日立Chromaster液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程分析

文件目录

一、目的 (2)

二、范围 (2)

三、责任者 (2)

四、内容 (2)

五、修订历史 (2)

六、相关记录 (12)

一、目的

1、建立一个日立Chromaster液相色谱仪操作、清洁、维护、保养规程。

二、范围

1、日立Chromaster液相色谱仪。

三、责任者

1、中心化验室主任，操作者。

四、内容

1、仪器型号及组成：

日立Chromaster液相色谱仪

模块泵自动进样

器柱温箱二极管阵

列检测器

（DAD）

荧光检测

器

蒸发散射

光检测器

(ELSD)

型号5110 5210 5310 5430 5440 6000

2、工作环境

温度4～35℃，在测量期间温度波动≤5℃；

湿度25%～85%

电源220V 50HZ

环境无腐蚀气体、磁场、阳光直射

3、操作规程

3.1使用前准备

a）每次开机前先检查电源连接情况,确保电源正确的连接。

b）每次开机前检验流动相,以保证足够量的流动相。

3.2 开机确认电源连接正确后，打开各使用模块电源。

3.3打开与设备连接的电脑，在电脑桌面双击图标，使操作系统与设备联机，进入登录窗口。

3.4 第一次使用仪器时应对仪器进行配置。选择配置，进入仪器配置界面

3.4.1 点击“增加”，选择连接的仪器

3.4.2 打开仪器，自动检测配置的仪器模块

3.4.3 确认自动检测所有模块，确认泵的信息、自动进样器的信息、柱温箱信息（选择control off at shutdown）、检测器信息（选择lamp off at shutdown）

3.4.4 配置仪器，点击向右箭头，命名仪器名称。

3.5 输入用户名、密码，选择创建新工程登录。

3.6 仪器准备

3.6.1 排空打开设备监视器，打开排空阀，设流速为5，流量100%，点击“清洗”，分别将四条管路排气泡，结束之后关闭排空阀。

3.6.2 自动进样器清洗点击“清洗”，依次对柱塞、注射器进行清洗

3.7方法设置

点击“新建方法”，在“方法”下选择“事件表”按照检测需要对自动进样器、LC梯度、液相色谱控制、测量、采集、恒温器、积分、计算进行设置，设置完成后点击“发送方法”

3.8 基线方法发送仪器运行稳定之后，点击“数据采集”查看基线

3.9 序列设置及运行点击“序列”，分别对样品起始位置“SV”、结束位置“EV”、样品

ID、样品名、进样量、进样体积、文件名、方法名、报告格式等进行设置，设置完毕后点击“序列检查”、“序列保存”再“运行”。

3.10 ELSD检测器操作

3.10.1开机：打开ELSD电源，并通过面板将ELSD设置为“运行(run)”状态。

3.10.2通气：打开并逐步调节供气压力至0.5Mpa。（注意：在使用钢瓶气源时，通气前主阀与减压阀应处于全关状态；拧开减压阀时需小心操作、将供气压力从小到大逐步调高至0.5Mpa，最高压力不得超过0.55Mpa或80psi。）

3.10.3通气加热平衡：根据检测的需要设定加热温度和气体流速，然后让仪器平衡10分钟。平衡后基线噪音应小于1mV，否则需要进行故障排查（如气体清洁度及光源稳定性）。

3.10.4流动相平衡：确保流动相清洁无污染，不含不挥发的改性剂。将柱后流份接入ELSD，然后平衡5分钟，基线噪音应小于2mV，可通过调整漂移管温度和气流量使噪音最小化。如噪音始终很高，需要进行故障排查（如气源、流动相或柱后流出物是否被污染）。

3.10.5测试后清洗：如测试时使用腐蚀性的流动相（含强酸或强碱），建议将ELSD继续连接在柱上清洗约30分钟。在使用高水含量的流动相清洗柱和ELSD时，相应调高ELSD漂移管加热温度和气流量以利于流动相挥发。

3.10.6关机：停止通入流动相后保持ELSD继续运行10分钟。可将ELSD设置为“待机(standby)”状态则ELSD会自动关闭气阀、光源并停止加热，等待下次启动工作。或者，可以关闭供气源1分钟后，完全关闭ELSD电源。

3.10 数据处理点击“数据处理”进入数据处理界面，打开需要处理的色谱图。

3.10.1 单击右键，选择“基线”、“锁定”

3.10.2 选择锁定基线后，指定不需要积分的区域

3.10.3 定峰，为目标峰命名

3.10.4 制作标准曲线

3.10.

4.1 点击“新建”，创建一个新的标准曲线并命名。

3.10.

4.2 打开校准下面的“选项”设置校准选项

3.10.

4.3 设置校准选项

3.10.

4.4 打开标准曲线的第一个标样色谱图，选择“增加峰”，为目标峰定峰，修改化合物名称和峰类型，输入含量

3.10.

4.5 打开第二个浓度的标样色谱图，选择“增加现有的”，然后输入等级2的含量；打开第三个浓度的标样色谱图，输入含量，创建等级3；打开第4个浓度的标样色谱图，输入含量，创建等级4，所有浓度处理完后，可在左下角化合物，查看标样的标准曲线。

3.10.

4.6 打开未知样品的色谱图，使用得到的标准曲线计算未知样，单击“设置”选择已有的标准曲线，选择ESTD外标法，左下角查看计算结果、性能等

4、清洁维护及保养

4.1检测器的维护和保养

4.1.1检测器是液相色谱仪器的数据收集部分，由很多的电子和光学元件组成。禁止拆卸更动仪器内部元件防止损坏或影响准确度。

4.1.2仪器内部的流通池是流动相流过的元件，样品的干净程度和微生物的生长都可能污染流通池，导致无法检测或检测结果不准，所以在使用了一段时间以后要先用水冲洗流通池和管路再换有机溶剂冲洗。

4.1.3当仪器检测数据出现明显波动，基线噪音变大时要冲洗仪器管路，冲洗后如果还是没有改善就应该检测氘灯能量，如果能量不足就因更换新的氘灯。

4.1.4仪器在每次使用完了以后都要用水和一定浓度的有机溶剂冲洗管路，保证下次使用时管路和系统的清洁。

4.1.5气源纯度（氮气或空气）必须达到99.9%，否则引起基线噪音。

4.1.6对于钢瓶气源，ELSD操作结束后应完全关闭主阀与减压阀。要进行ELSD操作时，先打开ELSD电源，然后依次打开钢瓶主阀与减压阀，小心操作减压阀，将供气压力逐渐提高到0.5Mpa。

4.2色谱柱的维护和保养