葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法关于《葡萄糖氧化酶法》，是我们特意为大家整理的，希望对大家有所帮助。
葡萄糖氧化酶法在生活起居中大部分人可能也没有听闻过，实际上葡萄糖氧化酶法是一种检测病人是不是高血糖，是不是患糖尿病的一种查验方式，一般较为普遍应用与医院门诊，假如高血糖或是是糖尿病人用葡萄糖氧化酶法来检验結果是十分精确的，下边实际详细介绍葡萄糖氧化酶法。
葡萄糖氧化酶法精确测量血糖浓度的详解生产基本原理疫苗葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)运用氧和水将葡萄糖空气氧化为葡萄糖酸，并释放出来双氧水。
乳酸脱氢酶(peroxidase，POD)在色原性氧蛋白激酶存有时将双氧水溶解为水和氧，并使色原性氧蛋白激酶4-羟基安替比林和酚去氢缩合反应为鲜红色醌类化合物，即Trinder反映。
鲜红色醌类化合物的产生量与葡萄糖成分正比。
生产实验试剂疫苗1．0.1mol/L聚磷酸盐缓冲溶液(pH7.0)称量没有水磷酸氢二钠8.67g及没有水磷酸二氢钾5.3g溶解纯净水800ml中，用1mol/L 氢氧化钠溶液(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用纯净水定容至1L。
2．酶实验试剂称量乳酸脱氢酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-羟基安替比林10Mg，叠氮钠100mg，溶解聚磷酸盐缓冲溶液80Ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用聚磷酸盐缓冲溶液定容至100ml，置4℃储存，可平稳3月。
3．酚水溶液称量重水蒸气蒸馏酚100mg溶解纯净水100ml 中，用深棕色瓶存储。
4．酶酚混和实验试剂酶实验试剂及酚水溶液相等混和，4℃能够储放1月。
5．12mmol/L苯甲酸水溶液融解苯甲酸1.4g于纯净水约800ml 中，升温助溶，制冷后加纯净水定容至l L。
6．100mmol/L葡萄糖标准存储液称量已干躁恒重的无水葡萄糖1.802g，溶解12mmol/L苯甲酸水溶液约70Ml中，以12mmol/L 苯甲酸水溶液定容至100ml。
科华项目标准操作程序2
α－淀粉酶测定标准操作程序1、方法原理：上海科华生物工程股份有限公司的α－AMY试剂测定采用CNPG3方法。
底物CNPG3在α－AMY催化下产生的 2－氯－4－硝基苯酚（CNP）引起波长405nm处吸光度上升，上升的速率与α－淀粉酶的活力成正比。
5CNPG3 α-AMY 3CNP ＋ 2CNPG2 ＋ 3G3＋2G2、标本：2.1病人准备：无特殊要求。
2.2类型：血清、肝素化血浆、尿液。
2.3标本稳定性：标本在4℃保存α－淀粉酶活力可稳定5天。
3、仪器与材料:3.1仪器：日立7600生化分析仪3.2材料：上海科华生物工程股份有限公司的α－AMY试剂盒4、注意事项：4.1.此试剂为体外诊断用。
4.2.不要入口，吞下有害。
4.3.保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
5、性能参数：5.1.试剂空白吸光度与变化值：在试剂盒有效期内，光径1cm, 波长405nm处吸光度≤0.250A，吸光度变化值ΔA/5min≤0.010A。
5.2.精密度：批内变异CV≤5%；批间相对极差≤10%。
5.3.准确度：相对偏差≤15%。
5.4.线性范围：要求试剂盒在样本浓度为0~1200U/L时，整个反应呈线性，r2≥0.995。
6、校准：标准液的准备：这个实验不需要标准液。
7、质控：在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品分析。
8、操作程序（逐步地）：日立7600开机装载试剂输入参数实施校准加载样本和仪器有关的操作程序请参照日立7600用户手册。
9、参考范围：10、操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司的α－淀粉酶试剂盒的线性范围是0～1200U/L。
样品浓度超过线性上限应稀释重做。
在日立7600中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。
11、临床意义：α－淀粉酶试剂盒适用于定量测定人血清、尿液中α－淀粉酶的活力。
α－淀粉酶活性升高时与急性胰腺炎、胰腺管道阻塞、腹内疾病、流行性腮腺炎以及细菌性腮腺炎有关。
葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试剂盒测定血糖比较
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）试剂盒与己糖激酶法（HK）试剂盒测定血糖比较摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较，分析葡萄糖氧化酶法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。
对本实验室使用的血糖测定参考方法HK法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。
结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求，且与HK法相关性良好。
关键词：GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言。
血糖测定是诊断糖尿病的重要依据，血糖的准确测定对诊断和处理高血糖和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法，而酶法有分为葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。
酶法中的GOD-POD法，因具有操作简单，无毒、无害，试剂已商品化、易于质控、价格低等优点，现已广泛用于临床。
为此，将GOD-POD法与血糖参考方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较，现报告如下：2 材料与方法2.1仪器与试剂己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310胆红素校准品（430 umol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101120血糖中值质控品（4.80 mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008血糖高值质控品（11.20mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008日立-7180全自动生化分析仪2.2方法按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次，计算批内误差。
另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次，累计20个结果，计算天间误差。
2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合，分装，按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液，用两种方法分别测定，每种方法的每一浓度平行测定三次，分别计算回收率。
葡萄糖试剂盒(氧化酶法)标准操作程序
葡萄糖试剂盒（氧化酶法）标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中葡萄糖的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清样本中葡萄糖的含量。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定葡萄糖浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的葡萄糖试剂盒采用的是氧化酶法(GOD-POD)。
5. 原理葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下与水分子和氧分子反应生成葡萄糖酸和双氧水,最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物、4-氨基安替比林和苯酚反应生成红色化合物醌亚胺。
由于醌亚胺在波长500nm 处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 500nm 处吸光度的变化值与样本中葡萄糖的含量成正比。
O H O H O H O O H 22222224+−−−→−+-++−−−−→−++醌亚胺苯酚氨基安替比林葡萄糖酸葡萄糖过氧化物酶葡萄糖氧化酶6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：R1：磷酸盐缓冲液、过氧化物酶、苯酚、防腐剂；R2：磷酸盐缓冲液、葡萄糖氧化酶、4-氨基安替比林、防腐剂；校准品：葡萄糖、防腐剂7.3 试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年。
开瓶后存放在生化分析仪试剂仓中可稳定14天。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
方法比较试验
3．绘制散点图：以X轴代表对比方法的测定值，Y轴代表
被评价方法的测定值，图中标出斜率为1通过零点的直 线。 4．如果实验结果线性关系良好，继续处理。如果呈非线 性趋势，则需要观察是否有部分呈线性关系，寻找修正
点，使余下的部分具线性趋势。但应考虑这部分是否包
括了临床上有用的范围，是否需再多做一些在此范围的 标本结果。如去掉非线性部分后，范围过小，无应用价 值，则停止评价。
邻甲苯胺法测定血糖原理：
在热的醋酸溶液中，葡萄糖醛基与邻甲苯胺(OT)缩合成糖基胺，经脱水，生成希夫碱（Schiff base），经分子重排生成蓝绿色化合物，在 630nm波长处有一吸收峰，吸光度大小在一定 范围内与血糖浓度成正比。
邻甲苯胺+葡萄糖 葡萄糖基胺 夫碱 蓝绿色化合物
缩合
脱水
希
三.试验试剂器材
评价报告中除了要叙述操作方法(包括试剂配 制和所用实验器材)以外，应着重写明候选方法的各 项分析性能指标，要特别重视实验数据的科学整理 和客观陈述。实事求是，对候选方法的优点要充分 肯定，对其
加入物 DDW
空白管
S(标准管) 0.1ml 3ml
U 1(测) 0.1ml 3ml
U2(测) 0.1ml 3ml
0.1ml 5mmol/L糖标 待测血清 邻甲苯胺试剂 3ml
混匀后放入沸水中煮沸5min，取出置冷水中冷却3min， 于630nm处比色，以空白管调零，读取吸光度值。
3．最好使用当天采集的标本，若需保存标本，应 确保它们的稳定性。只使用一种保存条件，能符 合两个方法的要求，以免条件不一引出新的变异。 4．方法学比较试验时，随时将实验数据点在分布 图，发现异常值即复做，及时纠正，可减少离群 值出现的机会。
抗体储存液
北京雷根生物技术有限公司
抗体储存液
简介：
抗体的稳定性对于抗体的保存和使用极其重要，IgG 是最稳定的球蛋白之一，通常在pH5～9、浓度小于20mg/ml 的缓冲液中最稳定。
Leagene 抗体储存液由磷酸盐、防腐剂、保护剂等组成，pH=7.2，可用于常规抗体的保存。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 制备好的抗体充分溶解于抗体储存液后，4℃保存1年，-20℃保存2年或更长时间。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 24个月有效。
相关：
编号 名称 PZ0050 Storage 抗体储存液 100ml 4℃ 使用说明书 1份 编号 名称 DG0005
糖原PAS 染色液 NH0053
变性鲑鱼精DNA(10mg/ml) NR0001
DEPC 处理水(0.1%) NR0040
RNase A(10mg/ml) PW0040
Western blot 一抗稀释液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)。
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介：葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应，通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。
本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。
本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性，并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。
本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品)，相当于50ng/ml 或278µM ；检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品)，相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。
本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度，也可以检测高血糖血样品。
市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ，相当于约20-600mg/dl ，在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难，而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。
本试剂盒所需样品体积小。
本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ，也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。
本试剂盒特异性好。
与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比，由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，且不受其它还原性物质的影响，本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。
葡萄糖(glucose)，也被称为dextrose 或grape sugar ，被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。
实验三 GOD-POD法测定葡萄糖的回收和干扰试验1
4、消除干扰的方法有
1）空白对照 包括试剂空白和标本空白。 2）物理、化学方法去除干扰（可能会引入新的干扰） 3）只使用对干扰物的敏感度不高的方法。如：己糖激酶法 测定GLU，酶法测定肌酐等 4）以两点法或双波长法消除部分干扰，可以设计双试剂法 消除内源性干扰
2．纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样 品的10%，避免将血清稀释过度，引起误差 的改变。
3．准确加量是最主要的技术关键。
注意事项(干扰试验)
1、加入可疑干扰物的浓度应明显高于通常所 见浓度的上限，有可能时应达到病理标本 的最高值。
2、凡可疑干扰物都应做，这里仅是举例示范。 3、适当增加测定次数以减少实验的随机误差。
样本测定
37 ℃水浴，10分钟，500nm比色。
结果计算-回收率
加入浓度= 标准液浓度* 标准液量ml 血清量(ml) 标准液量(ml) 生理盐水量(ml)
回收浓度 = 分析样品测得浓度 – 基础样品测得浓度
回收率（%）=
回收浓度 加入浓度
100％
一般要求回收率95-105%
干扰值计算
试剂与器材
1、试剂组成：R1：苯酚10mmol/L，POD>1000U/L，抗VIC氧化 酶； R2： GOD>1600U/L, 4-AAP2mmol/L
2、试剂包装：R1及R2，标准液浓度5.55 mmol/L 3、工作试剂配制：本试剂盒为液态双试剂，加双试剂的仪器
可直接应用，试剂更稳定，加单一试剂的仪器临用时缓冲 液和酶溶液以R1：R2=3:1的比例混合。
干扰物加入浓度= 干扰物浓度*
干扰物溶液量 ml
血清量 (ml ) 干扰物溶液量 (ml ) 生理盐水量(ml )
干扰值＝加入干扰物后的测定值－基础测定值
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试剂(C): Glu 标准(5mmol/L)
1ml
2× 1ml
பைடு நூலகம்-20℃
试剂(D): ddH2O
1ml
2ml
RT
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液 样本：从待测样本 中分理出的血清 或血浆丌应有溶 血，直接检测， 如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐>106 以上)，离心，弃上清，留取沉淀。 b、用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次，离心，弃上清，留取沉淀。 c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率 300W，每 次 3~5s，间隔 30s，重复 3~5 次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液丌可离心，待用。 d、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或 PBS(ml)=1：9 的比例， 加入生理盐水或 PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。
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2、 普通分光光度计(2ml 比色杯)Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl) 待测样本(μl) GOD-POD 工作液(ml)
空白管 20
2.0
标准管 20 2.0
待测管
20 2.0
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。 2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量，但丌能直接检测尿液中的葡萄糖含量，
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因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。 3、 待测样本如丌能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定。 4、 本法线性范围可达 25mmol/L，如果样本葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低。应
待测样本(μl) GOD-POD 工作液(μl)
3
300
300
300
②充分混匀,水浴中孵育。
③全自动生化分析仪测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的
吸光度。
机器参数：
主波长
505nm
反应类型
终点法
反应方向
升反应(+)
计算公式：
血清、血浆等液体样本(空白调零)： 葡萄糖(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝× 5mmol/L 血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)： 葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)× 5mmol/L 细胞、组织等样本(空白调零)： 葡萄糖(mmol/L)=｛(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)｝× 5mmol/L÷ 待测样本浓度(mg/ml) 细胞、组织等样本(全自动生化分析仪)： 葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)× 5mmol/L÷ 待测样本浓度(mg/ml)
②充分混匀,水浴中孵育。 ③分光光度计测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
3、 分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 Glu 测定操作:
①按下表依次加入试剂：
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl)
10 10
待测样本(μl)
参考区间：
健康成年人空腹葡萄糖：3.9~6.1mmol/L(70~110mg/dl) 备注：Glu 标准(5mmol/L)=90mg/dl
性能指标：
外观 线性范围 变异系数 空白吸光值 稳定性
无色至淡黄色澄清液体 0~25mmol/L，r>0.990 批内<2~5%，批间<5% <0.2(1cm 光径) 密闭，12 个月
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葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)
产品简介：
葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式 C6H12O6，分子 量为 180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。用酶学方法测定葡 萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法
Leagene 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸， 同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢，分光光度计 505nm 进行比色测定。本试剂盒专门用 于人或动物的血清、血 浆、脑脊液、细胞 、组织等样本中 的葡萄糖含量定 量测定。本试剂 盒仅用于科研领域，丌宜用于临床诊断或其他用途。
用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
组成：
名称
编号
TC071 3 100T
TC071 3 200T
Storage
试剂(A): 酚试剂
50ml
2× 50ml RT 避光
试剂(B): 磷酸盐缓冲液(pH7.0)
酶试剂
4-氨基安替比林 葡萄糖氧化酶
50ml
2× 50ml -20℃ 避光
过氧化物酶
临用前，按酚试剂：酶试剂=1：1 混匀，即 GOD-POD 工作液，4℃保存。
3
3
3
300
300
300
②充分混匀,水浴中孵育。。 ③酶标仪测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 5、 全自动生化分析仪 Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl)
3 3
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10
GOD-POD 工作液(ml)
1.0
1.0
1.0
②充分混匀,水浴中孵育。。 ③分光光度计测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 4、 酶标仪 Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：
空白孔
标准孔
待测孔
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl) 待测样本(μl) GOD-POD 工作液(μl)