ATP生物发光检测方法
ATP荧光检测仪使用说明解析
ATP荧光检测仪使用说明解析ATP荧光检测仪是一种用于快速检测水、食品、医疗设备、医疗器械、表面清洁、消毒和环境卫生等领域中生物负载和卫生问题的仪器。
它可以通过检测和测量样品中存在的三磷酸腺苷(ATP)的浓度来判断样品的卫生状况，从而评估清洁程度和卫生质量。
ATP荧光检测仪的工作原理是基于生物发光技术。
ATP是一种生物能量分子，存在于所有活细胞中。
ATP荧光检测仪使用酶(luciferase)和底物(d-luciferin)反应，产生可见光的生物发光，其强度正比于样品中的ATP浓度。
通过荧光光谱仪检测到的荧光强度，可以对样品进行定量分析。
在使用ATP荧光检测仪之前，首先需要准备样品收集器。
样品收集器是存储待测物的载体，可以是刷子、海绵或者其他合适的材料。
收集器需要提前清洗和消毒，确保样品不受污染。
开始检测之前，需要打开ATP荧光检测仪，并将其置于一个干净的工作台上。
仪器通常配备了一个显示屏，用于显示检测结果和设置参数。
接下来，将准备好的样品收集器放入一个干净的容器中，加入适量的溶液，使样品溶解。
然后，将样品收集器插入ATP荧光检测仪的检测槽中，并关闭检测槽的盖子。
确保检测槽紧密封闭，以防止外部光线的干扰。
然后，在仪器上选择适当的测试参数和荧光信号积分时间。
一般来说，积分时间越长，检测结果的准确性越高。
设置好参数后，点击开始测试按钮，并等待一段时间，以获取稳定的荧光信号。
测试完成后，仪器将显示荧光信号的数值。
这个数值表示样品中的ATP浓度，可以根据预设的标准或者参考值对结果进行评估。
一般来说，ATP浓度越高，样品的卫生状况越差。
在使用完ATP荧光检测仪之后，要及时清洁检测槽和样品收集器，并储存起来。
清洗过程可以使用水和适量的清洁剂进行，确保仪器的可靠性和使用寿命。
总结起来，ATP荧光检测仪是一种基于生物发光技术的仪器，用于快速检测样品的卫生状况。
使用时需要准备好样品收集器，将样品收集器插入检测槽中，并设置适当的参数开始测试。
atp检测原理
atp检测原理ATP（adenosine triphosphate）是一种细胞能量的代谢物质，在生物体内广泛存在，并广泛应用于快速检测微生物和有机物残留的方法中。
ATP检测原理是基于生物发光技术的一种快速生物检测方法，主要用于检测和评估样品中的微生物污染程度和卫生状况。
一、ATP检测的基本原理ATP检测原理是依据微生物分解ATP过程中产生的光反应进行的。
ATP分解产生的光是一种有规律的化学反应，可以通过光反应仪器测量和记录。
这种检测方法具有灵敏度高、实时性强、结果准确等特点。
二、ATP检测的步骤和过程ATP检测主要包括样品采集、提取、发光反应和结果判定几个步骤。
1. 样品采集：首先，需要从被测物表面、水样、土壤或其他样品中采集一定量的样品，保证样品的代表性。
2. 提取：样品采集后，将样品与盖上发光酶的提取液充分混合并接触一定时间，使ATP分子和发光酶发生反应。
提取液中的酶能够分解样品中的细胞壁和膜，释放出其中的ATP。
3. 发光反应：将提取液中经过提取的ATP样品与发光剂混合，在一定的反应条件下，ATP和发光剂反应产生光。
光的强度与样品中ATP浓度成正比，通过发光计测量光的强度，可以得出样品中ATP含量。
4. 结果判定：根据测量结果和预先设定的阈值，判断样品中的ATP 含量是否超过了规定的标准限值。
如果超过了阈值，说明样品中存在微生物污染。
三、ATP检测的应用领域ATP检测方法在许多领域都得到广泛应用，包括食品安全、水质监测、环境卫生等。
1. 食品安全：ATP检测可以用于食品卫生检测，通过检测食品表面的ATP含量，判断食品是否卫生合格。
2. 水质监测：ATP检测可以用于水质监测，通过检测水样中的ATP 含量，评估水质是否符合标准。
3. 环境卫生：ATP检测也可以用于环境卫生监测，通过检测污染区域的表面或空气中的ATP含量，评估卫生状况和污染程度。
四、ATP检测的优势和局限性ATP检测方法具有许多优势，如操作简便、快速、高灵敏度和实时性强等。
ATP生物发光检测方法
ATP生物发光技术以生物体内的ATP作为检测 对象，不仅包括细菌（大肠杆菌，沙门氏菌， 志贺氏菌等），也包括体细胞在内的食品残 渣等食品污染物，因此适合在食品卫生检测 领域对卫生状况进行快速检测。 ATP生物发光检测方法具有检测速度快、成本 低、易于操作等特点
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检测原理
• ATP即三磷酸腺苷，是广泛存在于生物体内的一种能量物
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检测仪器
• 结构原理 • 主要有三部分：自动进样单元、光电转换
单元和信号采集处理及控制单元
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• 其中，自动进样单元包括三套蠕动泵 。根据测试需要，
蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和光电转在暗盒中。光电转换器件将反应释放荧光转化为电信号， 由信号采集处理单元采集并处理，并对测试结果进行实时 显示和存储。
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• 图中各响应曲线400 s内的测量值进行积分，作为各浓度
样品的输出信号。输出信号与浓度的关系如图5所示。由 图可以看出，输出信号随浓度增加而增加，且有明显梯度， 两者的线性相关系数达到0.986。这一结果说明本检测系 统可以对ATP浓度进行快速检测。由于细菌细胞中所含 ATP含量基本一致，因此，本检测仪可实现对细菌总数的 现场快速检测。
放荧光强度的时间响应曲线。
• 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、
自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 口岸、卫生监管部门、食品生产部门等对产品、 环境等的卫生状况进行现场快速检测领域具有很 好的应用前景。
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• 实验选择标准ATP样品作为检测对象，浓度
范围为10-6～10-14mol／L，实验中所用荧 光素及荧光素酶购自美国普洛麦格公司。 实验采用联机测量方式，将本检测仪与计 算机通过。RS232接口相连接，仪表信号采 集单元采集荧光信号后直接上传至计算机 并将测试结果实时显示。测量结果如图4所 示。
生物学发光检测法(ATP)解析
权威机构研究了1000个以上的样品，这种只需十几秒就能完
成检测的快速检测法所得实验结果90%以上与24-48小时标 准细菌培养法/平皿法所得结果一致 使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、 效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方 法进行培养检测。 应用于HACCP的关键环节监测，方便有效。
[INSERT AND DETECT]
将检测管放入ATP荧光检 测仪中，盖上盖子，倒 计 时开始并检测。
ATP检测反应原理
D-虫荧光素 荧光素酶 O2+Mg2+
氧化荧光素 PPi+AMP
AT P
荧 光 光 度 计 测 量
光（RLU ）
植物 微生物
细胞 数量
现场ATP检测的意义
ATP检测技术实验结果准确可靠，值得信赖。美国多个专业
当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些外资、
合资企业用于自检 2002年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCP实施 指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测技术 2005年3月卫生部新出台《卫生监督机构建设指导意 见》，要求省、市、地配置
什么是ATP
ATP——三磷酸腺苷 【adenosine triphosphate， C10H16N5P3O13】存在于所有 生物体中，在细胞内主要作用 是提供能量 通过检测ATP ，可以间接地 证明生物体的存在
生物学发光检测法（ATP）
• 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利 用“荧光素酶—荧光素体系”快速检测三磷酸腺 苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的 ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细 菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶 可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强 度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样 品中微生物与其他生物残余的多少，用于判断卫 生状况
ATP检测方法范文
ATP检测方法范文ATP（Adenosine Triphosphate，腺苷三磷酸）是一种能量分子，在生物体内广泛存在，并代表着生物体的活动水平。
ATP的检测方法主要包括生物发光法、生物酶法和生物传感器法等。
一、生物发光法：生物发光是利用生物体内氧化还原酶系统以及氧化酶或酶反应，在氧气存在的条件下将底物发光。
ATP检测方法中，常用的底物为辅酶或荧光基团（luciferin），通过与ATP反应，生成可发光的物质。
1.生物发光法的原理：ATP酶或荧光基团与氧化剂中的氧产生氧化反应，生成Ox2-（Ox-Dioxetan），然后从氧化剂分子中获取能量，进而引发可见光或发射荧光。
2.生物发光法的操作步骤：（1）制备反应液：包括辅酶AB、荧光素、酶、酶抑制剂等。
（2）加入底物：将待检测的样品加入反应液中。
（3）测量发光值：使用光度计或荧光分光光度计测量样品在特定波长下的发光值，并与标准曲线或标准品对照得到ATP的浓度。
二、生物酶法：生物酶法是通过一些酶与ATP底物发生显色或变色反应，进而进行浓度测定的方法。
1.生物酶法的原理：ATP酶与底物发生反应，生成染色产物，如酚酞或过氧化物。
2.生物酶法的操作步骤：（1）制备反应液：包括酶、底物、辅助试剂等。
（2）加入底物：将待检测的样品加入反应液中。
（3）显色反应：根据底物与酶的反应特性，观察样品的颜色变化，并与标准品对照，得到ATP的浓度。
三、生物传感器法：生物传感器法是一种利用生物分子识别特异性和生物反应性等特点，与传感器相结合实现对ATP检测的方法。
1.生物传感器法的原理：通过将ATP与传感器的生物组分（如酶、抗体、单链DNA）结合，使传感器发生变化，如电位变化、荧光变化等。
2.生物传感器法的操作步骤：（1）构建传感器：将ATP与传感器的生物组分结合，构建传感器。
（2）传感器测定：测定传感器的电位、荧光等变化，与标准品对照，得到ATP的浓度。
综上所述，ATP的检测方法主要包括生物发光法、生物酶法和生物传感器法。
ATP微生物荧光检测参数
CQ-LBY-420 ATP生物荧光检测仪使用说明书一、操作原理CQ-LBY-420 ATP生物荧光检测仪利用生物化学发光技术将不可见的ATP浓度变为可见光输出，从而以定量的结果间接显示微生物数量，数值位于0—9999之间，以相对光单位RLUs表示。
虽然RLU并不是一个实实在在的光强度单位，但它能够为ATP生物化学发光检测提供一种真实的检测方法。
1RLU约等于1fmol的ATP。
RLU读数可以与用户设定的限值范围相比较，提供全面的结果限值，即通过（OK）、警戒（！）或不通过（－）。
二、使用准备2.1 外部结构：机身：1.上盖2.液晶显示屏 6.机器序列号3.按键 7.电池盒上盖内部结构：7.RS232接口8.拭子插口2.2 按键功能：◎开关键OK 确认键S 限值选择键T 时间键* 特殊功能键↑上升键↓下降键以下各个章节中将对按键功能进行详细介绍。
2.3 开机画面：液晶显示屏上部的数字显示具有检测和时间日期双重功能，按时间键T进行切换：限值序号和检测功能是：限值序号 88 限值序号8888↑ 检测上限值8888↓ 检测下限值检测编号888 检测编号时间和日期功能是：88：88 时间88日/18月/8888年 日期显示屏其它标志意义为：记忆记忆标识，闪烁表示存储超过95%，在查阅记忆模式中变亮。
删除？删除记忆确定标识，闪烁提示测试人员是否删除全部测试结果校准校准标识，闪烁表示需要内部校准RLU测量单位，以相对光强度表示OK结果通过！结果警戒－结果不通过系统忙标志电量电池电量不足时显示此标识，严重不足时闪烁上盖标识，闪烁提示上盖没有盖好或提示拔出拭子2.4 安装电池：本机需要两节普通AA电池。
安装电池只需要打开仪器背后的电池盒盖，插入两节电池，正极向上。
正确插入电池以后，仪器将自动开机并进入时钟设置模式。
设定时间和日期参见第四章。
注意：不要颠倒电池的正负极，这可能破坏仪器的电子系统。
提示：为了保证得到较好的结果，请使用品质较好的碱性电池；如果显示低电量请及时更换。
食品微生物快速检测常用方法-ATP生物发光法测菌落总数.
食品营养与检测专业教 学资源库
目录页
一
ATP生物发光法检测原理
二
ATP生物发光法检测过程
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食品营养与检光法检测原理
一
食品营养与检测专业教 学资源库
ATP存在于包括微生物在内的一切活细胞内，ATP生 物发光法是利用ATP与荧光素酶系统接触时的发光现象 建立起来一种检测方法。 各生长期的微生物均有较恒定水平的ATP含量，微生 物死亡后，ATP将很快被分解掉。因此，提取细菌的 ATP，利用生物发光法测出ATP含量后，即可推算出样 品中的含菌量，ATP浓度与活细胞数密切相关。
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食品营养与检测专业教 学资源库
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谢 谢
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ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
操作步骤 指示菌ATP的提取：TCA法和加热煮沸法 ATP的检测： 先用标准ATP试剂作一条标准曲线。测 量得到样品的相对发光值。 测定样品发光值,与标准曲线对比，得到 样品中的ATP含量, ATP含量可以转化为微生 物的浓度。
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试剂
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过渡页
ATP生物发光法检测过程
一
1.设备和试剂
2.操作步骤
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ATP 生 物 发 光 法 测 菌 落 总 数
• 设备和试剂 ATP荧光仪：包括样品过滤膜、ATP一生物荧 光反应器、荧光增强及数据处理系统。 试剂：荧光素-荧光酶试剂 、ATP提取液 、标 准ATP试剂
atp效果测试方法
atp效果测试方法ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，主要用于测试细胞的活力和生物分子的活性。
ATP是细胞内能量的一种重要指标，因此测试ATP效果可以反映细胞的活力和生物分子的活性。
下面将介绍ATP效果测试的方法。
一、仪器和试剂ATP效果测试需要用到一些常见的仪器和试剂。
其中，ATP酶试剂盒是必不可少的试剂之一，它可以用于ATP酶的检测。
此外，还需要用到ATP标准品、反应物和缓冲液等试剂。
仪器方面，需要使用荧光光度计或发光光度计等仪器。
二、ATP酶试剂盒的使用ATP酶试剂盒是ATP效果测试的核心试剂之一。
具体使用方法如下：1.制备样品：将待测样品制备好，如细胞、生物分子等。
2.加入试剂：取一定量的ATP酶试剂盒，加入标准品和缓冲液，制备成一定浓度的反应液。
3.加入样品：将制备好的样品加入到反应液中，并混合均匀。
4.测量荧光或发光：将反应液加入到荧光光度计或发光光度计中，测量荧光或发光。
5.计算ATP含量：根据荧光或发光的测量结果，可以计算出样品中的ATP含量。
三、其他相关试验除了ATP酶试剂盒外，还有一些其他相关的试验可以用于ATP效果测试。
例如，ATP酶活性的测定、ATP水解反应的测定等。
这些试验都可以反映出ATP效果的好坏。
四、注意事项在进行ATP效果测试时，需要注意以下几点：1.样品的制备需要严格按照试剂盒的说明书进行，避免样品的影响。
2.反应液的制备需要准确，避免浓度过高或过低。
3.荧光或发光的测量需要准确，避免干扰因素的影响。
4.ATP酶试剂盒的储存需要在-20℃下，避免试剂的失效。
5.实验过程中需要注意安全，避免试剂的误食或误触。
ATP效果测试方法是一种常见的测试方法，可以用于反映细胞的活力和生物分子的活性。
在实验过程中需要注意各种细节，保证实验的准确性和可靠性。
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• 图中各响应曲线400 s内的测量值进行积分，作为各浓度 图中各响应曲线400 s内的测量值进行积分，作为各浓度
样品的输出信号。输出信号与浓度的关系如图5 样品的输出信号。输出信号与浓度的关系如图5所示。由 图可以看出，输出信号随浓度增加而增加，且有明显梯度， 两者的线性相关系数达到0.986。这一结果说明本检测系 两者的线性相关系数达到0.986。这一结果说明本检测系 统可以对ATP浓度进行快速检测。由于细菌细胞中所含 统可以对ATP浓度进行快速检测。由于细菌细胞中所含 ATP含量基本一致，因此，本检测仪可实现对细菌总数的 ATP含量基本一致，因此，本检测仪可实现对细菌总数的 现场快速分：自动进样单元、光电转换 主要有三部分：自动进样单元、
单元和 单元和信号采集处理及控制单元
• 其中，自动进样单元包括三套蠕动泵 。根据测试需要， 其中，自动进样单元包括三套蠕动泵
蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 蠕动泵在控制单元控制下，向光电转换单元中的样品池加 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和 入对应反应试剂。光电转换单元包括检测样品池和光电转 换器件。为消除外界光的干扰，整个光电转换单元被密封 换器件。为消除外界光的干扰，整个光电转换单元被密封 在暗盒中。光电转换器件将反应释放荧光转化为电信号， 由信号采集处理单元采集并处理，并对测试结果进行实时 显示和存储。
ATP生物发光检测方法
ATP生物发光技术以生物体内的ATP作为检测 对象，不仅包括细菌（大肠杆菌，沙门氏菌， 志贺氏菌等），也包括体细胞在内的食品残 渣等食品污染物，因此适合在食品卫生检测 领域对卫生状况进行快速检测。 ATP生物发光检测方法具有检测速度快、成本 低、易于操作等特点
检测原理
• ATP即三磷酸腺苷，是广泛存在于生物体内的一种能量物 ATP即三磷酸腺苷，是广泛存在于生物体内的一种能量物 • •
• 在反应中，加入发光反应试剂时，体系中样品浓
度相对较高，因此在短时间内即迅速反应释放大 量荧光，此时荧光光强较强，因此测量结果可能 会超出系统的测试量程。由于本仪表的最大输出 电压为2500 mV，反应初期释放的荧光可能会超 电压为2500 mV，反应初期释放的荧光可能会超 出该范围，在图中表现为前端的水平直线。随着 反应进行，体系中样品和试剂的浓度逐渐降低， 所释放荧光随之逐渐衰减。由图可见，不同样品 浓度的ATP随反应进行，进入测量量程的时间不 浓度的ATP随反应进行，进入测量量程的时间不 同，浓度越高，衰减越慢，进入测量量程的时间 同，浓度越高，衰减越慢，进入测量量程的时间 越长，反之越短。
优点
• 目前生物荧光反应法被广泛用于食品加工
条件的快速评价和食品中微生物的快速检 测，同时在HACCP管理中也被广泛用于关 测，同时在HACCP管理中也被广泛用于关 键控制点检测，与传统检测方法不同之处 在于几分钟内可获得结果，而且荧光光度 计是便携式的，使用方便，适合现场检测， 不仅可以检测微小的污染物水平，还能检 测食品加工设备及其表面的清洁程度。
• 实验选择标准ATP样品作为检测对象，浓度 实验选择标准ATP样品作为检测对象，浓度
10-14mol／ 范围为10范围为10-6～10-14mol／L，实验中所用荧 光素及荧光素酶购自美国普洛麦格公司。 实验采用联机测量方式，将本检测仪与计 算机通过。RS232接口相连接，仪表信号采 算机通过。RS232接口相连接，仪表信号采 集单元采集荧光信号后直接上传至计算机 并将测试结果实时显示。测量结果如图4 并将测试结果实时显示。测量结果如图4所 示。
质 检测ATP含量的一种方法是用荧光光度计法，生物发光是 检测ATP含量的一种方法是用荧光光度计法，生物发光是 活细胞在荧光素酶催化下发出的荧光，目前使用的荧光素 活细胞在荧光素酶催化下发出的荧光，目前使用的荧光素 酶来源于北美的萤火虫，相对分子质量为62000的蛋白质 酶来源于北美的萤火虫，相对分子质量为62000的蛋白质 萤火虫荧光素酶简称虫光素酶，是一种能将化学能转变为 萤火虫荧光素酶简称虫光素酶，是一种能将化学能转变为 光能的活性蛋白质，即生物催化剂。ATP在虫光素酶的催 光能的活性蛋白质，即生物催化剂。ATP在虫光素酶的催 化作用下，与荧光素在有氧环境及二价镁离子作用下，反 应释放出荧光。当荧光素及虫光素酶过量情况下，释放的 荧光与ATP在一定范围内成线性关系，因此可以通过测量 荧光与ATP在一定范围内成线性关系，因此可以通过测量 荧光光强检测样品中的ATP，进而检测其中的细菌总数。 荧光光强检测样品中的ATP，进而检测其中的细菌总数。
• • •
• 。该检测仪在对现有产品进行分析的基础上，选
择H5773-02光电倍增管作为光电转换器件，其检 H5773-02光电倍增管作为光电转换器件，其检 测波长与生物发光反应所释放荧光波长一致，可 有效提高检测灵敏度。 有效提高检测灵敏度。 采用自动加样技术，在暗室内加入发光反应试剂， 采用自动加样技术，在暗室内加入发光反应试剂， 消除了外界光的干扰，且获得了反应最初的信号。 将检测仪与计算机连接测量，获得了各反应所释 将检测仪与计算机连接测量，获得了各反应所释 放荧光强度的时间响应曲线。 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、 本设计的针对细菌总数的检测仪具有检测速度快、 自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 自动化程度高、操作简单、小型便携等特点，在 口岸、卫生监管部门、食品生产部门等对产品、 环境等的卫生状况进行现场快速检测领域具有很 好的应用前景。