进行管理工作。