移植免疫及其免疫检测
干细胞移植中的免疫抗体监测与获得技巧
干细胞移植中的免疫抗体监测与获得技巧引言：干细胞移植是一项先进的医疗技术，已被广泛应用于治疗各种疾病。
然而，在干细胞移植过程中，由于免疫抗体的存在，可能会对患者产生不良反应。
因此，监测和获得免疫抗体的技巧成为该领域的重要研究方向。
本文将介绍干细胞移植中的免疫抗体监测与获得的技巧，旨在帮助医生和研究人员更好地应对干细胞移植的免疫反应。
一、免疫抗体的监测技巧干细胞移植后的免疫抗体监测对于评估移植患者的免疫状态以及发现并预防移植免疫排斥反应至关重要。
以下是一些常用的免疫抗体监测技巧：1. 流式细胞术（Flow Cytometry）：流式细胞术是一种常用的免疫抗体监测技术。
通过使用不同标记的单克隆抗体，可以识别和计数特定细胞亚群，定量免疫抗体的生成和消退情况。
通过分析样品中不同细胞亚群的表达情况，可以评估移植患者的免疫状态，并监测免疫抗体的变化。
2. ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）：ELISA是一种常用的免疫抗体检测技术，可以用于检测体液和组织中的特定免疫抗体水平。
ELISA的原理是抗原与免疫抗体结合后，通过酶标记的标记物来检测免疫反应的产物。
通过ELISA可以快速、准确地检测免疫抗体的生成和消退情况，为干细胞移植后的免疫监测提供了一种可靠的技术手段。
3. 免疫荧光染色技术：免疫荧光染色技术是一种利用荧光染料标记免疫抗体的方法，通过观察荧光信号来定位和检测特定的免疫抗体。
这种技术可以用于检测免疫抗体在体液和组织中的分布情况，了解其动态变化。
适用于监测干细胞移植后产生的免疫抗体及其在机体中的作用。
二、免疫抗体的获得技巧为了研究和应对干细胞移植中的免疫反应，研究人员需要获得特定免疫抗体。
以下是一些常用的免疫抗体获得技巧：1. 多克隆抗体制备：多克隆抗体制备是利用机体对抗原产生特异性免疫应答的原理，通过免疫动物获得全套针对抗原不同位点的抗体。
在干细胞移植研究中，可以通过免疫动物注射特定干细胞相关抗原来获得特异性免疫抗体。
免疫检测技术在临床诊断中的应用
免疫检测技术在临床诊断中的应用随着科技的不断进步，免疫检测技术在临床诊断中的应用也越来越广泛。
免疫检测技术是指利用生物体内产生的抗体与特定抗原结合的原理，通过测定这种结合来获得相关信息的一种方法。
它具有很多优点，如准确性高、敏感性强、操作简便等，因此在临床诊断中被广泛应用。
诊断方面，免疫检测技术可以用于检测病原微生物的存在。
例如，我们可以通过检测体液中的抗体来判断病人是否感染了某种病原体。
当人体感染了病原体后，机体会产生相应的抗体来抵御侵入的病原体。
通过检测这些特定的抗体，我们可以确认某种疾病的存在与否。
这在传染病的诊断中尤为重要，可以帮助医生及时确定病因，采取相应的治疗措施。
另外，免疫检测技术还可以用于检测肿瘤标志物。
肿瘤标志物是指与肿瘤相关的特定蛋白质或抗原物质，它们通常在体液中存在着一定的浓度差异，因此可以通过免疫检测技术来定量地检测肿瘤标志物的浓度变化。
这对于早期肿瘤的诊断和预后评估具有重要意义。
通过测定肿瘤标志物的水平，医生可以及时发现恶性肿瘤的存在，并根据标志物的变化情况评估治疗的效果。
除了在诊断方面的应用，免疫检测技术还可以在治疗过程中起到重要的作用。
例如，免疫治疗作为一种新型的抗癌治疗方法，已经得到了广泛应用。
免疫治疗通过增强机体免疫系统的功能，帮助机体识别和销毁癌细胞。
在这个过程中，免疫检测技术可以帮助医生准确评估病人免疫功能的状态，选择合适的治疗方案。
例如，通过检测PD-L1表达水平，可以预测患者对免疫检查点抑制剂治疗的响应情况，从而决定是否适合接受这种治疗。
此外，免疫检测技术还可以应用于器官移植的监测。
在器官移植后，监测免疫抑制剂的水平对维持移植器官功能非常重要。
免疫检测技术可以通过测定免疫抑制剂在血液中的浓度来判断移植者的服药情况，以及是否出现了免疫抑制剂的过量或不足的情况。
这对于预防移植排异反应或免疫抑制过度带来的副作用具有十分重要的意义。
总之，免疫检测技术在临床诊断中的应用不可忽视。
肾脏移植后的免疫监测
肾脏移植后的免疫监测肾脏移植是治疗肾功能衰竭的有效方法之一，具有显著的临床疗效。
但是，由于移植后的免疫反应可能会影响移植物的存活和患者的生存质量，因此需要进行免疫监测来检测移植后的免疫状态和预测移植后的存活率。
1.移植后的免疫反应移植手术后，人体的免疫系统会对移植物进行识别并发起攻击，因为移植物来自于不同的个体，具有外来性。
这种免疫反应称为移植排斥反应，是移植后最常见的并发症之一。
移植排斥反应可以分为急性和慢性两种类型。
急性排斥反应多发生在术后前几个月内，通常由淋巴细胞介导，表现为发热、疼痛、肿胀和移植物功能障碍等症状。
慢性排斥反应则通常在移植数年后发生，对移植物功能的影响更加严重。
除了排斥反应，移植后还可能出现感染和肿瘤等并发症。
这些并发症的发生与移植后的免疫状态密切相关，因此需要进行免疫监测来识别和治疗这些并发症。
2.免疫监测的意义免疫监测是通过检测移植后的免疫状态来预测移植后的存活率和移植物的存活率。
医生可以根据监测结果有针对性地调整治疗方案，以达到最佳的治疗效果。
免疫监测可以检测多种免疫指标，包括血清中的免疫球蛋白、T细胞亚群、细胞因子、蛋白质标记物等。
这些指标可以反映移植后的免疫状态和机体的免疫功能，从而预测移植后的存活率和移植物的存活率。
免疫监测的常见方法包括ELISA、流式细胞术、质谱法等。
这些方法可以在不同的层次上检测免疫指标，例如ELISA可以检测血清中的免疫球蛋白，流式细胞术可以检测T细胞亚群，质谱法可以检测蛋白质标记物。
通过选择合适的方法进行免疫监测可以得到准确的监测结果，指导临床治疗。
3.免疫监测的时机和频率免疫监测的时机和频率对于预测移植后的存活率和移植物的存活率至关重要。
一般来说，免疫监测应该在移植手术后的不同时间点进行，以确定移植后的免疫状态和机体的免疫功能。
免疫监测的时间点通常包括术后第一周、第一、三、六个月和每年一次。
特别是在移植后的第一年内，免疫监测应该更加频繁，以便及时发现并纠正移植排斥反应等并发症。
免疫系统检查项目
免疫系统检查项目临床免疫学检测具有较高的特异性和敏感性，因此被广泛用于感染性疾病、自身免疫性疾病、变态反应性疾病、肿瘤等的诊断、鉴别诊断和预后判断，以及移植后免疫监测。
常见的免疫系统检查项目主要包括体液免疫检测、细胞免疫检查、肿瘤标志物检测等。
一、体液免疫检测：1、免疫球蛋白：免疫球蛋白因其功能和理化性质不同分为免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白D、免疫球蛋白E。
血清及体液免疫球蛋白含量可因疾病的进展而发生变化，可反映机体的体液免疫功能状态，与临床表现相结合，有助于感染性疾病、免疫增殖性疾病和免疫缺陷病等的鉴别诊断；2、补体系统：主要包括总补体溶血活性检测以及补体C1、补体C3测定，补体系统功能下降及补体成分的减少对于急性炎症、肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、组织损伤、某些恶性肿瘤等疾病的诊断具有重要意义。
二、细胞免疫检测：主要包括T细胞亚群的检测、B淋巴细胞分化抗原检测、自然杀伤细胞免疫检测，以及细胞因子检测。
临床上各种免疫疾病均可出现不同群淋巴细胞数量和功能的变化，对它们进行检测可用以判断细胞免疫功能。
三、肿瘤标志物检测：主要包括蛋白质类肿瘤标志物的检测、糖脂类肿瘤标志物检测、酶类肿瘤标志物检测、激素类肿瘤标志物检测等，主要用于反映肿瘤的存在和生长，对肿瘤的诊断、疗效和复发的监测、预后的判断具有一定的价值；四、自身抗体检测：主要包括类风湿因子的检测、抗核抗体测定、抗组织细胞抗体测定以及其他抗体检测，是诊断风湿免疫性疾病、甲状腺功能亢进、肝炎等自身免疫病的重要依据。
五、感染免疫检测：主要包括细菌感染免疫检测、病毒感染免疫检测、寄生虫感染免疫检测、性传播疾病免疫检测。
主要用于伤寒沙门菌、结核杆菌、幽门螺杆菌、轮状病毒等微生物、寄生虫感染的检测；六、移植免疫检测：主要包括移植前免疫检测、移植后免疫监测，有助于预防和控制排斥反应的发生，使移植物能在受体内长期存活。
七、其他免疫检测：主要包括循环免疫复合物测定、冷球蛋白检测、C反应蛋白检测、降钙素原检测，以及特异性IgE检测。
免疫学检测的方法有哪几种
免疫学检测的方法有哪几种免疫学检测是以分子生物学、免疫学等作为理论基础，应用于多种疾病诊断以及病情预估的检测方法。
尽管免疫学检测在临床中较为常见，但多数人对其包含的具体方法了解的并不透彻，下面就免疫学的检测项目及方法进行科普。
1. 免疫学检测项目临床免疫学检测的项目包含种类很多，以下列几种的应用较为频繁，临床较为常见，即细胞免疫检测、体液免疫检测、感染免疫检测、肿瘤标志物检测以及自身抗体检测，而移植免疫学检测项目则较为少见。
（1）细胞免疫检测：细胞免疫学检测通常会针对多种类型的细胞进行含量及形态的测定，除了我们熟悉的淋巴细胞、粒细胞以及巨噬细胞以外，还包含前体细胞及单核细胞等[1]。
（2）体液免疫检测：体液免疫检测是针对免疫球蛋白（IgA、IgE 、IgG、IgM）、血清B因子以及血清补体（CH50、C3、C4）进行含量及形态的测定。
通过体液检测结果能够让医师了解受检者的体液免疫功能情况，进而判断其是否患有免疫性疾病或者感染性疾病；通过对血清补体指标的检测结果还能判断受检者是否患有肾小球肾炎、急性感染性疾病或者红斑狼疮等疾病[2]。
（3）感染免疫检测：感染免疫检测主要通过对寄生虫、病毒及细菌等指标的测定，判断受检者是否感染轮状病毒、结核杆菌、脑炎病毒、艾滋病毒、寄生虫或者微生物等。
（4）肿瘤标志物检测：肿瘤标志物检测是针对酶类、激素类、组织多肽抗原、糖类抗原、甲胎蛋白（AFP）以及癌坯抗原（CEA）等多种标志物的检测。
医师可通过检测结果判断受检者是否患有肿瘤及肿瘤的良恶程度，进而对病情、预后以及治疗效果展开预估和评价[3]。
（5）自身抗体检测：自身抗体检测是针对多种不同抗体的测定，包括抗核抗体、抗组织细胞、风湿因子等。
医师可根据这些指标的检测结果判断受检者是否患有炎性疾病、甲状腺以及风湿免疫性疾病等。
（6）移植免疫学检测：移植免疫学检测主要针对接受移植治疗的患者，并对其移植前后的相关指标进行检测和比较，有助于医师判断移植组织是否出现排斥反应，以便能够及时作出应对[4]。
临床免疫学检验技术简介
临床免疫学检验技术简介一、抗原抗体反应抗原抗体反应是临床免疫学检验中的基本技术之一。
抗原是指能够与抗体结合的物质，而抗体则是免疫系统产生的能够识别和结合抗原的蛋白质。
抗原抗体反应是指抗原与抗体在一定条件下结合，形成复合物的过程。
这种反应具有高度特异性和灵敏性，常用于检测体内是否存在某种特定的抗原物质。
二、免疫细胞的分离和鉴别免疫细胞的分离和鉴别是临床免疫学检验中的重要技术之一。
通过分离和鉴别免疫细胞，可以了解免疫系统的功能和状态，为临床诊断和治疗提供重要依据。
常用的免疫细胞分离方法包括密度梯度离心法、贴壁法、磁珠法等，而鉴别方法则包括免疫表型分析、细胞因子检测等。
三、免疫血清学检测免疫血清学检测是利用血清中的抗体或抗原进行检测的方法。
通过检测血清中的抗体或抗原，可以了解机体对某种病原体的免疫应答情况，从而为临床诊断和治疗提供依据。
常用的免疫血清学检测方法包括ELISA、RIA、IFA等。
四、细胞因子及其受体的测定细胞因子及其受体的测定是了解机体免疫应答情况的重要手段。
细胞因子是由免疫细胞分泌的具有调节作用的蛋白质，而受体则是细胞表面或细胞内能够识别和结合细胞因子的蛋白质。
通过测定细胞因子及其受体的表达水平，可以了解机体的免疫状态和疾病进程。
常用的细胞因子及其受体测定方法包括ELISA、Western blot、PCR等。
五、自身抗体检测自身抗体检测是用于诊断自身免疫性疾病的重要方法。
自身抗体是指针对自身组织或细胞的抗体，当机体出现自身免疫性疾病时，会产生针对自身组织的抗体。
通过检测这些抗体，可以了解机体的自身免疫状态，为临床诊断和治疗提供依据。
常用的自身抗体检测方法包括ELISA、IFA等。
六、移植免疫学检测移植免疫学检测是用于评估移植后排斥反应和移植物抗宿主病风险的重要方法。
通过检测供体和受体的免疫状态和组织相容性，可以预测移植后排斥反应和移植物抗宿主病的风险，为临床医生提供重要参考。
常用的移植免疫学检测方法包括HLA配型、供受体淋巴细胞交叉试验等。
干细胞移植后的免疫监测方法及注意事项
干细胞移植后的免疫监测方法及注意事项干细胞移植是一种前沿的医疗技术，已经在治疗多种疾病方面显示出了巨大的潜力。
在干细胞移植后，免疫监测方法的应用至关重要，可以提供有效的治疗策略，并帮助预防并发症的发生。
本文将探讨干细胞移植后的免疫监测方法及注意事项。
干细胞移植后的免疫监测方法主要包括以下几个方面。
首先，骨髓移植后的干细胞移植免疫监测方法。
骨髓移植是最常见的干细胞移植方法之一，也是治疗血液系统疾病的主要方式。
免疫监测方法可通过检测受移植干细胞的来源和受移植干细胞在患者体内的程度来评估免疫抑制和干细胞移植的成功程度。
例如，骨髓活检可以观察受移植干细胞的源头，判断是否来自同一供体。
其次，外周血干细胞移植后的免疫监测方法。
外周血干细胞移植是一种常用的替代性干细胞移植方法，可以通过采集患者自身的干细胞，再经过处理和培养，再次注入患者体内。
免疫监测方法主要通过监测细胞亚群和免疫指标来评估移植后的免疫状态。
例如，可以检测外周血中的T细胞和B细胞受体亚群，以判断移植后免疫系统恢复的进程。
另外，液体肿瘤的免疫监测方法也是干细胞移植后重要的方面。
液体肿瘤是一种最常见的并发症，可能发生在干细胞移植后的患者中。
免疫监测方法可以通过定期检测血液中的肿瘤标志物来评估患者的肿瘤复发情况。
此外，还可以通过PCR技术检测患者体内的微小残留病变，以便及时采取治疗措施。
在干细胞移植后的免疫监测过程中，也需要注意以下一些事项。
首先，及时检测免疫恢复情况。
移植后的患者免疫系统往往处于低抗原状态，容易发生感染和其他并发症。
因此，及时检测免疫恢复情况，以及及时采取相应的治疗和预防措施，至关重要。
其次，注意并发症的监测。
干细胞移植后的患者往往面临并发症的风险，如移植物抗宿主病（GVHD）、移植物失败和感染等。
定期进行免疫监测，并紧密关注患者的体征和症状，可以帮助及早发现并发症的迹象，从而采取有效的治疗措施。
此外，还需要加强患者的体检和心理支持。
肾移植后的免疫抑制治疗和监测
肾移植后的免疫抑制治疗和监测肾移植术是一项重要的治疗终末期肾脏疾病的方法。
然而，由于移植后的免疫排斥反应，接受肾移植的患者需要进行免疫抑制治疗和监测。
这样可以降低排斥反应发生的风险，并增加移植肾获得长期成功的机会。
本文将讨论肾移植后的免疫抑制治疗和监测的相关内容。
一、免疫抑制治疗在进行肾移植手术后，为了防止机体识别新器官为异物并引发排斥反应，免疫抑制药物成为不可或缺的治疗方式。
主要包括以下几类药物：1. 糖皮质激素：例如泼尼松等。
该类药物通过减少免疫细胞数量和活性来抑制排斥反应。
然而，长期使用可能导致一系列副作用，如骨质疏松、高血压和高血糖等。
2. 其他非特异性免疫抑制药物：例如环孢素A、他克立替尼等。
这些药物通过干扰T细胞活性、减少免疫细胞增殖和抑制细胞因子的合成，以达到免疫抑制的效果。
然而，它们也可能引起一系列不良反应，如肾脏毒性、高血压和肝功能异常等。
3. 抗淋巴细胞制剂：例如ATG、OKT3等。
这些药物通过破坏或阻断免疫系统中特定细胞群体的功能来发挥作用。
但是，它们使用时需要谨慎监测，并密切注意可能的过敏反应。
4. 新型免疫抑制药物：例如生物制剂。
近年来，一些新型的生物制剂如BELATAcept、SIROLIMUS等被广泛应用于临床实践中。
相较于传统药物，它们具有更为精确的靶向作用，并且能够减少某些副作用的发生。
二、免疫监测为了确保移植器官长期存活并预防排斥反应的发生，密切监测患者免疫状态是至关重要的。
以下是常见的免疫监测方法：1. 免疫细胞计数：通过测量外周血中T细胞、B细胞和NK细胞等的数量，可以了解免疫系统的整体情况。
如果某一类免疫细胞明显减少，可能需要调整免疫抑制药物的剂量。
2. 免疫功能评估：包括测定淋巴细胞亚群比例、检测细胞因子水平等。
这些指标能够反映患者的免疫功能状态，并及时发现异常情况。
3. 移植器官功能监测：通过定期检查移植肾的生物化学指标，如血肌酐、尿素氮等，可以评估移植器官的功能状态。
骨髓移植后的免疫监测与治疗
骨髓移植后的免疫监测与治疗骨髓移植是一种治疗白血病、淋巴瘤等血液系统疾病的有效手段。
随着技术的进步，骨髓移植的成功率不断提高，但同时也会伴随着一系列并发症。
其中最严重的可能就是移植物抗宿主病（GVHD）。
GVHD是由移植后免疫系统攻击宿主组织而引起的严重疾病，是骨髓移植后最常见、最危险的并发症。
因此，在骨髓移植后进行免疫监测和治疗是至关重要的。
一、骨髓移植后的免疫监测为了及时发现并预防GVHD，需要对受移植者进行免疫监测。
目前常用的免疫监测方法包括测量免疫细胞数量、分析细胞表面标志物、检测循环谷胱甘肽等。
其中，测量免疫细胞数量是比较简单和常用的方法，通常可以通过血液检测来实现。
分析细胞表面标志物可以更精确地获得患者体内每种免疫细胞的数量及比例，有利于监测和治疗GVHD。
检测循环谷胱甘肽则可帮助判断GVHD是否存在、程度如何，及时给予治疗。
二、GVHD的治疗骨髓移植后出现GVHD，意味着移植者的免疫系统正在攻击宿主组织。
治疗的原则就是尽量控制免疫系统的攻击，并平衡免疫系统的活力。
治疗的方法主要包括药物治疗、光照治疗、细胞治疗等。
1.药物治疗常见的药物治疗包括糖皮质激素和免疫抑制剂。
糖皮质激素主要通过抑制T细胞的免疫活性，控制GVHD的发展。
免疫抑制剂则通过抑制移植后的免疫系统活性达到目的。
这两种药物常常会组合使用，但是也会伴随一定的副作用。
2.光照治疗光照治疗是通过让特定波长的紫外线照射患者的体表，使得免疫细胞受损而失去功能，从而起到控制GVHD的作用。
这个方法目前较少采用，主要是因为这个方法还没有得到广泛的应用和证实。
3.细胞治疗细胞治疗是指通过将移植者的免疫细胞进行加工，然后重新注入到移植者体内，以平衡和调节免疫系统的反应。
这种方法已经得到了一定的应用和发展。
三、预防GVHD的措施预防GVHD比治疗GVHD更为重要。
因此，在进行骨髓移植时，需要选择匹配度高的供体，以减少免疫系统攻击宿主组织的情况发生。
北京大学《免疫学》免疫病理之五：移植免疫
2、间接识别
指受者APC提呈同种异型抗原肽供受者T细胞识别。同种异型 MHC抗原在结构上不同于受者自身组织成分，故亦属“非己”抗原 也可按普通外来抗原的方式被提呈。
三、（急性）同种移植排斥反应的效应机制
1、细胞免疫效应机制：多个T细胞亚群参与同种移植排斥反应的 损伤机制：①Th１细胞通过分泌IL‐２、IFN‐γ和TNF-α等炎性 细胞因子，聚集单核／巨噬细胞等炎性细胞，导致迟发型超敏反 应性炎症损伤；②CTL可直接杀伤移植物血管内皮细胞和实质细胞 ；③Th17细胞可释放IL-17，后者可招募中性粒细胞，促进局部组 织产生炎症因子、趋化因子（IL-６、IL-８、MCP-１等）并表达 基质金属蛋白酶，介导炎性细胞浸润和组织损伤。 2、体液免疫效应机制：体液免疫在急性排斥反应中发挥一定作用 。急性排斥反应后期，机体产生抗同种异型组织抗原的抗体，其 通过不同机制损伤移植细胞：形成免疫复合物，通过激活补体而 损害移植物血管内皮细胞；通过ADCC、调理作用，介导或促进效 应细胞对移植物细胞的杀伤和吞噬。 3、移植排斥反应的固有免疫损伤机制：同种器官移植术中，诸多 因素可启动移植物非特异性损伤 （1）参与同种排斥反应的非特异性效应分子 （2）参与同种排斥反应的固有免疫效应细胞
第三节
同种异型移植排斥反应的防治
（一）供者选择
1、检测预存抗体 2、HLA配型 3、移植物与受者预处理
（二）免疫抑制治疗
1、激素和抑制代谢药物 2、抑制T细胞活化的药物 3、抗体及其他生物制剂
（三）诱导移植耐受的策略及其原理
1 、诱导同种异基因嵌合体
（１）建立同种异基因造血干细胞嵌合体：通过大剂量全身 放射线照射以破坏宿主造血系统和免疫系统，然后进行同种 异型造血干细胞移植，可建立同种异基因造血干细胞嵌合体 。
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（一）血清学分型法
应用一系列已知抗 HLA 的特异性标准分 型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的 生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。
操作简便易行 节约试剂、结果可靠、重复性好 无需特殊设备
耗时长 不同批号抗血清结果 常有不同
2. PCR-SSO分型法
序 列 特 异 性 寡 核 苷 酸 - 聚 合 酶 链 反 应 （ PCR-
sequence specific oligonucleotide, PCR-SSO）是以
PCR 为基础，将凝胶上扩增的 HLA基因 DNA 转移
至硝酸纤维膜或尼龙膜，进而用放射性核素或酶、
地高辛等非放射性物质标记的寡核苷酸探针与之 进行杂交，从而对扩增产物作出HLA型别判断。
1.移植器官或组织的抗原性异物属性
2.排斥移植物的记忆特性
3.负向免疫调节的必要性
二、HLA是诱导排斥反应最强的靶抗原
主要组织相容性复合体（major histocompatibility
complex,MHC）编码的人类白细胞抗原（human
leukocyte antigen,HLA），是不同个体间进行器官或组织
lymphocyte reaction, MLR）为基本技术的HLA分
型法。能用本法测定的抗原称为LD抗原（
lymphocyte defined antigen）,包括HLA-D、-DP。 MLC分为单向MLC和双向MLC
1. 单向MLC
将已知HLA型别的分型细胞用丝裂霉素C或X线照射预处
理，使其失去增殖能力仅作为刺激细胞；而以具有增殖能
分类： 斑点或印渍法 反向斑点或印渍法
PCR-SSO是Ⅱ类HLA分型应用最广泛的方法， 能够鉴定所有已知序列的HLA-DR、－DQ、－ DP等位基因
技术，使HLA分型得以在更精密的水平上进行。
1. RFLP与PCR-RFLP分型法
限制性片断长度多态性（ restriction fragment length polymorphism, RFLP）分析：最早建立
的研究HLA多态性的DNA分型技术
PCR-RFLP 分型法：对 DNA 片段进行体外扩 增，然后再用限制性内切酶进行酶切分析，可 使限制性长度分析的敏感度大大增加
移植的类型
自体移植 同系移植 同种异体移植 异种移植 原位移植
根据移植物来源分类
根据移植部位分类
异位移植 器官移植
移植物种类分类
支架组织移植 细胞移植
移植种类和命名
移植名称
自体移植
供者、受者关系
同一个体
举例
自体皮片移植
同系或同基因移植
同系或同基因 的个体间
同种不同基因 的个体间 异种动物间
人的单卵双生子间的器官移植 同品系小鼠的皮片移植
用于HLA分型的微量细胞毒试验
微量细胞毒试验判定标准
死（着染）细胞（%）
记分
结果判断
0～10
1
阴性
11～20
21～50 51～80 >80
2
4 6 8 0
可疑阴性
弱阳性 阳性 强阳性 未试验或不能读数
（二）细胞学分型法
以混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte
culture, MLC）或称混合淋巴细胞反应（mixed
在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触发移植排斥 反应的首要抗原，尤其是HLA-DR位点的抗原分子 HLA发挥双重作用：
介导宿主抗移植物反应(HVGR);
参与移植物抗宿主反应(GVHR)。 HLA的识别方式： 直接识别
间接识别
第二节 HLA配型与应用分析
一、HLA配型
HLA分型方法的改进和不断完善，使得HLA
人与人之间的肾移植 不同品系小鼠间的皮片移植 狗的器官移植给猩猩 猪的器官移植给狗
同种异基因移植
异种移植
第一节 器官移植与移植免疫的特点
移植手术后移植物能否存活取决于： 1.移植器官在移植过程中活力的保存； 2.手术时血管吻合和血液循环重建的质量； 3.移植排斥反应的控制。
一、器官和组织移植的一般规律
力的受检者外周血单个核细胞为反应细胞。两者混合培养 时，反应细胞可对刺激细胞发生应答而增殖，用3H-TdR掺 入法测定细胞增殖强度，从而判断受检细胞的HLA型别。
根据选用的刺激细胞类型分为：
1．阴性分型法 2．阳性分型法
2. 双向MLC
遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培 养时，由于两者HLA不同，能相互刺激导致对方淋 巴细胞增殖，故称双向MLC。在此试验中，各自 的淋巴细胞既是刺激细胞，又是反应细胞可通过形态法
计数转化细胞 。
本法不能判断型别，只能说明供、受体HLA抗原配合程度
（三）分子生物学分型法
分子生物学技术的迅速发展，使得HLA的
DNA分型技术应运而生，并在开展DNA限制性
片段长度多态性分析、DNA指纹图、等位基因特
异性寡核苷酸杂交等基础上，引入多聚酶链反应
第二十六章 移植免疫及其免疫检测
移植（transplantation）是指将健康细胞、组 织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、 用以替代或补偿机体所丧失的结构和（或）功能的 现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植 物（graft），提供移植物的个体称为供体(donor)， 接受移植物的个体称为受体（recipient）。
细胞移植时发生排斥反应的主要成分，这种代表个体特异
性的同种抗原又称组织相容性抗原(histocompatibility)或
移植抗原(transplantation antigen)。
HLA的遗传特征
HLA是人体多态性最丰富的基因系统。
HLA分型要比ABO血型复杂的多，每个人不是从父母分别得到一个 基因，而是得到一串基因 (HLA单倍型)。每人遗传到二串“冰糖葫芦 ，其上的“红果”(基因)以A、B、C、D、DR、DQ和DP为序。 A有28种红果(分别记为A1、、A2、A3、A9...)， B有61种(记为B5、B7、B8、B12...)， DR有24种(记为DR1、DR2、DR3、DR4...)等。 七彩红果共有164种编号，如不同遗传排列的红果随机组合，按理论推 算，“冰糖葫芦”有五亿多种变化，能组合33亿多种HLA分型。 理论推测的HLA分型数量巨大，但对一个具体的民族来说并非如此。