SIGMA 葡萄糖HK检测试剂盒说明书
葡萄糖检测试剂盒
原理
原理
1.己糖激酶法(HK法) 葡萄糖 + ATP G-6-P+ ADP G-6-P + NAD+ 6-磷酸葡萄糖+NADH + H NADH在340/380nm的吸光度变化与标本中存在的葡萄糖数量成正比，可在340/380nm波长处进行吸光度测定， 同时与标准品吸光度比较，从而计算出样本中葡萄糖的浓度。 2.葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法) 葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2 H2O2+苯酚+4-氨基安替比林醌亚胺色素+H2O 上述反应生成的红色醌亚胺色素与样本中葡萄糖的浓度成正比，可在500nm（490至520nm）波长处进行吸光 度测定，同时与标准品吸光度比较，从而计算出样本中葡萄糖的浓度。 计算公式 葡萄糖浓度（mM）=（测定管吸光度-空白管吸光度）/（标准管使用方法
1.葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法) 取3支试管，编号，按下表操作（可根据使用检测仪器调整样品与工作液体的使用量）： 混匀，置37℃水浴中保温15 min，在波长500 nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。 2.葡萄糖氧化酶法(GOD-PAP法) 取3支试管，编号，按下表操作（可根据使用检测仪器调整样品与工作液体的使用量）： 混匀，置37℃水浴中保温15 min，在波长340 nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。 3.电极法 首先将氧电极置于含有适量葡萄糖氧化酶的溶液中，然后加入待测样品，样品中的葡萄糖被氧化而消耗氧。 由于氧消耗量与血糖浓度呈正比，而电极的极限扩散电流又与溶液中的氧含量呈正比，因此，氧电极值即可反映 样品中血糖浓度。
葡萄糖检测试剂盒(电极法)产品技术要求
医疗器械产品技术要求编号：葡萄糖检测试剂盒（电极法）1.产品型号/规格及其划分说明序号规格1500ml22×2000ml2.性能指标2.1外观试剂R溶液黄色、无颗粒、无杂质。
2.2净含量试剂盒各试剂装量应不小于标示值。
2.3分析灵敏度灵敏度（检测限）应≤3.31mmol/L。
2.4线性范围在(0～20)mmol/L范围内，其线性相关系数r≥0.990；浓度≥5.0mmol/L时，相对偏差≤20%；浓度＜5.0mmol/L时，绝对偏差≤1.0mmol/L。
2.5测量精密度2.5.1重复性用控制血清重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应≤6.0%。
2.5.2批间差批间差应≤10.0%。
2.6准确度用参考物质进行测试，其相对偏差应≤10.0%。
3.检验方法仪器基本要求a）恒温装置温度：37℃±1℃。
b）全自动生化分析仪。
测试方法按说明书规定，因不同机型使用试剂最终浓度相同。
在此推荐以本公司BECKMAN全自动生化分析仪进行测试。
3.1外观和性状目测检查，试剂R溶液性状应符合2.1的要求。
3.2净含量用通用量具进行测量，应符合2.2的要求。
3.3分析灵敏度用蒸馏水作为空白，测定20次，计算空白平均值和SD，按式（1）计算，结果应符合2.3的规定。
检测低限（LLD）=空白的平均值+2SD (1)注：参照冯仁丰《临床检验质量管理技术基础》58页分析灵敏度（检测限）的操作。
3.4线性范围用接近线性范围上限高浓度（活性）的样品和接近线性范围下限低浓度（活性）的样品，混合成5个稀释浓度（xi）。
分别测试试剂（盒），每个稀释浓度测试3次，分别求出检测结果的均值（yi）。
以稀释浓度（xi）为自变量，以测定结果均值（yi）为因变量求出线性回归方程。
计算线性回归的相关系数（r）。
稀释浓度（xi）代入线性回归方程，计算yi的估计值及yi与估计值的相对偏差或绝对偏差，应符合2.4的要求。
3.5测量精密度3.5.1重复性在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复测试至少10次（n≥10），分别计算测量值的平均值（x）和标准差（s），按公式（2）计算变异系数（CV），应符合2.5.1的要求。
葡萄糖含量测定试剂盒
葡萄糖含量测定试剂盒葡萄糖含量测定试剂盒作为分析工具，酶法已在食品、生物化学和制药工业中得到了广泛的应用。
酶法具有特异性强，可重复性好，灵敏度高，检测速度快等优点，是理想的分析方法。
本试剂盒主要用酶法定量测定食品和其他材料中葡萄糖的含量。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下，氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。
在过氧化物酶的存在下，过氧化氢与邻联茴香胺反应，生成有色产物。
氧化的邻联茴香胺与酸反应，形成更稳定的有色产品。
在540nm下测定其吸光度值，吸光度值的变化与原来的葡萄糖浓度成正比。
本试剂盒适用于葡萄糖含量的比色测定，可完成100次反应。
试剂准备1. 酶溶液：用98mL酶缓冲液溶解1管酶，颠倒混匀，不要涡旋。
分装后避光保存于-20°C。
2. 邻联茴香胺溶液：在邻联茴香胺试管中，加入5mL蒸馏水溶解酶，颠倒混匀，不要涡旋，分装后避光保存于-20°C。
3. 分析缓冲液：将酶溶液与邻联茴香胺溶液混合，比例为49比1，按需要的量进行混合，混合后的溶液，可在2-8°C下避光保存2周。
如果出现浑浊或有颜色形成，应丢弃。
4. 终止反应液：将市售浓硫酸与蒸馏水混合，比例为1:2。
切记，在40mL蒸馏水中，缓慢加入20mL浓硫酸。
不能将蒸馏水加入浓硫酸中。
其中，浓硫酸需用户自备。
使用说明一样本制备1. 液体样本制备：用蒸馏水将样品稀释至约20~80μg葡萄糖/mL。
如果需要，可过滤或去蛋白，使溶液澄清。
有颜色的溶液需要脱色；碳酸或发酵产品需要脱气。
2. 固体样本制备：称取样品约0.1mg。
用蒸馏水提取样品。
该溶液可加热（<75°C）以辅助提取。
用蒸馏水将样品稀释至约20~80μg葡萄糖/mL。
如果需要，可过滤或去蛋白，使溶液澄清。
二葡萄糖检测方法1：用不同浓度葡萄糖制备标准曲线2. 在第一个试管中加入2mL分析缓冲液启动反应，然后混合，记为零时；随后每间隔30或60秒，在一个试管中加入2mL分析缓冲液，以此类推。
葡萄糖(GLU)测定试剂盒(己糖激酶法)产品技术要求sainuopu
葡萄糖（GLU）测定试剂盒（己糖激酶法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中葡萄糖的含量。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
校准品（选配）：1×1ml；1×3ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：浅黄色澄清液体。
校准品：无色至淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.3。
2.4 分析灵敏度测定浓度为5.55mmol/L样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.2，0.4）范围内。
2.5 线性范围在（0.5，38.9）mmol/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
在[5，38.9）mmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果（0.5，5）mmol/L时线性绝对偏差不大于±0.5mmol/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于6%。
2.8 准确度当参考物质浓度在（0，4.16）mmol/L时，实测值与标示值偏差不应超过±0.833mmol/L；当参考物质浓度在[4.16，38.9）mmol/L时，实测值与标示值偏差应在±20%范围内。
2.9校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至中国计量科学研究院生产的有证参考物质（GBW10062）。
01 GLU-HK
复星长征体外诊断试剂标准操作规程试剂名称：葡萄糖测定试剂盒（己糖激酶法）上海复星长征医学科学有限公司目录1 试剂盒概况2 方法学原理3 试剂主要组分4 样本准备5 试剂准备6 校准要求7 质量控制8 计算方法9 参数设定10 参考范围11 试剂性能概要12 超出可报告范围的处理13 其他必须说明的内容14 参考文献1 试剂盒概况1．1 货号：1.02.0702/1.02.0704/1.02.0801。
1．2 包装规格：试剂1（R1）：4×50ml ；试剂2（R2）：2×50ml试剂1（R1）：4×50ml ；试剂2（R2）：4×25ml 试剂1（R1）：2×250 测试；试剂2（R2）：1×500 测试1．3 产品注册证号：沪食药监械（准）字2014第2401267号 1．4 产品标准号：YZB/沪 2727-40-2014 1．5 版本号：2014－1 2 方法学原理本试剂所采用的反应式如下：+--+++-−−−→−+--+--−→−+HNADH PG NAD ADPATP PDHG HK 6666磷酸葡萄糖磷酸葡糖糖葡萄糖式中：ATP 为三磷酸腺苷；ADP 为二磷酸腺苷；HK 为己糖激酶；G-6-PDH 为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG 为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中，NADH 的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm 处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
3 试剂主要组分 3．1 试剂1（R1）三磷酸腺苷0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶375U/LNAD15mmol/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L 3．2 试剂2（R2）己糖激酶60KU/L哌嗪-N,N’-双（2-乙磺酸）缓冲液50 mmol/L3．3 储存条件3．3 . 1 在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起效期12个月。
葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)产品技术要求shouyi
葡萄糖测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中葡萄糖的含量。
1.1 包装规格4×100mL；6×60mL；8×50mL；2×100mL1.2. 产品组成葡萄糖氧化酶15KU/L，过氧化物酶1.5KU/L，变旋酶2.0KU/L，苯酚0.75mmol/L，4-氨基安替比林0.25mmol/L。
2.1 外观试剂为无色或略带红色透明溶液；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在500nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于0.10。
2.4 分析灵敏度测定10.2mmol/L葡萄糖时，吸光度的变化在0.408±0.1001范围内。
2.5准确度测定标准品，当浓度≤4.16mmol/L，实测值与标示值偏差应不超过±0.833mmol/L；当浓度＞4.16mmol/L时，实测值与标示值的偏差应在±10%范围内。
2.6 精密度2.6.1 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于2.0%。
2.6.2 批间差试剂（盒）批间相对极差应不大于3.0%。
2.7 线性测试血清样本，试剂线性在[0.1，27.8] mmol/L区间内：a) 线性相关系数|r|应不小于0.990；b) [0.1，3.0] mmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±0.3mmol/L；（3.0，27.8] mmol/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装试剂2～8℃避光保存有效期18个月，到效期末的样品检测，检测结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介：葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应，通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。
本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。
本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性，并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。
本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品)，相当于50ng/ml 或278µM ；检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品)，相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。
本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度，也可以检测高血糖血样品。
市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ，相当于约20-600mg/dl ，在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难，而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。
本试剂盒所需样品体积小。
本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ，也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。
本试剂盒特异性好。
与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比，由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，且不受其它还原性物质的影响，本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。
葡萄糖(glucose)，也被称为dextrose 或grape sugar ，被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。
葡萄糖测定试剂盒使用说明书(OX法)(精)
葡萄糖测定试剂盒使用说明书(OX法)GLUCOSE MENSURATION REAGENT KIT OPERATION INSTRUCTION[用途]本试剂用于体外定量测定人血清、血浆或尿液中葡萄糖的浓度。
葡萄糖的准确测定对于诊断和处理高糖血症和低糖血症是十分重要的。
葡萄糖浓度的升高可由糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症和脑血管意外等引起。
葡萄糖浓度的降低则可由胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍或厌食等引起。
通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和刺激试验与葡萄糖测定一同进行。
[方法原理]采用葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase,GOD）偶联Trinder反应。
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖的氧化产生葡萄糖酸和过氧化氢，后者与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸经过氧化物酶的作用（Trinder反应）形成红色的醌亚胺化合物，从而引起500nm处吸光度的上升，此种变化与样本中的葡萄糖浓度成正比。
双光束分析时，空白波长可设于660-700nm。
[产品规格]规格1（R1：4×60ml，R2：1×60ml），包装总量：300ml规格2（R1：2×80ml，R2：2×20ml），包装总量：200ml规格3（R1：4×20ml，R2：1×20ml），包装总量：100ml规格4（R1：4×1000ml，R2：1×1000ml），包装总量：5000ml[试剂成份]试剂1 对羟基苯甲酸盐25mmol/L 磷酸盐缓冲液100mmol/L试剂2 葡萄糖氧化酶>1KU/ml 过氧化物酶>1.5KU/L4-氨基安替比林0.3mmol/L 磷酸盐缓冲液100mmol/L[试剂制备]底物启动方式（双试剂模式）试剂1和试剂2均为液体制品，可直接使用。
样本启动方式（单试剂模式）将试剂1和试剂2以4:1的比例混匀。
[试剂稳定性和贮存]在2-8℃避光条件下未开封的试剂,可稳定12个月。
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SIGMA 葡萄糖HK 检测试剂盒说明书
（Glucose (HK) Assay Kit; Product Code GAHK -20）
一、产品介绍
食品、生化和制药业普遍将酶作为分析工具。
酶法具有特异性高、重现性好、敏感性高以及反应快速的特点，是用于分析的理想工具。
由于酶具有高的特异性和敏感性，所以不需样品制备即可进行定量分析。
本试剂盒以酶法定量测定食品和其他材料中的葡萄糖。
原理：
葡萄糖+ATP Hexokinase
→ 6-磷酸葡萄糖+ADP
G6P+NAD G6PDH → 6-磷酸葡萄糖酸+NADH
葡萄糖在己糖激酶催化反应中被A TP 磷酸化，然后G6P 在NAD 存在下被6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化，氧化为6-磷酸葡萄糖酸；反应中，等分子量的NAD 被还原为NADH 。
随后的340nm 吸光度的增加与葡萄糖含量成正比。
二、试剂组成
1、葡萄糖检测试剂
用20ml 水溶解小瓶内粉剂；加水后立即盖紧瓶塞，反转混匀数次，不可震动。
加水20ml 溶解后，每瓶溶液含有1.5 mM NAD ，1.0 mM ATP ，1.0 U/ml G6PDH ；并含有防腐剂苯甲酸钠和山梨酸钾。
小瓶粉剂保存于2-8℃。
如果粉剂受潮结块、加水不能充分溶解、或水溶液浑浊，则应将试剂弃用。
试剂水溶液比较稳定，18-26℃保存7天、2-8度保存4周不会有微生物生长。
以水作为空白参照，新配置的溶液340nm 吸光度如果大于0.350，则溶液不适合使用。
2、葡萄糖标准溶液
D -葡萄糖，1.0mg/ml 溶于0.1%苯甲酸；该标准液为即用型，符合美国国家标准技术研究所标准；2-8℃可至少保存半年。
期间如果溶液浑浊，则应弃用。
三、需自备的实验仪器
1、可测定340nm 吸光度的分光光度计
2、测量杯
3、10μl -1ml 量程的移液器
四、注意事项和免责声明
本试剂仅供科研使用，不能用于药品、家庭以及其他用途。
涉及危害和使用安全性问题，参照材料安全数据表。
五、存储及稳定性
2-8℃保存。
六、实验步骤
1、样品制备
液体：以去离子水稀释样品至0.05-5mg 葡萄糖/ml 。
可过滤或去蛋白处理使样品澄清；样品葡萄糖含量较低而颜色较浓时，应予以脱色处理。
含碳酸或发酵样品，须脱气处理。
固体：称量0.1mg 样品，用去离子水提取样品。
可以加温溶液（＜75℃）以助提取。
以去离子水稀释提取液至0.05-5mg 葡萄糖/ml 。
可过滤或去蛋白处理使样品澄清。
2、测定
吸取0.5-50μg 葡萄糖质量相当的溶液。
为使ΔA360在0.03-1.6之间，必要时可重复测定并
改变溶液体积。
（2）混匀，室温（18-35℃）孵育15min
（3）去离子水调零，测量340nm吸光度，
3、计算
总空白对照应包括样品和试剂空白。
A Total Blank = A Sample Blank + A Reagent Blank
葡萄糖mg/ml = (ΔA) (TV) (Glucose Molecular Weigℎt) (F)
(ε)(d)(SV)(Conversion Factor for μg to mg)
葡萄糖mg/ml = (ΔA) (TV) (180.2) (F)
(6.22) (1) (SV) (1,000)
葡萄糖mg/ml = (ΔA) (TV) (F) (0.029)
(SV)
ΔA = A测试– A总空白
TV = Total Assay Volume (ml) 总测试体积
SV = Sample Volume (ml) 样品体积
Glucose MW = 180.2 g/mole（葡萄糖分子量）
F=制样稀释倍数
ε=NADH /mmol/cm在340nm的毫摩尔消光系数d=光径=1cm
1000=换算系数（μg到mg）
七、参考文献
（略）
翻译：Zhang Zhi-Qiang。