丹参提取工艺研究

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丹参提取制备实验报告(3篇)

丹参提取制备实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习和掌握丹参提取制备的基本原理和操作方法。

2. 提高对丹参中有效成分丹参酮的提取纯化技术的认识。

3. 了解薄层扫描法和高效液相色谱法(HPLC)在丹参酮含量测定中的应用。

二、实验原理丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)是中药材中常用的活血化瘀药,其主要有效成分为丹参酮类化合物。

本实验采用溶剂提取法从丹参药材中提取丹参酮,并通过薄层扫描法和HPLC法对丹参酮A进行含量测定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:丹参药材、甲醇、石油醚、氯仿、正己烷、硅胶薄层板、HPLC色谱柱、紫外检测器等。

2. 实验仪器:分析天平、超声波清洗器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、高效液相色谱仪等。

四、实验方法1. 丹参酮提取(1)称取干燥的丹参药材粉末5.0g,置于50mL具塞锥形瓶中。

(2)加入20mL甲醇,超声提取30分钟。

(3)过滤,收集滤液,旋转蒸发浓缩至近干。

(4)用适量石油醚溶解残渣,转移至分液漏斗中。

(5)依次用氯仿、正己烷萃取,合并萃取液。

(6)旋转蒸发浓缩至近干,用适量甲醇溶解残渣,转移至10mL容量瓶中,定容至刻度。

2. 薄层扫描法测定丹参酮A含量(1)制备硅胶薄层板,用氯仿-甲醇(8:2)为展开剂。

(2)取适量丹参酮A对照品溶液和提取样品溶液,点样于薄层板上。

(3)展开,取出晾干。

(4)用紫外灯(254nm)照射,观察斑点。

(5)用薄层扫描仪测定斑点面积,计算丹参酮A含量。

3. HPLC法测定丹参酮A含量(1)色谱条件:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-水(80:20),流速为1.0mL/min,检测波长为254nm。

(2)样品制备:取适量丹参酮A对照品溶液和提取样品溶液,经0.45μm微孔滤膜过滤,进样。

(3)测定:记录峰面积,计算丹参酮A含量。

五、实验结果与分析1. 丹参酮提取通过实验,成功从丹参药材中提取出丹参酮。

采用薄层扫描法测定,丹参酮A平均回收率为99.8%,RSD为2.15%。

丹参的提取精制工艺的研究

丹参的提取精制工艺的研究
收稿日期: 2012 - 06 - 23 作者简介: 蔡韡韡( 1985 - ) ,女,上海人,实验师,学士,研究方向:
中药学。
丹参的活性成分主要分为脂溶性和水溶性两类。其脂 溶性成分主要是丹参酮、隐丹参酮、丹参酮ⅡA 等,其水溶 性成分主要是丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸 A、B、C、D、E、F、G 等[2 - 4]。丹参脂溶性成分以丹参酮类化 合物为代表,具有扩张血管、改善微循环和抗菌作用等基本 作用,同时具有免疫调节作用、激素样作用、抗氧化作用等 多方面的作用。丹参水溶性成分在丹参的作用中占有重要
基,同时具有多种其他作用,这些作用的结合在多种疾病治 疗中取得良好的效果[5 - 9]。
本文以丹参酮 IIA 和丹酚酸 B 为丹参脂溶性有效成分
和丹参水溶性有效成份的指标,兼顾两类有效成份优选丹
参的提取精制工艺,提高药材中有效成分的收率,降低得膏 率,便于制剂成型[10 ~ 12]。
1 丹参酮ⅡA的含量测定 参考《中华人民共和国药典》2005 年版 1 部第 57 页丹
DOI:10.13193/j.archtcm.2012.11.199.caiww.040
第 30 卷 第 11 期 2012 年11 月
中华中医药学刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 30 No. 11 Nov. 2 0 1 2
收率,降低得膏率,便于制剂成型。
关键词: 丹参; 丹参酮 IIA; 丹酚酸 B; 提取; 精制
中图分类号: R284. 1
文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2012) 11 - 2565 - 06
Research on Extraction Technology of Salvice Miltiorrhizae Radix

丹参的提取纯化实验报告

丹参的提取纯化实验报告

一、实验目的1. 学习丹参药材的提取和纯化方法。

2. 掌握薄层色谱法、高效液相色谱法等分离纯化技术。

3. 提高对丹参药材中主要活性成分的认识。

二、实验原理丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科植物,其根茎入药,具有活血化瘀、通络止痛、清心除烦等功效。

丹参中含有多种活性成分,如丹参酮、丹酚酸等。

本实验采用乙醇提取法提取丹参中的有效成分,利用薄层色谱法进行初步分离,再通过高效液相色谱法进行纯化。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:丹参药材(干燥)、乙醇、正己烷、硅胶、薄层板、高效液相色谱仪等。

2. 仪器:电子天平、回流提取器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、高效液相色谱仪等。

四、实验方法1. 丹参提取(1)称取干燥丹参药材10g,置于回流提取器中;(2)加入50mL 95%乙醇,回流提取1h;(3)冷却,过滤,收集滤液;(4)将滤液旋转蒸发至近干,用正己烷溶解,备用。

2. 薄层色谱分离(1)制备薄层板:将硅胶均匀涂布在玻璃板上,晾干;(2)点样:将提取液点于薄层板上,晾干;(3)展开:将薄层板置于展开缸中,加入正己烷,展开至溶剂前沿;(4)显色:将薄层板取出,晾干,喷以10%FeCl3乙醇溶液,显色。

3. 高效液相色谱纯化(1)制备样品:将薄层色谱分离得到的化合物溶解于甲醇中,制成一定浓度的样品溶液;(2)色谱条件:色谱柱:C18柱;流动相:甲醇-水(体积比80:20);流速:1.0mL/min;检测波长:254nm;(3)进样:将样品溶液进样,记录色谱图。

五、实验结果与分析1. 薄层色谱分离结果通过薄层色谱分离,观察到丹参药材中存在多个斑点,说明丹参中含有多种活性成分。

2. 高效液相色谱纯化结果通过高效液相色谱纯化,成功分离出丹参中的主要活性成分,如丹参酮IIA、丹参酮IIB等。

六、实验结论1. 本实验采用乙醇提取法成功提取了丹参中的有效成分;2. 通过薄层色谱法对丹参中的活性成分进行了初步分离;3. 高效液相色谱法进一步纯化了丹参中的主要活性成分。

丹参水溶性成分提取工艺研究

丹参水溶性成分提取工艺研究
2 2 2 干 膏 收 率 测 定 . .
病。 丹参的活性 成分 主要有脂 溶性 和水 溶性 两类 , 脂溶性成 分主要 是 丹参 酮 、 隐丹 参酮 、 丹参酮 Ⅱ 等。 1 近 0多年来 国内外对丹参 及
其 同属 植 物 的 脂 溶 性 成 分 进 行 了大 量 的 研 究 , 从 丹 参 中分 离 的 仅 二萜醌类化 合物就有 4 0多 个 , 且 对 其 药 理 也 进 行 研 究 。 而 中 并 然
丹 参 为 唇 形 科 植 物 丹 参 5 m o 。B ne的 干 燥 根 及 0 r ug 根 茎 , 用 于 治疗 妇 科病 、 心 病 、 血 性 中风 、 脉 粥 样 硬 化 等 疾 常 冠 缺 动
摇 匀 , 微 孑 滤 膜 ( .5 m) 用 L 0 4 滤过 , 续 滤 液 即得 供 试 品溶 液 。 取 测 定 法 : 别 精 密 吸取 对 照 品 溶 液 与 供试 品 溶 液 各 1 , 分 0 注 入液相色谱仪测定即可。
0 nb0 o a ts wa u e .T】 eh n J o a e e £丑 tn tme fa 1 o c n r£0 gnl e£ s s d ’e t a 0 d s g , x rc ig i ,eb n0 c n e tai n,e ta t t e we e h fur a tr i te x e j n . xr cj ng i s m r te 0 f co s n h e p rme t Th c ne t f s l in lc cd a te i1 o x rci n e o tn o a va o i a i B nd h yed f e ta t0 we e h s n s he n e e fr c e nn t e t_ tn c n t0 .Re ul Th r c o e a t i d x s 0 s r e ig he xI ci g o diin a s t e bet xr ci p c d r wa :a i g tme a u o 3 s e ta tng m e u e s dd n 6 i s m0 nt f 0% e h l k o o ,e ta tn fr tme , a h i 60 t y a h l xr ci g 0 3 i s e c tme mi n.CO l i n The ncus0 o tmie tc 0o y s e sbl wih p rbii . p i z d e hn l g i fa i e t o e a lt y Ke w0 ds S li mit0 r z Bun e 0 t g n l y r : ava lirhia g ; rho o a de in; xr ci g t c n lg ;s linoi a i B sg e ta tn e h o o y aV a l c cd

丹参片提取工艺的研究

丹参片提取工艺的研究

丹参片提取工艺的研究江 华,李兆明北京大学第三医院药剂科,北京100083 摘要:目的 研究丹参片提取工艺,并建立质量标准。

方法 定性比较,定量分析,正交试验筛选。

结果与结论 确定生产工艺为95%乙醇、6倍量温浸3h,75%乙醇、6倍量温浸3h,60%乙醇、6倍量温浸3h,药渣加12倍量水煎煮2次,每次115h。

关键词:丹参酮ⅡA;原儿茶醛;正交试验;定性定量中图分类号:R28412文献标识码:B文章编号:1006-0103(2002)05-0391-02 丹参(Radix Salviae miltiorrhizae)味苦、微温,入心、肝经,具活血化淤、安神宁心之功效。

有效成分达30余种[1],分脂溶性和水溶性两类。

水溶性成分有增加冠脉流量、抗心肌缺氧等作用[2];脂溶性成分具体外抑菌作用,其在体内是否有似水溶性成分的作用尚无报道,且所含的许多化合物尚缺乏深入的构效关系研究[3]。

现就不同溶媒提取丹参的成分进行分析比较。

1 实验部分111 仪器与药品CS-910双波长扫描仪(日本岛津)。

丹参饮片(北京市药材公司售);原儿茶醛(AR);丹参酮ⅡA (北京药品检验所)。

等体积的1%铁氰化钾与2%三氯化铁混合为显色剂;展开剂为苯-醋酸乙酯-甲酸(16∶10∶116),苯-醋酸乙酯(19∶1);硅胶G板(青岛海洋化工厂)。

112 方法与结果11211 样品液的制备 取丹参饮片粉碎,称取5份10100g药材加适当溶剂(分别为水、50%乙醇、60%乙醇,75%乙醇、95%乙醇)各100ml,热回流提取3 h,趁热抽滤,加适量溶剂清洗药渣,定容于100ml 量瓶中。

以移液管吸取25ml溶液,以1%HC1调作者简介:江华,女,主管药师。

pH2,以乙醚(25、20、20、10ml)萃取,收集乙醚液加热蒸干,残渣加015ml乙醇溶解。

取丹参片10100g,以60%乙醇冷浸24h,浸出液过滤,定容于100ml量瓶。

11212 标准品的制备 取丹参酮ⅡA10mg加无水乙醇,定容于25ml量瓶。

丹参提取工艺分析

丹参提取工艺分析

丹参提取工艺分析论文摘要:目的优选丹参脂溶性及水溶性成分的集成提取工艺条件。

方法采用正交设计法,以丹酚酸b、丹参酮ⅱa为测定指标,采用高效液相色谱法测定其含量,并以此为指标优选集成提取工艺条件。

结果集成法可同时对丹参中脂溶性及水溶性成分进行提取。

优选的提取工艺条件为:加8倍量70%乙醇,提取2次,每次1 h。

结论采用集成方法同时提取丹参水溶性及脂溶性部位,可省时、省工、节能,使丹参的提取工艺合理可行。

主题词:丹参提取工艺【中图分类号】s567.53丹参为唇形科植物丹参salvia miltiorrhiza bge.的干燥根及根茎,主要含有二萜醌类脂溶性及酚酸类水溶性成分。

2005年版《中华人民共和国药典》(一部)以丹参酮ⅱa和丹酚酸b为指标,对丹参药材进行质量控制。

为了能同时兼顾丹参脂溶性及水溶性两类有效成分,我们采用正交试验法,以丹参酮ⅱa和丹酚酸b的含量为考察指标,对丹参的提取工艺进行全面优选,以使丹参的提取工艺更科学、合理。

一、仪器与试药agilent 1100高效液相色谱仪。

丹参酮ⅱa(批号110766- 200518)、丹酚酸b(批号111562-200605)标准品购自中国药品生物制品检定所;丹参药材购自安国药材市场(经河北省药品检验所中药室孙宝惠主任药师鉴定为正品)。

甲醇、乙腈为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

二、方法与结果1、丹参提取液中丹参酮ⅱa的含量测定方法采用phenomenex luna c18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm,广州菲罗门科学仪器有限公司),流动相:甲醇-水(75∶25),流速:1.0 ml/min,检测波长:270 nm。

精密称取丹参酮ⅱa对照品10.21 mg,置50 ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀;精密量取2 ml,置25 ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为对照品溶液(每1 ml中含丹参酮ⅱa 16.32 μg)。

分别取溶剂考察、粒度考察、正交试验及验证试验中回流提取液的稀释液,以0.45 μm微孔滤膜滤过,作为供试品溶液。

丹参提取工艺的实验研究

丹参提取工艺的实验研究

考察 不 同提 取 条件 下丹 参 中丹 参酮 Ⅱ 一原儿 茶醛 的溶 出情况 方 法
量及 出膏率 为指标 , 用正 交设 计 和单 因素比较 法对丹 参的提 取I 艺进行 优选 结果 用 8倍 量的 7 乙醇提 取 2次 , O 每次 2 。结论 h 关键 词 : 参 ;i 酮 I ; 交设 计 丹 4参 - ^正 中图 分类号 : 8. R24 2 文献 标识 码 : A
的含量 。
2 1 1 色谱条件 色谱柱 K o aiCa2 0 m× .. rm s 1 0 l ( m 4 6mm, . 5岬 ) 流 动 相 : 醇一 (0; 0 ; 测 波 ; 甲 水 8 2 )检
长 :7 m; 2 0n 流速 :. ・ n 柱 温 : 温 ; 样 10mL ml一; 室 进
丹 参提 取I 艺的研 究 为其深入研 究提 供 1科 学依据 文 章编 号 :0 420 (02 0—020 1 0—47 20 )20 6—2
表 2 正 交试验提取丹参脂溶性成分 及结果
丹 参 为 唇 形 科 植 物 丹 参 S li lor ia avamiirhz t B e 的干 燥 根及 根 茎 。具 有 祛 瘀止 痛 、 血通 经 、 g. 活 清
心除烦 的功 效 。 用于 月经不调 、 闭经 、 经 、 腹刺痛 、 痛 胸
心烦 不眠 、 脾肿 大及 心绞 痛“ 丹 参用 于治疗 冠 心 肝 病 的 主 要 有 效 成 分 分 为 脂 溶 性 成 分 和 水 溶 性 成 分。 其提 取工 艺亦 分 为两 种 : 一种 为脂 溶性 成分 ( 丹 参酮 1 为 指标 ) 的提 取 方法 , 一种 为水 溶性 另 成 分 ( 原儿 茶醛 为 指标 ) 的提取 方法 , 现分别 对这 两 种 提取 工艺进 行优 选 , 为进 一步研 究 和工业化 生产 提 供 科学 依据 l 仪 器与试 药

丹参中主要成分的提取分离工艺简述

丹参中主要成分的提取分离工艺简述

丹参最主要含有的成分为脂溶性的二萜类成分和水溶性酚酸类成分,所以在设计丹参提取分离时,主要考虑的是这两类物质的提取过程。

其中脂溶性成分以丹参酮ⅡA为主要有效成分,其含量也相对较高;而水溶性成分以丹参素、丹参酚酸类、原儿茶醛为主要成分,原儿茶醛虽为活性成分,但其在丹参中含量很低。

且水溶性成分对于热的敏感性强,脂溶性成分有升华性,在长时间热处理过程中容易成分损失。

1、提取已知丹参中成分热不稳定,采用梯度渗漉法对脂溶性成分和水溶性成分进行提取。

先以95%乙醇对丹参药材进行浸泡溶胀一段时间后,再用95%乙醇进行渗漉,采用正交法选用合适的渗漉速率,注意低温操作。

滤去渗漉液A(主要为提取丹参酮等脂溶性成分),再用8倍量水对药渣进行渗漉,滤去渗漉液B,提取水溶性成分。

两份渗漉液均需要采用减压浓缩的方式进行适当浓缩,温度不宜过高,时间也不宜过长。

2、分离对渗漉液A可以采用水沉法进行精制。

因为丹参酮ⅡA等二萜醌类成分具有共轭体系,刷型作用力强,也可以选用合适的大孔树脂吸附进行分离,再使用95%的乙醇进行解吸附。

对渗漉液B可以采用醇沉法,查资料可以加醇使药液含醇量达50%,能减少成分的损失,起到最好的分离效果。

另外,由于水溶性酚酸成分中,丹酚酸具多个酚羟基、且分子量较大,可以采用大孔吸附树脂和聚酰胺树脂吸附的方法进行分离;而丹参素与原儿茶醛分子量小于丹酚酸类成分,分子间作用力相对于丹酚酸类较小,因此与水的亲和力更大,更适合于阴离子交换树脂进行分离。

若要对丹酚酸类成分过大孔树脂进行分离,可采用先用水洗脱,再用醇洗脱的方式进行分离纯化。

3、超临界流体萃取法超临界流体萃取法是现行方便、有效提取丹参中有效成分的方法,同样在条件的选择上需要控制温度、压力、时间等因素,另外可以加入适当的夹带剂来提高提取效率。

如脂溶性成分可以加入高浓度的乙醇来增加脂溶性成分的溶解性,而水溶性成分也可以选用合适的夹带剂,有文献提出可以选用10%醇和非离子表面活性如吐温的混合体系溶液进行提取。

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丹参提取工艺研究
丹参由脂溶性成分和水溶性成分组成,其酯溶性成分丹参酮ⅡA是治疗心脑血管疾病的有效成分。

本方案采用乙醇回流提取,通过正交实验(将丹参用不同提取时间、浓度乙醇溶液、不同溶媒量及提取次数各设置3个水平)选择最佳乙醇提取工艺条件,并以丹参酮ⅡA含量作为考察指标。

通过实验最终得:以12倍量85%的乙醇回流提取3次,1.5 h/次,丹参酮ⅡA的提取率最高。

标签:丹参;丹参酮ⅡA;提取工艺;正交试验
1丹参提取方法
丹参提取方法有:①水煎煮法,②乙醇回流法,③乙醇回流-水煎煮提取法,④超临界提取法,⑤超声提取法。

2丹参研究的现实意义
近年来管疾病的治疗取得迅猛发展,溶栓药物和介入治疗等大大改善了冠心病患者的预后。

随着人们生活水平提高,人们越来越关注自身的健康问题,天然药物及其保健品的需求也越来越大,为了更好地发挥丹参的药用价值,本文采用乙醇回流提取法,运用正交设计法,考察丹参醇提的影响因素,并以丹参酮ⅡA 作为参考指标,筛选最佳提取工艺条件。

2.1实验材料
2.1.1仪器,见表1。

2.1.2试剂及药材乙醇(95%)(分析纯,杭州长征化工厂);甲醇(分析醇,杭州双林化工试剂厂);甲醇(色谱纯)。

丹参药材(20140108,亳州市安利达药业有限公司)。

2.2实验步骤
2.2.1正交试验的设计
2.2.1.1正交试验因素水平表根据影响乙醇回流提取的因素:以乙醇浓度、提取时间、溶媒量、提取次数为因素,每个因素拟定3个水平,因素水平表,见表2。

2.2.1.2 L934正交试验将丹参药材粉碎为粗粉,平行精密称取9份药材,每份10 g,按L934正交试验表安排实验,以丹参酮ⅡA的含量为指标。

将丹参药材粗粉,置蒸馏烧瓶中,精密加入规定量乙醇,称重,加热回流,放冷,再称定重量,用乙醇补足减失重量,摇匀,合并提取液,滤过,续滤液,即得。

2.2.2含量测定
2.2.2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-水(75-25)为流动相;检测波长270 nm。

理论塔板数按丹参酮IIA峰计算为12040。

2.2.2.2对照品溶液的制备精密称取丹参酮IIA对照品0.0020 g,置50 ml 棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,中含丹参酮IIA 40 g/ml。

2.2.3供试品溶液的制备精密量取1~9号试验回流提取液一定量,甲醇定容至25 ml棕色瓶中,摇匀,作为供试品溶液。

2.2.4供试品含量测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液(用0.45 μm 微孔膜滤过,取续濾液)各5 μl入液相色谱仪,测定,即得。

3实验结果与分析
3.1实验结果,见表3。

3.2结果分析从表3比较R(极差)值,可以看出,因素间主次关系为
B>C>A>D。

即乙醇浓度影响最大,其次是加醇量,再次是提取时间,提取次数的影响最小。

直观分析正交试验结果,确定以A2B2C3D3,即加12倍量85%的乙醇提取3次,1.5 h/次,为最佳工艺条件。

4结论
丹参是我国现代研究较早较多的中药,其脂溶性成分和水溶性成分均具有显著的药理作用,将其开发为药物或相应保健品,得出更高提取率的工艺更是发挥着举足轻重的作用,优良工艺无疑会造福于人类。

本实验以丹参中主要成分丹参酮ⅡA为指标,采用正交试验法对丹参的提取工艺进行了优选后实验以乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数为因素,4个因素各分3个水平,结果表明,乙醇浓度为85%乙醇量为药材量的12倍,回流时间为90 min,回流3次为最佳提取工艺。

中药材的工艺研究,应根据临床疗效的需要、处方中各组成药物的性质、拟制备的剂型,从传统用药的经验出发,结合现代化学成分、药理等方面的资料,并结合生产设备条件、经济技术的合理性,选择和确定最佳生产工艺。

本文通过试验优选了最佳工艺参数,为全面开发利用丹参打下基础。

参考文献:
[1]李娴,金传山,吴德玲,等.HPLC同时测定丹参中丹参酮ⅡA与丹酚酸B
的含量[J].安徽中医学院学报,2007,26(3):47-49.
[2]杨巧巧,高君柱.丹参提取工艺条件的优选[J].中成药,2004,26(1):84.
[3]谢凯,赵磊磊,姜红宇,等.近年来丹参提取工艺的研究概况[J].中国试验方剂学杂志,2007,13(10):67-70.
[4]杨保津.丹参的活性成分[J].中成药研究,1986,21(3):36-39.
[5]胡志方,郭慧玲,胡律江.不同提取工艺对丹参酮IIA 提取率的实验比较[J].江西中医学院学报,2005,17(1):45.编辑/肖慧。

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