小鼠白介素6试剂盒的实验原理和操作步骤
白介素6化学发光
白介素6化学发光白介素6（Interleukin-6，简称IL-6）是一种细胞因子，它在免疫系统中发挥着重要的调节作用。
除了免疫系统，IL-6还参与了多个生理和病理过程，包括炎症反应、细胞增殖、分化和存活等。
近年来，研究人员发现IL-6还具有化学发光的特性，这为生物医学研究和临床诊断提供了新的工具和方法。
化学发光是指在某些特定条件下，物质能够发出可见光或紫外光的现象。
通常情况下，化学发光需要通过外界能量激发物质，使其处于激发态，然后在返回基态的过程中释放出光子。
而IL-6的化学发光是通过特定的化学反应来实现的。
IL-6化学发光的原理是利用酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）的基本原理。
ELISA是一种常用的生化分析方法，用于定量检测特定蛋白质或其他生物分子在样品中的含量。
而IL-6化学发光ELISA则在传统的ELISA基础上进行了改进，使其能够发出可见光信号。
IL-6化学发光ELISA的具体步骤如下：首先，将含有待测IL-6的样品加入特定的试剂盒中，并与盒内的抗体结合。
然后，加入特定的底物，底物在酶的作用下发生化学反应，产生可见光。
最后，使用专用的发光仪器测量发出的光信号的强度，根据光信号的强弱来确定样品中IL-6的含量。
IL-6化学发光ELISA具有许多优点。
首先，它具有高灵敏度和高特异性，能够准确地检测到极低浓度的IL-6。
其次，它的操作简便，不需要复杂的仪器和昂贵的试剂，适用于大规模的样品检测。
此外，IL-6化学发光ELISA还可以同时检测多个样品，提高工作效率。
IL-6化学发光在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用。
在生物医学研究中，IL-6化学发光可用于研究IL-6在免疫系统中的调节机制，以及其在炎症、肿瘤和自身免疫性疾病等疾病中的作用。
在临床诊断中，IL-6化学发光可用于早期诊断和监测炎症性疾病、肿瘤和感染等疾病的进展。
白介素6检测试剂注册技术审评指南
附件1白介素6检测试剂注册技术审评指南本指南旨在指导注册申请人对白介素6检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门审评注册申报资料提供参考。
本指南系对白介素6检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。
本指南是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其它方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。
应在遵循相关法规的前提下使用本指南。
本指南是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指南相关内容也将适时进行调整。
一、适用范围白介素6检测试剂是指利用抗原抗体反应的免疫学方法对人血清、血浆、全血中的白介素6（Interleukin 6, IL-6）进行体外定量检测的试剂。
本指南适用于以酶标记、（电）化学发光标记、（时间分辨）荧光标记等方法标记抗体，以微孔板、管、磁颗粒、微珠和塑料珠等为载体的定量检测白介素6的免疫分析试剂。
不适用于免疫层析法以及单独申请注册的白介素6校准品和质控品。
根据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）、《体外诊断试剂注册管理办法修正案》（国家食品药品监督管理总局令第30号）和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号），白介素6检测试剂管理类别为Ⅱ类，分类编码为6840。
本指南适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品。
二、注册申报资料要求（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、有关生物安全性方面的说明、研究结果的总结评价以及同类产品在国内外上市情况介绍等内容。
综述资料应符合《体外诊断试剂注册管理办法》和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014年第44号）的相关要求。
白介素6(IL-6)测定试剂盒产品技术要求深圳市锦瑞生物
白介素6（IL-6）测定试剂盒
（化学发光免疫分析法）
2性能指标
2.1外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固；外观和性状应符合表2 要求。
表 2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2装量
试剂盒内各组分装量应不少于标示值。
2.3准确度
用国际标准品或具有溯源性的正确度控制品作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应在±10%范围内。
2.4空白限
应不大于 1.4 pg/mL。
2.5线性
试剂盒在 1.5 pg/mL～5000 pg/mL 区间范围内，其线性相关系数r≥0.9900。
2.6重复性
用试剂盒质控品L 和质控品H 作为样本，重复检测10 次，其变异系数（CV）
应不大于7%。
2.7批间差
用3 个批号试剂盒分别检测同一瓶质控品L 和质控品H，3 个批号试剂盒之间的批间变异系数（CV）应不大于9%。
2.8质控品测定值
用试剂盒配套的校准品校准测量系统后，以试剂盒配套的质控品作为样本进行检测，其测定结果应在标示范围内。
2.9质控品均一性
瓶间变异系数（CV）应不大于10%。
2.10校准品测量准确度
用工作校准品校准测量系统后，以试剂盒配套的校准品作为样本进行检测，其测定结果与标示值的相对偏差应在±10%范围内。
2.11校准品均一性
瓶间变异系数（CV）应不大于10%。
白介素—6(IL—6)测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求瑞辉
医疗器械产品技术要求编号：
白介素-6(IL-6)测定试剂盒（荧光免疫层析法）
2.性能指标
2.1.物理性状
2.1.1.外观
试剂卡外观平整，材料附着牢固；
样本稀释液为无色透明液体，无悬浮物及沉淀物；
2.1.2.净含量
样本稀释液净含量应在标示值的 90%-110%之间；
稀释液标示值：300μl。
2.1.
3.膜条宽度
膜条宽度应不小于 3.9mm。
2.1.4.液体移行速度
液体移行速度应不低于 25mm/min。
2.2.最低检出限
最低检出限≤3pg/ml。
2.3 .线性范围
试剂的线性范围为（3-1000）pg/ml，在此线性范围内，线性相关系数 r 应不小于 0.990。
2.4.测量精密度
2.4.1.重复性
用质控品重复测试，所得结果的变异系数（CV）≤15%；
2.4.2.批间差
用质控品重复测试 3 个批号的试剂盒，所得结果的变异系数（CV）≤15%。
2.5.准确度
回收率在 85%-115%之间。
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白介素6测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 产品技术要求新产业
2. 性能指标
2.1 外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；包装标签应清晰，准确、牢固；试剂盒内组分（磁性微球除外）应为澄清的液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2 批内精密度
批内变异系数（CV）应≤8%。
2.3 批间精密度
批间变异系数（CV）应≤15%。
2.4 准确度
回收率应在（90.0%~110.0%）范围内。
2.5 空白限
空白限应≤0.500 pg/mL。
2.6 线性
在（1.500~5000）pg/mL浓度区间内，线性相关性系数（r）绝对值应≥0.9900。
2.7 校准品均一性
）应≤8%。
校准品均一性（CV
均一性
2.8 质控品预期结果
质控品1每次测定结果应在（28.0~52.0）pg/mL范围内，质控品2每次测定结果应在（175~325）pg/mL范围内。
2.9 质控品均一性
质控品均一性（CV
）应≤8%。
均一性。
四正柏生物 小鼠IL-6 ELISA试剂盒说明书
REV20190712仅供研究，不用于临床诊断。
客服热线: 400-7060-959﹡技术支持邮箱: **************公司官网: 目录简介 ........................................................................................................................................................... - 3 -检测原理 ................................................................................................................................................... - 3 -试剂盒组分 ............................................................................................................................................... - 4 -储存条件 ................................................................................................................................................... - 5 -其他实验材料(不提供，但可协助购买) : ............................................................................................. - 5 -注意事项 ................................................................................................................................................... - 5 -样本收集处理及保存方法 ....................................................................................................................... - 6 -试剂准备 ................................................................................................................................................... - 6 -操作步骤 ................................................................................................................................................... - 8 -操作流程图 ............................................................................................................................................... - 8 -操作要点提示 ........................................................................................................................................... - 9 -结果判断 ................................................................................................................................................... - 9 -结果重复性 ............................................................................................................................................. - 10 -灵敏度 ..................................................................................................................................................... - 10 -特异性 ..................................................................................................................................................... - 10 -参考文献 ................................................................................................................................................. - 10 -该产品由北京四正柏生物科技有限公司研制。
小鼠 IL-6 Elisa试剂盒
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；
4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。
Hirano, T. et al. (1986) Nature 324:73.
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
ELISA Kit for the Quantitative Analysis of Mouse IL-6
Introduction
Interleukin 6 (IL-6) is a multifunctional protein that plays important roles in host defense, acute phase reactions, immune responses, hematopoiesis and differentiation of nervous system. The IL-6 gene product is a single chain protein with a molecular mass ranging from 21 to 28 kDa, depending on the cellular source.IL-6 proteins are expressed by variety of cells, such as T cells, macrophages, fibroblasts, hepatocytes, vascular endothelial cells. Since IL-6 plays a wide variety of biological functions, it is also known as interferonβ2 (IFN-β2), B cell stimulating factor-2 (BSF-2), hybridoma growth factor, hepatocyte stimulating factor, cytotoxic T-cell differentiation factor, or macrophage & granulocyte inducer (MGI-2A).
Elabscience
（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-UNEL-M0070产品规格：96T*5/96T*15Elabscience®未包被小鼠白介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Uncoated Mouse IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆样本中IL-6浓度。
试剂盒组成及保存试剂体积以实际发货版说明书为准。
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
其他所需试剂ELISA辅助组分试剂盒(Ancillary Reagent Kit，货号：E-ELIR-K001)：包含完成96T*5规格ELISA实验的全套辅助试剂。
或有其他实验需求，可单独购买以下辅助试剂产品：或自行配制指标通用性辅助试剂。
(注：下列配方均为各试剂的基础组分，可根据实验需求和实验结果对配方进行优化)●包被液：1xCBS●封闭液：1xPBS，保护性蛋白●洗涤液：3%Tris●样本稀释液：1xPBS, 保护性蛋白●抗体/酶结合物稀释液：1xPBS, 保护性蛋白●终止液：5%硫酸试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网：/List-detail-241.html) 1.血清：全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
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小鼠白介素6试剂盒的实验原理和操作步骤
实验原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被白介素6(IL-6)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。
所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。
使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。
在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。
温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。
任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。