蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量
蒽酮-硫酸比色法测定盘龙七中多糖的含量
＝
６ ） 。结论是 所 用方 法快速 准确 、 重现 性好 ， 可 用 于盘 龙七 中多糖 的含 量 测定 。
西北大学学报 （ 自然科学版 ） ２ ０ １ ３ 年１ ２月 ， 第４ ３卷第 ６期 ， Ｄ ｅ ｃ ． ， ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ４ ３ ， Ｎ ｏ ． ６ Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｎ ｏ ｒ ｔ ｈ ｗ ｅ ｓ ｔ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
蒽 酮 一硫 酸 比色 法测 定 盘 龙 七 中 多糖 的含 量
冯永辉 ， 曹东凯 ， 郭耀 武
（ １ ． 西安 医学 院 药学 院， 陕西 西安 ７ １ ０ ０ ２ １ ； ２ ． 陕西省 富平县人 民医院药剂科 ， 陕西 富平 ７ １ １ ７ ０ ０ ； ３ ． 陕西省食 品药 品检验所 ， 陕西 西安 ７ １ ０ ０ ６ １ ）
ｉｄ ｒ ｅ ｓ ｗ ａ ｓ ０ ． ０ ２ —０ ． １ ０ ｍｇ ／ ｍＬ，ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｎ ｅ ａ ｒ ｅ ｑ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ａ ｓ Ｙ＝６ ． ７ ９ ５ ０ ｘ＋０ ． ０ ３ ４ ２，ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｌ ｅ ｖ ａ ｎ ｃ ｅ ｍｏ ｄ ｕ ｌ ｕ ｓ ＝０ ． ９ ９ ９
ｒ ａ ｔ ｅ ａ ｎ ｄ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｉ ｂ ｌ ｅ ．Ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ Ｒｈ ｉ ｚ ｏ ｍａ Ｂ ｅ ｒ ｇ ｅ ｎ ｉ ａ ｅ Ｓ ｃ ｏ ｐ ｕ ｌ ｏ ｓ ａ ｅ ．
蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量
蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量
操作步骤
葡萄糖标准曲线的制作
取6支具塞试管，按下表数据精密配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液，每个浓度做2个重复：
管号0 1 2 3 4 5
标准葡萄糖溶液/mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
蒸馏水/mL 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热10min。
取出，迅速浸于冰水浴中冷却10min。
在652nm波长下以第1管为空白，迅速测定其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量( g)为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
样品的测定
将样品溶液糖浓度调整到测定范围，精确吸取2mL置于干燥洁净试管中，在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。
取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min，每个浓度做2-3个重复。
在652nm波长下迅速测定各管吸光值。
根据葡萄糖含量的标准曲线，由样品溶液吸光值计算各样品溶液中糖的浓度，并计算其糖含量。
Cri-J。
蒽酮-硫酸比色法测定香菇多糖含量
Ｚ Ｕ Ｗｅ（ Ｌ Ｎ （Ｉ Ｎ Ｓ Ｎ Ｔ Ａ Ｅ ＴＣ ＬＣ Ｌ Ｄ ｉｇ ａｇ ２４ ０ ， Ｈ Ｎ Ｈ ｉＡ Ａ Ｄ Ｊ Ｇ Ｕ） Ｕ Ｒ Ｃ Ｕ Ｉ Ａ Ｏ，Ｔ ．Ｊ ｊｎ １５ ０Ｃ Ｉ Ａ） Ａ ｎｉ
Ａ ｓ ａ ｔＯ ｊｃｖ ：ｏ ｅｔｂｉ ｔｏ ｏ ｅｅｍｎ ｔ ｎｏ ｅＬ ｎ ｎｎ ｃｎ ｎ ｉ Ｌ ｎ ｎｎ Ａ Ｉ ｅ ｏ ： ｅ ｒ ｉ ｖａ － ｂｔ ｃ： ｂ ｔ ｅＴ ｓ ｌｈ ａｍｅ ｄｆｒｄｔｒ ｉａ ｏ ｆｔ ｅ ｔ ａ ｏｔ ｔ ｎ ｅ ｔ ａ Ｐ．Ｍ ｔ ｄ Ｄ ｔ ｍｎ ｂ ｎ ｒ ｅｉ ａ ｓ ｈ ｉ ｈ ｉ ｅ ｉ ｈ ｅ ｅ
ｔ ｒｎ ｓ ｌ ｒｃ ａ ｉ ｅ ｌ ｒ ｔ ， ｔｋ ｎ ｘ ｒ ｎ ａ ｈ ｅｅ ｅ ｃ ｏ ｔ １ ｈ ｏ ｅ— ｕｆ ｉ ｃｄ ｏ ｏ ｍｅ ｒ ｕ ｉ ｙ ａ ｉ ｇ Ｄｅ ｔａ ｓ ｔ ｅ ｒｆ ｒ ｎ ｅ ｃ ｎ ｒ ．Ｒｅ ｕ ｔ Ｉ ｈ Ｄ ｘ ｒ ｎ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ｗｉ ｉ １ ０ ｏ ｓ ｌ：ｎ ｔ ｅ ｅ ｔ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ｉ ｔ ｎ ０ ０４— ａ ａｏ ｈ
水均为二次重蒸馏 水。
表 １ 不 同 反 应 时 间对 应 吸 光 度值
ｌ ．主要仪器 ： ＿３ １ 岛津 ｕ 一４０ Ｖ ２５ 型紫外一 可见分光光度计 、 涡旋 混合器。
２ 取 ．２ ２ １１ ．４主要器材 ： ． 硅胶 Ｈ板 （ 青岛海洋化工厂） １ｍ 具塞试管。 １ ． 、５ ｌ ．４放置时间对于吸光度 的影 响 ： １ ．下配制之香菇多糖 １ ． 法 ２方 溶液 ３ ｌ ｍ ，冰水浴中沿管壁精密加入 已加入 ０２ ． ％蒽酮硫 酸溶 液 ５ｌ ｍ 的试管 中 ， 涡旋混 匀后 ， 即于沸水 中加热 ， 立 自混 匀起 １ ． 香菇多糖组成单糖 的初 步分析 ： ２ ０ ０４批 香菇 多糖 ．１ ２ 取 ０９０ 计时 ， 准确反应 ６ ｉ ， ｍ ｎ 取出移至冰水 浴中 ， 再放至室温 ， 水为空 ００ ０ ．２ｇ于 １ ｍ 安 剖瓶 中 ，加 ｌ ｏ／的硫 酸 溶液 ５ 封 口， ０ｌ ｍｌ １ ｍｌ 白， ６ ５ ｍ处测定吸收度 ， 于 ２ｎ 结果见表 ２ 从 表 ２ ， 结果 看出 ， 溶 Ｉ０ 加热 ８ 时 ， 出 ， 酸 钡 中和 ， Ｏ￣ Ｃ 小 取 碳 水浴 浓缩 至 ｌ ｌ为供 ｍ， 液在 ６ ０分钟 内稳定 。 试液 。取 Ｄ 葡 萄糖 、一 糖 、一 一 Ｄ果 Ｄ 甘露糖 、 一 Ｄ 半乳糖各 ２ ｍ ， ．ｇ Ｏ
蒽酮_硫酸比色法测定麦冬多糖的含量_
·40 ·
安 徽 医 药 A nhui Medical and Pharm aceutical Jou rnal 2003 Feb ;7 (1)
硫酸镁注射液细菌内毒素检查法的可行性研究
李凤华 张克俊
(安徽省和县人民医院药剂科 ,和县 238200)
摘要 目的 建立硫酸镁注射液的细菌内毒素检测方法 。方法 按《中国药典》二部 2000 年版附录细菌内毒素检查法 ,考察硫 酸镁注射液对细菌内毒素法检查的干扰作用 。结果 硫酸镁注射液稀释 10 倍 ,对细菌内毒素法无干扰作用 。结论 细菌内毒 素检查法可代替家兔热原检查法 。 关键词 硫酸镁注射液 ;细菌内毒素检查法 ;热原检查法 ;干扰试验
14. 7 23. 0227 12. 0 21. 0319 13. 8 21. 3464 11. 7 18. 2402
回收率 ( %) 99. 74
102. 14 104. 61 103. 34 102. 46 ±2. 07
2. 02
2. 2. 6 精密度试验 从同一样品中取出相同量溶液 6 份 ,测 定麦 冬 多 糖 的 含 量 , 结 果 为 71129 % ±0128 % ( RSD 为 0139 %) 。 2. 2. 7 样品的含量测定 精密称取麦冬多糖精制品约 20 mg ,加水溶解并定容至 100 ml 作为供试品 。取溶液适量 ,按 21214 方法操作 ,626 nm 处测定吸收值 。代入工作曲线方程 , 计算出 供 试 品 麦 冬 多 糖 的 含 量 , 结 果 为 81158 %、6911 %、 71136 %、6811 %、82145 %( n = 5) 。 3 讨论 3. 1 苯酚 - 硫酸和蒽酮 - 硫酸比色法测定多糖的含量为两
able. KEY WORDS Radix Ophiogonis ; ant hrone2sulphuric acid colrimetry ; content determination
蒽酮_硫酸比色法测定玉竹多糖含量的研究
蒽酮2硫酸比色法测定玉竹多糖含量的研究杨 辉(南京医药合肥天星有限公司,安徽合肥 230061)关键词:玉竹;蒽酮2硫酸比色法 玉竹多糖是中药玉竹Polygonatum odoratum (M ill .)D ruce的主要有效成分,含量测定中国药典一部2005年版采用苯酚2硫酸比色法[1]。
我们在实际工作中发现,这种方法受试剂的影响很大,并造成误差。
本文以水提醇沉方法精制玉竹多糖,以蒽酮2硫酸比色法测定玉竹多糖的含量,并对测定方法的可行性进行研究,报道如下。
1 仪器与试药1.1 仪器 HP8453紫外2可见分光光度计(美国惠普);TG328A 型电光分析天平(上海分析天平厂)。
1.2 试药 玉竹购于合肥市医药公司、无水葡萄糖(AR,中国上海曹杨第二试剂厂)、蒽酮(AR,中国医药集团上海化学试剂公司)、硫酸(AR,中国淮南市化学试剂厂)。
2 实验方法与结果2.1 玉竹多糖的提取与精制 玉竹适量,切成薄片,加6倍量水煎煮提取3次,每次1h,提取过程中应不断搅拌,提取液合并,过滤,减压浓缩至约为原体积的五分之一,浓缩液加乙醇至醇浓度90%以上,静置,倾去上清液,沉淀物以95%乙醇洗涤即得玉竹多糖粗提取物,再用少量无水乙醇和乙醚洗涤除去可能含有的少量脂溶性成分,80℃干燥即得玉竹多糖精制品,得率约为10%。
2.2 波长选择及工作曲线的建立 称取干燥恒重的葡萄糖适量,加水溶解使成118.6mg ・L -1作对照品溶液。
取对照品溶液0、0.5m l 置具塞试管内,分别加水1.0、0.5m l,加入新鲜配制的蒽酮试剂(0.2%蒽酮的80%硫酸溶液)8.0m l 沸水浴加热10m in,迅速置冰水浴冷却10m in 后,以首管为空白,在460～660n m 处扫描,结果在626±1n m 处有最大吸收,因此,选择测定波长为626n m,结果见图1。
称取干燥恒重的葡萄糖适量,加水溶解使成230.0mg ・L -1,精密量取0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0m l 置具塞试管内,加水1.0m l,再加入新鲜配制的蒽酮试剂(0.2%蒽酮的80%硫酸溶液)8.0m l 沸水浴加热10m in,迅速置冰水浴冷却10m in 后,以首管为空白,在626n m 处测定吸收度,以浓度对吸收度作工作曲线得方程为C =0.61312+25.285×A (r 2=0.9981)。
蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量
蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量之青柳念文创作一. 实验原理糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物呈蓝绿色.该物质在620 nm处有最大吸收，在150µg/mL范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比.该法有很高的活络度，糖含量在30 µg左右就可以停止测定.二. 试剂器材蒽酮试剂：紧密称取蒽酮，加80%浓H2SO4100 mL使溶解，摇匀.当日配制使用；葡萄糖尺度液：将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中，12hr后紧密称取100mg，用蒸馏水定容至100ml；其他器材：分析天平、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等.三. 操纵步调葡萄糖尺度曲线的制作取7支具塞试管，按下表数据紧密配制一系列分歧浓度的葡萄糖溶液，每一个浓度做2-3个重复：管号0 1 2 3 4 5 6 尺度葡萄糖溶液/mL 0 0.4 0.6 0.8蒸馏水/mL在每支试管中当即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min.取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min.在625nm波长下以第1管为空缺，迅速测定其余各管吸光值.以尺度葡萄糖含量(g)为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制尺度曲线.样品的测定将样品溶液糖浓度调整到测定范围，切确吸取2mL置于干燥干净试管中，在每支试管中当即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min.取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min，每一个浓度做2-3个重复.在625nm波长下迅速测定各管吸光值.根据葡萄糖含量的尺度曲线，由样品溶液吸光值计算各样品溶液中糖的浓度，并计算其糖含量.四. 注意事项该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物，不单可测定戊糖与已糖，且可测所有寡糖类和多糖类，包含淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量.在没有需要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多费事，因此，有特殊的应用价值，但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差.分歧的糖类与蒽酮试剂的显色深度分歧，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因分歧糖类的比例分歧造成误差，但测定单一糖类时则可防止此种误差.。
蒽酮_硫酸法测定板栗多糖含量
河北科技师范学院学报 第24卷第2期,2010年6月Journa l of H ebe iN o rm al U niversity of Science&T echno l ogy V o l.24N o.2June2010蒽酮 硫酸法测定板栗多糖含量李润丰,常学东,狄小丽(河北科技师范学院食品科技学院,河北秦皇岛,066600)摘要:采用蒽酮 硫酸法测定板栗多糖含量并对其测定条件进行优化。
结果表明,蒽酮 硫酸法测定板栗多糖的适宜操作条件为:加入2g/L蒽酮 硫酸溶液4mL,在沸水浴中加热3m i n,自来水冷却40m i n后在10 m i n内于波长600n m下读取吸光度。
蒽酮 硫酸溶液需要现配现用。
多糖含量控制在0.02~0.06g/L之间为宜。
蒽酮 硫酸法测定板栗多糖含量的精密度实验RSD值为0.792%,平均加样回收率为107.2%,R SD值为4.6%。
用本方法测定板栗中多糖含量为12.67%。
关键词:板栗多糖;蒽酮 硫酸法;测定中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:1672 7983(2010)02 0054 06板栗是中国栽培最早的果树之一,约已有2000~3000年的栽培历史。
板栗营养价值很高,甘甜芳香,含淀粉51%~60%,蛋白质5.7%~10.7%,脂肪2.0%~7.4%,多糖、粗纤维、胡萝卜素、维生素A、B、C及钙、磷、钾等矿物质,可供人体吸收和利用的养分高达98%。
栗果具有养胃健脾、补肾强筋、活血止血之功效,因而又具有较高的医疗保健价值,深受国内外消费者的青睐[1]。
目前,板栗作为一种营养价值高又具有重要的养生保健功能、药食两用的果中珍品,其营养和保健价值还远未得到有效开发、利用。
因而充分运用现代科学技术手段对板栗的营养保健功能的物质进行系统分析,对功能成分进行提取和开发,使之商品化、产业化,生产理想保健食品,进行深加工和新产品研究,提高附加值,具有重要的意义,开发应用前景将十分广阔[2、3]。
蒽酮-硫酸法测多糖
蒽酮硫酸比色法测定多糖含量之阳早格格创做一. 真验本理糖类正在较下温度下可被浓硫酸效率而脱火死成糠醛或者羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱火缩合，产死糠醛的衍死物呈蓝绿色.该物量正在620 nm处有最大吸支，正在150 µg/mL范畴内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比.该法有很下的敏捷度，糖含量正在30 µg安排便能举止测定.两. 试剂器材蒽酮试剂：粗稀称与0.1g蒽酮，加80%浓H2SO4100 mL使溶解，摇匀.当日配制使用；葡萄糖尺度液：将无火葡萄糖置于五氧化两磷搞燥器中，12hr后粗稀称与100mg，用蒸馏火定容至100ml；其余器材：分解天仄、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器战兴液缸等.三. 支配步调样品的测定将样品溶液糖浓度安排到测定范畴，透彻吸与2mL置于搞燥净净试管中，正在每支试管中坐时加进蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后所有置于沸火浴中加热15min.与出，赶快浸于冰火浴中热却15min，每个浓度搞23个沉复. 正在625nm波少下赶快测定各管吸光值.根据葡萄糖含量的尺度直线，由样品溶液吸光值估计百般品溶液中糖的浓度，并估计其糖含量. 四. 注意事项该法的特性是险些可测定所有的碳火化合物，不但可测定戊糖与已糖，且可测所有鳏糖类战多糖类，包罗淀粉、纤维素等（果为反应液中的浓硫酸可把多糖火解成单糖而爆收反应），所以用蒽酮法测出的碳火化合物含量，本量上是溶液中局部可溶性碳火化合物总量.正在不需要粗致区分百般碳火化合物的情况下，用蒽酮法不妨一次测出总量，省来许多贫苦，果此，有特殊的应用价格，但是正在测定火溶性碳火化合物时，则应注意切勿将样品的已溶解残渣加进反应液中，可则会果为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂爆收反应而减少了测定缺面.分歧的糖类与蒽酮试剂的隐色深度分歧，果糖隐色最深，葡萄糖次之，半乳糖、苦露糖较浅，五碳糖隐色更浅，故测定糖的混同物时，常果分歧糖类的比率分歧制成缺面，但是测定简单糖类时则可预防此种缺面.。
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蒽酮-硫酸比色法测定多糖含量
一. 实验原理
糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H10O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物呈蓝绿色。
该物质在620 nm处有最大吸收，在150 µg/mL范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
该法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定。
二. 试剂器材
蒽酮试剂：精密称取0.1g蒽酮，加80%浓H2SO4100 mL使溶解，摇匀。
当日配制使用；
葡萄糖标准液：将无水葡萄糖置于五氧化二磷干燥器中，12hr后精密称取100mg，用蒸馏水定容至100ml；
其他器材：分析天平、分光光度计、容量瓶(100ml、50ml、10ml)、烧杯、具塞试管、移液器、移液器吸头、涡旋振荡器和废液缸等。
三. 操作步骤
葡萄糖标准曲线的制作
取7支具塞试管，按下表数据精密配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液，每个浓度做2-3个重复：
管号0 1 2 3 4 5 6 标准葡萄糖溶液/mL 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
蒸馏水/mL 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。
取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min。
在625nm波长下以第1管为空白，迅速测定其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量( g)为横坐标，以吸光值为纵坐标，绘制标准曲线。
样品的测定
将样品溶液糖浓度调整到测定范围，精确吸取2mL置于干燥洁净试管中，在每支试管中立即加入蒽酮试剂6mL，振荡混匀，各管加完后一起置于沸水浴中加热15min。
取出，迅速浸于冰水浴中冷却15min，每个浓度做2-3个重复。
在625nm波长下迅速测定各管吸光值。
根据葡萄糖含量的标准曲线，由样品溶液吸光值计算各样品溶液中糖的浓度，并计算其糖含量。
四. 注意事项
该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物，不但可测定戊糖与已糖，且可测所有寡糖类和多糖类，包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值，但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。
不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时则可避免此种误差。