丹参提取物中总丹参酮(Total Tanshinone)含量测定方法
编号:FZD0146
丹参提取物中总丹参酮含量测定方法
一、色谱条件
色谱注:Inertsil ODS-3 4.6×150mm 5μm
流动想:甲醇:水(77.5:22.5,V/V)
流速:1.0ml/min
检测波长:254nm
柱温:25℃
进样量:10ul
二、溶液制备
1.对照品溶液制备 精密称取隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA对照品各约3mg于25ml容量瓶中,加二氯甲烷溶解定容。
2.样品溶液制备 精密称取丹参粉末400mg(样品中总丹参酮含量约为1%)于25ml容量瓶中,加甲醇5ml,二氯甲烷10ml ,超声振荡1h,冷却至室温,用二氯甲烷定容,用0.45um滤膜过滤后,既得样品溶液。
三、样品测定
在上述色谱条件下,待仪器稳定基线平稳后进样测定。隐丹参酮(Cryptotanshinone)、丹参酮Ⅰ(TanshinoneⅠ)、丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)保留时间分别约为8min、9min、14min,与杂质分离较好,用外标法计算含量。
反相高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参素的含量
反相高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参素的含量
【摘要】 目的 建立高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参素含量的方法。方法 HPLC法,Hypersil填料C18柱,流动相为甲醇 0.05%磷酸溶液(5∶95),流速为1.0 ml/min,检测波长为280nm。结果 丹参素0.088~2 μg范围内线性关系良好(r=0.9995),平均回收率为99.2%,RSD为1.7%。结论 该方法简便、灵敏、准确,可作为复方丹参片的质量控制标准。
【Abstract】 Objective To establish an HPLC method for the determination of
DanShensu sodium. Methods HPLC and a Hypersil C18 Column was used. The
mobile phase was methanol 0.05% acetic acid(5:95). The detective wavelength was at
280 nm, the flow rate was 1.0 ml/min. Results The linear range of danshensu sodiun
was 0.088~2 μg,(r=0.9995).The average recovery was 99.2%,RSD 1.7%. Conclusion
The method is simple and rapid which can be used for the quality control of
Danshenpian mixture.
【Key words】HPLC;Danshenpian mixture;Danshensu sodium
复方丹参片临床上常用的一种复方制剂,由丹参、葛根等中药经过提取精制而成,具有活血化瘀、通脉养心、活血消肿、养血安神等功效,临床用于治疗冠心病、心绞痛、胸中憋闷等疾病[1]。丹参素钠为其中主要水溶性成分,丹参素钠的含量测定方法主要有紫外分光光度法[2]、薄层扫描法[3]及HPLC法[4]等。笔者采用反相高效液相色谱法测定本品中的丹参素钠的含量。
一测多评法测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量
一测多评法测定白花丹参中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量
秦增贵;柳克浩;高长青;秦超
【摘 要】目的《山东省中药材标准》中收载的白花丹参项下只控制了丹参酮Ⅱ_A一种成分,现参考《中国药典》(2010年版)丹参项下丹参酮类测定方法,通过实验验证该方法在白花丹参药材中应用的准确性和可行性,达到质量可控的目的。方法测定白花丹参药材中3个有效成分,将其作为指标性成分,利用公式计算确立3种成分的相对校正因子,得到隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量,达到一测多评的目的。同时以外标法测得数据,进行比较。结果线性关系良好,方法精密度,重复性符合要求。结论该方法适用于白花丹参的含量测定,重现性良好,具备可行性。
【期刊名称】《药学研究》
【年(卷),期】2016(035)008
【总页数】4页(P457-459,496)
【关键词】一测多评法;白花丹参;质量控制
【作 者】秦增贵;柳克浩;高长青;秦超
【作者单位】莱芜市食品药品检验检测中心,山东莱芜271100
【正文语种】中 文
【中图分类】R927.2 白花丹参是山东莱芜道地药材,作为丹参的一个变型,《山东省中药材标准》(2012年版)收载为唇形科植物白花丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)的干燥根和根茎。苦,微寒。归心、肝经[1]。原标准对丹参酮类中的丹参酮ⅡA含量进行了控制。
现代研究表明,白花丹参富含丹参酮类化合物,尚含有一个结构比较新颖的二萜类衍生物[2]。现代药理研究表明,白花丹参具有保护脑梗死、抗氧化、抗癌等作用,民间流传应用其治疗血栓闭塞性脉管炎已有一百多年的历史[3]。其中的隐丹参酮对宫颈癌Hela细胞有较强的细胞毒性,能起到杀伤肿瘤的作用[4];丹参酮Ⅰ能够起到抑制小鼠B16黑色素瘤细胞,促进细胞凋亡作用[5];丹参酮ⅡA作用较多,除具有抗癌[6]作用外,目前研究较多的是心脑血管领域[7]。因此有效控制包括隐丹参酮在内的丹参酮类化合物的含量,对达到控制白花丹参药材及其制剂质量、确保其临床使用效果的目的有着重要意义。
不同产地丹参药材中丹参酮ⅡA与丹酚酸B的含量测定
38中国处方药 第18卷 第10期·实验研究·
采用乙腈-0.1%磷酸系统进行梯度洗脱。③本试验考察了不同柱温、流速对分离度及基线是否平稳的影响。本试验考察的柱温为25℃,30℃和35℃,试验结果表明,柱温对其的影响较小,因此本试验柱温采用30℃;还考察3种不同流速0.8 ml/min、1.0 ml/min、1.2 ml/min对分离度的影响,试验结果表明1.0 ml/min时分离度较好,基线也较平衡,故本试验采用的流速为1.0 ml/min。参考文献[1]尚云冰,曲夷.再论大承气汤[J].山东中医药大学学报,2016,40(2):135-136.[2]魏江存,秦祖杰,谢臻,等.大黄不同炮制品对大承气汤泻下作用变化研究[J].中华中医药杂志,2018,33(12):5392-5396.[3]张保国,梁晓夏,刘庆芳.大承气汤现代药效学研究[J].中成药,2009,31(9):1427-1430.[4] Peigen X, Liyi H, Liwei W.Ethnopharmacologic study of Chinese rhubarb[J].J Ethnopharmacol,1984,10(3):275-293.[5]魏江存,陈勇,谢臻,等.中药大黄炮制品的化学成分及药效研究进展[J].中国药房,2017,28(25):3569-3574.[6]阴健,郭力弓.中药现代研究与临床应用[M].北京:学苑出版社,1993:492.[7]刘学仁,张莹,林志群.橙皮苷和橙皮素生物活性的研究进展[J]. 中国新药杂志,2011,20(4):329-333,381.[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S]. 2015年版.北京:中国医药科技出版社,2015:23-24.[9]历淑芬. 大承气汤传统煎煮工艺及质量控制研究[D].杭州:浙江中医药大学,2012.[10]李丽,肖永庆.大黄饮片炮制前后物质基础变化规律研究[J].中华中医药杂志,2012,27(4):803-813.表5:DCQT样品测定结果(n=6)成分/样品平均质量浓度(μg/ml)RSD(%)柚皮苷867.24 1.55橙皮苷22.86 2.29新橙皮苷482.81 1.26芦荟大黄素6.90 2.05大黄酸27.84 2.21和厚朴酚19.60 2.53厚朴酚74.04 2.64大黄素13.57 3.01大黄酚38.69 2.75大黄素甲醚14.21
丹参等三种中药总黄酮含量分析及其抗氧化机制研究
1612017.06中医中药丹参等三种中药总黄酮含量分析及其抗氧化机制研究徐海涛北京卫生职业学院 北京市 101149【摘 要】目的:研究丹参、黄芪、人参三种中药中的总黄酮含量,以及其抗氧化机制。方法:采用紫外分光光度法,对含量进行测定,采用注射化学发光法、紫外分光光度法,对抗氧化性进行测定。结果:三种中药总黄酮含量不同,三种中药抗氧化性强弱依次为丹参>黄芪>人参。结论:在丹参、黄芪、人参三种中药中,丹参的总黄酮含量最高,抗氧化性最强。【关键词】丹参;黄芪;人参;总黄酮含量;抗氧化机制黄酮类化合物是一种重要的有效成分,生物功能广泛,可发挥抑制毛细管透性增加、抑制血小板凝聚、降血脂、抑制脂质过氧化等作用。在不同的中药材当中,总黄酮含量不同,而其抗氧化性也有所不同。1 仪器和材料1.1 材料试剂在本文的研究当中,材料选择了丹参、黄芪、人参标准样品;试剂选择了三氯乙酸、过氧化氢、硫酸亚铁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、邻二氮菲、浓盐酸、三清甲基氨基甲烷、碳酸氢钠、无水碳酸钠、邻苯三酚、2-硫代巴比妥酸、卵磷脂、芦丁对照品、溴化钾粉末、无水乙醇、石油醚、无水乙醚等。1.2 仪器设备在本文的研究当中,仪器设备选择了IFFM-E型流动注射化学发光、VERTEX70傅立叶红外光谱仪、T6紫外可见分光光度计等。2 方法和结果2.1 黄酮提取分析将三种中药粉碎、烘干,分别称取10g,置于索氏提取器,加入乙醚120ml。使用70%乙醇进行3次提取,每次10g。合并3次提取液,旋转蒸发减压浓缩至20ml。用石油醚进行3次萃取,将石油醚层弃用,用30%的乙醇将乙醇层定容至100ml。丹参、黄芪、人参提取液分别稀释500倍、100倍、100倍,使用200-400nm波长进行紫外扫描[1]。得出结果丹参、黄芪、人参最大吸收波长分别为285.20nm、256.00nm、266.00nm。2.2 总黄酮含量测定在250ml容量瓶中,分别准确称取丹参提取液0.50ml,黄芪提取液10.00ml,人参提取液10.00ml,稀释倍数分别为500倍、2.5倍、2.5倍。分别加入浓度为30%的乙醇至12.50ml,然后加入浓度为5%的碳酸钠溶液0.80ml,静置5min。再分别加入浓度为5%的硝酸铝溶液0.80ml,静置6min。再加入浓度为4%的氢氧化钠溶液5.00ml,然后使用浓度为30%的乙醇稀释到刻线,静置10min[2]。使用510nm波长,对三种试液吸收度进行测定,得出结果为,丹参、黄芪、人参的吸光度分别为0.226、0.481、0.293。得出结果为,丹参、黄芪、人参中,总黄酮含量分别为20.45mg/L、43.62gm/L、26.63mg/L;百分含量分别为10.2270%、0.1061%、0.0666%。2.3 抗氧化性对比在比色管中,分别加入pH为9.95的碳酸盐缓冲液、浓度为5×10-5mol/L的邻苯三酚溶液,使用流动注射化学发光仪进行3次测定,并取平均值。采用pH为9.95的碳酸钠-碳酸氢钠混合缓冲溶液、浓度为5×10-4mol/L的邻苯三酚溶液作为发光体系,对三种中药抑制后的发光进行3次测定,并取平均值。使用邻苯三酚-碳酸盐缓冲液-luminol发光体系做空白对照。结果显示,三种中药有效清除率能够超过90%[3]。其中,抗氧化能力强弱分别为丹参>黄芪>人参。对总黄酮对氧自由基清除率进行对比,得出结果为,丹参、黄芪、人参的超氧阴离子自由基清除率分别为98.75%、90.75%、93.75%。3 讨论和分析黄酮类化合物是丹参、黄芪、人参等中药材当中,一种十分重要的有效成分,为了对其药效进行检验,采用了纯提取法对三种药材中的总黄酮进行提取,具有良好的准确性、高效性、简便性[4]。使用石油醚进一步萃取,能够将乙醇中溶解的杂质清除。利用紫外分光光度计,对三种中药材提取液中的总黄酮含量进行测定,得出结果为,丹参中总黄酮含量10.2270%,黄芪中总黄酮含量为0.1091%,人参中总黄酮含量为0.0666%。在临床上,对于心脑血管类疾病的治疗,通常使用丹参入药,其中含有大量黄酮类化合物,对于疾病的治疗十分有利[5]。综上所述,在丹参、黄芪、人参三种中药材当中,总黄酮含量和抗氧化性均有所不同,其中,丹参的总黄酮含量最高,抗氧化性最强,因而在临床上应用广泛。在相关疾病治疗中,对三种中药进行协同使用,能够取得更好的临床疗效。参考文献[1]冯亭亭,李永民,贺伟,等.和营安心方中人参皂苷Rg1与丹参酮ⅡA的含量测定及其抗氧化作用研究[J].中华中医药杂志,2017(01):274-277.[2]黄馨莹,朱文瑞,陈高,等.土香薷总黄酮的含量测定及体外抗氧化作用研究[J].浙江海洋学院学报(自然科学版),2015,34(06):588-592.[3]刘贤贤,陈刚,杨起群,等.青钱柳叶香豆素、黄酮含量测定及抗氧化活性研究[J].桂林师范高等专科学校学报,2016(06):123-126.[4]仇宏伟,骆珍,孙立梅,等.萝藦花总黄酮的含量测定及抗氧化研究[J].青岛农业大学学报(自然科学版),2016,33(02):130-134.[5]左龙亚,于杰.温州蜜柑果皮提取物总酚•总黄酮含量测定及其抗氧化活性研究[J].安徽农业科学,2016,44(28):89-91.Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
梯度渗漉法提取丹参有效成分的工艺
梯度渗漉法提取丹参有效成分的工艺
刘少文
【摘 要】目的 对渗漉方法提取丹参中有效成分丹参酮IIA、丹酚酸B 进行研究.方法 采用回流法、一般渗漉法与梯度渗漉法分别进行提取,应用正交实验设计和单因素考察的方法对提取工艺进行筛选,以HPLC 法测定的丹参酮IIA、丹酚酸B 的含量评价两种方式的提取效果.结果 最佳提取工艺为梯度渗漉法,最佳的提取工艺条件为:取丹参药材粗粉,用适量95% 乙醇溶胀2.5h,装入渗漉器材,用95% 乙醇浸渍24h 后,以4.5mL/min 的速度开始渗漉,收集8 倍药材量的渗漉液,提取丹参酮类脂溶性成分;再用50% 乙醇,以4.5mL/min 的速度渗漉,收集10 倍药材量的渗漉液,提取丹参酚酸类水溶性成分,与HPLC 测量结果比较,丹参酮IIA 和丹酚酸B 的提取率较高.结论 梯度渗漉法提取丹参有效成分的最佳提取方式与一般渗漉法比较,提取率较高,完全适合丹参中有效成分的提取.
【期刊名称】《中国医药指南》
【年(卷),期】2012(010)010
【总页数】2页(P36-37)
【关键词】梯度渗漉法;丹参;丹参酮IIA;丹酚酸B
【作 者】刘少文
【作者单位】广东省佛山市中医院,广东佛山,528000
【正文语种】中 文
【中图分类】R282.710.3
丹参为唇形科中药丹参的根及根茎,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之等功效。文献报道[1,2],脂溶性的丹参酮类成分,水溶性的丹参酚酸类成分为其主要有效化学成分。中药丹参广泛的应用于现有中成药处方中,但是在工艺上仅仅将丹参酚酸类成分或丹参酮类成分单一的进行提取,作为治疗疾病中的有效成分,从而造成中药丹参的浪费。因此,我们通过丹参有效成分的性质[3],对丹参的提取方式进行了系统的研究,为找出同时提取丹参中丹参酮类成分和丹参酚酸类成分的简便方法,将中药丹参进行充分合理的利用,更为丹参有效成分最大限度的进行提取提供一种实验参考,现将实验研究结果报道如下。
云南丹参主要有效成分含量的测定与比较
云南丹参主要有效成分含量的测定与比较
飞进强; 张圣洁; 徐绍忠; 赵昶灵
【期刊名称】《《贵州农业科学》》
【年(卷),期】2019(047)009
【总页数】4页(P126-129)
【关键词】云南丹参; 有效成分; 含量; 资源评价; HPLC
【作 者】飞进强; 张圣洁; 徐绍忠; 赵昶灵
【作者单位】云南农业大学农学与生物技术学院 云南昆明650201
【正文语种】中 文
【中图分类】S567.239
云南丹参(Salvia yunnanensis)为多年生的草本植物,是唇形科(Labiatae)鼠尾草属(Salvia)的代表植物[1]。该药首载于《滇南本草》,其味苦, 性微寒,色赤象火,入心经。具有补心、生血、养心、定志、安神宁心、健忘怔忡、惊悸不寐、生新血、去瘀血、安生胎和落死胎等功效。一味可抵四物之功[2],为云南习用的丹参药材,广泛分布于我国西南地区[3-4]。云南丹参的主要药用部位为根部,其中的主要化学成分是脂溶性的二萜类和水溶性的酚酸类物质,药效与2015版《中国药典》中的丹参(Salvia miltiorrhiza)类似,都具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦及凉血消痈等作用[5],主要用于改善缺血再灌注损伤、心脑血管疾病的治疗[6-8]。云南丹参作为云南地方性药材,功效与丹参相同,作为地方药材收载入1974版的《云南省药品标准》[9]。云南丹参在云南地区具有悠久的使用历史,分布广,资源丰富,具有较高的开发利用价值。目前我国对云南丹参的研究主要集中在化学成分和药理活性方面,对种质资源的收集、栽培方式和化学含量之间的关系的研究尚处于空白。在用药习惯上,将山东丹参称为正品丹参,而云南丹参的利用未在药用中进行使用,而对于云南丹参是否能成功代替山东丹参使用也存在争议。钱子刚等[3]的研究发现,云南丹参的总丹参酮类含量比山东丹参略高,总酚酸含量约高1倍,丹参酮ⅡA含量略高;原儿茶醛含量约为山东丹参的3倍。靳鹏博[10]的研究表明,轻度遮阴处理有利于提高丹参中丹酚酸B的含量。为云南丹参的合理栽培、云南丹参替代山东丹参及云南丹参种质资源筛选、优良品种选育和道地药材品质成因的研究提供理论依据,笔者采用高效液相色谱法对不同产地及不同栽培处理丹参的有效成分进行测定,并与山东丹参进行比较。
高效液相色谱法测定复方丹参片丹参酮ⅡA含量
高效液相色谱法测定复方丹参片丹参酮ⅡA含量
张旋华;韩丽萍;杨德忠;李爱红
【期刊名称】《药学实践杂志》
【年(卷),期】2000(000)004
【摘 要】目的 :建立测定复方丹参片中丹参酮ⅡA含量的高效液相法。方法 :色谱条件 :色谱柱SpherisorbC1 8(5 μ ,2 0 0mm× 4.6mm)色谱柱 ;流动相 :甲醇 -水
(85∶1 5 ) ;检测波长 :2 70nm ;流速 :1ml/min。结果 :丹参酮ⅡA在 8~ 1 80ng范围内线性关系良好 (r=0 9999) ,最低检出限 1 5ng ,阴性样品对测定无干扰 ,溶液在 2 4h内保持稳定 ,加样回收率 95 %以上。结论 :该方法快速、准确 ,可用于复方丹参片中丹参酮ⅡA的鉴别和含量测定。
【总页数】3页(P)
【作 者】张旋华;韩丽萍;杨德忠;李爱红
【作者单位】顺德中西医结合医院;广州军区联勤部药品仪器检验所
【正文语种】中 文
【中图分类】R284
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丹参总有效成分的提取
丹参总有效成分的提取
丹参又名赤参,紫丹参,红根等。为双子叶植物唇形科 Labiatae鼠尾草属植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge. 的干燥根及根茎。主产于安徽、河南、陕西等地。功效:活血调经,祛瘀止痛,凉血消痈,清心除烦,养血安神。
根主含二萜醌类色素, 丹参酮(tanshinone)Ⅰ, ⅡA, ⅡB, 隐丹参酮(cryptotanshinone), 异丹参酮(isotanshinones)Ⅰ, Ⅱ, 异隐丹参酮(1socryptotanshinone), 丹参新酮(miltirone), 丹参酸甲酯(methyl
tanshinonate), 羟基丹参酮ⅡA(hydroxytanshinone), 二氢丹参酮Ⅰ(dihydrotanshinone I), 丹参新醌甲、乙、丙, 次甲丹参醌(methylenetanshinquinone)和鼠尾草酚(salviol).另报道含铁锈醇(ferruginol)、Δl-丹参新酮(Δl-dehydromiltirone)、Δl-丹参酮ⅡA(Δl-dehydrotanshinone IIA)、丹参新醌丁(danshenxinkun D)和1, 2二氢丹参醌等.除二萜醌类化合物外, 尚含原儿茶醛(protocatechuic aldehyde)、β-谷甾醇和D(+)β-(3, 4一二羟基苯基)乳酸(即丹参素, 丹参酸甲),
以及缩羧酸化合物(salvianolic acids)A, E等。
取丹参除杂,以粉碎机粉碎过20目筛。将丹参药粉装入提取罐中,加入体积比为20:1的95%的乙醇,进行蒸煮2h浸出。将浸出液输入到减压浓缩罐中,回收乙醇后将水溶液浓缩到小体积,成为稠浸膏状。加入浸膏量2倍的2%氢氧化钠水溶液,边加边搅拌、放置、沉淀完全后过滤。沉淀用蒸馏水洗到中性。在60℃以下烘干,粉碎成细粉,过60目筛即得成品。 此产品为生产“丹参舒心片”的原料药,每片含丹参提取物0.2g。适用于心绞痛及急性心肌梗塞。用于脑血栓形成的后遗症亦有效。此外还可用于血栓闭塞性脉管炎、硬皮病、视网膜中央动脉栓塞、神经性耳聋、白噻氏综合征及结节性红斑等。
高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参酮含量计算方法
高效液相色谱法测定复方丹参片中丹参酮含量计算方法
高效液相色谱法是一种常用的分离和定量分析技术,广泛应用于药物分析、环境分析等领域。复方丹参片是一种中药制剂,其中主要有效成分是丹参酮。测定复方丹参片中丹参酮含量的计算方法如下:
1.实验仪器和药品准备:高效液相色谱仪、C18色谱柱、甲醇、乙腈、纯化水、复方丹参片样品。
2.样品制备:取复方丹参片样品约0.3 g,粉碎并称取适量样品,加入50 mL锥形瓶中,用甲醇提取。放置15 min,并用超声波处理15
min,过滤取液,并用甲醇补足至50 mL。
3.色谱条件:采用C18色谱柱,流动相为甲醇-水(70:30, v/v),流速1.0 mL/min,柱温为25°C,检测波长为270 nm。
4.系统适用性:在上述色谱条件下,进行系统适用性实验,得到丹参酮在该条件下的保留时间和峰形。 5.制备标准曲线:取不同浓度的丹参酮标准品,分别加入甲醇中,制备一系列浓度的标准溶液。分别进行色谱分析,记录各峰的峰面积。
6.标定曲线:以丹参酮的质量浓度C为横坐标,以峰面积A为纵坐标制成标定曲线。对曲线上每个浓度点进行线性回归,得到方程:A
= aC + b。
7.样品测定:取经过提取的复方丹参片样品溶液,进行色谱分析,记录峰面积A。
8.计算含量:带入标定曲线方程,计算出复方丹参片样品中丹参酮的质量浓度C。
9.计算百分含量:将复方丹参片样品中丹参酮的质量浓度C除以样品的总质量m,并乘以100,得到丹参酮的百分含量。
在该测定方法中,高效液相色谱仪为分离和定量提供了可靠的保障。C18色谱柱选择了较常用的色谱柱,用于对复方丹参片中的丹参酮进行分离和测定。甲醇和水被选为流动相,以达到较好的分离效果。检测波长为270 nm,可以选择丹参酮的最大吸收波长。 通过制备标准曲线,可以建立丹参酮浓度和色谱峰面积之间的线性关系。通过回归分析,得到标定曲线的方程,进而可以通过测定复方丹参片样品的色谱峰面积,计算出丹参酮的质量浓度。
丹参提取实验报告
一、实验目的
本实验旨在通过提取丹参中的有效成分——丹参酮,了解丹参的提取方法,掌握提取过程中各步骤的操作要点,并对提取效果进行评价。
二、实验原理
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)为唇形科植物,其根茎富含多种生物活性成分,其中以丹参酮为主要的有效成分。丹参酮具有扩张血管、降低血脂、抗凝血、抗肿瘤等药理作用。本实验采用有机溶剂萃取法提取丹参中的丹参酮,通过薄层扫描法和高效液相色谱法(HPLC)对丹参酮进行含量测定。
三、实验材料与仪器
1. 实验材料
- 丹参根茎:新鲜,经清洗、晾干后备用。
- 甲醇、氯仿、正己烷:分析纯。
- 石油醚:分析纯。
- 薄层层析板、硅胶G薄层板。
- 硅胶G:色谱用。
- 标准品:丹参酮IIA、丹参酮IIB、丹参酮III、丹参酮IV。
2. 实验仪器
- 薄层扫描仪。
- 高效液相色谱仪。
- 分析天平。
- 热水浴锅。
- 漏斗、滤纸、滴管、试管等。
四、实验方法
1. 丹参酮的提取 (1)称取一定量的干燥丹参根茎,用甲醇回流提取2小时,过滤,滤液减压浓缩至干,残渣用石油醚溶解,转移至分液漏斗中。
(2)将分液漏斗中的溶液与氯仿混合,静置分层,取氯仿层,再用少量氯仿洗涤水层,合并氯仿层。
(3)将氯仿层减压浓缩至干,残渣用甲醇溶解,转移至容量瓶中,定容至刻度。
2. 薄层扫描法测定丹参酮含量
(1)制备薄层层析板:将硅胶G均匀涂布于薄层板上,晾干后备用。
(2)点样:取丹参提取液适量,点于薄层板上,重复3次。
(3)展开:将薄层板放入展开缸中,用氯仿-甲醇(体积比8:2)为展开剂,展开至距底边2cm处。
(4)显色:取出薄层板,晾干后,喷以10%硫酸乙醇溶液,于105℃烘箱中加热5分钟。
(5)扫描:将薄层板放入薄层扫描仪中,进行扫描,测定丹参酮的含量。
3. 高效液相色谱法测定丹参酮含量
(1)色谱条件:色谱柱:C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:甲醇-水(体积比80:20);流速:1.0ml/min;检测波长:272nm。
