分光光度法 双波长
物质含量m( )
结果( )
平均值平均( )
工作
曲线
序号
1
2
34Biblioteka 5678
9
含量( )
吸光度值A( )
吸光度值A( )
计算吸光度值(A)
线性方程
相关系数
计算公式
式中：：样品中物质浓度，；m：样品中物质含量，；
( )：取样量，。
实验步骤
备注
光度法检验原始记录(双波长)附页
检测项目
样品名称
样品编号
取样量（）
()
定容体积V1(mL)
稀释因子f
样品吸光度值A( )
样品吸光度值A( )
样品计算吸光度值A1
物质含量m( )
结果( )
平均值平均
()
备注
光度法检验原始记录(双波长)
样品名称样品编号
检验项目检验依据
检出限仪器编号
波长(nm)比色皿规格(cm)温度(℃)湿度(%RH)
标准溶液浓度检测日期
序号
1
2
取样量( ) ( )
定容体积V1( mL )
稀释因子f
空白吸光度值A’( )
空白吸光度值A’( )
空白计算吸光度值A0
样品吸光度值A( )
样品吸光度值A( )
§2.2 双波长和三波长分光光度法
2和K1分别为在λ2和 λ1处的放大系数；组分A和B 在λ2和 λ1处的吸光度分别为
A B A B A 、 A 和 A 、 A 2 1 1，则 2
S＝K2 A2＋K2 A2－K1 A1－K1 A1
调节仪器中的信号放大 器，使干扰组分B在波长λ2 和λ1处的信号相等，由此得 系数倍率K为：
第二节 双波长和三波长分光光度法 一．双波长分光光度法的原理
双波长分光光度法是在传统的单波长分光度法的基础上发 展起来的。单波长分光光度法要求式样本身透明，不能有混 浊，如果是试样溶液在测量过程中逐渐产生浑浊便无法正确 测定。对于吸收峰相互重叠的组分或背景很深的试样分析， 也很难得到准确的结果。 双波长分光光度法的建立，在一定程度上克服了单波长 法的局限性，扩展了分光光度法的应用范围，在选择性、灵 敏度和测量精密度等方面都比单波长法有进一步的改善和提 高。
二． 三波长分光光度法的原理和应用
1．基本原理
如图所示，在任一吸 收曲线上，可以在任意选 择的三个波长处测量吸光 度。根据三角形和三角形 相似，可推导出在上述三 个波长处测量的吸收度具 有下列函数关系： 三波长法原理图
式中，m和n分别表示(2 -1)和(3 -2)的数值。1、2和3 分别为待测物在三波长处的摩尔吸光系数；C为待测物的摩尔浓 度；b为光程。方程中的系数 可预先求得，A值 与待测物浓度成正比，因而可通过曲线求出样品中待测组分的 含量。 从上图可知，如选择的三个波长相应于吸收曲线上三点处 于一条直线上，则测得的A值为零。因此，当干扰组分的吸收 光谱为一直线（如浑浊产生的干扰），则在任选的三个波长处 测定，测得的值与干扰物浓度无关，如果干扰物为一吸收曲线， 只要在曲线上找到处在一条直线上的三点，在此三点相应的波 长处测定，由于干扰物在此三波长处的值为零，故测得的只与 待测组分的浓度有关。
双波长分光光度法测药品含量偏低的原因
双波长分光光度法是一种常用的药品含量测定方法，其原理是利用物质在不同波长下吸光度的差异来测定样品的含量。
然而在实际的药品生产和质量控制过程中，有时会出现药品含量偏低的情况，而双波长分光光度法测得的结果也会出现偏差。
那么，造成药品含量偏低的原因是什么呢？1. 药品成分不均匀药品在生产过程中，可能会出现成分不均匀的情况。
这可能是由于原料混合不均匀、加工过程中受热不均、或者贮存条件不当等因素导致的。
当药品成分不均匀时，使用双波长分光光度法测定含量就会出现偏低的情况。
2. 良品率不足在药品生产过程中，如果生产线上的设备不稳定或者操作不当，很可能会导致药品的良品率不足。
这样一来，部分药品的含量就会偏低，从而影响到双波长分光光度法的测定结果。
3. 样品制备不当样品的制备过程也是影响双波长分光光度法测定结果的关键因素之一。
如果样品制备不当，比如溶解不彻底、稀释比例错误等，都有可能导致测定结果偏低。
4. 仪器故障双波长分光光度法依赖于专用的分光光度计来进行测定，而仪器的精准度和稳定性直接影响着测定结果的准确性。
如果仪器发生故障或者未经过定期校准，就有可能导致测定结果偏低。
5. 操作不当操作人员的技术水平和操作规范也会对双波长分光光度法的测定结果产生影响。
样品的操作过程中如果没有按照要求操作，或者操作人员缺乏相关经验和训练，都有可能导致测定结果出现偏差。
导致药品含量偏低的原因包括药品成分不均匀、良品率不足、样品制备不当、仪器故障以及操作不当等多个方面。
在实际生产中，为了确保药品含量的准确性，需要从原料采购、生产工艺、仪器选择和操作规范等多个环节进行全面的管理和控制，以确保药品含量测定结果的准确性和可靠性。
在实际的药品生产过程中，药品含量偏低可能会给企业带来不小的损失，因为药品的含量不足会直接影响其疗效和安全性，甚至可能引发法律纠纷和产品召回。
对于药品含量偏低的原因以及如何预防和解决这一问题，企业必须高度重视，并加以有效管理。
双波长分光光度法同时测定溶液中的硝酸根和碘离子
双波长分光光度法同时测定溶液中的硝酸根和碘离子张慧芳;郭探;李权;叶秀深;吴志坚【摘要】食品和环境样品中往往同时含有硝酸根和碘离子,用紫外分光光度法直接测定硝酸根或碘离子时,二者相互干扰.为此建立了主、次波长分别为220.0、231.5 nm的等吸收点双波长紫外分光光度法测定溶液中的硝酸根和共存的碘离子.当溶液中硝酸根的浓度范围在0～0.12 mmol/L,碘离子的浓度在0～0.10 mmol/L时,主、次波长下的吸光度差值A220-231.5与溶液中硝酸根的浓度CNO3-呈良好线性关系,线性方程为A220-231.5=2.9958 CNO3-+0.0016(R2=0.99994)；其中A220( NO3-)=3.6099 CNO3-+0.0084(R2=0.99994),利用吸光度的加和性:A220 (I-)=A220-A220 (NO3-)=10.7394 CI-+0.0029(R2=0.99994),间接得到碘离子含量CI-.硝酸根和碘离子的平均相对标准偏差分别为0.6％、0.2％,回收率分别为99.5％～102％、99.9％～100％.方法简便快捷,可用于溶液中微量硝酸根和碘离子的同时测定.【期刊名称】《中国无机分析化学》【年(卷),期】2011(001)004【总页数】5页(P24-28)【关键词】硝酸根;碘离子;双波长分光光度法【作者】张慧芳;郭探;李权;叶秀深;吴志坚【作者单位】中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院研究生院,北京100049;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院研究生院,北京100049;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008;中国科学院青海盐湖研究所,西宁810008【正文语种】中文【中图分类】O657.32;TH744.12+21 引言工业废水、农田排水的不合理排放以及化肥使用量的不断增加，致使大量硝酸盐进入地下水［1－4］，也导致很多蔬菜中的硝酸盐含量超标［5］。
双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量
双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量目的建立双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量的测定方法。
方法样品操作及测定方法同重复性试验，平行操作5批样品，另按照中和滴定法测定，比较两种测定方法测定所得样品的百分标示量。
结果双波长法：99.2%，97.9%，98.5%，96.5%，98.2%；中和法：100.8%，98.7%，99.8%，97.1%，99.4%。
乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。
乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。
结论采用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，操作简单，所用试剂方便易得，通过两种试验方法的比较，效果较满意。
标签：双波长分光光度法；爱索尔感冒片；乙酰水杨酸；含量爱索尔感冒片是乙酰水杨酸和盐酸吗啉胍的复方制剂，原质量标准采用中和滴定法测定乙酰水杨酸含量，且操作繁琐，本文改用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，取得较满意的效果。
1 仪器与试药岛津UV-2100型紫外分光光度计；乙酰水杨酸对照品、盐酸吗啉胍对照品（符合中国药典2005年版规定）；乙醇为分析纯；爱索尔感冒片为市售品。
2 实验条件的选择精密称取乙酰水杨酸对照品适量，用乙醇配制成10ug/ml的溶液，按处方量配制盐酸吗啉胍溶液及辅料溶液，在200nm～300nm的波长范围内绘制吸收曲线。
结果表明：乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm 的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。
乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。
3 标准曲线的制备精密称取乙酰水杨酸约25mg和盐酸吗啉胍10mg，同置50ml量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度摇匀。
双波长双指示剂动力学分光光度法测定钴
２ 实 验
２ ． １ 主 要仪 器 与试 剂
７ ２ ２ Ｓ型分光光度计 （ 上海精密科学仪器有 限公 司） ； Ｆ Ａ ２ ０ ０ ４型 电子天平 （ 上海 良平仪器仪表有限公
司） ； Ｈ Ｈ一６数 显恒 温 水浴 锅 （ 国华 电器 有 限公 司 ） ． 钴（ Ｉ Ｉ ） 标 准溶 液 ： 称取 ０ ． ０ １ ３ １ ５ ｇ 无 水 硫酸 钴 于 １ ０ ０ ０ ｍＬ容 量瓶 中配 制成 含 钴 ５ ． ０ ０×１ ０ 一 ｇ ／ ｍＬ储 备
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３—０ １一ｌ ２
作者简介： 邵
鑫（ １ ９ ８ ６ 一 ） ， 女， 安徽淮北人 ， 硕士生， 研究方 向： 动力学光度 分析 ． 通讯作者： 张振新 （ １ ９ ６ ２ 一 ） ， 女， 河北 文安人， 教授
第 １ 期
邵 鑫等 ： 双波 长双 指 示剂 动 力学分 光光度 法 测定钴
建 立 了动 力 学 分 光 光 度 法 测 量 痕 量 钴 的 新 方 法 ． 在 最大 吸收峰波 长 ５ ３ ０ ｎ ｍ和 ５ ９ ０ ｒ ｉ ｍ处， 钴离子 在 （ ０ ． ２ ５～ ４ ． ０ ） ×
１ ０ ｇ ／ ２ ５ ｍＬ范围 内与 △ Ａ呈线性关 系， 其线性 回归方程为 Ｚ ｌ Ａ＝０ ． ０ ９ ３ ７ ３＋ ０ ． ４ １ ２ ６ Ｃ ｃ 。 （ ） ， 相关系数 Ｒ＝ ０ ． ９ ９ ６ ８ ， 检
第３ ４卷 第 １ 期
２ ０ １ ３年 ３月
淮北 师 范大 学学 报 （ 自然 科 学版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｈ ｕ ａ ｉ ｂ ｅ ｉ Ｎ ｏ ｒ ｍａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ）
双波长分光光度法的基本原理及应用
双波长分光光度法的基本原理及应用应用分光光度法对共存组分进行不分离定量测定时，通常采用的方法有双波长法，三波长法，导数光谱法、差谱分析法及多组分分析法等方法，其快速，简便的优点使这些方法在实用分析中得到越来越广泛的应用。
其中以双波长法的应用为最多，该法的准确度和精密度要高于其它方法，是对共存组分不分离定量测定的有效方法之一。
实用中的双波长法主要采用等吸收波长法和系数倍增法两种分析方法，下面就其基本原理和应用作以介绍：一、等吸收波长法1、基本原理图1是同一组分三个不同浓度供试液的吸收光谱图，经典分光光度法的定量测定通常是在被测组分的最大吸收波长处进行测定，根据兰伯一比耳定律，其吸光度值与被测组分的浓度C成正比，即：依（3）式测定被测组分a，则可完全消除b组分的干扰，达到共存组分不分离进行定量测定的目的。
2、影响因素（1）测定波长和组合波长的选择应使被测组分的△A值尽可能大，以增加测定的灵敏度和精确度。
（2）测定波长和组合波长应尽可能选择在光谱曲线斜率变化较小的波长处，以减小波长变化对测定结果的影响。
（3）干扰组分等吸收波长（组合波长）的选择必须精确，只有其△A值等于零时才能完全消除干扰，否则会引入测定误差。
为此，在实用分析中，都是先配制一个干扰组分b的供试液，在仪器上准确找出等吸收波长，然后再对样品进行测定。
3 应用实例等吸收波长法的一个典型应用实例为收载于《中华人民共和国药典》中的抗菌消炎药复方磺胺甲噁唑片的含量测定。
复方磺胺甲噁唑片中含有磺胺甲噁唑（SMZ）和甲氧苄（TMP）两个成分，其吸收光谱见图3。
当测定SMZ时，选择其最大吸收波长257nm为测定波长，可以在干扰组分TMP的光谱曲线上304nm附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰；当测定TMP时，选择239nm为测定波长，可以在干扰组分SMZ的光谱曲线上295nm附近找到等吸收波长为组合波长消除其干扰，分别对SMZ和TMP进行含量测定。
双波长分光光度法消除浊度对水中色度测定影响的研究
．
第２ ２卷 ， 第 ４期 ２ １ ３年 ７ 月
化 学分析 计量
ＣＨＥＭ Ｉ ＣＡＬ ＡＮＡＬｙＳ Ｉ Ｓ ＡＮＤ Ｍ ＥＴ ＥＲＡＧＥ
ＶＯ １ ． ２ ２． Ｎｏ ． ４ Ｊ ｕ １ ． ２ ０ １ ３
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ － ６ １ ４ ５ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ４ ． ０ ２ １
ｄ ｅ ｖ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｃｈ ｒ ｏ ｍｉ ｕ ｍ— ｃ ｏ ｂ ａ ｌ ｔ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ － ｃ ｏ ｄ ｅ ａ ｓ ａ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ， ｄ ｕ ａ ｌ ｗａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｒ ｏ ｐ ｈ ｏ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ３ ５ ０ ａ ｎ ｄ ５ ４ ０ ａ ｍ ｗｅ ｒ ｅ
消 除人 为误 差 ， 还 可提 高 分析 结 果 的 准确 度 。 关 键 词 色度 ； 浊度 ； 分 光 光 度 法
中图分类号 ： ０６ ５ ７ ． ３ ２
文献标识码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ ８ － － ６ １ ４ ５（ ２ ０ １ ３） ０ ４ － ０ ０ ７ ２ － ０ ４
ｓ ｅ ｔ ｕ ｐ ． Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｏ ｆ ｃ ｏ ｌ ｏ ｒ ｉ ｔ ｙ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｈ ａ ｄ ａ ｇ ｏ ｏ ｄ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ（ Ｆ ２ ＞０ ． ９ ９ ９） ， ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｄ ｅ ｖ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ
双波长分光光度法同时测定电镀液中铜和铁
Ｋｅｗ ｒｓ Ｓ ｅｔ ｐ ｏｏ ｔ ； ｃｐ ｅ ；ｉ ｎ 一 ５Ｂ 一一ｙｉｙ ｚ 一－ｉ ｈ ｌ ｎ ｐ ｅ ｏ ５Ｂ — ｙ ｏ ｄ ： ｐ ｃ ０ｈ ｔ ｒ ｒ ｍｅ ｙ ｏ ｐ ｒ ｒ ；２ （ 一ｒ ｐ ｒ ｌ ｏ）５ｄｅ ｙａ ｏ ｈ ｎｌ（ 一ｒ ｏ ２ ｄａ ｔ ｍｉ
等工艺 均 有 影 响 ¨ 。铁 离 子 是 镀 液 中最 常 见 的 杂 Ｊ
质 ， 各种镀 液 的性能都 有 不 良影 响 。铁 杂 质 的测 对 定 可 以为 排 除 电镀 故 障 提 供 重 要 依 据 。 电 镀 液 中铜 和铁 的允 许 含量 随镀 种不 同而 异 。例 如 ， 镀镍 液 中的铜 和铁 的允 许 范 围为 几十 ｍ ／ ， ｇ Ｌ 而镀铬 液 中
Ｂ ・Ａ Ａ ） ａ ｓｄａ ｈｏ ｇｎｃａｅｔ Ｔ ｉ ｎＸ １０（ Ｐ ａ ｌｂｌｅ．Ｂ ｘ ｅｉ ｅ ｔ ｔｅ ｐ ｒＰ Ｄ Ｐ ｗ ｓ ｅ ｓ ｒｍｏｅｉ ｇｎ ， ｒｏ 一０ Ｏ ） ｓ ｓ ｕ ｉｚｒ ｙｅｐ ｒ ｎｓ， — ｕ ｃ ｔ ａｏ ｉ ｍ ｈ ０
ｔ ｕｎ ｅ ｐ ｒｍｅ ｔｌｃ ｎ ｔｏ ｒ ｏ ｆｒ ｅ ｉ ｒ ｘ ｅ ｉ ｎ ａ ｏ ｄｉ ｎｓｗｅ ｅ ｃ ｎ ｍ ｄ，ｉ ｃｕ ｉ ｇ ｔ ｅ ｂ ｓ ｍ ｏ ｎ ｆｒ ａ ｅ ｔ ｈｅ ｓａ ｉｉ ｆｓ ｓ ｍ ｉ ｉ ｎ ｌ ｄ ｎ ｈ ｅ ｔａ ｕ ｔｏ ｅ ｇ ｎ ，ｔ ｔ ｂ ｌ ｙ ｏ ｙ － ｔ
１ １５ ％ ，铜 的 回 收 率 为 ９ ．２ ～１ ５ ０ ％ 。 ０ ．３ ５３ ％ ０ ．２
关键 词 ：分光 光度 法 ； ； ； 一５ 溴一 一 铜 铁 ２ （ 一 ２ 吡啶偶 氮 ） ５二 乙氨基 酚 ； 一一 电镀 液
双波长紫外分光光度法
②样品测定：取阿司匹林肠溶片20片，精密称定，研细。精密称取约 相当于阿司匹林50mg置于50mL容量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解 并定容，摇匀，滤过。精密量取续滤液2mL置25mL容量瓶中，加乙 醇至刻度，摇匀。分别在276nm、322nm波长处测定吸收度，用回 归方程计算阿司匹林的含量。
含量计算
阿司匹林制剂在体外的含量测定
——双波长紫பைடு நூலகம்分光光度法
原料
阿司匹林肠溶片
原理
采用双波长紫外分光法（测定波长为276nm和322nm），测定了阿 司匹林肠溶片的含量，可消除附加产物水杨酸的干扰。
方法
①标准曲线的绘制：精密称取阿司匹林对照品适量，加乙醇溶解使成 1000μg/mL的溶液。精密吸取1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分置于 25mL容量瓶中，加乙醇至刻度，分别制成40，60，80，100和 120μg/mL的对照品溶液，以乙醇为空白，分别在276nm、322nm波； 长处测定吸收度，以浓度C和ΔA进行线性回归得出方程式。
多波长系数法计算分光光度法与双波长法_三波长法等经典方法的异同
……………………………………………………… ( 1) A i 为波长 i处的吸收度, K i 为对应于 A i 的倍率系数。对于干 扰组分, 根据线性 相关 原理, 必 然 有不 全为 零 的 K 1、K2 , K n 使下式成立, v A干 = K1A干1 + K2A干2 + , + KnA干n = E K iA干i = 0 ……… ( 2) 对于待测组分, 由于待测组 分与干 扰组分 吸收光 谱不完 全重 叠, 必然存在 v A测 = K1 A测1 + K2 A测2 + , + K nA测n = E K iA测i = b ( bX 0) …………………………………………………… ( 3) 一旦该 K 1、K2, K n 值确定, 根据 L am bert- Bee r定律和吸收
2003, 39 ( 2) : 9 ~ 12.
多波长系数法计算分光光度法与双波长法、三波长法等经典方法的异同
张学惠 1, 巫巧鹤 2, 李枝端2 ( 11福建省古田药品检验所 古田 352200; 21福建省宁德人民医院 宁德 352100)
摘要: 目的与方法 比较多波长系数法计算分光光度法与 双波长法、三波长法 等经典方 法的异同, 为计算分 光光度法 方法的选 用提供参 考。 结果与结论 多波长系数法涵盖了双波长法、三波长法等经典方法, 双波长法、三波长法 等经典方法是有 着特定限制条件, 从而有着特定 抗吸 收干扰、抗测定误差干扰优点的特殊多波长系数法。多波长系数法只要用之得当, 就是一种应用广泛, 方法灵活, 抗吸收干扰 与抗测定误差 干扰 能力强的优良的计算分光光度法。由于波长位置与数量的选择更为灵活, 其优越性将大大超过现有的经典方法, 值得推广应用。 关键词: 多波长系数分光光度法; 双波长法; 三波长法 中图分类号: R 92712 文献标识码: A 文章编号: 1006-3765( 2007 ) 012-0116-02