肿瘤动物模型构建实验技术
建立小鼠肿瘤模型的研究进展
建立小鼠肿瘤模型的研究进展摘要：建立一种理想的肿瘤动物模型对研究肿瘤的发病、治疗和预防有重大的意义。
其中小鼠肿瘤模型具有生长周期快、易获得、易操作等优点被基础实验研究所广泛采用，如何选择和建立一个合适的小鼠肿瘤模型对肿瘤的整个研究有着举足轻重的作用。
关键字：肿瘤，动物模型，小鼠肿瘤，是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病。
对肿瘤的研究一般都是在人类疾病动物模型的基础上展开的。
建立一个完全反映人类疾病的动物模型比较困难，但可依据不同的实验目的选择相应的动物实验模型。
1.实验动物的选择可用作肿瘤模型的动物有很多，小鼠肿瘤模型作为其中一种常用模型主要因为有以下几个优点。
（1）易获得，常用的肿瘤模型小鼠通常采用SPF级小鼠，SPF级小鼠一般医学院校及研究所都能买到。
（2）生长周期短，一般小鼠肿瘤模型两周左右就能长大，能大大缩短实验周期。
（3）易操作，小鼠的动物实验操作一般简便，因此可适当增加组内样本数量，使实验数据更具说服力。
2.理想的建立肿瘤模型应具备的条件（1）肿瘤生长的过程应与人类肿瘤生长过程相似，做到尽可能复制出与人类肿瘤相同的模型。
（2）制作模型的方法简单易行。
（3）动物模型的重复性要好，要能满足实验的多次重复试验结果稳定性好。
（4）采用的建模方法对实验人员和环境无危害或危害较小。
3.肿瘤来源的选择现在世界上保有近500种的动物移植瘤，但常用于筛药的不到40种，多数为小鼠肿瘤，其次是大鼠和仓鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，P1534淋巴白血病，艾氏腹水瘤，Friehd病毒白血病，肉瘤180，白血病P388，Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，Walker-256，吉田肉瘤，肉瘤45，Liol淋巴瘤，Dunning 白血病，Ｗagner癌肉瘤，白血病L5170Y，P1798淋巴肉瘤，LPC-1浆细胞瘤，淋巴瘤8，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，Gardner 淋巴肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Mur hy-sturm淋巴肉瘤，Jensen肉瘤，Geurin氏癌，仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。
肿瘤动物模型构建实验技术
肿瘤动物模型得建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗得疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好得研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好得实验工具。
实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型就是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物得肿瘤等。
实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右得封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。
除给普通食物外，饲以致癌物，即用0、25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0、025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0、005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。
2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0、06%DBA得饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1、5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量得肝癌诱发成功。
3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0、03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。
4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0、3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。
5．亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0、1 ml含1 mg）涂在动物得两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。
（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。
（3）或用2、5 mg OAAT溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。
肿瘤动物模型
1. 肿瘤发生情况参差不齐。
2. 难以短时间内获得大量肿瘤材料，耗时长，耗资大。
3. 发生肿瘤的动物肿瘤生长速度差异大，难以评价。
二、诱发性肿瘤动物模型
定义：使用致癌因素(Carcinogens)在实验条件下诱发动物发生肿瘤的动
物模型。
原理：利用外源性致癌因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和
注：肿瘤模型形成时间较长，需30~40d甚至更长。
在异种移植瘤实验中，还有一种正位移植，即将人癌组织或细胞按其在人 体内的原发部位，接种于相应的器官，有别于通常的皮下接种（异位接种）
免疫功能抑制的大鼠作为移植宿主
实验动物：体重120~160g的Wistar大鼠
操作方法（例：人胃癌细胞株）：
1.大鼠分笼饲养，皮下注射具有免疫抑制作用的阿糖胞苷200mg/kg体重，2d后用 10Gy(1000rad)60Co全身照射，照射后的大鼠饲养于洁净环境中，每日紫外线灯照 射1h，自由摄食饮水，饮水中加土霉素1mg/ml 2.将人胃癌细胞株调至1×106个/ml细胞悬液，台酚蓝拒染法检测癌细胞存活率后， 每只鼠皮下注射0.5ml(含5×105个细胞）细胞悬液 3.接种后每日观察肿瘤生长情况，肿瘤生成后取瘤组织进行组织病理学检查
2.腹水瘤
肿瘤细胞的冻存与复苏
对肿瘤细胞或瘤株进行冷冻保存可以使其得以长期使用，防 止退化或变异，保存不同代细胞的特征。一般在液氮中保存 1~2年，细胞存活率可达80%~90%。 1.冻存方法：取对数生长期增殖旺盛的细胞，胰蛋白酶消化、离心、洗涤，
用含7份培养液、2份小牛血清、1份DMSO配成（1~5）*106个/ml的细胞悬液，转 入细胞冻存管。将冻存管于4℃放置30min,-20℃放置4h，-70℃过夜，然后放入液 氮中。
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定实验肿瘤学的需要导致肿瘤动物模型的产生,借以研究人类肿瘤的病因、发生、发展以及治疗和预防。
肿瘤动物模型可来自于动物的自发肿瘤、诱发肿瘤和移植性肿瘤。
一前两者由于对动物品系要求严格、实验周期较长或缺少实验一致性而较少使用。
移植性肿瘤动物模型具有特性明确、生长一致性好、实验周期短、瘤株分布广泛、可反复复制等优点,在肿瘤研究中占有重要地位。
可移植性肿瘤,是把动物或人的肿瘤移植到同系、同种或异种动物,经传代后,组织类型和生长特性已趋稳定,并能在受体动物中继续传代,又称为可移植性肿瘤细胞。
二可移植性肿瘤移植于同系或同种动物,称为同种移植,是国内外最常用的肿瘤动物模型复制方法之一。
同种移植的优点是,可供选择使用的细胞系或细胞株多,许多细胞系在世界范围分布广泛,并且这些细胞的生物学特性已经比较明确,一般都有明确的背景资料,使一群动物同时接种同样量的瘤细胞,生长速度一致、个体差异较小,成活率高,易于对照观察,这些都是便于科研成果相互比较和交流的有利因素三在接种过程中，应把握注射深度，否则易造成内脏损伤。
接种后三天即开始观察有无肿瘤形成。
本实验具有周期短、制作方便、成功率比较高、较好重复性和稳定性的明显优势，是一种较为理想的肿瘤实验动物模型，值得推广。
肝癌肿瘤模型建立：抗肿瘤药物及制剂的药效学评价，可通过建立小鼠荷瘤数据模型，探索肿瘤生长的本质及其发生发展的规律，探究其抗肿瘤效果。
方法：小鼠右腋下注射H22肿瘤细胞，注射部位发生癌变，小鼠肿瘤生长明显，切片结果证明实验成功，模型构建完成，使小鼠荷瘤，观察肿瘤生长，记录体重数据并建立动物模型。
1材料与方法1.1实验材料1.1.1动物及分组：取20只昆明鼠随机分成A组（10只），B组（5只），C组对照组（5只），编号饲养。
1.1.2试剂：无菌水，生理盐水，台酚蓝，2%冰醋酸，甲醛，乙醇，二甲苯，石蜡等。
1.1.3仪器：离心机，显微镜，计数板，电子称，超净工作台，温箱，切片机等。
乳腺癌动物模型构建
乳腺癌动物模型构建乳腺癌是一种常见的恶性肿瘤，临床表现为乳房肿块、乳房异常分泌物、乳房皮肤红肿等症状。
为了更好地研究乳腺癌的发病机制和寻找新的治疗方法，科学家们通过构建乳腺癌动物模型来模拟乳腺癌的发展过程。
本文将介绍乳腺癌动物模型的构建方法和研究价值。
一、乳腺癌动物模型的构建1. 细胞系移植模型细胞系移植模型是构建乳腺癌动物模型的常用方法之一。
研究人员可以选择已知的乳腺癌细胞系，将其移植到小鼠的乳腺组织中，观察肿瘤的生长和转移情况。
这种模型可以模拟乳腺癌的肿瘤生长、浸润和转移过程，为进一步研究乳腺癌的发病机制提供了可靠的平台。
2. 基因工程小鼠模型基因工程小鼠模型是通过基因突变或基因操纵技术，使小鼠表达人类乳腺癌相关基因，从而模拟乳腺癌的发展过程。
这种模型可以精确控制乳腺癌发生的时间和位置，研究人员可以观察到乳腺癌的发展过程以及与基因突变相关的病理变化。
基因工程小鼠模型在研究乳腺癌的发病机制和筛选治疗靶点方面具有重要意义。
3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给小鼠注射化学物质，如致癌物质DMBA （7,12-二甲基苯[α]蒽）或NMU（N-甲基-N-亚硝基脲），诱导乳腺癌的发生。
这种模型可以模拟乳腺癌的致癌过程，研究人员可以观察到肿瘤的生长速度、转移能力以及对化疗药物的敏感性。
化学诱导模型的优势在于可以快速诱导肿瘤形成，是进行大规模筛选实验的理想模型。
二、乳腺癌动物模型的研究价值1. 研究乳腺癌的发病机制乳腺癌动物模型能够模拟乳腺癌的发展过程，帮助研究人员深入理解乳腺癌的发病机制。
通过观察肿瘤的生长、浸润和转移过程，研究人员可以揭示乳腺癌的发展规律，寻找新的治疗靶点。
2. 评估抗癌药物疗效乳腺癌动物模型是评估抗癌药物疗效的重要工具。
研究人员可以在动物模型中测试新的抗癌药物，观察肿瘤的生长速度、转移能力以及对药物的敏感性，从而评估药物的疗效。
3. 验证分子靶向治疗方法乳腺癌动物模型对于验证分子靶向治疗方法的有效性具有重要作用。
关于肿瘤动物模型建立的方法
关于肿瘤动物模型建立的方法生物实验菌推荐搜索关键词列表：动物模型光热治疗HE染色常规的动物实验，除了皮肤或者骨的缺损修复，癌症也是其中重要的一种。
目前，癌症仍然威胁人类的一大疾病，因此需要动物实验来深入了解如何有效进一步治疗癌症。
通常，动物模型一般是研究者利用化学致癌剂或者致癌病毒诱发实验动物肿瘤。
那么肿瘤动物实验模型建立的优点主要有：抗肿瘤药物的筛选以及疗效；抗肿瘤转移性药物的研发以及研究平台。
因此，我们总结了常见癌症的动物模型建立方法供读者参考。
一、肝癌（1）二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌：第一种方式可以用DEN直接灌胃（10mg/kg，每周一次），其余5天用0.025%的DEN 水溶液供其饮用，约4个月可以诱发成肝癌；另一种方式可以直接用0.005%掺入水中饮用约8个月即可诱发肝癌。
（2）2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、兔、狗肝癌：可以将0.03%的2AAF混入饲料喂养；或者每只每日喂养平均2～3mg的2AAF，3-4月左右即可诱发肝癌。
（3）4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌：将0.06%的DBA 混入饲料喂养，饲料中的维生素B2不可超过1.5～2mg/kg。
（4）黄曲霉素诱发大鼠肝癌：将0.001～0.015ppm（每日用量）的黄曲霉素混入饲料中喂6个月后，肝癌诱发率可达80％。
二、肺癌（1）二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肺癌：小白鼠每周皮下注射1%的DEN水溶液一次，每次剂量56mg/kg，总剂量达到1176mg，半年左右发癌率可达94%。
（2）乌拉坦诱发肺腺癌：适龄大鼠每次每只腹腔注入10%乌拉坦生理盐水液0.1～0.3ml，间隔3～5日再注，共注2～3个月，每只小鼠用量约为100mg。
3个月左右即可成功诱发肺腺癌。
（3）硫酸铵气溶胶诱发肺腺癌：让老鼠吸入硫酸胺气溶剂13个月即可诱发肺腺癌。
三、胃癌（1）不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌：不对称亚硝胺的剂量为0.25ml/kg，3个月即可发生前胃乳头状癌，7-8个月诱发胃癌。
肿瘤动物模型的建立及应用
肿瘤动物模型的建立及应用肿瘤动物模型是一种在动物体内模拟人类肿瘤发展过程的实验模型，被广泛用于肿瘤的病理生理学、分子生物学、药理学等研究。
通过建立肿瘤动物模型，可以加深对肿瘤的发生、发展、转移和抑制机制的了解，同时也可以评估新药物及治疗策略的有效性。
下面将探讨肿瘤动物模型的建立及应用。
首先，肿瘤动物模型的建立是一个复杂而具有挑战性的过程。
一般来说，肿瘤动物模型的建立可以分为自发性肿瘤模型和人工诱导肿瘤模型两种类型。
自发性肿瘤模型主要是利用动物自身遗传倾向或环境诱导等因素，在动物体内自发产生肿瘤。
比如在家养动物中，很多小鼠和家兔由于遗传因素或者饮食、环境等长期暴露，会自发产生肿瘤。
这种模型更接近人类肿瘤的发展过程，但是其建立的可控性和可重现性较差，需要耗费大量的时间和经费。
人工诱导肿瘤模型则是通过外界的干预手段，比如化学药物、辐射等方式，直接在动物体内诱导肿瘤的产生。
这类模型具有较好的可控性和可重现性，可以更好地满足科研实验的需要。
常用的人工诱导肿瘤模型包括移植肿瘤模型、化学诱导模型、基因编辑模型等。
其次，肿瘤动物模型的应用范围非常广泛。
一方面，肿瘤动物模型可以用于研究肿瘤的发生机制和发展过程。
比如，利用肿瘤动物模型可以深入探究各种致癌物质或致癌基因对肿瘤发生的影响，分析肿瘤细胞的生物学特性和转移能力等。
通过模拟肿瘤的生长形态，可以更好地了解肿瘤细胞的生理活动和分子机制，为探寻肿瘤治疗策略提供理论依据。
另一方面，肿瘤动物模型还可以用于筛选和评估抗肿瘤药物。
通过向肿瘤动物模型中输入肿瘤细胞或移植肿瘤组织，可以评估新药物对肿瘤生长的抑制效果，了解药物的毒副作用、适应症等。
这种通过体内实验评估药物疗效和安全性的方法，大大提高了新药物研发的效率和成功率。
此外，肿瘤动物模型还被广泛用于研究肿瘤的诊断和预后指标、肿瘤免疫治疗、基因治疗等领域。
通过模拟肿瘤动物模型，可以更好地理解和验证这些新技术和新疗法在肿瘤治疗中的应用。
pdx模型构建方法
pdx模型构建方法
PDX模型构建方法是一种用于研究肿瘤发生和发展的技术。
它可以将人类肿瘤细胞移植到实验动物体内，以模拟肿瘤的发展
过程。
PDX模型构建方法的主要步骤包括：细胞收集、细胞培养、细胞移植、细胞增殖和细胞分析。
首先，细胞收集是PDX模型构建方法的第一步，它需要从患
者体内收集肿瘤细胞。
这些细胞可以从活检标本中收集，也可以
从肿瘤组织中收集。
其次，细胞培养是PDX模型构建方法的第二步，它需要将收
集的肿瘤细胞培养在体外培养基中，以增加细胞的数量。
第三，细胞移植是PDX模型构建方法的第三步，它需要将培
养的肿瘤细胞移植到实验动物体内，以模拟肿瘤的发展过程。
第四，细胞增殖是PDX模型构建方法的第四步，它需要在实
验动物体内观察肿瘤细胞的增殖情况，以了解肿瘤的发展过程。
最后，细胞分析是PDX模型构建方法的最后一步，它需要对
肿瘤细胞进行分子分析，以了解肿瘤的发展机制。
总之，PDX模型构建方法是一种用于研究肿瘤发生和发展的
技术，它包括细胞收集、细胞培养、细胞移植、细胞增殖和细胞
分析五个步骤。
它可以帮助研究人员更好地理解肿瘤的发展机制，为肿瘤治疗提供有效的指导。
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肿瘤动物模型的建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。
实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。
实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。
除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。
2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1.5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量的肝癌诱发成功。
3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0.03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。
4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0.3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。
5．亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0.1 ml含1 mg）涂在动物的两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。
（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。
（3）或用2.5 mg OAAT溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。
6．黄曲霉素诱发大鼠肝癌（1）每日饲料中含0.001～0.015 ppm，混入饲料中喂6个月后，肝癌诱发率达80％。
二、胃癌1．甲基胆蒽诱发小鼠胃癌（1）取20 g左右的小鼠，无菌手术下，在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆蒽（MC）线结。
（2）含MC的线结是用普通细线，在一端打结后，将线结置于盛有MC小玻璃试管内，在酒精灯上微微加温，使MC液化渗入线结。
MC浓度为0.05～0.1 g 20-甲基胆蒽内浸入10～20根线。
（3）手术埋线后4～8个月可诱发成功胃癌。
2．不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌剂量为0.25 ml/kg体重，3个月后全部动物发生前胃乳头状癌，7～8个月后有85～100%发生前胃癌。
昆明种最敏感。
A系次之，615系小鼠敏感性最差。
3．甲基亚硝基醋酸尿素诱发小鼠胃癌给BD大鼠饮水中加甲基亚硝基醋酸尿素，剂量为2 mg/kg体重，每周饮用5次，520天后全部大鼠均发生了腺胃癌。
三、食管癌1．甲基苄基亚硝胺（MBNA）诱发大鼠食管癌（1）取体重100 g以上的Wistar大鼠；（2）任其食用含甲基苄基亚硝胺的饮水，并将MBNA掺入饲料中使每日摄入量达0.75～1.5 mg/kg体重；（3）80～100天可诱发成食管癌。
2．二烃黄樟素（Dihydrosafrole）诱发大鼠食管癌（1）二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品，在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万（2500～10000 ppm）黄樟素，就能引起20～75%的食管癌。
3．甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌（1）用0.2%或0.005%的甲基苄基亚硝胺水溶液，给动物经口灌喂，每天一次，大鼠灌注剂量为1 mg/kg体重；（2）至第27天即发现一例食管乳头状瘤，154天发现第一例食管癌，11个月食管癌的发生率为53%。
四、肺癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肺癌（1）小白鼠每周皮下注射1%DEN水溶液一次，每次剂量56 mg/kg，DEN总剂量达到868 mg；（2）观察时间为100天左右时，发癌率可达40%。
（3）DEN总剂量达到1176 mg，观察时间为半年左右时；发癌率可达94%。
2．乌拉坦诱发肺腺癌（1）小鼠（A系，1～11/2月龄）较大鼠敏感，每次每只腹腔注入10%乌拉坦生理盐水液0.1～0.3 ml，间隔3～5日再注，共注2～3个月，每只小鼠用量约为100 mg；（2）注后3个月肺腺癌发生率为100%，而且多数为多发性，这种诱发瘤为良性。
3．苯并芘诱发肺腺癌（1）猴气管内注入3，4-苯并芘（苯并花为3～15 mg与等量之Fe2O3混合液），每周一次，共10次；（2）6只猴中有2只诱发肺的鳞状上皮癌。
4．硫酸铵气溶胶诱发肺腺癌（1）用硫酸胺气溶剂给100只大鼠吸入；（2）13个月后所有大鼠都发生了肺腺癌。
5．甲基胆蒽诱发肺腺癌（1）用0.2%明胶作悬浮剂将甲基胆蒽混合后给金地鼠气管内注入，每次0.1 ml（含甲基胆蒽5 mg）每周一次，共6次；（2）53周后有62.5%动物发生了肺癌。
五、鼻咽癌1．二甲基胆蒽（MC）诱发大鼠鼻咽癌（1）取直径2～3 mm的硬质塑米管，在酒精灯上小火拉成锥形，每段长约3.5 cm，管内填以结晶体MC。
（2）小管一端用火封闭，以防药物外溢，尖端用针刺数孔，使MC能从小妃溢出。
（3）取体重120 g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，由前鼻孔将上述含MC的塑料小管插入鼻腔，利用前鼻孔较小管粗端为小的特点，稍加用力，迫使小管全部进入鼻腔内，其尖部可达鼻咽腔。
不需另加固定，即可使小管长期留于鼻腔内。
（4）待到预定时间（半年以上），或动物自行死亡时，到其鼻咽部，10%福尔马林固定，脱钙后，石蜡包埋，进行连续切片。
发癌率可达60%以上。
2．二乙基亚硝胺滴鼻法诱发鼻咽癌（1）取120 g左右大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，用磨平针尖的8号针头，从前鼻孔轻轻插入，针尖可达鼻咽腔；（2）经注射器灌注用1%吐温-80新配的33.3%DEN混悬液0.0 2 ml(含DEN 6.7 mg)每周1次，共15～20次，可诱发成鼻咽癌。
六、宫颈癌1．二甲基胆蒽（MC）诱发宫颈取雌性小白鼠，以附有0.1mgMC的棉纱线结在动物不麻醉的状态下，借助于阴道扩张器及磨纯的弯针，将线穿入宫颈。
经右宫角背部穿出，使线结固定于宫颈口。
线的另一端则固定于背部肌肉，缝合皮肤，挂线以后，同日开始连续注射青霉素2～3天。
以防术后感染。
至一定时间（半年左右）处死动物，宫颈组织用10%福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片。
七、结肠癌1．二甲基苄肼（Dimethlhydrazine，DMH）诱发鼻咽癌（1）给四周龄的雄性大白鼠，皮下注射二甲基苄肼（Dimethlhydrazine，DMH）每周一次，连续21周，每次DMH21mg/kg；（2）最后一次给药后1～4周，处死动物；（3）降结肠部位用Bouin液固定，脱水，石蜡包埋，切片。
所用之DMH先配成每100 ml 含400 mg的母液，并加EDTA37 mg，用氢氧化纳（0.1 N）液将pH调至6.5备用。
注意事项1．要设计不同的实验组和对照组，每组动物数一般为5-10只；2．一般接种肿瘤6-8周后，小鼠的肿瘤可生长至直径为15-20mm (即小鼠会濒临死亡)时，可眼球取血，分离血清并保存血清，处死小鼠，取肿瘤组织照相，取部分肿瘤组织作冰冻组织切片(或- 80℃保存)，作相应的免疫组织化学染色，取部分肿瘤组织用3%中性的甲醛固定，石腊包埋，作常规HE染色。
其他1．芳香胺及偶氮染料类致癌物的特点（1）通常需要长期、大量给药才能致癌；（2）肿瘤多发生于远隔作用部位的器官如膀胱、肝等；（3）有明显的种属差异；（4）其本身不是直接致癌物，致癌是由于其某种代谢产物的作用；（5）其致癌作用往往受营养或激素的影响，例如，奶黄仅在以缺少蛋白质和核黄素的饲料喂饲大鼠时才引起肝癌，而且雄性大鼠较敏感，邻位氨基偶氮甲苯则易起雌性大鼠的肝癌。
2．亚硝胺类的致癌特点（1）致癌性强，小剂量一次给药即可致癌；（2）对多种动物（包括猴、豚鼠等不易诱发肿瘤的动物）的许多器官（包括食管、脑、鼻窦等不易引起癌的器官）能致癌，甚至可以通过胎盘致癌，如给怀孕大鼠以二乙基亚硝胺（Diethy lnitrosamine,DEN）可比较快地引起仔鼠的神经胶质细胞瘤；（3）具有不同结构的亚硝胺有明显的器官亲和性，例如二甲基亚硝胺等对称的衍生物常引起肝癌，不对称的亚硝胺如甲基苄基亚硝胺常诱发食管癌；在大鼠，二丁基亚硝胺能引起膀胱癌，二戊基亚硝胺能诱发肺癌，而N-甲基-N-硝基-N-1-亚硝基胍则能引起胃肠癌。
3．黄曲霉毒素的致癌特点（1）黄曲霉毒素的毒性很强，很小剂量（1mg/kg体重）即可使狗、幼龄大鼠、火鸡或小鸭致死；（2）其致癌性也极强，最小致癌剂量比亚硝胺还要小数十倍，是已知化学致癌物中作用最强者；（3）它能诱发多种动物（从鱼到猴）的肝癌，也可引起肾、胃及结肠的腺癌，滴入气管内可引起肺鳞状细胞癌；（4）注入皮下可引起局部的肉瘤，还有报告认为，它可引起泪腺、乳腺、卵巢等其它部位的肿瘤。
4．其他在动物实验中早已确定：乙硫氨酸可诱发大鼠肝癌；乌拉坦（氨基甲酸乙酯，C２H５O－CONH ２）、氨乙胺可引起小鼠的肺癌；一些卤代烃如四氯化碳、氯仿等可引起大鼠或小鼠的肝癌。
构建实验。