ISO标准 参考译文 沙门氏菌检验基准方法
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌（Salmonella）是一类革兰氏阴性的杆状细菌，是引起沙门氏菌属感染的病原菌。
这种细菌可以引发食物中毒和伤寒症，其中食物中毒是最常见的感染途径。
因此，对沙门氏菌的快速、准确的检测非常重要。
目前，沙门氏菌的检测方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
以下是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 传统培养分离法传统的沙门氏菌检验方法是利用富含寡糖的培养基，如XLD、SS等，以及一些选择性供氧培养基，如亚硫酸和肉汤琼脂培养基等，将样品进行培养。
通过培养，沙门氏菌会形成典型的红色或蓝绿色菌落。
然后，从菌落中挑取纯培养物，并进行生理生化反应和田纳氏试验以确定是否为沙门氏菌。
2. 免疫学方法免疫学方法是通过检测沙门氏菌特异性抗原或抗体来诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- 血清凝集试验：利用特异性沙门氏菌抗原和患者血清，在特定条件下观察血清与抗原的凝集反应，可确定是否感染沙门氏菌。
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用特异性沙门氏菌抗原或抗体和酶标记的二抗，通过检测光学密度来判断是否存在沙门氏菌。
3. 分子生物学方法分子生物学方法可以通过检测沙门氏菌的基因或DNA来快速、准确地诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- PCR（聚合酶链式反应）：通过特异性引物扩增沙门氏菌的DNA片段，然后进行凝胶电泳分析。
PCR可以提供快速、高效的沙门氏菌检测结果。
- 实时荧光PCR：使用带有荧光探针的PCR引物，通过检测荧光信号的强度来定量沙门氏菌的存在量。
- 基因芯片技术：基因芯片上固定了沙门氏菌特异性的探针，可以同时检测多个基因或DNA序列，提高检测效率。
除了上述方法，还可以利用质谱仪等仪器进行快速鉴定，甚至利用抗生素敏感试验、细菌溶解酶试验等进行进一步的鉴定和鉴别。
总结起来，沙门氏菌的检验方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
这些方法可以单独或联合使用，以提供准确、快速的沙门氏菌检测结果，对于预防和控制沙门氏菌感染具有重要意义。
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。
2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。
3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。
5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。
需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。
沙门菌的检验技术
亚硫酸铋（BS ）琼脂
糖发酵管
HE 琼脂
邻硝基酚 β-D 半乳糖苷 （ONPG）培养基
木糖赖氨酸脱氧胆盐 （XLD ）琼脂
半固体琼脂
沙门氏菌属显色培养基 三糖铁（TSI）琼脂
丙二酸钠培养基 沙门氏菌O 和H 诊断血清。
生化鉴定试剂盒
操作步 骤 1、前增菌——第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养
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沙门氏菌的增菌液
l 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)：含有胆盐， 抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌的 生长，而伤寒与副伤寒沙门氏菌仍能生长。
l 亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）：可对伤寒及 其他沙门氏菌作选择性增菌，亚硒酸与蛋白 胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸和硫的 复合物，影响细菌硫代谢，从而抑制大肠埃 希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增殖。
——修改了标准的中英文名称； ——修改了标准的范围； ——修改了培养基和试剂； ——修改了设备和材料； ——修改了附录A。 本标准的附录A、附录B 为规范性附录。 本标准所代替的历次版本发布情况为： ——GB 4789.4-84、GB 4789.4-1994、 GB/T 4789.4-2003、GB/T 4789.4-2008
（一）前增菌 •前增菌：使食品加工过程中受伤的沙门菌细胞 恢复活力 •未经加工过的食品，检验前不需要前增菌
前增菌：25克（加工食品）+225毫升缓冲蛋白胨 水 37度培养4小时（干蛋品18—24小时）。
沙门氏菌前增菌培养基
缓冲蛋白胨水(BPW) 肉汤： 是基础增菌培养基，不含任何抑制成
分，有利于受损伤的沙门氏菌复苏。使受 损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状 态。2003版本标准仅用于加工食品或冷冻 食品的前增菌。
食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验
沙门氏菌检验程序
1 取消样品分类，前增菌液统一为“缓冲蛋白胨 水” 原国标：BPW FDA、AOAC：多种前增菌液 ISO：BPW
2 对所有样品均进行8-18h前增菌 原国标只对冻肉、乳品、蛋品等加工食品进 行前增菌，FDA、AOAC、ISO、Canada MFHPB、CCFRA等组织或国家对所有样品都 进行前增菌。
65.3 81.0 52.0 83.2 80.0 83.0 86.2 106.6 77.7 68.4 98.4 71.6 100.0
I： 进口 C：国产
SS琼脂 上面的志 贺氏菌和 沙门氏菌
C-BS
I-BS
C-HE
I-HE
I-XLD
C-XLD（变形菌落-错误）
I-XLD
样品+BPW+SC+BS
DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技 术制造的全自动PCR分析仪。将已知核 苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法 标记，加入已变性的被检DNA样品中， 在一定条件下即可与该样品中有同源序 列的DNA区段形成杂交双链，从而达到 鉴定样品中DNA的目的。
AOAC 967.25－967.28
处理样品 35℃ 1mL+10mLSC 35℃ 24±2h XLD & HE & BS 35℃ TSI 35℃ 纯培养物 尿素酶＋ 非沙门菌 尿素酶－ 24±2h（BS 24h&48h） & LIA 24±2h 不纯培养物 MAC or XLD or HE 纯培养物 非 沙 门 菌 非 沙 门 菌 24±2h 1mL+10mLTT
35± 1℃ 18~24h & 48h TSI & LIA 血清学试验
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。
第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。
第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。
第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。
沙门氏菌国标检测方法
沙门氏菌国标检测方法一、样本采集在采集样本时，应确保采集的样本具有代表性，且无菌操作。
通常采集食品、动物粪便、环境样本等。
对于食品，应采集不同种类，如肉类、禽类、奶制品等。
对于动物粪便，应采集新鲜样本，避免受到污染。
环境样本应采集可能存在沙门氏菌的表面或水样。
二、增菌培养增菌培养是沙门氏菌检测的重要步骤，目的是增加细菌的数量，使其更容易分离和检测。
常用的增菌培养基有肉汤培养基和缓冲葡萄糖胨水培养基等。
将采集的样本接种到培养基中，在37℃下培养18-24小时。
三、分离培养将增菌培养后的培养物划线接种于选择性培养基（如SS 琼脂、麦康凯琼脂等）上，在37℃下培养18-24小时。
选择性培养基可以抑制其他细菌的生长，有利于沙门氏菌的分离。
四、初步鉴定对分离培养得到的单个菌落进行初步鉴定，包括菌落形态、染色特性、镜下形态等观察。
同时进行革兰氏染色和氧化酶试验，以初步判断是否为沙门氏菌。
五、生化试验生化试验是确定分离菌株是否为沙门氏菌的关键步骤。
常用的生化试验包括赖氨酸脱羧酶试验、尿素试验、靛基质试验等。
根据试验结果，对分离菌株进行初步分类。
六、血清学分型为了确定分离菌株的具体血清型，需要进行血清学分型。
通过与已知抗血清进行反应，确定细菌的特异性抗原，从而确定其血清型。
血清学分型对于追踪沙门氏菌的来源和传播途径具有重要意义。
七、报告结果根据以上各步骤的检查结果，综合分析并得出最终结果。
对于疑似沙门氏菌的样本，应进行复核和确认。
最终结果应以书面形式报告给相关单位或个人，报告应包括样本来源、检测方法、检测结果等内容。
同时，应对检测结果进行解释和说明，提供相应的建议和措施。
沙门氏菌检验标准操作规程
沙门氏菌检验标准操作规程1目的purpose规范888物料、产品的沙门氏菌检验操作，确保检验结果的可靠性。
2范围scope适用于888物料、产品的沙门氏菌检验工作。
3责任responsibility微生物检验员严格执行本规程，品质部负责人监督执行。
4程序procedure4.1定义和原理沙门氏菌广为存有于动物的肠道和内脏，以及被粪便污染的水和土壤中，就是细菌性食物中毒的主要病因。
本方法利用沙门氏菌呈圆形辛酸酯酶阳性，而氧化酶和脂肪酶均呈圆形阴性的特性，对物料、产品展开沙门氏菌检验。
4.2材料和设备4.2.1紫外灯：波长366nm，功率不小于6w。
4.2.2放大镜：3至4倍。
4.2.3毛细滴管。
4.2.4lx-b35l压力蒸汽杀菌锅。
4.2.5无菌的培养皿。
4.2.6无菌的注射环路。
4.3培养基和试剂4.3.1scdlp液体培养基：按《化妆品卫生规范》（2021版）或使用商品培养基干粉配制。
4.3.2四硫磺酸钠煌蓝（ttb）减菌液：按gb4789.4—2021第三章a.5酿制或采用商品试剂。
4.3.3ss琼脂培养基（含1%蔗糖）：牛肉浸膏(或牛肉粉)5.0g，蛋白胨5.0g，乳糖10.0g，蔗糖10.0g，胆盐no.38.5g，柠檬酸钠8.5g，硫代硫酸钠1.0g，柠檬酸铁1.0g，煌绿1.0g，中性红0.025g，琼脂13.5g，蒸馏水1000ml。
4.3.4he琼脂培养基：按gb4789.4—2021第三章a.5或采用商品培养基干粉酿制。
4.3.5玉米油维多利亚蓝琼脂培养基：灭菌后的基础培养基冷却至50℃左右，边摇边加入玉米油乳化液。
倾注平皿，制成平板。
基础培养基及玉米油乳化液配方如下：a）基础培养基：蛋白胨5g，酵母浸粉3g，氯化钠5g，琼脂13g，水900ml，ph7.8-8.0。
将各成分重新加入水中，冷却熔化。
调节ph7.8-8.0，116℃15min高压杀菌。
b）玉米油乳化液：玉米油100ml，0.1%维多利亚蓝水溶液100ml，0.5%琼脂溶液80ml，吐温801ml。
欧盟沙门氏菌检验标准
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌，可以导致食物中毒。
为了确保食品安全，许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。
欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一，其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。
以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准：
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。
2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。
3. 检测频率:对于某些高风险食品，如生肉、家禽、蛋类和蛋制品，欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。
4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被视为阳性。
5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么必须立即报告给相关的监管机构。
6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被销毁，并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。
需要注意的是，具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。
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国际标准 ISO 6579食品和动物饲料的微生物学——沙门氏菌检测的基准方法内容1 范围2 参考标准3 定义4 原理4.1 概要4.2前增菌——非选择性液体培养基4.3 增菌——选择性液体培养基4.4 划平板和鉴定4.5 确认5 培养基、试剂和血清5.1 概要5.2 培养基和试剂5.3 血清6 设备和玻璃器皿7 采样8 检验样品的制备9 程序9.1 试验样品和原始悬浮液9.2 非选择性前增菌9.3 选择性增菌9.4 划平板和鉴定9.5 确认10 结果表示11 检验报告12 质量保证附录A （标准化）程序图表附录B （标准化）培养基和试剂的成份及准备附录C （非标准化）实验室间试验结果参考书目ISO（国际标准化组织）是国际标准化团体的全世界同盟。
通常由ISO技术委员会来执行国际标准的制订工作（ISO成员体）。
通常由ISO技术委员会来完成国际标准的准备工作。
在委员会中，若对建立的技术委员会有兴趣的话，每个成员体有权作为代表。
国际组织、政府或非政府组织，通过ISO联系，也可以参加这项工作。
在所有电工标准方面，ISO与国际电工委员会（IEC）紧密合作。
国际标准按照ISO/IEC指南第三章所列的规则草拟。
技术委员会的主要任务是准备国际标准。
被技术委员会采用的国际标准草案以投票方式在成员体内运行。
至少要75%成员体的投票赞成，才能作为一个国际标准发布。
要引起注意的可能性是:本国际标准的一些要素可能是专利权主体。
ISO不应承担鉴定部分或全部的这种专利权。
ISO6579是由食品ISO/TC34技术委员会、微生物SC9分委员会所准备的。
第四版删除或更换了第三版（ISO6579：1993），并已作了技术性修订。
附录A和附录B形成了本国际标准的标准化部分。
附录C仅为资料。
因为有大量的不同种类的食品和饲料产品，本基准方法可能对某些产品并不完全适用,而另一些产品可能得用到其他方法。
既然这样，如果为论证技术上的原因而绝对需要时，那么就可使用这些产品指定的不同方法。
不过，应尽可能地使用本基准方法。
在下一次审查这个国际标准时，我们会考虑所有有用关于这些指标所涉及的范围内以及个别产品不遵照这些指标的原因的信息。
(产品的)检测方法无法在短时间内达到统一,而且,对于某些产品,可能已经有与本基准方法不符的国际标准/或国家标准存在。
但是我们希望,在以后审查这些标准时能进行修改,使其同本国际标准保持一致,以保证除了因技术原因确实需要外不会发生背离本基准方法的情况.微生物学——检测沙门氏菌方法的通用指南警告——为了保护实验室工作人员的身体健康，在适当装备的实验室、在熟练的微生物学家的控制下检测沙门氏菌、特别是伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌，这是非常关键的。
另外最要关注的是所有培养物的处置。
1 范围本国际标准详述了沙门氏菌的基准方法，包括伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。
在绪论中受讨论的局限性，本国际标准适用于——供人类消费或动物饲养所使用的产品。
——在食物生产和处理范围内的环境样品。
警告——本方法并不包括所有的伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌。
2 标准的参考资料通过本文中的参考目录，下列标准化文件包含组成本国际标规定的条款。
对后来更正或修订的陈旧参考资料，这些条款并不适用。
然而，鼓励那些基于赞同本国际标准的成员，去调查下面提到的大多数新版标准化文件应用的可能性。
对更新的参考资料，最新版的标准化文件作了参考应用。
ISO和IEC的成员保持对现行有效国际标准的注册。
ISO6887-1，食品和动物饲料的微生物学——微生物检验中测试样品、原始悬浮液及十倍稀释液的制备——第一章：原始悬浮液和十倍稀释液制备的通用规则ISO 7218：1996，食品和动物饲料的微生物学——微生物检验的通用规则ISO 8261，牛奶及奶制品——微生物检验中测试样品、原始悬浮液及十倍稀释液制备的通用指南3 术语和定义应用下列定义来表达本国际标准的用途。
3.1 沙门氏菌：在选择性培养基上形成典型或少典型的菌落，当依照本国际标准进行试验时，它们表现出特有的生化反应和血清学特征的微生物。
3.2 沙门氏菌检测：当依照本国际标准进行试验时，在一定重量或体积的产品中，测定这些沙门氏菌的存在与否。
4 原理4.1 概要沙门氏菌检测需四个连续阶段（也可以见附录A）注沙门氏菌可能少量存在，并经常伴随着相当数量的其它肠杆菌属或其它菌属。
因此，选择性增菌是必需的；此外，为尽可能地检测到受伤沙门氏菌，经常需要进行前增菌。
4.2 前增菌——非选择性液体培养基将试验部分接种于缓冲蛋白胨水，在37℃±1℃培养18h±2h。
对于某些食品，则需利用其它的前增菌程序，见9.1.2。
数量比较庞大时，在接种测试样品前应将缓冲蛋白胨水加热到37℃±1℃。
4.3 增菌——选择性液体培养基将4.2得到的培养物接种到RVS肉汤和MKTTn肉汤。
RVS肉汤在41.5℃±1℃孵育24h±3h，MKTTn肉汤在37℃±1℃孵育24h±3h。
4.4 划平板和鉴别从4.3中获得的培养物接种于两种选择性固体培养基上。
——木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD琼脂）——对XLD琼脂的任何其它补充性的选择性培养基，特别是适合于分离乳糖阳性的沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌的培养基，实验室可以选择使用。
XLD琼脂在37℃±1℃孵育，在24h±3h后检查结果。
第二种选择性琼脂按照厂家说明书进行孵育。
注作为资料，亮绿琼脂、亚硫酸铋琼脂等，可用作第二种平板划线培养基。
4.5 确认挑选可疑沙门氏菌的菌落进行次培养，再按4.4所描述的划线分离，通过适当的生化试验和血清学试验加以证实。
5 培养基、试剂和血清5.1 概要供常规实验室使用，见ISO 7218。
5.2 培养基和试剂注由于培养基和试剂的数量庞大，为了表述清晰，我们认为将它们的组成和配制在附录B中列出更适当。
5.2.1 非选择性前增菌液：缓冲蛋白胨水见B.15.2.2 第一种选择性增菌液：RVS肉汤见B.25.2.3 第二种选择性增菌液：MKTTn肉汤见B.35.2.4固体选择性平板培养基5.2.4.1 第一种培养基：木糖赖氨酸去氧胆酸盐琼脂（XLD琼脂）见B.45.2.4.2 第二种培养基第二种培养基的选择是留给检测实验室自定。
在它的准备使用时应准备按厂家说明书准确执行。
5.2.5 营养琼脂见B.55.2.6 三糖/铁琼脂（TSI 琼脂）见B.65.2.7 尿素琼脂（Christensen）见B.75.2.8 L-赖氨酸脱羧酶培养基见B.85.2.9 β-半乳糖苷酶检测试剂（或依照厂商说明书使用的比色盘）见B.95.2.10 V-P反应试剂见B.105.2.11 吲哚反应试剂见B.115.2.11.1 半固体营养琼脂见B.125.2.13 生理盐水溶液见B.135.3 血清含有一种或多种O抗原的多价血清型可由商品化获得，也就是包含一个或更多个O群抗血清（称单价或多价抗O血清），抗Vi血清和含有一个或多个H因子的抗血清（称单价或多价抗菌素H血清）。
应确保所用的抗血清足以检测所有的沙门氏菌血清型。
6 设备和玻璃器皿如果操作规范，对于可重复使用的玻璃器皿，重复使用是可以接受的。
通常或特殊情况下微生物实验室设备（见ISO 7218）如下：6.1 干灭菌（烘箱）或湿灭菌（高压灭菌器）设备见ISO 72186.2 干燥柜或烘箱，通过对流通风，能在37℃±1℃和55℃±1℃之间调节温度。
6.3 培养箱，能调节温度至35℃±1℃或37℃±1℃。
6.4 水浴，能调节温度至41.5℃±1℃，或孵育，能调节温度至41.5℃±1℃。
6.5水浴，能在44℃-47℃间调节温度。
6.6水浴，能调节温度至37℃±1℃。
由于沙门氏菌的低传染性，推荐使用含有抗菌剂的水浴锅（6.4、6.5和6.6）。
6.7 灭菌环，直径约为3mm或10μl的灭菌吸管。
6.8 pH计，要求在20℃-25℃时精确校准到±0.1单位。
6.9适当容量的试管或烧瓶可以使用带无毒金属或塑料螺旋帽的试管或烧瓶6.10 分别以0.5ml和0.1ml间隔标示，容量为10ml和1ml的刻度吸管或自动吸管。
6.11 小规格（直径为90mm-100mm）和/或大规格（直径为140mm）的皮氏培养皿。
7 制样实验室收到具有代表性的，且在运输或贮存过程中没有损坏或改变的样品是非常重要的。
制样不是本国际标准指定方法的一部分。
可参见处理相关产品的特定国际标准。
如果没有特定国际标准，可推荐这一方面已被公认的相关部分。
8 测试样品的制备根据处理相关产品的特定国际标准来制备测试样品。
如果没有特定国际标准，可推荐这一方面已被公认的相关部分。
9 程序（见图附录A）9.1 测试样品和原始悬浮液9.1.1 概要特定的国际标准处理相关的产品，见ISO 6887-1。
牛奶及奶制品见ISO 8261。
准备原始悬浮液，通常用5.2.1和4.2（缓冲蛋白胨水）指定的前增菌培养基作为稀释液。
如果指定测试样品的重量超过25g，则需用一定量的前增菌液做约1：10稀释。
为减少检测工作量，当检测指定食品中超过25g样品时，或有证据表明混合物（将测试样品堆聚）不会影响到特殊食品的检测结果时，则样品可以混合测定。
例如，如果要测定10份25g的样品，则各取10份样品混合形成一个250g混合测试样品，加入2250ml前增菌肉汤。
另外，还可从10份单独测试样品（9.3.1）的前增菌液中取0.1ml（10mlRVS肉汤）和1ml（10mlMKTTn肉汤）混合加入到100ml选择性增菌液中进行增菌培养。
9.1.2 某些产品原始悬浮液的特殊制备注下列特殊的制备仅涉及沙门氏菌的情况。
在ISO 6887-2、ISO 6887-3、ISO 6887-4和ISO 8261中描述了适用于其它病原微生物检测的特殊制备。
9.2 非选择性前增菌液将原始悬浮液（9.1）于37℃±1℃孵育18h±2h。
9.3 选择性增菌液9.3.1 将9.2获得的培养物0.1ml接种到含有10mlRVS肉汤（5.2.2）的试管中；另取9.2获得的培养液1ml接种到含有10mlMKTTn肉汤（5.2.3）试管中。
9.3.2 接种的RVS肉汤（9.3.1）于41.5℃±1℃孵育24h±3h；接种的MKTTn 肉汤于37℃±1℃孵育24h±3h。
引起注意的是不得超过最高允许的孵育温度（42.5℃）9.4 划线和鉴定9.4.1 在孵育24h±2h后，取RVS肉汤（9.3.2）培养物一环（6.7）接种于含有第一种选择性平板培养基（XLD平板，见5.2.4.1）的大规格皮氏培养皿表面，以便获得好的单个菌落。