大豆低聚肽中抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定
大豆蛋白多肽的分离纯化及其体外抗氧化活性研究
大豆蛋白多肽的分离纯化及其体外抗氧化活性研究大豆作为我国传统的农作物，在农业领域扮演着重要的角色。
除了作为主要食物原料之外，大豆还具有丰富的蛋白质含量，其中包含的大豆蛋白多肽备受研究者的关注。
大豆蛋白多肽不仅具有营养价值，还具有多种生物活性，尤其是其抗氧化活性引起了人们的极大兴趣。
大豆蛋白多肽的分离纯化是研究其活性的重要前提。
分离纯化主要通过离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析、逆相高效液相层析等技术手段来实现。
其中，离子交换层析是应用较为广泛的方法之一。
该方法是基于样品中的多肽带有带电的特点，在特定条件下，利用层析填料的特定吸附剂选择性地吸附和洗脱目标多肽，从而实现多肽的分离纯化。
大豆蛋白多肽的体外抗氧化活性研究是探究其生物活性机制的重要方向之一。
抗氧化活性是指物质抵抗氧化反应的能力，通过对抗自由基的生成和清除，以保护细胞免受氧化损伤。
大豆蛋白多肽具有良好的抗氧化活性，主要表现在清除自由基、抑制氧化酶活性、提高抗氧化酶活性等方面。
在体外实验中，可以通过一系列的方法评估大豆蛋白多肽的抗氧化活性，如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、还原力测定法等。
近年来，随着生物技术和分离纯化技术的发展，研究者们对大豆蛋白多肽的活性成分进行了更深入的研究和探索。
通过质谱联用技术的应用，可以准确地鉴定和分析大豆蛋白多肽中的活性成分，了解其分子结构和功能。
通过对大豆蛋白多肽的成分分析和功能研究，可以进一步揭示其在抗氧化方面的作用机制，为开发具有抗氧化活性的功能性食品和药物提供了理论依据。
当然，除了大豆蛋白多肽的分离纯化和体外抗氧化活性研究，还有很多与之相关的领域值得进一步研究，如大豆蛋白多肽的生物利用度、生物活性机制的深入探索等。
同时，还可以开展与大豆蛋白多肽相关的应用研究，如其在食品、药物和生物医学领域的应用潜力。
总之，大豆蛋白多肽的分离纯化及其体外抗氧化活性研究是当前研究的热点之一。
通过对其分离纯化和抗氧化活性的研究，能够更好地理解其功能和机制，为利用大豆蛋白多肽开发功能性食品和药物提供重要的理论依据。
降胆固醇黑豆肽的分离纯化与结构鉴定
降胆固醇黑豆肽的分离纯化与结构鉴定刘恩岐;李华;巫永华;高兆建;张建萍【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2013(034)019【摘要】通过超滤与大孔树脂吸附分离黑豆蛋白酶解产物,获得降胆固醇活性较强的黑豆肽组分,采用凝胶过滤色谱(GFC)、反相高效液相色谱(RP-HPLC)与排阻色谱(SEC)对黑豆肽粗品进行纯化,得到高纯度的降胆固醇肽,经Edman降解、N端测序对降胆固醇黑豆肽一级结构进行分析鉴定,其氨基酸组成序列为Ala-Phe-Pro-Lys-Asp,相对分子质量为576,肽链中具有特定的疏水区域,且Pro位于N端之外的重要位点.【总页数】5页(P128-132)【作者】刘恩岐;李华;巫永华;高兆建;张建萍【作者单位】西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西杨凌 712100;徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室,江苏徐州 221008;西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西杨凌 712100;徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室,江苏徐州 221008;徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室,江苏徐州 221008;徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室,江苏徐州 221008【正文语种】中文【中图分类】TS201.2.1【相关文献】1.大豆低聚肽中抗氧化肽的分离纯化及结构鉴定 [J], 刘文颖;谷瑞增;鲁军;潘兴昌;蔡木易2.大豆降胆固醇活性肽的初步分离纯化 [J], 张晓梅;钟芳;麻建国3.酶法制备黑豆抗氧化肽及其分离纯化与氨基酸组成分析 [J], 李华;刘恩岐;唐仕荣;巫永华4.黑豆肽的分离纯化及其辅助降血脂作用 [J], 刘恩岐;巫永华;张建萍;陈振家;李玉娥5.抗氧化黑豆肽的分离纯化与结构鉴定 [J], 刘恩岐;巫永华;高兆建;张建萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大豆肽的制备、提取与结构鉴定研究进展
大豆肽的制备、提取与结构鉴定研究进展富校轶;高永欣;张佰荣;孙茂成;王舒然【摘要】大豆肽是大豆蛋白质经过蛋白酶水解、微生物发酵后分离、提取获得的具有多种生物功能的低分子肽类.近年来,研究发现大豆肽具有易消化和低抗原性的特点,具有调节免疫、降胆固醇、抗疲劳、抗氧化等多种生物活性,因此,大豆肽成为食品领域研究和开发的热点.本文对大豆肽的制备、提取方法以及结构鉴定进行简要概述.【期刊名称】《吉林医药学院学报》【年(卷),期】2014(035)001【总页数】4页(P51-54)【关键词】大豆肽;制备;提取;结构鉴定【作者】富校轶;高永欣;张佰荣;孙茂成;王舒然【作者单位】吉林医药学院食品质量与安全教研室,吉林,吉林,132013;吉林医药学院食品质量与安全教研室,吉林,吉林,132013;吉林化工学院化工与生物技术学院,吉林,吉林,132022;吉林医药学院食品质量与安全教研室,吉林,吉林,132013;吉林医药学院食品质量与安全教研室,吉林,吉林,132013【正文语种】中文【中图分类】TS255.1近年来，肽类物质尤其是大豆肽由于具有特殊的营养和功能引起了国内外广泛的关注。
大豆肽是由大豆蛋白经过蛋白酶作用或者微生物技术处理后，再经过分离、精制等特殊处理而得到的低聚肽混合物，还包括一些游离氨基酸、水、灰分和少量的糖分等。
大豆肽一般是由3～6个氨基酸组成的低分子量肽，蛋白质含量为85%左右，氨基酸组成与大豆蛋白质大体相同，必需氨基酸含量丰富且平衡。
大豆肽的平均分子量小于1 000，主要出峰位置在分子量为300～700[1]。
大豆肽具有良好的生物活性，如：促进脂肪代谢、抗氧化、降血脂和抗血栓形成等；同时具有良好的营养特征和加工性能，大豆肽能促进微生物的生长发育和代谢，在醋、酱油、奶酪、发酵食品中添加大豆肽可以显著提高产品的品质和营养价值，并增强产品的口感风味，提高产品的生产效率等，此外，大豆肽还能用于生产酶制剂[2]。
抗氧化大豆多肽制备和纯化的研究的开题报告
抗氧化大豆多肽制备和纯化的研究的开题报告题目：抗氧化大豆多肽制备和纯化的研究一、选题背景和意义近年来，随着人们生活水平的提高，日常饮食和生活习惯的变化，人们对于健康的关注和需求也日益增加。
而在维护健康方面，抗氧化剂的作用越来越受到重视。
抗氧化剂能够清除自由基，延缓衰老、预防疾病，因此引起了人们极大的兴趣。
目前市面上的抗氧化剂种类繁多，如维生素C、E、多酚、类黄酮等。
而大豆多肽也被发现具有较强的抗氧化活性，且其来源广泛，丰富的氨基酸结构也为其赋予了更多的生物活性。
大豆多肽的制备与纯化一直是研究热点，常用的方法包括酶解法、酸解法、碱解法和超声波法等。
其中，酶解法成为大豆多肽制备与纯化的主要方法，其产品质量较高，操作简便，且能够得到具有一定生物活性的肽类。
因此，本文以酶解法为主要研究方向，旨在探究大豆多肽的制备和纯化方法，为其在生命科学、医学领域中的应用提供技术支持。
二、研究内容和方法1. 研究大豆多肽的制备方法，根据酶的种类、用量、pH值、温度等条件，探究制备具有较高抗氧化活性的大豆多肽。
2. 研究大豆多肽的纯化方法，通过分子筛吸附、反渗透、凝胶过滤等方法，对酶解后的产物进行纯化，并检测其抗氧化活性和生物活性。
3. 通过FT-IR、HPLC等技术手段，分析大豆多肽的结构和组成成分，探究其生物活性和抗氧化机制。
4. 应用研究成果，探究大豆多肽在生物制品、保健品、美容品等领域的应用前景。
三、预期成果1. 建立合适的大豆多肽制备和纯化技术。
2. 获得抗氧化活性较高的大豆多肽产物，并对其结构和组成成分进行分析。
3. 研究大豆多肽在生物制品、保健品、美容品等领域的应用前景。
四、研究难点和解决方案1. 大豆多肽制备的酶种和用量选择问题。
采用多种酶类筛选，通过比较产物的抗氧化活性和其他生物活性确定最适合的酶种和用量。
2. 大豆多肽纯化过程中，如何在保证产品质量的前提下，提高产率并控制成本。
采用多种纯化方法的组合，根据酶解产物的特性选择合适的分离技术，通过合理排列各分离步骤，达到最佳纯化效果的同时，控制成本和提高产率。
大豆肽酶解条件与抗氧化性关系的研究
关键词 : 大豆肽 ；酶解条件 ；抗氧化性 ；研究 中图分类号 ：R155 文献标识码 ：Ａ
Study on the Relationship between Soybean Peptidase Hydrolysis Conditions and Antioxidant Activity
WEN Rui
收稿日期 : 2020-12-18 作者简介 : 温 睿（1979-），女，牡丹江大学医护学院副教授，硕士，研究方向 : 食品营养与检测。
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自由基在人体产生过多或清除过慢时， 时间后，取出酶解液在 4500r/min 的离心机
其通过攻击生命大分子物质和各种细胞，加 中离心 20min。离心后，将顶层漂浮油脂小
图 1 二苯代苦味酰基自由基消除率和肽得率随水解时间变化曲线 Fig1 Time of hydrolysis affects on the capability of acyl-diphenyl bitter scavenging rate and peptide yield
由图 1 可知，抗氧化性和肽得率在水解 前 期 变 化 比 较 一 致， 随 着 水 解 时 间 的 增 加， 抗氧化活性不断的提高，达到最高值后，继 续延长水解时间，大豆肽抗氧化活性逐渐降 低，而肽得率在抗氧化活性达到最高值后稍 有升高。原因可能是蛋白酶是逐步水解蛋白 质的，当蛋白酶量和底物一定的情况下，蛋 白质通常被逐步水解为较小的肽段，而具有
生物活性肽的分离纯化和鉴定
生物活性肽的分离纯化和鉴定生物活性肽是由氨基酸组成的小分子多肽，具有调节生理活动的作用，如改善免疫系统、降低血压、增强肠胃功能等。
由于它的生理活性，生物活性肽对于医药、保健品、化妆品、食品等行业都有着广泛的应用。
因此，分离纯化和鉴定生物活性肽的研究也变得越来越重要。
一、生物活性肽的来源生物活性肽的来源主要有三种：天然来源、化学合成和酶解产物。
其中，天然来源是最常见的，包括动物、植物、真菌、海洋生物等。
在生物体内，生物活性肽通常被储存于前体蛋白中，需要在内外切割酶的作用下被切割出来。
此外，一些食品中也含有生物活性肽，如乳类产品、海产品、肉制品等。
二、分离纯化方法1.离子交换色谱法离子交换色谱法是基于离子交换原理的一种分离方法，可以将不同电荷性质的组分分离开来。
离子交换色谱法常用于生物活性肽的分离纯化。
该方法首先将混合物样品溶液通入高性能离子交换柱中，然后通过梯度洗脱和洗脱缓冲改变离子浓度和PH值，将不同极性的蛋白分离出来。
2.凝胶过滤色谱法凝胶过滤色谱法是一种分子筛分离方法。
该方法是利用不同分子大小的分子筛，使较大分子无法进入小孔，被分离出来。
凝胶过滤色谱法可以把不同分子量的肽分离开来。
3.反相高效液相色谱法反相高效液相色谱法是一种基于极性的分离方法。
在该方法中，样品溶液通过反相柱，具有不同的亲水性，亲水性较强的分子会发生亲水作用，与柱子被吸附在一起，而亲水性较弱的物质则通过柱子，此时分离出来的物质组分与溶液中极性成反比。
三、鉴定方法1.质谱法质谱法是用于肽的分子量判定的一种方法。
生物活性肽经分离纯化后，可以通过质谱法来进行鉴定。
这种方法可以确定肽的精确分子量，也可以检测出其序列及其各种修饰。
2.氨基酸分析法氨基酸分析法是一种确定氨基酸成分的方法。
通过氨基酸分析法可以确定分离出的生物活性肽是由哪些氨基酸组成。
该方法可以确定哪些氨基酸有生物活性。
3.生物学检测法生物学检测法是指通过细胞培养、实验动物、人体试验等方法，检测生物活性肽在体内的生物学活性。
大豆肽的分离纯化及应用研究
大豆肽的分离纯化及应用研究大豆肽具有许多独特的理化特性与生物学活性,同时具有原料来源广泛、价廉,安全性好,无毒副作用,便于产业化生产的优点。
本文以两种样品肽作为研究对象,分别对其理化性质,分离纯化方法以及具体的应用进行研究,为大豆肽产品的继续深入研究提供了试验基础。
分析测定两种样品肽的一般成分及理化性质,结果表明:大豆分离蛋白肽和豆粕肽的氨基酸组成基本一致,但蛋白肽含量相差较大;在较广泛的pH值条件下,前者保持更好的溶解状态。
随着浓度的增大,两种样品肽的粘度均有增加,但浓度超过60%后,大豆分离蛋白肽保持良好的流动性,而豆粕肽的流动性降低;大豆分离蛋白肽具有更强的还原能力和抗氧化能力,但乳化性及其稳定性却不如豆粕肽。
大豆分离蛋白肽经凝胶过滤层析洗脱分离,选用Sephadex G-25为填料,最佳洗脱条件为:径高比1:35;上样体积3mL;上样浓度0.01g/mL;洗脱流速16mL/h;洗脱液为蒸馏水。
高效凝胶渗透色谱（HPGPC）分析结果表明,各洗脱组分均为单一组成,分子量分别为:组分1:1860Da;组分2:1426Da;组分3:853Da;组分4:376Da。
红外色谱分析表明:四个组分的峰形基本一致,在3049-3406cm<sup>-1</sup>处和1690-1630cm<sup>-1</sup>之间具有典型的酰胺吸收峰。
选用DA021-CⅡ型大孔吸附树脂作为填料洗脱分离豆粕肽,径高比1:30,样品肽液pH值3.0,浓度45mg/mL,上样量为40mL,吸附流速为0.5mL/min,解析流速为1.0mL/min,水解析体积为2BV,经梯度乙醇洗脱可以得到4个组分;继续用Sephadex G-25柱层析洗脱得6个组分,HPGPC测定其分子量分别为:aⅠ:1845Da、209Da;bⅠ:288Da;bⅡ:4019Da、402Da;cⅠ:2314Da、197Da;dⅠ:1318Da、180Da;dⅡ:2719Da、209Da。
生物活性肽的制备分离纯化鉴定以及构效关系研究进展
生物活性肽的制备分离纯化鉴定以及构效关系研究进展生物活性肽是一类具有生物活性的短肽分子，可以通过调控细胞信号传导通路以及与细胞表面受体的结合来发挥生物学功能。
由于其具有优异的生物活性和选择性，生物活性肽在药物研发领域被广泛应用，并成为新药发现的热点。
本文将详细介绍生物活性肽的制备、分离纯化、鉴定以及构效关系研究进展。
首先，生物活性肽的制备方法有多种，其中包括化学合成、原核表达和真核表达等。
化学合成是最常见的制备方法，通过将合成氨基酸连接成肽链，再进行后续的修饰和功能化处理，可以获得所需的生物活性肽。
原核表达是利用大肠杆菌等细菌作为宿主表达目标肽，将目标基因导入宿主细胞中，通过细胞机制合成目标肽。
真核表达则是利用真核细胞如酵母菌、哺乳动物细胞等表达目标肽。
这些制备方法各有优劣，选择合适的方法取决于肽的长度、复杂性和目标应用等因素。
其次，生物活性肽的分离纯化通常采用高效液相色谱（HPLC）和凝胶电泳等技术。
HPLC是一种强大的分离技术，能够根据样品中化合物的特性通过改变流动相的性质进行分离。
凝胶电泳则可以根据肽的大小和电荷进行分离。
这些技术通常与质谱技术结合使用，以进一步鉴定目标肽的纯度和结构。
鉴定生物活性肽的方法多种多样，包括生物学功能评价、质谱分析、核磁共振（NMR）等。
生物学功能评价是最直接的方法，通过观察肽对细胞、生物体或生物过程的影响来鉴定肽的功能。
质谱分析可以确定肽的分子量和序列，利用质谱数据可以鉴定肽的纯度和结构。
NMR则可以提供关于肽的结构和动力学信息，有助于深入了解肽的生物学功能。
总之，生物活性肽的制备、分离纯化、鉴定以及构效关系研究是生物活性肽研究的关键环节。
随着技术的不断发展和方法的不断改进，相信在未来的研究中，生物活性肽将发挥更重要的作用，为新药发现和生物医学研究提供更多的机会和挑战。
大豆活性肽的分离纯化和生理活性
大豆活性肽的分离纯化和生理活性大豆蛋白肽是利用酶法或微生物发酵法将大豆蛋白降解成多肽、短肽和氨基酸的混合物。
大豆蛋白肽是一种重要的肽来源。
大豆蛋白肽与蛋白质相比较，多肽具有如下特点：在较宽的pH范围内溶解度高，容易在体内消化和吸收；渗透压低，能够避免高渗透压导致的腹泻；不容易导致过敏。
Rerat等研究表明，短肽的特点是吸收速度快、消耗能量低、载体不易饱和，不同肽之间运转没有竞争和抑制。
随着生物技术与生命科学的不断进步与发展，大豆多肽的功能越来越多的被人们所发掘，而某些活性肽的结构与生理功能也逐渐被人们所认识和了解，这对活性肽的研究起到了推动作用，更有利于人类对大豆活性肽进行研究与开发。
迄今为止，从大豆蛋白中已分离出降血压肽、免疫调节肽、抗氧化肽、降胆固醇肽、抗血栓形成、促进钙磷及微量元素的吸收等多种纯化的大豆蛋白生物活性肽，对这些大豆活性肽的研究情况进行了综述，以期为大豆活性肽的应用提供参考。
1大豆蛋白活性肽的分离和纯化目前，生产大豆活性肽的方法主要三种有：酶解法、微生物发酵法和化学法，最为先进的是微生物发酵法，它不仅能修饰肽的苦味。
还能将原料中的KTI和BBI 等影响消化和口味的抗营养因子降解。
大豆蛋白肽的活性易受到外界条件的影响，在过强的酸碱、较高的温度与剧烈震荡等条件下都有可能失活。
初始的肽液成分相对较复杂，目标产物的浓度也比较低，一般低于5%,含有大量杂质，某些杂质的理化性质和目标产物有相似之处，这就提高了大豆肽的分离纯化的难度。
传统多肽分离工艺，如吸附沉淀、溶媒、萃取和离子交换法等步骤繁多，耗时，原料消耗量大，耗能高，得到的产品较少。
生物技术的发展与人们对大豆肽结构和功能研究的不断深入，大豆肽分离检测技术也获得了突飞猛进的发展，出现了反相高效液相色谱法、凝胶过滤色谱法、毛细管电泳法、膜分离法、各种技术手段的联用等许多高效的分离纯化技术和手段。
1. 1反相高效液相色谱（RP— HPLC法反相高效液相色谱是一种色谱洗脱法，它以非极性的反相介质为固定相，流动相是水溶液或甲醇、乙睛等极性有机溶剂。
大豆多肽的分离纯化技术
精品整理
大豆多肽的分离纯化技术
大豆多肽具有易消化吸收，可以迅速供给机体能量，无蛋白变性，无豆腥味，黏性小以及加热不凝固等特性，尤其是具有降低胆固醇、降低血压、抗疲劳、抗氧化等多种生物功能。
因此分离纯化大豆多肽成为了当今的研究热点，传统大豆品回收率低。
随着生物技术的快速发展，分离纯化大豆多肽的新技术逐渐替代传统技术被广泛应用。
膜分离是利用天然或人工合成的具有选择透过性的高分子薄膜，以外界能量或化学位差为推动力，对混合物进行分离、提纯、浓缩的一种分离方法，由于分离膜具有选择透过性，混合物中的一些成分可以通过，另一些成分不能通过，从而实现混合物的分离。
超滤是膜分离法中分离纯化大豆多肽常用的分离方法，其分离程度取决于超滤过程的条件(操作压力、温度、pH值等)和膜表面的物理化学性质(孔径大小、孔隙率、膜材料极性等)。
控制操作条件、选用合适的膜材料是大豆多肽分离纯化的关键。
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混合物， 分 子质 量大 多在 １ ０ ０ ０ Ｕ以下 ， 氨基 酸组 成 与 大 豆蛋 白基本 相 同 ， 还 具有 大豆 蛋 白所 不具 备 的 良好 的溶解 性 、 稳 定性 等理 化性 质 。大豆 低 聚肽 具有 抗 氧化 、 降血 压 、 降 血糖 、 降胆 固醇 、 抗 疲 劳 等 多种 生
交加 速 电喷 雾 串联 质谱 仪 ， 英 国 Ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｍ ａ ｓ ｓ公 司 ； ｍ ｏ ｄ ｅ ｌ ９ ０多 肽 合 成 仪 ， 美国Ａ Ａ Ｐ Ｐ Ｔ ｅ ｃ公 司 ； Ｖ ｏ ｙ ａ ｇ ｅ ｒ
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Ｘ Ｂ ｒ ｉ ｄ ｇ ｅ Ｂ Ｅ Ｈ１ ３ ０ Ｃ 。 色谱 柱 （ ４ ． ６ ｍ ｍ ×２ ５ ０ ｍｍ） ， 美
国 Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ公 司 ； Ｔ Ｓ Ｋ ｇ ｅ ｌ Ｇ ２ ０ ０ ０ Ｓ ＷＸ Ｌ 凝 胶 过 滤 柱 （ ７ ． ８ ｍｍ ×３ ０ ０ ｍ ｍ） ， 日本 Ｔ Ｏ Ｓ Ｏ Ｈ公 司； Ｑ ． Ｔ Ｏ Ｆ ２ 正
自 由基 会 引 起 Ｄ Ｎ Ａ损 伤 和细 胞 损伤 ， 导 致 多 种 疾病 和衰 老 的发生 … 。抗 氧 化 剂 能 够 清 除体 内多 余 的 自由基 ， 维 持体 内 自由基 的平 衡 ， 从 而增 强 机 体 免
疫力 ， 延缓 衰 老 。 目前 由于人 工合 成抗 氧化剂 如叔 丁 基． 羟基 ． 茴 香醚 （ Ｂ Ｈ Ａ） 、 丁 羟 基－ 甲苯 （ Ｂ Ｈ Ｔ ） 、 特 丁 基
ｍａ 公司。 １ ． ２ 主 要 仪 器 设 备
对苯 二 酚 （ Ｔ Ｂ Ｈ Ｑ） 等存在 潜 在 的危 害 ， 寻 找 天然 安 全
的抗 氧化 剂成 为研 究 的热 点 。天 然 抗 氧化 肽 因具
有较 强抗 氧化 活性 和很 高 的安全 性 ， 在食 品等领 域展
现 出极好 的应 用前 景 。 大 豆低 聚肽是 大 豆 蛋 白经过 酶 解 后 得 到 的短 肽
摘 要 为 考 察 大 豆 低 聚 肽 中抗 氧 化 肽 的 活 性 和 结 构 ， 以大 豆 分 离 蛋 白 为原 料 ， 采 用 两 步 酶 解 法 制 备 出 大 豆 低 聚肽 ， 在 对 其 理 化 成 分 进 行 分 析 的基 础 上 ， 以Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由 基 清 除 能 力 为 指 标 对 其 抗 氧 化 活 性 进 行 了评 价 。 结 果 表明 ： 大 豆低 聚 肽 的 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由基 清 除 活 性 的 Ｉ ｃ 。 值约为 ２ ． ６ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ 。利 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 （ Ｒ Ｐ — Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 对 大 豆低聚肽进行分离纯化 ， 收 集 ６个 组 分 峰 ， 对其 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自 由基 清 除 能 力 进 行 了测 定 。 结 果 表 明 ， ６个 组 分 的活 性 均 比大 豆 低 聚 肽 高 。 最 后 利 用 Ｑ — Ｔ Ｏ Ｆ质 谱 仪 对 活 性 最 高 的 组 分 ５ ＃ 进 行 了结 构 鉴 定 ， 并 对 鉴 定 出 的 ６个 肽 段 的 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由基 清 除活 性 进 行 了评 价 。结 果 表 明 ， ６个 肽 段 均 有 一 定 的 Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ 自由基 清 除 能力 ， 其中Ｌ ｅ ｕ ． Ｔ ｙ ｒ （ Ｌ Ｙ） 、 Ｌ ｅ ｕ — Ａ ｌ ａ — Ｇ ｌ ｙ — Ａ ｒ ｇ （ Ｌ Ａ Ｇ Ｒ） 、 Ｐ ｈ ｅ — Ｓ ｅ ｒ — Ａ ｒ ｇ （ Ｆ Ｓ Ｒ） 的 清 除 率 比大 豆 低 聚 肽 高 ， 是具 有 较 高抗 氧 化 活 性 的 肽 段 。 关 键 词 大豆 低 聚 肽 ； 抗氧化肽 ； 分 离纯 化 ； 结 构 鉴 定
ＤＯＩ ： １ ０ ． １ ３ ９ ９ ５ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． １ １—１ ８ ０ ２ ／ ｔ ｓ ． ２ ０ １ ７ ０ ２ ０ ０ ８
大 豆 低 聚 肽 中抗 氧 化 肽 的 分 离 纯 化 及 结 构 鉴 定
刘文颖 ， 谷瑞增 ， 鲁军， 潘 兴 昌， 蔡木易
（ 中 国食 品发 酵 工 业 研 究 院 ， 北 京 市 蛋 白功 能 肽 ｑ － 程技术研究 中心 ， 北京 ， １ ０ ０ ０ １ ５ ）
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 原 料
大 豆分 离蛋 白 ， 实 验 室碱 提 酸 沉法 制 得 ； 碱 性 蛋
白酶 （ ２ ． ４ Ａ Ｕ ／ ｇ ） 和 中性 蛋 白酶 （ ２ ． ４ Ａ Ｕ ／ ｇ ） ， 诺 维 信 生物技术 有限公 司； 乙腈 （ 色谱纯 ） ， 美国 Ｆ ｉ ｓ ｈ ｅ ｒ公 司； 三 氟 乙酸 （ 分 析纯 ） ， 英国Ａ ｌ ｆ ａ Ａ ｅ ｓ ａ ｒ 公司 ； ２ ， ２ ． 二 苯基一 １ 一 苦味肼 基 自由基 （ Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ） （ 色谱 纯 ） ， 美国 Ｓ ｉ ｇ —