嗜麦芽窄食单胞菌的耐药基因检测及分子分型研究

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嗜麦芽窄食单胞菌36株临床分布及耐药性监测

物，但ＰＮＰＧ和ＴＮＲＧ流行率仍是其耐药流行病学监测的重要指标之一。本数据表明，淋球菌对环丙沙星耐药率１００％。
与其他地区环丙沙星耐药率相似【喹诺酮类药物是一类广谱ｌ】。抗生素，在性病门诊该药物常用于对衣原体、支原体感染的治疗，其价格相对低廉，性病患者存在自行购买药物，不规范用药，可能是导致本地区淋球菌对环丙沙星的高耐药率发生原
的流行病学研究．中华皮肤科杂志，２１，４７：７－７．０１４（）４３４５
果：环丙沙星对１８株淋球菌的耐药率为１０头孢曲松对００％，
１８０株淋球菌的敏感率为４％，中敏率为５％。大观霉素对４６
ＰＮＴＮＧ和环丙沙星耐药菌株全部敏感。ＰＧ、Ｒ
等高水平耐药，耐药性率为１０见第９４页表１０％，１。
３讨论
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表１１７种抗生素对３６株嗜麦芽窄食
ｆ１王辉，陈民钧，５倪语星，等．０３２０２０－０４年中国十家教学医院
主，对抗生素呈多重耐药。在不同国家和地区由于用药习惯不同，耐药性存在差异，故早期诊断、合理恰当的使用抗生素是治疗ＳＭＡ感染的关键。一旦确诊感染，应及时选用敏感抗生素早期、足量、联合用药，迅速控制感染，彻底治愈。同时医院应加强综合管理，对分离菌株早期监测，做好细菌的耐药性分

综合ICU48例嗜麦芽窄食单胞菌感染临床及药敏分析核心研究

综合ICU48例嗜麦芽窄食单胞菌感染临床及药敏分析核心研究1. 引言1.1 研究背景嗜麦芽窄食单胞菌是一种罕见的革兰氏阴性杆菌，在ICU患者中引起感染的报道较少。

随着ICU患者数量的增加和免疫力低下状况的加剧，嗜麦芽窄食单胞菌感染的频率也有所增加。

嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗生素具有耐药性，给治疗带来一定的挑战。

对综合ICU中嗜麦芽窄食单胞菌感染的临床表现、药敏以及治疗效果进行深入研究具有重要意义。

本研究旨在全面分析48例综合ICU患者中的嗜麦芽窄食单胞菌感染情况，为临床医生提供更加精准的治疗方案，同时为将来相关研究提供参考。

通过本研究的开展，有望为预防和治疗综合ICU患者嗜麦芽窄食单胞菌感染提供更为全面的依据，提高患者的治疗效果和生存率。

1.2 研究目的研究目的是探讨ICU患者嗜麦芽窄食单胞菌感染的临床特点及药敏情况，为临床治疗提供依据。

通过对48例患者的临床资料进行收集和分析，病原学分析及耐药性分析，来了解该感染在ICU患者中的流行情况及耐药性的变化趋势，从而为临床医生提供更准确的治疗方案。

本研究旨在评价不同抗生素对嗜麦芽窄食单胞菌感染的疗效，探讨药敏试验结果对治疗方案的指导意义，为提高ICU患者感染治疗的效果提供参考依据。

通过研究目的的实现，我们将为临床医生提供更多关于嗜麦芽窄食单胞菌感染的临床信息，为临床治疗提供参考依据，同时也为今后研究提供参考基础，为临床治疗提供更多的选择和方案。

1.3 研究意义本研究的意义在于深入探讨嗜麦芽窄食单胞菌感染在ICU患者中的临床表现和治疗效果，为临床医生提供更准确的诊断和治疗参考。

此病原菌在临床上具有较高的耐药性，对治疗造成一定困扰，因此深入分析其耐药机制和药敏试验结果对临床治疗具有重要意义。

通过本研究的开展，可以进一步完善对这种特殊感染的认识，提高治疗的有效性和成功率。

总结临床资料和治疗效果，可以为今后开展更多相关研究提供参考和借鉴，拓展临床研究领域，推动医学科研的发展和进步。

嗜麦芽窄食单胞菌耐药性分析

１材料与方法
３
讨
论
嗜麦芽窄食单胞菌是医院感染的主要致病菌之一，染嗜感麦芽窄食单胞菌的危险因素包括患有恶性肿瘤、用碳青霉烯应类药物、管插管／械通气、症监护病房患者、院超过６气机重住Ｏｄ等ｌ。控制感染率的上升首先应控制并降低其危险因素的】ｊ
控菌株为大肠埃希菌（ＴＣ５２）铜绿假单胞菌（ＴＣＡＣ２９２、ＡＣ２８３，美国临床实验室标准化委员会标准判读。７５）按
１４统计学方法ｗＨ０Ｔ５软件统计分析结果．ＮＥ
７９．４７．
８４．９５．００．４７．１．Ｏ５
７４．７．３１２．８０１．１１
０．０
［］李艳，长庭，德龙，．麦芽窄食单胞菌所致的医】刘王等嗜院感染及危险因素分析Ｅ］中华医院感染学杂志，０７Ｊ．２０，
【键词】嗜麦芽窄食单胞菌；条件致病菌；抗菌药物关
中图分类号：９９４Ｒ６．文献标志码：Ｂ文章编号：６２９５（０９０ — ００Ｏ１７ — ４５２０）１０８一１
嗜麦芽窄食单胞菌是一种条件致病菌，引起败血症、可结膜炎、口感染、炎等疾病。由于该菌本身具有天然耐药性，伤肺因此临床治疗十分困难。本文回顾性分析了本院２００４年５月至２００６年６月住院患者送检标本分离出来的１９株嗜麦芽窄８食单胞菌的药敏结果，旨在为Ｉ用药提供依据。临床

嗜麦芽窄食单胞菌耐药机制的研究进展

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ；ｂａｃｔｅｒｉａ１ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ
嗜麦芽窄食单胞菌由Ｅｄｗａｒｄｓ于１９４３年首次从胸腔积液中分离出来，并将其命名为布鲁克杆菌ｆＢａｃｔｅｒｉｕｍｂｏｏｋｅｒｉ），Ｈｕｇｈ￣ＤＲｙｓｃｈｅｎｋｏｗ在１９６１年将该菌重新命名为嗜麦芽假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ），１９８３年Ｓｗｉｎｇｓ等人将其更名为嗜麦芽黄单胞菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ），１９９３年由Ｐａｌｔｅｎｏｎｉ￣Ｂｒａｄｂｕｒｙ改为现名，即嗜麦芽窄食单胞菌（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａ，ＳＭＡ）Ｅ】。嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗菌药物耐药，其机制主要与抗生素灭活酶、存在多药外排泵、ｓｍｑｎｒ基因以及整合子、生物膜形成等相关。１嗜麦芽窄食单胞菌的流行现状
嗜麦芽窄食单胞菌为革兰阴性非发酵杆菌，专
性需氧，过氧化氢酶阳性，赖氨酸脱羧酶阳性，氧化酶阴性，可氧化葡萄糖和麦芽糖，有极性鞭毛，动力阳性，在麦康凯琼脂上呈黄色菌落［２］。ＳＭＡ是一种毒力低下的条件性致病菌，众所周知与其感染相关的危险因素包括：恶性肿瘤ｆ尤其是血液系统恶性肿瘤１、器官移植、ＨＩＶ（ｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ）感染、囊性纤维化、长期住院、入住ＩＣＵ（ＩｎｔｅｎｓｉｖｅＣａｒｅＵｎｉｔ）、机械通气、留置动静脉导管及导尿管、皮质类固醇或免疫抑制剂治疗以及暴露于广谱抗生素【ｌｊ，可引起各种医院内感染，特别是在免疫低下的患者中，包括呼吸道感染、败血症以及较少见的皮肤软组织感染、骨关节感染、胆道感染、尿路感染、眼内炎、心内膜炎和脑膜炎［，】，给临

嗜麦芽窄食单胞菌的耐药机制研究

方小龙综述陈群审校
【要】近年来，麦芽窄食单胞菌感染率不断增加，菌已成为医院感染的重要病原菌。其耐摘嗜该药机制复杂，产生内酰胺酶等灭活酶、与外膜通透性改变、位变异、动外排系统、物膜形成以靶主生及质粒、整合子、座子等介导的耐药基因转移等有关。现就嗜麦芽窄食单胞菌耐药现状、药机制转耐
外药物敏感实验因方法和标准不同，果难以判断，结
的氨基酸差异为８、２和２，ｌ１０Ｌｅ表现为不同于其他４型的水解特性，头孢硝噻和亚胺培南的水解对活性低，能与氨基酸残基和Ｚ结合域的改变有可ｎ关；２、２、２ＬｂＬｃＬｄ与Ｌａ的氨基酸差异为４、和２９２，明Ｌ、２基因进化较快，进化驱动力可能５表１Ｌ其是Ｂ内酰胺类抗生素的选择压力。近来认为，１Ｌ一Ｌ、２基因具有不同的调节机制，它们有重叠调控部分，但
方法，已成为当前该领域最为关注的焦点。嗜麦芽窄食单胞菌的耐药现状
体，对分子质量为５ ×１。等电点为８２可被克拉相７０，．，维酸和Ｂ４７５抑制，ＲＬ２１主要水解头孢菌素和单环类抗生素。多数学者认为Ｌ１和Ｌ酶均为染色体酶，２存在于菌体内，可被诱导，胺培南为其强诱导剂。均亚

嗜麦芽窄食单胞菌耐药性分析

嗜麦芽窄食单胞菌耐药性分析作者：周扬霄，万汝根，徐晓棠【关键词】嗜麦芽窄食单胞；菌耐药；抗生素［关键词］嗜麦芽窄食单胞；菌耐药；抗生素嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomonas maltohpilia SMA)是一种重要的院内条件致病菌，在获得性感染中的分离率逐渐上升，特别是在创伤、免疫功能低下、使用呼吸机等患者中以及在ICU中历经抢救处于病程相持阶段的危重患者，在治疗上是十分棘手的病原菌，临床上广泛应用的抗生素呈多重耐药。

我院临床微生物实验室分离的80株SMA对常用13种抗生素进行耐药性监测，供临床用药选择作依据。

现结果报告如下。

1 材料与方法1.1 菌株来源及鉴定2004年5月至2006年5月由我院临床标本中分离的80株SMA，分离菌株均鉴定到种的水平，除常规方法外，还采用ATB仪进一步作鉴定，同一患者只收集1株。

1.2 抗生素纸片及培养基舒普深由美国辉瑞公司提供。

其他纸片购自法国生物梅里埃公司。

法国梅里埃公司的MH干粉自制培养基作药敏试验。

1.3 方法所选择抗生素药敏试验严格按美国临床试验实验室国家标准委员会(NCCLS)药敏试验标准，采用纸片扩散法，并用铜绿假单胞菌ATCC 27853做质控。

2 结果2.1 SMA的临床分布所检出的SMA来源于临床各科室，其中ICU占29/80，神经内科占24/80，呼吸内科占14/80，其他占13/80，其中呼吸道标本占72/80，其他占8/80。

2.2 医院内分离的80株SMA 对13种常用抗生素敏感性见表1。

表1 80株SMA对13种抗生素的耐药率(略)抑菌作用因抗生素不同而有所差异。

从表1看出，SMA对氨苄西林和亚胺培南耐药率为100％，对复方阿莫西林、妥布霉素、庆大霉素的耐药率均在90％以上，阿米卡星的耐药率为85％。

耐药率较低的是复方新诺明、舒普深、环丙沙星、左旋氧氟沙星分别为13.8％、20％、23.8％、31.2%。

3 讨论SMA在非发酵菌中，临床检出率仅低于铜绿假单胞菌和不动杆菌［1］，且感染率不断上升，已成为医院感染的重要病原菌。

嗜麦芽窄食单胞菌体外药敏试验及耐药性分析

２１００年１２月第４卷第３８６
・
检验与临床・
嗜麦芽窄胞菌体敏试验及耐食单外药药性分析
赵碎娟孙根妹叶建萍王笑笑科，江乐清３５０）浙浙２６８
［摘要】目的检测不同孵育时间对嗜麦芽窄食单胞菌药敏试验结果的影响，观察嗜麦芽窄食单胞菌对８种氟喹诺酮类抗生
素的交叉耐药性及其他各种抗生素耐药现状，以指导临床合理用药。方法采用纸片扩散法测定临床标本中分离的７２株嗜
麦芽窄食单胞菌孵育２ｈ和４ｈ对各种抗生素的体外抗菌活性。结果无论培养２ｈ还是４ｈ４８４８，嗜麦芽窄食单胞菌敏感率
ＤｐｒｅｔｏｌｉｌＬｂｒｏ，ＺｅａｇＰｏｉｃｕｑｇＣｔＳｃｎｅｐｅｏｐａ，ｕｑｇ３５０，ｈａｅａｍｎｆＣｉｃａｏａｒｔｎａｔｙｈｊｎｒｖｅＹｅｉｉｅｏｄＰｏｌ‘ ＨｓｉＹｅｉ２６８ＣｉｉｎｎｙＳｔｌｎｎ
【ｓｒｃ】ＯｊｃｉｅＴｎｅｔａｈｅｕｔｏｎｉｉｉｓｓｅｔｉｔｔｔｏｔｏｏｈｍｏａａｏｈｌｔｄｅｅｔｔｅｐｉｓＡｂｔａｔｂｅｔｏｉｓｇｔｔｒｓｌｆａｔｏｃｕｃｐｉｌｙｅｆＳｅｔｐｏｎｓｍｈｐｉａａｉｒｎｉｏｔｖｖｉｅｅｓｂｔｂｉｓｎｒｉｆｍｎ
ｃｉｃｌｐｃｍｅｌａｓｅｉｎｓ，ｎｔｄｓｄｆｕｉｎｎｉａｄｈｅｉｃｉｓｏｍｅｈｄｔｏｗａｕｅｔｄｅｅｔｈａｉｉｒｂａｓｃｐｉｉｉｙｆｖａｉｕｓｎｔｃｅｉｌａｉｓｓｓｄＯｔｃｔｅｎｔｃｏｉｌｕｓｅｔｂｌｏｒｏａｉｔｒａｓｇａｎｔｍｔｂａＳｅｏｒｐｏｍｏａｍａｐｈｉａｔ４ａｎ４８ｔｎｔｏｈｎｓｈｏｌａ２ｈｉｄｈ．ＲｅｓｔＴｈｅｎｉｉｒｂｉｓｃｐｉｉｉｙａｅｏｎｔｂｅｅｉｌｔｅｏｒｐｈｍｏｓｕｌｓａｔｍｃｏａｕｓｅｔｂｌｒｔｓｆａｉａｔｒａｓｏＳｔｎｔｏｏｎａｍａ－ｌｔｌｔｐｈｌａｔａｎａ２ｏｏｉｉｓｒｉｓｔ４ｈｒ４８ｈｎｒｅｒｍｈｈｇｓｗｅｅｓｏｌｗｓ：ｍｏｉｏａｉｉｏｄｒｆｏｔｅｉｈｅｔｒａｆｌｏｘｆｘｃｎ，ｇｔｆｏａｉｌａｉｘｃｎ，ｌｖｆｘｃｎ，ＳＺＴＭＰ，ｃｆｐｒ－ｌｅｏｌａｉｏＭ／ｅｏｅａ

嗜麦芽窄食单胞菌感染的临床分布及耐药性分析

ｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａＳＯａｓｔｏｇｕｉｄｅｔｈｅｒａｔｉｏｎａｌｕｓａｇｅｏｆａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．ＭｅｔｈｏｄｓＦｒｏｍＭａｒｃｈ２０１１ｔＯＭａｒｃｈ２０１３，ａｔｏｔａ１ｏｆ１１１ｓｔｒａｉｎｓｏｆＳｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｈｏｐｈｉｌｉａ，ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｃｌｉｎｉｃａｌｓｐｅｃｉｍｅｎｓ，ｗｅｒｅｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙａｎａｌｙｚｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＳｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｌｔｏｐｈｉｌｉａｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｉｓｈｏｓｐｉｔａｌｗｅｒｅｍａｉｎｌｙｄｉｓｔｒｉｂ—
食单胞菌的监测资料进行回顾性分析，主要包括嗜麦芽窄食单胞茵分布科室及耐药性分析。结果分离出的嗜麦芽窄食单胞茵主要分布在干诊综合科、呼吸科和ＩＣＵ重症医学科，分离率为２５．２３、２５．２３和ｌ１．７１。药敏测
ｕｔｅｄａｔＣａｄｒｅＳＷａｒｄ，ＰｎｅｕｍｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅｎｔａｎｄｉｎｔｅｎｓｉｖｅｃａｒｅｕｉｎｉｔ（ＩＣＵ），ａｎｄｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓ２５．２３，２５．２３ａｎｄ１１．７１．Ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｓｅｓ１１１ｓｔｒａｉｎｓｏｆＳｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓｍａｈｏｐｈｉｌｉａｔｏｍｉｎｏｃｙｃｌｉｎｅｗａｓ

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嗜麦芽窄食单胞菌的耐药基因检测及分子分型研究目的建立LAMP法快速检测嗜麦芽窄食单胞菌L1、L2型β内酰胺酶的技术平台。

通过研究嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株的分子分型，为其分子流行病学研究及临床抗感染治疗提供依据。

方法利用DNA环介导恒温核酸扩增法（loop-mediated isothermal amplification ofDNA，LAMP）针对L1、L2型β内酰胺酶基因设计的5条特异引物，通过引物特异性识别β内酰胺酶基因上的6个独立区域来快速检测耐碳青霉烯类嗜麦芽窄食单胞菌。

并通过实时浊度仪检测结果，在65℃恒温条件下50min 即可完成LAMP反应；钙黄绿素的可视化检测结果也可区别绿色的阳性结果不同于橙色的阴性结果。

通过对嗜麦芽窄食单胞菌的7对管家基因进行PCR扩增，并将测序结果与数据库进行比对，确定嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株的ST型，由此对18株嗜麦芽窄食单胞菌进行分子分型研究。

结果建立起LAMP方法快速检测嗜麦芽窄食单胞菌L1、L2β-内酰胺酶的技术平台，LAMP检测法的灵敏度是PCR方法的100倍，且具有极好的特异性。

PCR耗时长，步骤繁琐，且对样品的浓度要求更加严格，因此，LAMP法更适用于嗜麦芽窄食单胞菌L1，L2β内酰胺酶基因的快速检测。

对18株嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株进行MLST分析的结果显示，18株耐药菌株中ST25型3株; ST4型4株； ST8型2株； ST31型5株； ST29型3株； ST28型2株；并且有两株ST23和ST24为新型分离株。

结论LAMP方法易于操作、实验设施简便、反应结果肉眼即可辨别，并且具有灵敏度高、特异性强的特点，对非L1、L2β内酰胺酶基因的结果呈阴性反应,
这表明了引物设计良好，特异性强，适用于临床和医院感染的L1、L2β内酰胺酶基因的快速检测。

MLST是一种新型的研究嗜麦芽窄食单胞菌分子分型的方法，为该菌的流行病学研究提供了依据。