革兰氏染色试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色是一种重要的微生物分析方法，在日常诊断检测中广泛应用。
微生物之间的形态和染色特征是鉴别它们的重要标志，而且是许多其他病原体的诊断的基础。
革兰氏染色是利用染料染色试剂，在微生物细胞实施染色，从而便于观察和辨别微生物的一种方法。
革兰氏染色所用的染料试剂分为水溶性和非水溶性两大类，其中水溶性染料试剂是革兰氏染色的主要原料，主要包括绿唑、新的修复绿和罗丹明B。
非水溶性试剂主要有硫酸、硝酸、酚酞等试剂，在革兰氏染色中都起到重要作用。
绿唑是传统的革兰氏染色试剂，性质稳定，抗酸、碱、表面活性剂等耐受性比较好，且染色效果易操控，在大多数细菌和真菌染色中有良好的效果。
另外，新的修复绿也可以用于革兰氏染色，因为它的抗老化性比绿唑好。
罗丹明B也是多用途的可溶性染料试剂，可以在植物，动物细胞和细菌中染色，并且它可以与绿唑混合使用，使细菌的染色效果更加良好。
此外，在革兰氏染色中还会适当添加一些非水溶性试剂。
例如，硫酸可以强化染色，使细菌自身的特殊特征更容易被观察到；硝酸可以促进细菌染料吸收，提高染色效率，而酚酞则是革兰氏染色常用的抗氧剂，可以有效地防止染料的褪色。
总之，革兰氏染色的成功与否与使用的试剂有着密切的关系，在选择染料试剂时，应当综合考虑染料的性质、染色效果、耐受性
和易用性等因素，以确保获得最佳的染色效果。
实验革兰氏染色法
细菌呈现第一次染色的 效果紫色，革兰氏阳性 菌（紫阳G+）
呈现第二次染色的效果 红色；称革兰氏阴性菌 （红阴G -）
G+ 菌: 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、 甲型和乙型链球菌、枯草杆菌 G- 菌: 大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、 卡他双球菌、淋球菌等
四、注意事项：
1、选用培养18～24小时菌龄的细菌为宜，若细菌太老， 由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。 2、加热固定时要使用载玻片夹子，以免烫伤。不要将 载玻片在火焰上烧烤时间过长，以免载玻片破裂。 3、革兰氏染色成败的关键是脱色时间，如脱色过度， 革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为革兰氏阴性菌；如 脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳 性菌。因此必须 严格把握脱色时间。 4、使用染料时注意避免沾到衣物上，乙醇脱色时勿靠 近火焰。
三、实验原理：
1、无菌操作技术：
高温对微生物具有致死效应，因为在微生物的转接 过程中，一般在火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环， 以达到灭菌的目的，但一定要保证其冷却后方可进行转 接，以免烫死微生物。
2、细菌制片：
涂片法：
涂抹——细胞个体在载玻片上均匀分布，避免菌体堆 积而无法观察个体形态。 加热——固定使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上， 这种加热处理还可以杀死大多数细菌而且不破坏细胞 形态。
染色 (1) 初染:滴加结晶紫染液数滴 于涂片上1 分钟,水洗; (2) 媒染:滴加碘液媒染1 分钟,水洗; (3) 脱色:滴加95 %酒精,轻轻不断摇动 玻片,使染液尽可能脱去,持续20~30s, 水洗; (4) 复染:滴加稀释石炭酸复红染液数 滴于涂片上复染1 分钟,水洗。吸水纸 吸干,油镜观察。
3、革兰氏染色：
革兰氏染色是丹麦医生Hans Christian Gram于1884年发明的 一种鉴别不同类型细菌的染色方法。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色是一种常用的细菌分类和培养方法，它把细菌染成不同颜色，使研究人员能够更加容易地识别出每种不同的细菌。
革兰氏染色所用的试剂有多种，它们提供了这种技术所需的色素，以及提高染色的精确度的其他特性。
它们的性质和激发机制有所不同，从而使它们可以提供准确的染色结果。
为了实现革兰氏染色，首先需要使用染料试剂，它们的颜色可以有红色，黑色，紫色，蓝色，橙色，绿色或灰色。
它们的颜色都可以由一种叫做脱氧核糖核酸（DNA）的分子素材来激发。
例如，一种叫做革兰氏绿的染料试剂会在存在DNA的环境中产生一种深绿色的颜色。
其次，染料试剂可以与各种不同类型的抗原结合，这种结合能够触发另一种叫做抗体的物质分泌。
抗体会与抗原结合，形成一种特殊的结构，这种结构可以被染料试剂吸收，从而使抗原和抗体之间的结合更加牢固。
最后，可以使用离子抑制剂来控制染料试剂的作用。
离子抑制剂可以抑制不同颜色的染料试剂之间的作用，从而让细菌染料更加清晰。
例如，使用一种叫做氯仿的离子抑制剂可以防止橙色染料与紫色染料之间的作用，从而使细菌的颜色更加精确。
革兰氏染色需要使用多种试剂，以便能够更准确地染色细菌。
染料试剂是基本的组成成分，它们提供了染色所需的色素，以及抗原和抗体结合到一起的形状所需的介质。
而离子抑制剂则控制着不
同颜色染料之间的作用。
这些试剂结合起来，提供了革兰氏染色所需要的色素，以及让染色更加清晰和准确的其他特性。
细菌的革兰氏染色实验操作步骤流程
细菌的革兰氏染色实验操作步骤流程革兰氏染色是一种常用的细菌分类方法，通过染色技术可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
这种染色方法简单快捷，对细菌的形态特征有着重要的观察作用。
本文将介绍细菌的革兰氏染色实验的详细操作步骤流程。
实验所需材料1.革兰氏染色试剂盒：–革兰碘液–革兰染色液–醇解液–洗涤液–脱水液2.细菌培养液3.玻璃载玻片4.导览盖玻片5.消毒棉球6.显微镜实验步骤1.预处理玻片和试管–用肥皂水洗净手并彻底冲洗干净。
–取一块干净的抹布或纸巾，将玻璃载玻片擦拭干净。
–取一块干净的纸巾蘸取少量醇解液擦拭玻璃载玻片表面，以去除可能存在的杂质。
–将试管清洗干净，用蒸馏水冲洗干净，并放置在烘箱中晾干。
2.制备细菌涂片–打开培养液管，将一滴细菌培养液滴在玻璃载玻片上，可略带颜色。
–将玻璃载玻片侧倾45度，用细胞棉棒轻轻均匀地将细菌培养液涂抹在玻璃载玻片上，尽量避免涂片过厚。
–将涂片晾干。
3.固定细菌涂片–将制备好的细菌涂片放入烘箱中，用50摄氏度温度固定5分钟。
–取出固定的细菌涂片，待冷却后准备进行染色处理。
4.革兰氏染色处理–取一滴革兰碘液，滴在细菌涂片上，静置1分钟。
–洗涤液冲洗：将细菌涂片放入洗涤液中，静置20秒，然后将涂片提起，用自来水轻轻冲洗10秒。
–脱水液处理：将细菌涂片放入脱水液中，静置20秒。
–将细菌涂片提起并用洗涤液清洗3次，每次间隔10秒。
–将细菌涂片放入洗涤液中，静置20秒。
–用细胞棉棒从上到下蘸取革兰染色液，均匀地在细菌涂片上涂抹。
–将细菌涂片放入革兰染色液中，静置1分钟。
–将细菌涂片提起并用洗涤液轻轻冲洗10秒。
–将细菌涂片放入醇解液中，静置1分钟。
–将细菌涂片提起并用洗涤液轻轻冲洗10秒。
5.干燥和观察–用吹风机或自然风将细菌涂片吹干。
–涂片完全干燥后，将其放置在显微镜载片夹上。
–用显微镜在低倍镜下观察涂片，然后转换到高倍镜下观察。
观察细菌在镜片上的染色结果和细菌形态。
革兰氏染色试验步骤
三、实验器材
1 、菌种：大肠埃希氏菌（Escherichia coli） 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 或巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）。
2 、试剂：革兰氏染液:草酸铵结晶紫染液、卢戈氏典液、 95%乙醇、番红复染液； 芽孢染液:5%孔雀绿染色液、 0.5%番红水溶 液。
染色结果：阴性细菌（G-）： 染成红色
2 、芽孢染色原理
细菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易着 色，若用一般染色法只能使菌体着色而芽孢不着色。 芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦着色后 又难以脱色这一特点，用着色力强的染色剂孔雀绿 或石炭酸，在加热条件下，延长染色时间，使染料 不仅进入菌体也进入芽孢内，进入菌体的染料经水 洗后被脱色，而芽孢一经着色就难以被水洗脱，当 用对比度大的复染剂番红复染后，芽孢仍保留初染 剂的绿色，而菌体则被染成复染剂的红色。
内 （扦在接种线上） 培养：倒置平板，28℃培养5-7天。
镜检：拔出盖玻片，擦去背面培养物，将有菌的一 面放在载玻片上，直接镜检或将有菌的一面 朝下，放在滴有0.1%美蓝染色液载玻片中 镜检。
1 盖玻片 2 培养基
酵母菌形态观察方法（美蓝浸片法）
载玻片中央加一滴0.1%美蓝染色液。 挑取酵母菌苔少许，置美蓝染色液中混合均匀。 用镊子取盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢 将盖玻片放下，以免产生气泡影响观察。 用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况。
氏阳性菌。 典型放线菌的菌丝体分化产生各种形 态特征：
基内丝菌（较细、透明）
菌丝体 气生菌丝（较粗颜色较深）有无气生菌丝
孢子丝（直、波曲、各种螺旋或轮生）等，是分类鉴定的重要依据 孢子：分生孢子（球形，椭圆，杆状或柱状）、孢囊孢子、游动孢子
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂革兰氏染色是一种常用的微生物分类方法，它通过染色试剂来辨别微生物的种类。
革兰氏染色是利用染色剂的活性成分，以及微生物的特定成份来进行染色的。
它是一种高灵敏度的、简单易行的染色方法，可以用来鉴别出大多数微生物，如大肠杆菌、细菌等。
革兰氏染色所用的试剂有很多，其中主要有番茄红染料、紫染料、四氯化铁、甲酚绿染料和雪莱染料等。
其中，番茄红染料的主要成份是细胞壁中的脂肪以及糖醛聚糖，紫染料的主要成份是细菌细胞壁中的细菌酸，四氯化铁和甲酚绿染料的主要成份是细菌细胞壁中的细菌蛋白，而雪莱染料是一种植物素，主要成份是碳水化合物，可以用来染色来细菌细胞壁中的多糖类物质。
革兰氏染色所用试剂的染色原理是，染料结合到细菌细胞壁上，产生特定的颜色，以示特定的微生物种类。
比如，番茄红染料可以与细菌的碳水化合物以及糖醛聚糖结合，产生红色；紫染料可以与细菌的细胞壁中的细菌酸结合，产生紫红色；四氯化铁可以与细菌的细胞壁中的蛋白质结合，产生棕红色；甲酚绿染料可以与细菌的细胞壁中的脂质结合，产生绿色；而雪莱染料则可以与细菌细胞壁中的多糖类物质结合，产生棕黄色。
革兰氏染色是一种全自动的染色方法，可以用来鉴别出各种微生物类型，从而可以帮助医学工作者准确鉴别病原体，以更好地为病人提供治疗。
然而，革兰氏染色所用试剂的染色效果受到温度、光照、pH等多种因素的影响，因此，在进行革兰氏染色时，实验室要确保试剂的染色效果，以及控制实验环境的温度、光照和PH，以达到较好的染色效果。
总体而言，革兰氏染色是一种简单易行且高灵敏度的染色方法，可以用来鉴别各种微生物类型。
它所用试剂的染色原理以及染色效果的重要性，都不容忽视。
此外，在染色过程中要注意控制实验环境，以达到较好的染色效果。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂染色是一种早已被发现的一类技术，可以被用来分析、断定和表示物质。
它曾在多种学科领域中被广泛应用，例如生物技术、微生物学、细胞学等等。
而革兰氏染色，又称革兰氏抗原定位法，是一种特有的染色技术，它被用于分析某物的细胞结构、分布形态以及在组织中的生理意义等等。
它的正确使用，需要正确的试剂，下面就具体介绍一下革兰氏染色所用的试剂。
首先，革兰氏染色需要用到一种定位用的特殊染料，即革兰氏抗原，它可以具体形式像抗体或者抗原分子。
在染色时，须要让它们与特殊颜料结合，然后经过一定的反应温度后，它们才能被用于染色。
其次，革兰氏染色所用的染料是碱性染料，主要有皮酰乙醇，乙醇胺，碘酒精及二甲基亚砜等。
这些染料与结合后的抗原结合能力极大，可以有效的将抗原反应到被染的物质上，以达到染色的效果。
此外，还有一些提取抗原的试剂，例如氨基酸抑制剂，它可以有效的抑制抗原及其相关抗体的产生，也可以抑制血清或血浆中其他物质的合成。
另外，还有一种抗原滴定剂，可以有效的测出抗原的水平，以便对它的结构和对抗物的特性进行分析。
最后，还有一种抗原滴定试剂，可以有效的抗原滴定及检测，以便于分析特定抗原的特性及其含量。
以上就是革兰氏染色所用的试剂，它们的正确选择和使用有赖于实验者对染色技术的掌握。
由此可见，革兰氏染色是一项复杂、耗时的实验技术，对于染色时所用试剂的正确选择和使用，其实做到对被染物质进行充分研究和实验是非常重要的。
除了以上介绍的革兰氏染色所用试剂，还有一些其他的试剂，如细胞抑制剂和蛋白质组分的抗原抑制试剂等。
这些试剂在染色实验中也有重要作用，他们可以起到双重效果，即在一定程度上抑制抗原及其相关抗体的产生，又能抑制血清或血浆中的其他物质的合成。
它们的正确使用，不仅可以使染色更加准确，更能有效的保护实验者和实验对象的安全。
综上所述，革兰氏染色是实验技术中应用较为普遍的一种技术，它的正确使用不仅可以保证染色的准确性，更能有效的保护实验者和实验对象的安全。
革兰氏染色所用试剂
革兰氏染色所用试剂革兰氏染色是一种常用的染色技术，在医学微生物学和病理组织学中发挥着重要作用。
因此，革兰氏染色试剂在医学研究中发挥着宝贵的作用。
革兰氏染色是由微生物学家和医学病理学家Paul/Gram老师在1883年发明的，利用显色染色的原理，将染色微生物的形态和属性进行归类，方便微生物的鉴定。
革兰氏染色所用的试剂有，厌氧染料，碘甲基紫和绿蓝，有细胞壁成分和脂肪组分，以及可改变微生物颜色的酸性和碱性染料等。
所有的试剂都有一定的浓度和储存条件，以保证它们的发挥最大作用。
厌氧染料（即脱氧核糖核酸染料）是革兰氏染色中最常使用的染料，其结果是革兰蓝色，可用来分析微生物的属性，观察微生物的形态和染色特征，进而确定微生物的类型。
碘甲基紫和绿蓝试剂是厌氧染料的改良品，可以染出不同的颜色，可以更准确地染色脂肪细胞和染色质，从而更准确地染色脂肪细胞和染色质，从而细分微生物的属性和形态。
细胞壁成分和脂肪组分的试剂，可以更准确地检测出微生物细胞壁的组成，从而更准确地鉴定微生物的种类。
另外，这种试剂还可以检测微生物的脂质组成，从而更加精细地鉴定微生物的特性。
酸性和碱性染料也可以改变微生物的颜色，但是改变的颜色受试剂的浓度和pH值的影响较大。
碱性染料可使微生物呈现褐色，而酸性染料可以使微生物呈现紫红色。
基于以上，在进行革兰氏染色时，应根据实际情况，选择合适的染色试剂，以确保良好的染色效果，并以此辅助微生物学研究和病理研究。
其中，应根据染色培养基的pH值确定染色的类型，例如碱性染料的pH值应大于7，酸性染料的pH值应小于7。
只有合理调整pH 值，才能保证染色效果的良好，以及达到准确的鉴定目的。
总的来说，革兰氏染色所用的试剂有许多种，它们的使用取决于微生物的性质和染色目的，同时要正确选择试剂的浓度和pH值，以实现良好的染色效果，从而实现准确的微生物鉴定。
革兰氏染色对医学微生物学和病理组织学的研究有着不可替代的作用，它的实施需要谨慎的选择试剂，因此，为了确保染色的准确性和质量，应确保使用合适的染色试剂。
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与亚碲酸钠培养基基础配套使用
HB8284
萋-尼氏染色液
5ml*6
用于细菌抗酸染色
HB8285
金胺O染色液
5ml*6
用于细菌抗酸染色
HB8286
瑞氏染色液
5ml*8
用于细菌瑞氏染色
HB8663a
新生霉素
Novobiocin
1ml/支*5
每支添加于225ml
HB8689ad
假单胞CFC选择性培养基添加剂(冻干)
1ml*5
每支添加于200ml假单胞菌CFC选择性培养基中
HB6271a
OADC添加剂
10ml*10支
用于添加于Middle Brrok 7H11琼脂
HB8579a
STAA添加剂
1ml*5支
每支添加于200mlSTAA琼脂培养基中
HB8397
姬姆萨染色液
5ml*4
用于血红细胞等染色
HB8301
荚膜染色液
产品用途：用于细菌革兰氏染色
产品用法
1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。
2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。
3.加（脱色液）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。
4.加溶液D，染1分钟，水洗。
5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色
产品货号
产品名称
产Hale Waihona Puke 规格产品说明及用途HB8725-1
Preston肉汤添加剂
1ml*5
HB8725添加剂，每200ml加一支。
GB065
硫化氢生化管
20支/盒
用于肠杆菌科的生化鉴定。
HB8281
V-P试剂盒
5ml*4
用于V-P试验
HB8282
硝酸盐还原试剂盒
5ml*4
用于硝酸盐还原试验
HB0123
1%亚碲酸钾溶液
5ml*2
用于吲哚（靛基质）试验
HB8280
甲基红指示剂盒
Methyl red indicator Kit
5ml*2
用于甲基红试验
HBPP004
Andrade指示剂
100ml
5ml*4
用于荚膜染色
HB8298-1
刘荣标氏鞭毛染色液
5ml*8
用于鞭毛染色
HB8300-2
芽孢染色液
5ml*4
用于芽孢染色
HB8296
乳酸酚棉蓝染色液
5ml*8
用于真菌染色
HB8295
50%卵黄乳液
5ml*10
作为添加剂添加于培养基中
HB8279
Kovacs氏靛基质试剂盒
Kovacs's indole Kit.