第1章(2)白细胞检验

b、计数误差：技术误差与固有误差 c、有核红细胞的影响： 校正后白细胞数/L＝X×100/（100+Y） 如：某患者白细胞计数为20×109 /L,血片分类计 数200个白细胞时,见到有核红细胞50个,问该患者白 细胞校正后数应为多少？
d、经验控制：
二、白细胞分类计数
操作方法：（显微镜分类计数法） 采血→ 制作血涂片→干燥后染色 →LPF 观察→干燥后油镜下 进行分类计数→ 计算 →出报告 要求： 血涂片制作良好，染色满意，镜检部位 恰当，在恰当的镜检部位按城墙式曲线运 动有规律的移动视野，不能重复计数，准 确辨认细胞形态。 如发现细胞形态异常、出现有核红细胞 及寄生虫等应如实描述。
3、其它应用： （1）观察急性传染病的预后：①病情严重，②恢复期， ③肾上腺皮质功能衰竭。 （2）观察大手术和烧伤病人的预后：嗜酸性粒细胞不 下降或下降很少为预后不良。 （3）肾上腺皮质及脑垂体功能测定： 注射ACTH为直接刺激，注射肾上腺素为间接刺激。 ①正常时：直接与间接刺激后，E均应减少50%以上； ②皮质正常，垂体不良：直接刺激后下降50%以上， 间接刺激不下降； ③垂体功能亢进：直接与间接均使E下降80~100%； ④垂体正常，皮质不良：直接与间接刺激均下降不到 50%。
四、注意事项： 1、标本不能放置过久； 2、孵育时间以2小时为宜； 3、常规HPF注意搜索片尾及两侧，可疑时用油 镜鉴定； 4、注意与其它吞噬现象区别。只有找到典型的 吞噬体才能报告为阳性。 五、临床意义： SLE多发于青壮年女性，临床表现极复杂。活 动期阳性率为70~90%。其它自身免疫性疾病活 动期也可呈阳性。须结合临床表现综合诊断。未 检出LE细胞，不能否定SLE。
（6） May-Hegglin畸形
临床意义
中性粒细胞分化发育
白血病与类白血病反应：
中性粒细胞类白血病
嗜酸粒细胞类白血病
四、嗜酸性粒细胞直接计数
[测定方法与评价] 血液稀释20倍，计数区域为两个计数池 各四角及正中的五个大方格共10个大方格， 静置时间为2~5分钟。 嗜酸性粒细胞数/L＝N/10×10×106×20
第一章
血液学一般检验
第二节 血液常用检查
一、白细胞计数
（一）白细胞生理：（复习自学）
要求：分化阶段、外周血白细胞与骨髓的关系、各种白 细胞的功能。
（二）概念及原理：
WBC（white blood cell count）：指测定每升外周血 （循环池）中各种白细胞的总数。 将全血用稀乙酸溶液稀释一定倍数，使红细胞破坏后保 留白细胞，充入计数池内，在显微镜（LPF）下计数一定范 围内的白细胞数，并换算成每升血液中白细胞的总数。
评价（见表）
[质量控制] 1、血液稀释后应在0.5-1小时内完成计数。 2、及时混匀但不可过分振摇。 3、采血时间要固定。 4、嗜酸性粒细胞保护剂浓度应恰当（如乙醇 应在30~35%），否则计数结果偏低。
[参考值] （0.05~0.5）×109/L [临床意义] 1、生理性变化： 交感神经兴奋→脑垂体ACTH释放↑→肾上 腺皮质激素↑→阻止骨髓释放E及促进E向组织 浸润→血液中E减少 2、病理性变化： （1）嗜酸性粒细胞增多：（见表） （2）嗜酸性粒细胞减少：伤寒、副伤寒及大手 术后，长期使用肾上腺皮质激素。
5. 正常参考值 成人 ： （4-10）×109/L 新生儿： （15-20）×109/L 6月-2岁：（11-12）×109/L 6. 注意事项 ⊙采血时不能挤压过度，因此针刺深度必须适当。 ⊙在大方格内压线细胞应按计数原则计数。 ⊙稀释液要过滤，小试管、计数板须清洁，以免 杂质、微粒等被误认为细胞。 ⊙充池前的摇匀要注意，气泡不能太多。 ⊙加盖玻片方式：“推式”，不要“盖式”。
三、白细胞形态检查
（一）、外周血正常白细胞形态
正常五种白细胞
（二）、外周血异常白细胞形态： 1、中性粒细胞毒性变化： （1）中性粒细胞大小不均
（2）中毒颗粒：
（3）空泡：
（4）杜勒小体：
（5）核变性：
2、中性粒细胞的核象变化
中性粒细胞核左移
中性粒细胞核右移
3、淋巴细胞形态异常： （1）异形淋巴细胞：Ⅰ型（空泡型）
2. 器材和试剂
白细胞稀释液：冰乙酸 10g/L亚甲蓝 蒸馏水 器材同红细胞计数。
2.0ml 数滴 加至100ml
3. 操作 a. 加白细胞 稀释液0.38ml于一小试管中 b. 用微量吸管吸取20ul末梢血。 c. 擦去微量吸管外余血，将其插入稀释液底部，轻轻 将血放出，并吸取上清液洗涤微量吸管3次（注意每次不 能冲浑稀释液），混匀。 d. 用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴，充入 计数池与盖片的缝隙中，静置2-3min，使白细胞下沉。 e. 低倍镜计数四角4个大方格内白细胞总数。
Ⅱ型（不规则型）
Ⅲ型（幼稚型）
Hale Waihona Puke （2）具有卫星核的淋巴细胞：
4、其它异常白细胞： （1）巨多核中性粒细胞：
巨杆状核
双核中性粒细胞
环形核中性粒细胞
（2）棒状小体：
（3） Pelger-Huet畸形
（4） Chediak-higashi畸形
（5） Alder－Reilly畸形
4. 计算 X/4×10 ×20 ×106/L=白细胞/L
式中：在法定计量单位制中用△. △ △ ×109/L表示 X：为4个大方格内白细胞总数。 ÷4：为每大方格（即0.1ul）内白细胞平均数。 ×10：1个大方格的容积为0.1ul，换算成1ul。 ×20：血液的稀释倍数。 ×106：将ul换算成L
五、红斑狼疮细胞检查
一、LE细胞形成： 条件： 1、患者特有的抗核抗体（LE因子，属于IgG）； 2、供抗核抗体作用的受损或退化的细胞核； 3、具有吞噬能力的白细胞。 形成： 二、LE细胞检查： 方法：血块法、脱纤维法、血浆法、滴血法等。 三、免疫学检查： 阳性率可达95%。
花形细胞簇
LE细胞
7. 考核评价 a. 常规考核标准 （RCS）
RCS=
四大格所见白细胞最大值—最小值 四大格所见白细胞数平均值
×100%
评价： 白细胞≤ 4×109/L者， RCS＜30% 白细胞在（4.1-14.9）×109/L者 RCS＜20% 白细胞≥15 ×109/L者 RCS＜15% 超过上述标准者为不合格
（三）测定方法及评价：
1.显微镜计数法： 2.血细胞分析仪法：国家临床实验标准委员会
(National Committee for Clinical Laboratory Standards.NCCLS )
显微镜计数法
1. 原理： 用稀乙酸将血液稀释并破坏红细胞， 混匀后， 滴入计数盘中，在显 微镜下计数一定范围内的白细胞数，经换算 求得每升血液中白细胞总数。