红曲发酵谷物麸糠提取Lovastatin的研究

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液态培养红曲霉产洛伐他汀开闭环组分的研究_黄颖颖

液态培养红曲霉产洛伐他汀开闭环组分的研究_黄颖颖

8 1 8
福建农业学报
第2 8卷
伐他汀及其开闭环组分比例是研究其功能性成分的 重要趋势之一
[ ] 9-1 2

M S O H 自然 。 在 2 5 0m L 三角瓶中装5 0m L g p 4, 液体种子培 养 基 并 加 入 数 颗 小 玻 璃 珠 ,1 2 1℃ 灭 菌 3 0m i n。 1 . 2 . 3 红 曲霉 液 体 发酵 基 本 培 养 基 葡 萄 糖 2% , 大米 粉 4% , 蛋 白 胨 2% ,0 . 2% N a NO . 2% 3 ,0 KH2P O 0 . 1%M S O 5 0m L三 H 自 然,在 2 g p 4, 4, 角瓶中 装 5 0m L 液体种子培养基并加入数颗小玻 。 璃珠 ,1 2 1℃ 灭菌 3 0m i n 1 . 3 红曲霉培养条件及方法 1 . 3 . 1 红 曲霉斜 面 种 子 的 制 备 将 接 好 种 的 斜 面 , 备用 。 置于 3 0℃ 的恒温培养箱中培养 1 3d 1 . 3 . 2 红 曲霉 液 体 培 养 方 法 将 菌 种 从 斜 面 接 到 液体种 子 培 养 基 后 , 置 于 3 0℃ 恒 温 摇 床 内 ,1 6 0
,YANG ,CHE i n HUANG Y i n C h e n l o n N Y u a n - - y g g g g ( I n s t i t u t e o A r i c u l t u r a l E n i n e e r i n T e c h n o l o F u i a n A c a d e m o A r i c u l t u r a l S c i e n c e s, F u z h o u, f g g g g y, j y f g

红曲霉发酵制备洛伐他丁

红曲霉发酵制备洛伐他丁

优化发酵工艺提高红曲洛伐他汀的产量
如今,红曲行业普遍采用的发酵工艺主要有两种,一种是液体深层发酵,主要用于生产 水溶性的红曲红色素;另一种是液-固两步发酵法,即先制备液体种曲,后采用固体发 酵培养,红曲米粉及功能性红曲的生产则主要采用此种发酵方式。大量研究表明,针对 不同的红曲霉菌株,采用各种优化的培养条件,能够有效提高红曲洛伐他汀的产量。
RP-HPLC-PDA检测器测定功能红曲中 Monacolin化合物含量
为了能够在缺乏Monacolin化合物标准样品的情况下对功能红曲中Monacolin类化合物 进行定性、定量分析,建立了用RP-HPLC-PDA检测器测定功能红曲中Monacolin类化合 物总含量的检测方法。 用75%乙醇超声提取功能红曲中的Monacolin类化合物,高效液相色谱仪以甲醇∶水∶ 磷酸=385∶115∶0.14(v∶v∶v)为流动相,用反相C18柱(4.6×250mm,5μm)分 离提取液中的Monacolin类化合物,并用二极管阵列检测器检测。在得到的色谱流出曲 线图上,根据标准Monacolin K(内酯型或酸式)保留时间和Monacolin类化合物特征 吸收光谱定性。 以波长238nm处的色谱图为定量依据,将样品中Monacolin 组分峰面 积之和与标准Monacolin K(内酯型或酸式)色谱峰面积比较定量。 在此实验条件下,功能红曲提取液中各Monacolin类化合物能够得到良好地分离。用检 测器同时给出的各Monacolin类化合物紫外吸收光谱图定性,用外标法根据Monacolin 类化合物峰面积定量。对方法的准确度、精密度、线性关系进行考察;对功能红曲样品 进行检测均取得良好结果。 Monacolin K 的检测方法还包括:紫外分光光度法、超临界流体色谱法等。

红曲霉洛伐他汀的液态发酵及其分离纯化研究

红曲霉洛伐他汀的液态发酵及其分离纯化研究

红曲霉洛伐他汀的液态发酵及其分离纯化研究陈景智;王力超;李亮;叶秀云;林娟【摘要】通过培养基和发酵条件的优化提高红曲霉R”-30的洛伐他汀产量,并通过分离纯化制备高纯度的洛伐他汀.研究碳源、氮源、金属离子、培养基初始pH 值、接种菌龄、接种量、装液量、摇床转速以及温度等对洛伐他汀产量的影响;进一步采用硅胶柱和Sephadex LH20柱层析对发酵液中洛伐他汀进行分离纯化.结果表明,最佳培养基配方为:甘油30 g/L,黄豆粉15 g/L,ZnSO4·7H2O 6.6g/L,KH2PO4 0.17 g/L,MgSO4·7H2O 1.5 g/L;最适发酵条件为:培养基初始pH 5.0,接种龄64 h,接种量8%(体积分数),温度30℃,转速150 r/min,装液量50mL/250 mL;在此条件下发酵12d,洛伐他汀产量达615.3 mg/L,比优化前(312 mg/L)提高了97.2%;发酵液经NaOH碱提,柱层析分离纯化后,洛伐他汀纯度达93%,得率达45%.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2019(045)002【总页数】8页(P31-38)【关键词】红曲霉;洛伐他汀;培养基;发酵条件;分离纯化【作者】陈景智;王力超;李亮;叶秀云;林娟【作者单位】福州大学,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州,350116;福州大学,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州,350116;福州大学,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州,350116;福州大学,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州,350116;福州大学,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州,350116【正文语种】中文红曲,在我国已有1000多年历史,是古代食疗两用的中药材[1],红曲中含有多种功能性成分,如红曲色素、氨基丁酸、洛伐他汀、麦角甾醇等[2],还含有淀粉酶、蛋白酶、果胶酶、酯化酶等多种酶类物质[3-5],具有很好的研究意义。

高产洛伐他汀的功能性红曲固态发酵营养液最佳pH值的研究

高产洛伐他汀的功能性红曲固态发酵营养液最佳pH值的研究

高产洛伐他汀的功能性红曲固态发酵营养液最佳pH值的研究齐文武;陈晓云;郑世茂;庞欣【摘要】目的:研究功能性红曲固态发酵营养液的pH对洛伐他汀产量的影响.方法:基于现有的发酵工艺,设置了4个营养液pH梯度,分别为3.4、3.6、3.8和4.0,希望找到高产洛伐他汀的最佳pH条件.结果:当pH=3.6时,洛伐他汀含量相对较高,但是色价较低;当pH =3.4时,洛伐他汀的含量相对较低,但是色价较高,但仍然达不到功能性红曲米的要求,需在下一步的工作中继续改进.所有的处理条件下,均未检出桔青霉素.结论:功能性红曲固态发酵高产洛伐他汀的营养液最佳pH值为3.6.%[Objective] To determine the effect of functional solid fermentation of monascus pH of nutrient solution on yield of lovastatin.[Method] Based on the existing fermentation process,set of four nutrient solution pH gradient,3.4,3.6,3.8 and 4,respectively,the best hope for pH to find a high yield of lovastatin.[Result] The results showed that when the value of pH was 3.6,the content of lovastatin was highest,but the color value was low.When the value of pH was 3.4,the content of lovastatin was lowest,but the color value was highest,but still not up to the requirements of functional red yeast rice and it needs to be improved in the next step of work.All processing conditions were not detected in citrinin.[Conclusion] pH 3.6 of nutrient solution is the optimum pH value for the solid-state fermentation process of functional monascus.【期刊名称】《中国食物与营养》【年(卷),期】2017(023)004【总页数】4页(P34-37)【关键词】功能性红曲;洛伐他汀;固态发酵;最佳pH;营养液【作者】齐文武;陈晓云;郑世茂;庞欣【作者单位】北京东方红航天生物技术股份有限公司,北京101400;北京东方红航天生物技术股份有限公司,北京101400;北京东方红航天生物技术股份有限公司,北京101400;北京东方红航天生物技术股份有限公司,北京101400【正文语种】中文红曲霉的固体发酵产物红曲也称为红曲米,最早发明在汉代,在我国已有上千年的历史,可做药用和食用[1-2]。

一种紫色红曲菌及其共酵产洛伐他汀的方法与应用[发明专利]

一种紫色红曲菌及其共酵产洛伐他汀的方法与应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910655078.X(22)申请日 2019.07.19(83)生物保藏信息CCTCC NO:M 2018910 2018.12.20(71)申请人 江南大学地址 214000 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号(72)发明人 毛健 刘双平 韩笑 (74)专利代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211代理人 张勇(51)Int.Cl.C12N 1/14(2006.01)C12N 1/20(2006.01)C12N 1/18(2006.01)C12G 3/022(2019.01)C12J 1/04(2006.01)C12R 1/645(2006.01)C12R 1/25(2006.01)C12R 1/07(2006.01)C12R 1/865(2006.01) (54)发明名称一种紫色红曲菌及其共酵产洛伐他汀的方法与应用(57)摘要本发明公开了一种紫色红曲菌及其共酵产洛伐他汀的方法与应用,属于发酵工程与生物技术领域。

本发明的紫色红曲菌已于2018年12月20日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M 2018910,保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

该种红曲菌固态发酵制备红曲发酵剂中洛伐他汀产量可达6~12mg/g,色价可达1500~2500μ/g,均处于较高水平且无桔霉素检出。

权利要求书1页 说明书6页 附图2页CN 110373332 A 2019.10.25C N 110373332A1.一种紫色红曲菌,分类命名为紫色红曲菌(Monascus purpureus)H8-2,所述菌株已于在2018年12月20日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国.武汉.武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 2018910。

2.一种组合物,其特征在于,含有权利要求1所述的紫色红曲菌H8-2。

正交试验法优选红曲中洛伐他汀的提取工艺

正交试验法优选红曲中洛伐他汀的提取工艺

正交试验法优选红曲中洛伐他汀的提取工艺胡正芳,李除夕,贾树田,李琴*(南京海陵中药制药工艺技术研究有限公司,南京210049)[摘要] 目的: 优选红曲中洛伐他汀的提取工艺。

方法:以干膏得率和洛伐他汀转移率的综合评分为考察指标,选取提取次数、提取时间、乙醇体积分数和乙醇用量为考察因素,采用L9(34)正交试验法优选提取工艺条件。

结果:最佳提取工艺为6倍量95%乙醇回流提取2次,每次0.5 h。

结论:该优选工艺合理,稳定可行,有效成分洛伐他汀提取率高。

[关键词] 红曲;洛伐他汀;正交试验;提取工艺Optimization of Extraction Process for Lovastatinfrom Red Koji by Orthogonal TestHU Zheng-fang, LI Chu-xi, JIA shu-tian, LI Qin*(Nanjing Hailing R&D for TCM Pharmaceutical Technology,Nanjing 210049, China)[Abstract] Objective: To optimize the ethanol extraction technology for lovastatin from Red Koji. Method: With comprehensive score of yield of dry extract and transferring rate of lovastatin as indexes, taking extraction times, extraction time, the concentration of ethanol and the amount of ethanol and as factors, extraction technology of lovastatin from Red Koji was optimized by L9 (34) orthogonal test. Result: Optimal extraction technology was as follows: reflux extracted 2 times with 6 times the amount of 95% ethanol, 0.5 hours every time. Conclusion: This optimized extraction technology was feasible, stable and reasonable with high yield of active ingredient lovastatin.[Key words]Red Koji; lovastatin; orthogonal test; extraction process[收稿日期][第一作者] 胡正芳,博士,中级工程师,从事中药新药研发工作,Tel: 025********, Email: njhlyy@[通讯作者] *李琴,硕士,中级工程师,从事新药研发工作,Tel: 025********, Email:yzjlq@目前心血管疾病已成为危害人类健康、引起死亡的重要因素,高脂血症是动脉粥样硬化主要易感因素,改善或纠正脂质代谢异常是防治心血管疾病的重要举措。

影响红曲酒糟发酵物γ-氨基丁酸含量的因子分析

影响红曲酒糟发酵物γ-氨基丁酸含量的因子分析陈豪锋;朱兰琴;朱丹华;薛临生;张乃文;王用富;陈铭【摘要】红曲制品含有降血压功能的天然γ-氨基丁酸.增加红曲酒糟的γ-氨基丁酸含量可以显著提高制酒和醋的副产品红曲酒糟的附加值.本研究对影响红曲酒糟二次发酵中发酵温度、原料此、料水比、pH值、发酵时间,红曲霉菌株、金属离子等对发酵物γ-氨基丁酸含量的影响效应进行了分析,确定了红曲酒糟高天然γ-氨基丁酸二次发酵的各因子参数为:选用"丹溪1号"红曲霉菌株,红曲/酒糟/米皮原料比0.10/2/0.8,料水比128/100,添加0.1 2%CaCl,pH4.6,35℃恒温发酵72 h~79h.结果表明,该工艺可使二次发酵的红曲酒糟γ-氨基丁酸含量显著提高,具有很好的应用前景.【期刊名称】《科技创新导报》【年(卷),期】2010(000)014【总页数】3页(P137-139)【关键词】红曲;酒糟;发酵;γ-氨基丁酸【作者】陈豪锋;朱兰琴;朱丹华;薛临生;张乃文;王用富;陈铭【作者单位】义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003;义乌市丹溪酒业有限公司,浙江义乌,322003【正文语种】中文【中图分类】TS262γ—氨基丁酸(GABA)是一种天然非蛋白质氨基酸,普遍存在于自然界动植物中,50年代末发现GABA具有降血压作用,而后对不同动物的GABA降血压有效剂量进行研究,发现GABA对不同类型的动物降血压达20%所需要的剂量各不相同[1,2]。

随着研究的不断深入,继而发现GABA还具有其它许多功能,如健脑、治疗癫痫、改善脂质代谢、防止皮肤老化、清除体臭、使精神安定、促进记忆、促进生长激素的分泌、肾功能活化、肝功能活化、抗疲劳、增加食品风味等[3,4,5,6]。

HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量

HPLC法测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量【摘要】目的建立测定红曲霉发酵液中洛伐他汀含量的方法。

方法采用HPLC法,以甲醇作溶剂、摇床振荡(150 r/min)3 h提取洛伐他汀,色谱条件:以甲醇18 mmol/L磷酸溶液(体积比为80∶20)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为237 nm。

结果洛伐他汀在5~50 μg/ mL质量浓度范围内与峰面积线性关系良好,加样平均回收率为100.75%,RSD为0.87%。

结论本方法简便有效,重复性好,可作为红曲霉相关产品的质量控制方法。

【关键词】高效液相色谱法;红曲霉;洛伐他汀Abstract:Objective To establish an HPLC method for determining the content of lovastatin in fermentation broth of Monascus. Method Lovastatin could be completely extracted from the fermentation broth by methanol under shaking for 3 h with 150 r/min. Then, samples were analyzed on the HPLC column using methanol18 mmol/L phasphate(80∶20) as mobile phase under the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was 237 nm. Result The method had good linearity over the concentration of 5~50 μg/mL for lovastatin. The average recovery was 100.75% and RSD 0.87%.Conclusion The method is convenient, effective and accurate, which is suitable for the quality control of Monascus products.Key words:HPLC; Monascus; lovastatin红曲霉的应用在我国已有近两千年的历史,红曲霉的早期研究主要集中在其所产的红曲色素和各种酶类,如淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、果胶酶等,因此早期红曲霉主要用于食品着色、酿酒、食品发酵等[1,2]。

红曲发酵液中洛伐他汀的检测研究


0.38
0.00
60.56
62.39
97.06
由表 2 得出:样品加标量 18.35mg/L、36.70mg/L、62.39mg/L 时回收率均符合国家标准 GB/T 27404-2008 《实验室质量控 制规范食品理化检测》 中被测组分含量在 1-100mg/kg 时回 收率范围 90%-110%的要求。 4 结论
第 46 卷 第 3 期 2019年5月
文章编号:1002-8110(2019)03-0103-02
酿酒 LIQUOR MAKING
Vol.46. № .3 May, 2019
红曲发酵液中洛伐他汀的检测研究
巩子路,吴丽华,刘曼曼,韩 旭,吴宏萍 *
(安徽金种子集团检测中心,安徽 阜阳 236018)
本次验证试验采用 GB5009.266-2016 《食品安全国家标 准食品中甲醇的测定》进行试验,用该标准进行食用酒精中 甲醇含量的检测,得出在本化验室该方法的线性、加标回收
率和精密度均符合要求,所以此标准适用于本公司食用酒精 中甲醇的含量测定,测定结果准确。
[参考文献] [1]中华人民共和国国家标准 GB 5009.266-2016《食品安全国家标准
食品中甲醇的测定》 [2]中华人民共和国国家标准 GB/T 27404-2008《实验室质量控制规
范食品理化检测》
103
第三期


2019
酵液,自制红曲发酵液。 1.3 标准曲线的配制
准确称取洛伐他汀标准品 50.0mg,于 100mL 的容量瓶中 用甲醇定容,配成浓度为 500μg/mL 的标准储备液。用甲醇 分 别 稀 释 成 浓 度 为 2μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、 100μg/mL、200μg/mL 的系列标准溶液。在选定条件下测定, 以浓度为横坐标,响应值为纵坐标,绘制标准曲线。 1.4 样品的前处理

洛伐他汀发酵条件研究

洛伐他汀发酵条件研究作者:游玟娟温拥军来源:《中国化工贸易·下旬刊》2018年第03期摘要:为了提高Monascus sp.UV-D-9发酵生产洛伐他汀的能力,对其发酵条件进行了研究。

结果表明:最佳温度为30 ℃,装液量130mL,转速180 r·min-1。

在此条件下,洛伐他汀产量为 0.312 mg·mL-1,比原始产量提高了8%。

关键词:洛伐他汀;红曲霉;发酵条件;研究洛伐他汀(Lovastatin)是临床上常用来治疗高血脂、高血压、冠心病等“富贵病”的药物,它作为体内羟甲戊二酰辅酶A(HMG-CoA)的结构类似物,能竞争性抑制HMG-CoA的代谢,减少机体内胆固醇的生成,从而对高血压和冠心病等疾病起到一定的防治作用。

随着社会经济的发展,人民生活水平日益升高,近年来高血脂、高血压、冠心病等“富贵病”发病率显著增加,因此对洛伐他汀的需求量也日益增加。

目前,洛伐他汀主要是通过微生物发酵生产,在微生物发酵中,优良的菌种和优化的发酵条件是获得高产的关键。

课题组采用复合诱变获得了洛伐他汀高产菌株Monascus sp.UV-D-9,本实验对Monascus sp.UV-D-9的发酵条件进行优化研究,以期进一步提高洛伐他汀的产量,为功能性红曲的开发提供理论依据。

1 材料与方法1.1 材料与仪器①菌株。

红曲霉(Monascus sp. UV-D-9),为本课题团队前期诱变得到的洛伐他汀高产菌株,保存于本校生物制药实训基地;②培养基。

斜面培养基: PDA培养基;种子及发酵培养基:PD培养基;③洛伐他汀标准品。

购于上海永叶生物科技有限公司,纯度≥98%;④主要仪器。

HPS-250生化培养箱(哈尔滨东明);CBV-1500A超净工作台(上海瑞仰);QYC.2102摇床(上海福玛);DZ4-0.8A离心机(北京医用);高效液相色谱仪(美国戴安)。

1.2 实验方法①菌种活化。

用接种环取1环红曲霉孢子,接种到斜面培养基上,置于生化培养箱中,于32℃下培养4d;②摇瓶种子液的制备。

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(. h o f ri, ia d o d Hea iesyo T cn lg , hn z o 5 0 2C ia 1 c o l a O ln o , nnUnvri f eh oo yZ e gh u4 0 5 ,h ; S oG n F t n) (.co l f o d cec d eh ooy Hea r u ua U i ri , hn z o 5 0 2 C i ) 2S h o o i e n cn lg , n n i l rl nvs t Z eg h u4 0 5 , hn oF s n a t Ag c t e y a
S u y 0 eEx r c i n o v sa i 0 Fe m e t d Br n t d n t t a to f h Lo a t t f m r n e a n r
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Ab t a t L v tt sa kn fa t e s b tn e wh c a h b t h y t e iai n o h ls r n mv n r r te o d s r c : o a a i i i d o ci u s c i C l i ii te s n s t fc o e t i a d p e t t y ah , ma a s n v a h ln h z o en ae n
Ke wo d : tt y r s M n u Brn Ul a vo e e t h t mee ; o a a i s s r s o s n
17 99年 , 日本学 者远藤 章 首先从 红色红 曲霉菌 Moacsrbr中发现能产强力抑 制胆 固醇合成 的活 nsu ue 性物质 ,命名为 Mo aoi ncl K。MoaonK类物质不 n ncl i 仅可 以降低胆 固醇,而且对重症胆 固醇血症患者也极 为有效 ,特别 是对 导致动脉硬化最严 重的低密度脂蛋 白胆 固醇有优先 降低 的作用 ,其 中以 Moaoi K抑 ncl n 制 H -OA 还 原酶 的活性最高【。18 MG C 1 9 0年 ,美 国 J Ale br t等人 从土 曲霉 Asegl str r 中发现 了与 priu ers l e
1 试验材 料 、试剂 与仪 器 11材料 . 菌种 : 曲霉 原始 菌株, 红 由河南 工业 大学生物 工程 学 院生物 工程实验室提供 。
原料:麸皮购 自 郑州第二面粉厂。 粳米购 自 家世
界超市 。红 曲米 ,本 实验 室制备 。 培养基 :P A培 养基 、米饭培 养基【。 D 3 J 1 主要试剂 . 2 L vs t oati an标准品 :( 自美 国 s ma公司 ) 购 i g ;冰 醋酸 ,乙酸 乙酯 ,无水 乙醇 ,甲醇 ( 为分 析醇 ) 均 ;中
ise do t e i t xr c L v s t . ers l s o d t ew e t r nC l n ta herc t xr c L v tt , dc nd tc e hec ne t n ta f c oe t t o a t i T ut h we h h a b a al se dt e o e t t o a ai a h re a a nh e si i a s nn a e tdt o t n e L v tt s g7 % e a o i l s lt n a du i gA1 b o pi n a a ai u i 5 s n n h tn l ds l oui n 2 a a s rt . s a i t o n s 03 s o
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Mo enF o c nea dT c n lg d r odS i c n eh oo y e
V 1 2 .总 8) o. 3 2 No ( 9
文章篇号 :0 726 (06 0- 1 06 10- 7420 )30 -3 1 2
红 曲发酵谷物麸糠提取 L v s a o at t i n的研究
田洁 ,乔明武 ,左 秀凤 ’ ,史燕强
(. 1河南工业大学粮油食品学院,河南郑州 4 05 ) 2 河南农业大学食品科技学院,河南郑州 40 0 ) 502 ( . 502
摘要 : o at i是一种强力抑制胆 固醇合成的活性物质,能够预防动脉粥样硬化和冠心病的产生。 L v an s t , 目前市场上大部分 L v tt oa an s i 是从红曲米 中提取 出来的 本试验采用农副产品一 麦麸为基质 ,来发酵提取 L v ti,找出了适合本试验的提取溶剂: %乙醇。然 o a an s t 7 5 后经中性氧化铝吸附脱除红曲色素,最后 采用增量法 ,成功地检测 了红曲麸 中的 L vs t o aai t n的含量 关键词:红曲;麦麸;紫外分光光度计;L v t i oa a n s t
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