菌落计数及报告方法
实验四食品中细菌菌落总数的测定
4、若所有稀释度平板菌落数均<30， 则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍 数计算。
5、若所有稀释度平板均无菌落生长， 则应按<1乘以最低稀释倍数计算。
6、若所有稀释度均不在30～300之间， 有的>300，有的又<30，则应以最接近 300或30的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
（四） 菌落计数报告方法
（二） 菌落记录方法 做平板菌落数记录时，可用肉眼观察
，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在 记下各皿的菌落总数后，求出同稀释 度的各平板平均菌落数。
到达规定培养时间，应立即计数。如果 不能立即计数，应将平板放置于0～4℃ ，但不要超过24h。
1、 平皿菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作
例如：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数 232，244
33，35
232+244+33+35 (2+0.1×2) ×10-2
=544/0.022=24727
四舍五入表示为: 2.5 × 104
3、 若所有稀释度的平板菌落数均 >300，则取最高稀释度的平均菌落数乘 以稀释倍数计算。
酱油（GB/T2717-2003）： 细菌菌落总数： ≤30000 CFU/mL 大肠菌群： ≤30MPN/100mL 肠道致病菌： 不得检出
全脂奶粉、脱脂奶粉（GB5410-1999）：
特级 一级 二级
细菌菌落总数：≤20000 ≤30000 ≤50000
（CFU/ml）
大肠菌群
≤40
≤90
≤90
一、 目的
1、 学习并掌握食品中菌落总数测定方 法和原理。 2 、了解菌落总数测定在对被样品进行 卫生学评价中的意义 。
003菌数报告规则
（一）菌落计数1．细菌培养时间为72小时（3天），、分别在24小时及48小时，72小时，点记菌落数，一般以72小时菌落数为准，2：霉菌、酵母菌培养时间为120小时（5天），分别在48小时及72小时点记菌落数，一般以小时菌落数为准。
点计后，计算各稀释级的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。
3．一般将平皿置菌落计数器或从平皿的背面直接以肉眼点计，以透射光衬以暗色背景，仔细观察。
勿漏计细小的琼脂层内和平皿边缘生长的菌落。
注意细菌菌落与霉菌菌落和酵母菌菌落以及它们与供试品颗粒、培养基沉淀物、气泡等的区别。
【必要时用放大镜或用低倍显微镜直接观察或挑取可疑物涂片镜检。
如仍难区别，可延长培养时间4～7天，细菌菌落常会生长增大而加以区别。
】（4．供试品如为微生物制剂，应将有效微生物菌落排除，不可点记在细菌、霉菌和酵母菌数内。
排除的方法须按该制剂微生物品种而定，并须观察菌落特征及染色形态。
）5．供试品稀释液常含有不溶性原料、辅料，（特别是1：10级别），培养基注皿后亦可能产生沉淀物，经过培养后有时形成数量很多且难与菌落用肉眼相区别的有形物。
（为了有利于菌落计数，可在操作时将适宜稀释级的供试液多增加注皿（1～2个平皿），注皿后不经培养而放置于冰箱（勿结冻）中，在计数菌落时作为对照。
或用0.001％TTC营养琼脂注皿，经培养后可将细菌菌落与其他有形物区别开来。
［0.001%TTC肉汤琼脂培养基（0.001%2、3、5氯化三苯四氮唑琼脂），TTC即为：2、3、5氯化三苯四氮唑琼脂在每1000ml营养琼脂内加入灭菌的1％TTC溶液1ml混匀后倾注平皿，防止菌落蔓延］。
）有些软膏等非水溶性供试品：经营养琼脂注皿后呈乳白色，培养后生长的菌落不易辨认和点计，【为防止这种情况，也可用0.001％TTC营养琼脂注皿，经培养后生长的菌落为红色，衬以白色背景上易于点计。
】若平板上有2个或2个以上菌落重叠，肉眼可辨别时仍以2个菌落或2个以上菌落计数；若片状菌落不到平板的一半,而余下的一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2代表全平板菌落数.若生长蔓延较大的片状菌落或花斑样菌落，一般不宜作为计数用。
微生物菌落计数实验报告
微生物菌落计数实验报告实验目的：本实验旨在通过微生物菌落计数方法，确定水样中细菌和真菌的菌落数，以评估水质的卫生安全水平。
实验原理：微生物菌落计数是一种常用的微生物计数方法，通过将待检测样品在适当培养基上培养，促使微生物菌落形成，然后用目镜进行观察计数。
细菌和真菌在不同培养基上生长的特性不同，利用这一特性可以分别计数。
瓶子计数法和平板计数法是常用的微生物菌落计数方法。
实验步骤：1. 做好消毒准备，将取样瓶开盖，取适量水样。
2. 用无菌移液管分别移取水样至含有不同培养基的培养皿中。
3. 均匀涂抹样品，覆膜，进行培养。
4. 培养后观察培养皿上的菌落形成情况，用计数板进行计数。
5. 计算出每毫升水样中的微生物菌落数。
实验结果：根据观察和计数，得出水样中细菌和真菌的菌落数分别为XXX CFU/mL和XXX CFU/mL。
实验分析：通过微生物菌落计数实验，我们可以了解水质中微生物的富集情况，评估水样的卫生安全性。
根据实验结果，可以判断水样是否存在污染，进而采取相应措施提高水质。
结论：微生物菌落计数实验是一种简单而有效的水样检测方法，可以帮助我们及时了解水质情况，保障人们的健康。
在日常生活中，我们应该重视水质安全问题，做好水质检测和管理工作。
实验注意事项：1. 操作时要保持无菌环境，避免外界微生物的污染。
2. 操作时要注意个人防护，避免实验中发生意外伤害。
3. 实验后要及时处理实验用具，保持实验室整洁。
通过微生物菌落计数实验，我们可以更深入了解水质情况，及时采取措施改善水质，保障人们的生活健康。
愿我们在未来的生活中，都能享受清洁卫生的水资源，健康快乐地生活。
食品微生物检验技术GB4789.2-2010 菌落总数测定
2. 培养 (1) 待琼脂凝固后，将平板翻转，36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h。水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h。 (2) 如果样品中可能含有在琼脂培养基表 面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂 表面覆盖一薄层 琼脂培养基（约 4 mL）， 凝固后翻转平板，按 36 ℃±1 ℃培养 48 h±2 h（水产品 30 ℃±1 ℃培养 72 h±3 h）条件进行培养。
GB 4789.2-2010 食品安全国家标 准 食品微生物学检验 菌落总数测定
一、设备和材料 二、培养基和试剂 三、检验程序 四、操作步骤 五、结果与报告
一、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和 材料如下： (1) 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。 (2) 冰箱：2 ℃～5 ℃。 (3) 恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。 (4) 天平：感量为 0.1 g。 (5) 均质器。 (6) 振荡器。 (7) 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度）、10 mL（具 0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。 (8) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL。 (9) 无菌培养皿：直径 90 mm。 (10) pH 计或 pH 比色管或精密 pH 试纸。 (11) 放大镜或/和菌落计数器。
三、 检验程序
检
样
25g(ml)样品+225ml稀释液，均质
10倍系列稀释
选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液， 各取1ml分别加入无菌培养皿内 每个皿中加入15ml~20ml平板计 数琼脂培养基，混匀 培养 计数各平板菌落数 计算菌落总数 报告
四、操作步骤
1. 样品的稀释
(1) 固体和半固体样品：称取 25 g 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓冲 液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质 1 min~2min，或放入盛有 225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击 式均 质器拍打 1 min～2 min，制成 1:10 的样品匀液。 (2) 液体样品：以无菌吸管吸取 25 mL 样品置盛有 225 mL 磷酸盐缓 冲液或生理盐水的无菌锥形瓶 （瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠） 中，充分混匀，制成 1:10 的样品匀液。 (3) 用 1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1 mL，沿管 壁缓慢注于盛有 9 mL 稀释液的 无菌试管中（注意吸管或吸头尖 端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1 支无菌吸管反复吹打 使其混 合均匀，制成 1:100 的样品匀液。
细菌菌落测定实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌菌落总数测定的原理和方法。
2. 学会使用细菌菌落计数器，并正确操作。
3. 通过实验了解不同样品中细菌菌落的生长情况，评估样品的卫生质量。
二、实验原理细菌菌落总数（Colony Forming Units, CFU）是指在一定条件下，一个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的可见菌落数量。
通过测定样品中的细菌菌落总数，可以评估样品的卫生质量。
实验原理基于以下步骤：1. 样品处理：将样品进行适当的稀释，以便在平板上形成单菌落。
2. 平板培养：将稀释后的样品涂布在含有营养物质的平板上。
3. 培养与计数：在一定温度下培养平板，待菌落生长成熟后，使用菌落计数器进行计数。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 样品：食品、水、土壤等。
- 培养基：营养琼脂平板。
- 稀释剂：生理盐水、无菌水等。
- 菌落计数器。
- 无菌操作台、无菌棉签、镊子等。
2. 实验仪器：- 电热恒温培养箱。
- 电子天平。
- 移液器。
- 烧杯。
- 移液管。
四、实验步骤1. 样品处理：- 称取适量样品，用无菌水进行10倍递增稀释。
- 将稀释后的样品分别取1mL，涂布在营养琼脂平板上。
2. 平板培养：- 将涂布好的平板倒置放入电热恒温培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。
3. 菌落计数：- 使用菌落计数器，在显微镜下观察菌落，记录每个平板上的菌落数。
- 计算每个样品的细菌菌落总数。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 样品A：细菌菌落总数为2.5×10^6 CFU/g。
- 样品B：细菌菌落总数为1.2×10^5 CFU/g。
- 样品C：细菌菌落总数为8.0×10^3 CFU/g。
2. 分析：- 样品A的细菌菌落总数较高，可能存在一定的卫生问题。
- 样品B的细菌菌落总数较低，卫生质量较好。
- 样品C的细菌菌落总数最低，卫生质量最佳。
六、实验结论通过本次实验，我们成功掌握了细菌菌落总数测定的原理和方法。
菌落计数及报告方法
菌落计数及报告方法1、目的建立微生物实验中菌落计数及报告规范，从实际生长的菌落数中计算出较为科学的结果2、方法说明本文件采用平板计数法，产品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下生长的微生物总数。
3、参考文件GB7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定4、菌落计数方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数。
5菌落计数及报告方法5.1 首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数侧定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) ,5.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ，应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2及例3),5.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)，5.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5),5.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在 30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30 或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6),5.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10 个。
5.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。
菌落总数计数和报告
（三）计数和报告1．操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。
可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。
2．到达规定培养时间，应立即计数。
如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。
3．计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落），若有二个稀释度均在30~300之间时，按国家标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。
4．若所有稀释度均不在计数区间。
如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。
如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30~300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。
有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。
5．不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。
如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据。
6．当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。
如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。
7．当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时），但分布很均匀，可取平板的一半或1/4计数。
再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。
细菌菌落数实验报告
一、实验目的1. 了解细菌菌落总数的测定方法。
2. 掌握细菌菌落总数的计数技巧。
3. 分析实验数据，探讨影响细菌菌落数的因素。
二、实验原理细菌菌落总数（Colony-Forming Units，CFU）是指在一定条件下，一个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的肉眼可见的菌落。
通过测定一定量样品中的细菌菌落数，可以评估样品的卫生状况和微生物污染程度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：肉膏蛋白胨脂培养基、无菌水、无菌试管、无菌吸管、无菌培养皿、细菌样品等。
2. 实验仪器：高压蒸汽灭菌锅、电热培养箱、恒温箱、电子天平、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理：取一定量的细菌样品，加入适量的无菌水，进行10倍递增稀释。
2. 制备平板：将肉膏蛋白胨脂培养基加热融化，待冷却至45-50℃时，用无菌吸管吸取适量稀释液，均匀涂布在培养皿上。
3. 培养与观察：将涂布好的培养皿倒置放入恒温箱中，37℃培养24小时。
4. 菌落计数：观察培养皿上的菌落，按照菌落形态、大小、颜色等特征进行计数。
5. 数据分析：根据实验数据，计算样品中的细菌菌落数。
五、实验结果与分析1. 实验结果本次实验中，样品A的细菌菌落数为3.2×10^6 CFU/g，样品B的细菌菌落数为1.5×10^5 CFU/g。
2. 结果分析（1）样品A的细菌菌落数明显高于样品B，说明样品A的微生物污染程度较重。
（2）实验过程中，操作人员的无菌操作对实验结果有一定影响。
无菌操作不规范可能导致样品受到污染，从而影响细菌菌落数的准确性。
（3）培养温度和时间对细菌菌落数也有一定影响。
本次实验采用37℃培养24小时，适用于大多数细菌的生长。
若培养温度过低或过高，或者培养时间不足，可能导致细菌菌落数偏低。
六、实验结论本次实验成功测定了样品中的细菌菌落数，结果表明样品A的微生物污染程度较重。
实验过程中，应注意无菌操作，严格控制培养温度和时间，以保证实验结果的准确性。
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菌落计数及报告方法
1、目的
建立微生物实验中菌落计数及报告规范，从实际生长的菌落数中计算出较为科学的结果
2、方法说明本文件采用平板计数法，产品中污染的细菌种类不同，每种细菌都有它一定的生理特性，培养时对营养要求，培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等均有所不同。
在实际工作中，不可能做到满足所有菌的要求，因此所测定的结果，只包括在本方法所使用的条件下生长的微生物总数。
3、参考文件GB7918.2-1987化妆品微生物标准检验方法细菌总数测定
4、菌落计数方法先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5～10倍的放大镜检查，以防遗漏。
记下各平皿的菌落数后。
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。
若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘2，以代表全皿菌落数。
5菌落计数及报告方法
5.1 首先选取平均菌落数在30～300之间的平皿，作为菌落总数侧定的范围。
当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数(见表中例1) ,
5.2 若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300个之间，则应求出两者菌落总数之比值来决定。
若其比值小于或等于2 ，应报告其平均数，若大于2则报告其中较小的菌落数( 见表中例2及例3),
5.3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例4)，
5.4 若所有稀释度的平均菌落数均少于30个，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例5),
5.5 若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300个之间，其中一个稀释度大于300个，而相邻的另一稀释度小于30个时，则以接近30 或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表中例6),
5.6 若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每克或每毫升小于10 个。
5.7 菌落计数的报告，菌落数在10以内时，按实有数值报告之，大于100时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。
为了缩短数字后面零的个数，可用10的指数来表示(见下表报告方式栏)。
在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。