HPLC法测定丹膝颗粒中丹参酮_A的含量_李翔

供试品溶液的制备 取本品适量， 研细， 取约 1. 0 g， 精密称定， 置具塞锥形瓶中， 精密加入
［9 ］ Gokbuget N， Basara N， Bartmann H， et al． High singledrug activity of nelarabine in relapsed Tlymphoblastic leukemia / lymphoma offers curative option with subsequent stem cell transplantation［J］ ． Blood， 2011 ， 118 ： 35043511． ［ 10］ Commander LA， Seif AE， Insogna IG， et al． Salvage therapy with nelarabine， etoposide， and cyclophosphamide in relapsed / refractory paediatric Tcell lymphoblastic leukemia and lymphoma ［ J］． Br J Haematol， 2010 ， 150 ： 345351． ［ 11］ Dunsmore KP， Devidas M， Linda SB， et al． Pilot study of Nelarabine in combination with intensive chemotherapy in highrisk Tcell acute lymphoblastic leukemia： a report from the children＇s oncology group［J］ ． J Clin Oncol， 2012 ， 30 ： 27532759．
实用药物与临床 2013 年第 16 卷第 4 期
Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies， 2013 ， Vol． 16 ， No． 4
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甲醇 100 mL， 称定重量， 超声处理 （ 功率： 150 W， 频率： 40 kHz） 30 min， 放冷， 再称定重量， 用甲醇补 0. 45 μm 滤膜滤过， 足减失的重量， 摇匀， 取续滤 液， 即得。 2. 3 专属性试验 按“2. 2 ” 项下方法， 制备缺丹 “ 2. 1 ” 参的阴性样品溶液， 按 色谱条件测定对照品
101. 74
1. 42
取 3 批次样品， 按“2. 3 ” 项 ， 20 L 。 下方法制备供试品溶液 μ 进样测定 批号为 20110802 、 20110716 、 20110808 样 品 中 丹 参 酮 Ⅱ A 2. 9 样品含量测定 2. 085 、 2. 007 mg / 袋。 的含量分别为 2. 313 、 3 讨论 3. 1 通过比较乙腈水和甲醇水不同体系流动相 对样品中丹参酮 Ⅱ A 的分离效果， 发现甲醇水可 分析时 以取得令人满意的色谱峰形和分离效果， 间短， 试验成本更为经济。 3. 2 75% 甲醇、 50% 甲醇和水对颗粒 考察甲醇、 剂中丹参酮Ⅱ A 的超声提取效果， 发现甲醇溶液中 的含量最高， 这与丹参酮Ⅱ A 脂溶性较强的化学性
［ 关键词］ 丹膝颗粒; 丹参酮Ⅱ A ; 高效液相色谱法; 含量测定
Determination of tanshinone Ⅱ A in danxi granula by HPLC LI Xiang， LIU Guiyang， MA ZHOU Liang， WANG Fang （ Department of Pharmacy， First Affiliated Hospital of PLA General Hospital， Beijing Jianli， 100037 ， China） ［Abstract］ Objective To establish an HPLC method for determination of tanshinone Ⅱ A in Danxi granula．
“ 2. 1 ” 色谱条件进样， 测定峰面积。 以丹参酮 Ⅱ A 进样量（ μg） 为横坐标、 峰面积积分值为纵坐标绘 0. 29 制标准 曲 线， 得 回 归 方 程： Y = 6 894. 52 X（ r = 0. 999 9 ， n = 6 ） 。 结 果 表 明， 丹 参 酮 ⅡA 在 0. 020 50 ～ 0. 820 0 μg 范围内与峰面积呈良好的 线性关系。 2. 5 精密度试验 取对照品溶液 10 μL， 重复进 样 6 次。结果丹参酮 Ⅱ A 峰面积的 ＲSD 为 0. 27% （ n = 6） ， 表明仪器的精密度良好。
芳
采 用 HPLC 法， 色 谱柱: Agilent
建立测定丹膝颗粒中 丹 参 酮 Ⅱ A 含量的 HPLC 法。方法
Eclipse XDBC18 ( 4. 6 mm × 150 mm， 5 μm) ; 流动相: 甲醇水( 80∶ 20 ) ; 流速: 1. 0 mL / min; 检测波 长: 270 nm; 柱温: 30 ℃ 。结果 丹参酮Ⅱ A 在 0. 020 50 ～ 0. 820 0 μg 范围 内 与 峰 面 积 线 性 关系 良 好 ( r = 0. 999 9 ) ， 平 均 回 收率 为 99. 76% ， ＲSD = 1. 33% ( n = 6 ) 。结论 和评价方法。 本方法专属性 强、 重 复 性 好、 结果 准确 可 靠， 可 用 于 丹 膝颗 粒的 质 量 控 制
表1
取样量（ g） 0. 509 0. 516 0. 512 0. 514 0. 511 0. 507 0 2 4 2 8 2 样品量（ μg） 115. 3 116. 9 116. 0 116. 4 115. 9 114. 9 加入量（ μg） 123. 0 123. 0 123. 0 123. 0 123. 0 123. 0
溶液、 供试品溶液和阴性样品溶液。 结果显示， 供 试品溶液中丹参酮 Ⅱ A 色谱峰与其他色谱峰能达 到基线分离， 且保留时间与对照品溶液一致， 阴性 对照溶液在相同保留时间处无色谱峰， 表明其他 见图 1 。 组方药材味对丹参酮Ⅱ A 的测定无干扰，
图1
丹参酮Ⅱ A 与丹膝颗粒 HPLC 色谱图 1. 丹参酮Ⅱ A
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实用药物与临床 2013 年第 16 卷第 4 期
Practical Pharmacy And Clinical Ｒemedies， 2013 ， Vol． 16 ， No． 4
·药学研究·
HPLC 法测定丹膝颗粒中丹参酮 Ⅱ A的含量
李
［ 摘 要］ 目的
翔， 刘皈阳， 马建丽，性试验 取供试品溶液， 分别在 0、 8、 12、 24 h 进样。结果丹参酮Ⅱ A 峰面积的 ＲSD 为 1. 81% （ n = 6） ， 表明供试品溶液在 24 h 内稳定。 2. 7 重复性试验 取同一批号样品 6 份 （ 批号： 2. 6 20110802 ） ， “ 2. 3 ” 按 项下方法制备供试品溶液， 测 ＲSD 为 定丹参 酮 Ⅱ A 的 平 均 含 量 为 231. 3 μg / g， 1. 37% （ n = 6 ） ， 表明方法的重现性良好。 2. 8 加样回收率试验 精密称取已知含量的同 一批号样品 6 份（ 批号： 20110802 ） ， 精密加入适量 ， “ 2. 3 ” 丹参酮Ⅱ A 对照品溶液 按 项下方法制备供
B. 供试品溶液， C. 阴性样品溶液； 注： A. 对照品溶液，
2. 4
线性关系考察 精密量取丹参酮 Ⅱ A 对照品 储备液 1 mL， 置 10 mL 棕色量瓶中， 用甲醇定容， ， 20. 50 g / mL 摇匀 即得 μ 的对照品溶液。 精密吸 2、 5、 10 、 20 、 40 μL， 取丹参酮 Ⅱ A 对照品溶液 1 、 按
收稿日期： 2012 － 07 － 09 作者单位： 解放军总医院第一附属医院药剂药理科， 北京 100037
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丹参酮 Ⅱ A 对照品 （ 中国药品生物制品检定 200619 ， 所， 批号： 110766供含量测定用 ） ； 丹膝颗 粒 （ 10 g / 袋，九 芝 堂 股 份 有 限 公 司，批 号： 20110802 、 20110716 、 20110808 ） ； 甲醇为色谱纯， 其 他试剂均为分析纯， 水为重蒸水。 2 方法与结果 2. 1 色谱条 件 Agilent Eclipse XDBC18 色 谱 柱 （ 4. 6 mm × 250 mm， 5 μm ） ， 以甲醇水 （ 80 ∶ 20 ） 为 流动相， 流速为 1. 0 mL / min， 检测波长为 270 nm， 柱温为 30 ℃ 。理论板数按丹参酮Ⅱ A 峰计不低于 5 000 。 2. 2 2. 2. 1 溶液的制备 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮 Ⅱ A 10. 25 mg， 对照品 置 50 mL 棕色量瓶中， 用甲醇定 容， 摇匀， 即得 205. 0 μg / mL 的对照品储备液， 置4 ℃ 冰箱保存。 2. 2. 2
Methods The Agilent Eclipse XDBC18 （ 4. 6 mm × 150 mm， 5 μm） was used， the mobile phase consisted of methanolthe flow rate was 1. 0 mL / min， the column temperature was at 30 water（ 80∶ 20 ） with the detection wavelength at 270 nm， ℃ ． Ｒesults A good linear correlation of tanshinone Ⅱ A was observed within the range of 0. 020 50 ～ 0. 820 0 μg （ r = with the average recovery was 99. 76% ， ＲSD = 1. 33% （ n = 6 ） ． Conclusion The method is simple and accu0. 999 9 ） ， rate with good specificity and reproducibility， and it can be used for the quality control and evaluation of Danxi granula．