微生物标本的处理
微生物标本的处理1.尿液样品采集和处理通常留取晨起第一次尿液（此时尿液在膀胱内储存4h以上）；尿液采集后要及时送检，并保证2h内接种；不能及时送检和接种时，尿液应置4~8℃冰箱保存；冷藏样品应于8h内接种；怀疑沙门氏菌时，应于发病2w左右采集尿液，怀疑钩端螺旋体感染时，应于发病后2w 采集尿液，上述时间此时阳性率高。
尿液微生物学检验样品采集方法如下：（1）中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水或1:1000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，无菌生理盐水冲去消毒液，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5~10ml盛于带盖的无菌容器内送检。
（2）导尿法：用导尿管导取10`15ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检（不可采集尿液收集袋中的尿液送检）。
（3）集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁容器中留取24h尿液，取其沉渣10~15ml 送检。
（4）耻骨上膀胱穿刺法：培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用。
（5）肾盂尿采集法：必须由临床医生采集。
注意事项：正常人的尿液是无菌的，除外尿道有正常菌群外，还有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌，故应该注意无菌采集。
2.粪便样品采集和处理(1)采集时间：①腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；②伤寒患者于发病2w以后采集粪便；③怀疑霍乱时立即采集粪便送检。
(2)采集方法：①自然排便法：取新鲜粪便的粘液、脓血、或絮状物等有意义成分，2~3g或1~2ml，生物菌容器内或置于保存液或増茵液内送检；或疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中（ph8.6）。
②直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难者及幼儿可采用此法，将拭子前段用无菌甘油或生理盐水湿润，然后插入肛门约4~5cm（幼儿2~3cm），轻轻在直肠内旋转。
擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。
3.痰及下呼吸道样品采集和处理（1）自然咳痰法：①晨痰为佳；②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿；③再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中；④痰量不得少于1ml：⑤痰咳出困难时可先雾化吸入Nacl溶液（100g/L，加温到45℃）使痰容易咳出。
查结核分枝杆菌，应留取24h痰。
（2）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。
（3）支气管镜、支气管穿刺、支气管肺泡灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。
①气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液。
②气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或用支气管刷直接取得。
（4）呼吸道样品采集方法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光坐，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹数次，立即放入无菌试管中。
注意事项：痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。
痰液样品要求涂片镜检：达到低倍镜视野中≤10个鳞状上皮细胞，以及≥25个白细胞方可送检。
4.血液及骨髓培养样品（1）学培养样品采集指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征：①发热（≥38℃）或低热（≤36℃）②寒热③白细胞增多（＞10×109/L，特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时）④粒细胞减少（未成熟的多核白细胞＜1×109/L）⑤血小板减少⑥皮肤黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭（2）最常用的方法为血液赠菌培养法。
培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。
每瓶需要8~10ml。
儿童瓶为需痒瓶每瓶需血液1~3ml,另外，脑积液和胸腹水也可用血液赠菌培养瓶，但仅需要儿童瓶，样品量与血液相同。
①抗生素治疗前，严格无菌静脉采血8~10ml（儿童1~4ml）；不同时间或不同部位采取2~3份血液样品；②无菌注入专用培养瓶（成人、儿童、需氧瓶、厌氧瓶、L型菌需要不同培养瓶）中送检；③如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取不同时间的3份血液样品送检；④必要时可需氧菌、厌氧菌（占10％）和L型菌同时培养；⑤疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养；⑥必要时可取骨髓1~2ml，无菌注入专业培养瓶中送检。
注意事项：血液在正常情况下为无菌样品，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。
一般病人在发病初期1~2天或发热高峰时采集血液样品，用一次性注射在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。
对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。
5.脑脊液（1）采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最好在应于抗生素之前采集脑脊液。
（2）采集方法：无菌腰穿采集脑脊液3~5ml分装到3个无菌小瓶中（各1~2ml）。
用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。
6.穿刺液培养样品（1）穿刺液培养样品包括胸水、腹水、心包液、关节腔、鞘膜液等。
（2）采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后2~3d采集样品。
（3）采集方法：①无菌操作穿刺抽取样品或外科手术采集样品；②样品采集量应＞1ml（结核分枝杆菌培养时应为1~5ml）;③样品采集后注入无菌小瓶或无菌试管中立即送检；④可在盛器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml样品）。
7.胃液及胆汁培养样品抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检；胆汁培养样品由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5ml，置无菌管内送检；胃液和胆汁采集后必须立即送检。
8.脓汁和病灶分泌物培养样品采集前局部消毒后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。
样品采集后立即置无菌管内送检。
9.眼、耳、鼻、咽拭子培养样品（1）采集眼分泌物：先用无菌生理盐水冲洗盐步，然后用棉拭于拭干，再用无菌棉拭于采集分泌物。
（2）采集咽分泌物：先用清水漱口。
用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹数次。
切勿接触口腔和舌粘膜。
（3）采集耳、鼻或鼻咽分泌物：直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接触周围粘膜或皮肤。
样品采集过程中应注意避免粘膜上的正常菌群污染，样品采集后联通拭子一起置于无菌管内送检。
10.泌尿生殖道培养样品(1)尿道分泌物：清洗尿道、采取尿道、溢出的脓性等分泌物，或用无菌拭子插入尿道2-4cm处轻轻转动后取出，置无菌试管中送检。
(2)阴道、宫颈分泌物：通过阴道扩张器，用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管1-2cm处分泌物，置无菌试管中送检。
避免阴道分泌物污染拭子。
(3)宫颈分泌物：在必要时用外套保护膜的灭菌导管抽取。
(4)前列腺液|：清洗尿道、冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液于无菌容器内送检。
(5)精液：受检者应5d未排精，清洗尿道后手淫或体外排精法，射精于无菌容器内送检。
(6)溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处，用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物，置无菌试管中送检。
13.真菌感染培养样品（1）浅部真菌感染样品采集①皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检，皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；②指（趾）指甲消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片5~6片置无菌容器内送检；③毛发：采集根部断折处，至少5~6根送检。
（2）深部真菌感染样品采集①血液：无菌采血8~10ml，注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检，如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过8~9h；②脑脊液采样量不少于3~5ml，分别注入两支无菌试管中送检（一般做真菌培养和墨汁染色一管测隐球菌抗原和其他培养）；③呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染样品采集同一般菌培养样品。
14.皮肤（主要指伤口、创面脓液等）样品采集方法（1）对采集样品部位应首先清除污垢，再用碘酒或酒精消毒，防止皮肤表面污染菌混入影响检验结果，盛放样品器皿应无菌。
（2）封闭性脓肿：病灶局部消毒后，以无菌干燥注射器穿刺抽取，将采集的脓液注入灭菌试管，对疑似厌氧菌的脓液，抽取脓液后立即派出注射器内的空气，同时将针头插入灭菌橡皮塞，防止空气进入。
（3）开放性脓肿及脓性分泌物：先做局部消毒再用无菌棉拭子采取脓液及病灶深部分泌物，并置无菌容器内送检。
（4）大面积烧伤的创面分泌物因创面的部位不同，细菌种类不同，故应用无菌棉拭子多部位采集脓液及分泌物，置于无菌试管。
注意事项：烧伤12h内的创面及分泌物中细菌检出率较低。
15.空气培养样品采集方法（1）采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。
（2）采样高度：与地面垂直高度80~150cm。
（3）布点方法：室内面积≤30㎡，设一条对角线是哪个取三点，即公司一点，两端各距墙1m处取一点；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点，其中东、南、西、北距墙1m。
（4）采样方法：用9cm直径普通培养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。
（5）样品保存：①采样后必须尽快送检。
②在平皿上注明各采自哪个室，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检中平皿和平皿盖子分离而造成污染。
③将封好的平皿装入自封袋，并将自封袋封好后送检。
申请项目包括：血培养及鉴定+药敏试验尿培养及鉴定+药敏试验一般细菌培养及鉴定+药敏试验真菌培养及鉴定+药敏试验。
微生物标本采集及保存要求
微生物标本采集及保存要求引言微生物标本的采集和保存是微生物学研究和诊断的基础。
正确的采集和保存方法能够确保标本的质量和完整性，并提供可靠的结果。
本文将介绍微生物标本采集和保存的要求，旨在帮助人们正确进行微生物标本的处理。
1. 标本采集前的准备在进行微生物标本采集之前，准备工作是至关重要的。
以下是一些需要注意的事项：•准备采集工具和材料: 预先准备好所需的采集工具和材料，如无菌容器、无菌拭子等。
•确保个人卫生: 采集标本前，采集人员应洗手，佩戴适当的个人防护设备，例如手套和口罩，以防止交叉感染。
•了解采集部位和要求: 在采集标本前，了解所要采集的部位和采集要求，以便采集人员能够正确操作。
2. 标本采集步骤下面是一些常见微生物标本的采集步骤：2.1 血液标本血液标本是常见的微生物病原体检测标本之一。
以下是血液标本的采集步骤：1.选择合适的采集部位: 常用的采集部位有静脉内和指尖采血。
根据需要选择合适的采集部位。
2.消毒采集部位: 使用适当的消毒剂对采集部位进行消毒，以减少细菌的污染。
3.利用无菌注射器或放血针采集血液: 选择合适的采血设备，按照正确的技术和步骤采集适量的血液。
4.将血液转移到无菌容器中: 将采集到的血液转移到适当的无菌容器中，如血培养瓶或离心管。
2.2 呼吸道标本呼吸道标本用于检测呼吸道感染。
以下是常见的呼吸道标本采集步骤：1.依照需要选择合适的采集方法: 常见的呼吸道标本采集方法包括咽拭子、鼻拭子、喉拭子等，根据需要选择合适的采集方法。
2.使用无菌拭子采集标本: 使用无菌拭子轻轻刮取相应部位的分泌物，注意避免刮伤黏膜。
3.将拭子转移到无菌容器中: 将采集到的标本拭子放入无菌容器中，并确保容器密封。
2.3 尿液标本尿液标本常用于病原体的检测和诊断。
以下是尿液标本的采集步骤：1.准备容器和适当的采集方法: 准备无菌容器和适当的采集方法，如尿杯或导尿管。
2.进行尿液采集: 采集尿液时应注意保持个人卫生，避免污染。
(完整版)微生物室标本溢洒处理流程
标本溢洒处理流程1。
感染性材料洒溢处理的一般原则1.1戴手套和穿防护服1。
2用干布或吸湿纸巾覆盖1.3倾倒消毒剂1。
4消毒，由外向中心，适当时间后处理1。
5再次消毒、清水擦洗1.6污染材料放置在废弃物处理容器中，并通知有关部门收纳。
2。
溢洒后处理标本溢洒台面、地面后的处理2。
1用吸水纸吸干，防止渗流。
2。
2可用2000mg/l的84消毒液喷洒，静置10—15分钟。
(如果漏出量大或存在污染工作人员鞋的可能性时，应穿防水鞋套）2.3静置10—15分钟后及时用清水擦洗，以除去残留的消毒液。
存在较多有机物(如血液、分泌物、排泄物）的物品消毒时，应加大消毒药物的使用剂量和/或延长作用时间。
2。
4碎玻璃或其他物体，不得直接用手取走或弃置。
可用硬纸板或带推板的一次性塑料铲来收集处理，也可用钳子或镊子；用后应与所处理物一并弃置于耐扎生物安全袋中。
3。
溢洒后处理溢洒后手或皮肤的处理3.1采用感应式自动洗手装置用流水冲洗。
3。
2采用医用消毒凝胶酒精进行手表面或皮肤局部消毒。
3.3肥皂洗手，按照洗手消毒原则执行.4.溢洒后处理血液标本离心过程破碎后的处理4.1标本如在离心机内破损，在开始去污染之前，设备应至少保持关闭状态30 min以上，使血/体液的液滴沉降，同时杜绝离心过程中由于空气摩擦加热形成的气溶胶外溢。
4。
2必须带乳胶手套操作,用吸水纸吸干，防止渗流和扩大污染范围。
碎玻璃或其他物体，不得直接用手取走或弃置。
可用硬纸板或带推板的一次性塑料铲来收集处理，也可用钳子或镊子;用后应与所处理物一并弃置于耐扎生物安全袋中。
4.3可用500—1000mg/l的84消毒液喷洒，量大时直接用含氯干粉覆盖，静置10-15分钟左右。
4.4溢洒量大时要适当延长含氯消毒液静置时间。
再次用吸水纸吸干，然后用清水擦洗，以除去残留的消毒液防止腐蚀离心机内胆.(注意气溶胶污染），由于大部分消毒剂在有高浓度蛋白质(如血液或血清中的)存在时活性较低甚至无效，因而应在去污染之前将大部分漏出的液体吸尽.应用一次性吸附材料(如纸巾、纱布垫或卫生纸巾)吸附漏出物.如果漏出量大，可用粒状吸附材料(如用于吸附腐蚀性漏出物的）吸附漏出液。
微生物学标本采集与处理程序
微生物学标本采集与处理程序1. 引言微生物学标本的采集和处理是微生物学研究中至关重要的一环。
正确的采集和处理程序能够保证标本的质量和准确性，从而确保后续的实验和分析的可靠性。
本文档旨在介绍一套标准的微生物学标本采集与处理程序，以帮助研究人员在实验室中进行规范的操作。
2. 标本采集2.1 选择合适的采集根据所研究的微生物类型和标本特点，选择合适的采集。
常用的采集包括离心管、培养皿、尿液收集等。
确保采集清洁无污染，并在使用前进行灭菌处理。
2.2 标本采集技巧在采集标本前，确保双手清洁并穿戴好防护手套。
根据标本类型，采取适当的采集方法，例如：- 血液标本：通过静脉采血或采用穿刺器采集足跟血。
- 粪便标本：采用干燥的收集新鲜便样，并确保不混入尿液、水或其他污染物。
- 尿液标本：清洁外阴部，使用无菌尿杯收集中段尿液。
- 喉拭子标本：使用标本采集棒轻轻刮取喉部后壁表面。
- 污水标本：根据采样点不同，采用合适的和采集方法。
2.3 标本标识标本采集完成后，将标本上贴上标识标签，标明采集日期、采集者姓名、标本类型等关键信息。
确保标识清晰、不易脱落。
3. 标本处理3.1 标本转运采集完成后，及时将标本转运至实验室。
对于需要特殊处理的标本，应按照相应的要求进行转运，确保样本稳定和安全。
3.2 标本处理前的准备在处理标本前，仔细阅读实验操作指南，准备必要的试剂和材料。
同时，确保实验室工作台面清洁无菌。
3.3 标本处理步骤根据实验要求，进行标本处理的步骤。
可能的步骤包括标本培养、PCR扩增、生物化学检测等。
根据具体情况，确保每一步骤的操作规范和无菌。
3.4 标本处理后的处理标本处理完成后，将废弃物正确处理，如进行灭菌消毒或遵守实验室废物管理规定。
4. 结论微生物学标本采集和处理程序的规范操作对于研究可靠性和实验结果的准确性至关重要。
研究人员应遵循本文档中的程序和指南，确保标本采集和处理的质量和准确性，从而提升微生物学研究的可信度和可靠性。
临床微生物标本处理及操作流程PPT
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
血培养 Blood Culture
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
如何看待CSF的培养结果？
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。 成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他 肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌 可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
微生物学--细菌检验基本技术
• 常用的指示剂：酚红、中性红、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、 甲基红等
一、培养基
（二）培养基分类
1．按成分分类
• 合成培养基：是人工合成，组分明确，都是无机盐和化学 纯物质组成的培养基 • 天然培养基：也称复合培养基。是指含有化学成分不完全 明了或各批物质的成分很难一致的天然物质所组成的培养基， 如蛋白胨、牛肉膏、肉浸液、鸡蛋、马铃薯等。细菌检验常 用
一、培养基
6．灭菌 • 高压蒸汽灭菌
• 无糖：103．4kPa
121．3℃维持
15~20min
• 有糖： 68．95kPa 115℃ 维持
15min
• 间歇蒸汽灭菌法：血清、牛乳、鸡蛋 • 血清凝固器灭菌
一、培养基
7．质量检验 • 无菌试验：将制好的培养基在35℃温箱培养过夜，判定是否 灭菌合格 • 效果检查：按不同的培养要求，接种相应菌种，观察细菌的 生长、菌落形态、色素、溶血及生化反应等特征，判断培养基 是否符合要求
（2）结果 抗酸性细菌和非抗酸性细菌
三、细菌染色标本的检查-革兰染色
三、细菌染色标本的检查
•未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌 •脱色经复染呈蓝色为非抗酸性细菌
三、细菌染色标本的检查
3．其他染色方法
（1）鞭毛染色 （2）荚膜染色
第二节 细菌的培养与分离技术
重点提示
• 培养基的主要成分及作用 • 培养基的种类 • 培养基制备的基本程序 • 细菌接种与培养方法 • 细菌在培养基中的生长现象
2020/2/28
7
常用诊断流程
• 表解法 区别比较复杂细菌，将各种细菌及其多 种
特性列成矩阵表格，使相互区别点十分明显，便于分析 比较
•
肠杆菌科初步分属
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集，储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本，以免皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位：采集时应特别小心；应明确检查的目的菌在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时，如窦道标本，应从窦道底部取活组织检查，而非从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或使用一次性无菌容器，不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂，一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少，可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：三1ml尿液标本：＞3ml4.1.3粪标本：1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊：4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml;4.2.2清晨中段尿：5-10ml;4.2.3粪标本：>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等)：5- 10ml。
微生物标本操作流程
微生物标本操作流程一、采集标本1.根据需要使用的微生物种类，选择采集适当的标本类型，如血液、尿液、呼吸道分泌物、伤口分泌物等。
2.采集前洗手，戴好手套，保证操作无菌。
3.根据标本类型选择适当的采集方法，如穿刺、切开、吸引等。
4.采集标本时避免污染和损伤，采集的标本量要充足，确保后续实验的需要。
5.采集后立即将标本放入合适的容器中，并用合适的保存液固定标本。
二、保存标本1.封闭保存a.无菌标本应尽快处理。
b.根据需要，选择适当的保存方式：常温、4℃、-20℃，-80℃等。
c.使用密封标本袋、离心管等避免样本污染。
d.根据需求添加保存液，如生理盐水、甘油、琼脂糖等。
2.运输保存a.标本运输前应按照需要将标本进行适当保存。
c.标本运输时需要严格遵守相关的运输规定和防护措施，避免标本在运输过程中受到污染或损坏。
三、处理标本1.无菌条件下进行标本处理。
2.打开封闭的标本容器时，应尽量减小环境污染。
3.首先进行外部检查，检查标本是否完整，有无明显破损或渗漏。
4.根据需要，将标本分为不同的试管或培养皿中，避免不同菌种相互干扰。
5.针对具体需求，对标本进行不同的处理，如离心、稀释、加酶处理等。
四、传递标本1.打开封闭的标本容器时，应尽量减小环境污染。
3.准备适当的传递容器和传递材料，避免标本在传递过程中受到损坏或污染。
4.标本传递时应尽快送至指定的实验室，避免标本在传递过程中受到温度变化、时间延误等因素的影响。
五、清洗操作区域和工具1.实验完成后，需要对操作区域进行清洁2.清洗操作区域可以使用含有消毒剂的清洁剂，如含有氯己定的漂白粉或消毒液。
3.清洗使用过的工具，如采集器具和传递容器等，使用适当的清洁剂和消毒液进行清洗和消毒，保证无菌状态。
微生物标本操作流程的重点是保持标本的无菌状态，避免标本的污染和损伤。
在每一步操作中，都要严格遵守操作规程和消毒措施，以确保标本的质量和准确性。
此外，还需要根据具体实验需求，选择适当的保存液、保存条件和传递方法。
微生物检验标本采集运送程序
标本的采集和运送具有重要意义，其质量直接影响到微生物实验室检测结果的可靠性。标本的采集和处理方式不当将导致病原体分离失败，或无法确定真正致病的微生物，给医院感染的病原学诊断造成困难，因此必须规范微生物检验标本的采集、运送，保证实验检测前标本质量。
标本
类型
采集
时间
温度
转运
报告时间
2、液体粪便取1～3ml
无菌
容器
常温
≤2h
住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的病人，不做常规粪便培养
直肠拭子
1、小心插入拭子超越肛门括约肌，轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样
2、用于检测病原的拭子应能见到粪便
无菌
试管
褥疮溃疡
1、一般不选择拭子标本
2、无菌盐水清洗表面
3、如得不到活检标本或抽吸物，则用拭子用力采集损伤底部
由于褥疮溃疡拭子提供不了什么临床信息，一般选择组织活检或针头抽吸标本
1/d#表示一天中仅需送检1次，无需多次重复送检相同标本
涂
片
抗
酸
染
色
痰
量多为宜
无菌容器
无
1h出报告
至少连续送3d，每日1次
尿（24h尿沉淀或12h全夜尿沉淀）
10ml
无菌管
留取24h尿或12h全夜尿于洁净容器中，必须静止2h后，弃上清液，收集沉渣约10ml于无菌容器送检
血培养瓶有两种规格，采血量不一样。
成人瓶：
8～10ml/瓶
小儿瓶：
1～3ml/瓶
≤2h
常温
禁止冷藏
阴性：5d
阳性：随时报告危急值，最终报告及时发出
建议从不同部位各采1瓶，共2瓶同时送检。
1、采集部位通常为肘静脉，疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉为宜。
临床微生物实验室标本处理流程详细
微生物实验室标本处理流程涂片革兰染色，其他形
态：1.弧形菌属根据标本种类标本接种后油镜下观察染色 2.弯
曲菌3.酵母菌上显板挑选可疑菌落，35°C培养，情况和细菌形
态4其他菌：鉴定参照《全国必要时可做18~24h 检验操作规
程3版》） CO2，厌氧培养 G+球菌G-球菌：主要奈瑟G-杆菌 G+
杆菌（分芽菌属和布兰汉菌属（多为污为主孢和无染，结合
临芽孢）床）触酶（+）触酶试验氧化酶触酶（-）：链球菌属
氧化酶（+）：氧化酶(-): 血浆凝固酶非发酵菌（不动，嗜肠杆
菌属麦除外）血浆凝固酶血浆凝固酶（+）（-）参照《全国
检验操作规一般采用肠杆菌属鉴定板程3版》鉴定，并做链条，
沙门志贺加做血清学球菌属药敏鉴定葡萄糖O/F F（+）：金F （-）：新生霉新生霉素参照《全国检验操作规程按照肠杆菌属
做药敏微球菌试验并报告黄色葡萄素（+）：（-）：腐生3版》
鉴定按照非发酵菌球菌葡萄球菌属做药敏试验并报告表皮葡萄
球菌备注：此图为粗略图，以全国检验操作规程3版为准按照
葡萄球标本处理：1.痰液：血板+麦康凯（插管痰注明）菌属做
药敏 2.大便：血板+麦康凯+SS平板（稀便注明）试验，报
告 3.尿：血板+麦康凯（中段尿注明，用大环取样）
4.棉签取样的标本: 血板+麦康凯(最好以生理盐水湿润后接种)
5.带菌量少的标本：需要增菌处理注意事项：接种标本后平板
注意注明接种时间和标本编号，性病衣原体筛查要留标本于冰
箱中。
支原体标本避免干燥和高温，及时处理为宜。
微生物检验标本不合格原因有哪些，如何处理
微生物检验标本不合格原因有哪些，如何处理作为重要的检验项目之一，微生物检验在医疗卫生工作和处理突发公共卫生等工作中的应用非常广泛。
顾名思义，这一检验的主要目标是对于相关标本中的目标微生物情况进行科学检测。
研究人员指出，这一检查项目即可以帮助医生结合检查结果对患者所患的疾病进行科学诊断并调整后续的治疗方法，对于患者治疗工作效果的达成具有良好的促进意义；也可以通过对食物环境等寻找引起事件的病原微生物。
然而，通过对大量实验数据进行分析后可以发现，在微生物检验工作开展中，由于受到多种因素的影响微生物检验标本极易受到污染，继而导致其检测结果出现不理想的问题，对于后续检验结果和处置的准确性造成了一定的影响。
然而在日常工作中，部分检验工作者对于该问题的关注程度相对偏低，而其沿用的检验工作方法相对较为传统，继而不利于微生物检验标本合格率的充分维系。
为了合理应对这一问题，本文针对医疗卫生工作和处理突发工作公共卫生工作过程中常见的导致微生物检验标本不合格的因素进行了归纳与总结，同时提出了相应的处理方案，旨在进一步促进微生物标本检验工作水平的全面提升。
一、导致微生物检验标本不合格的常见原因（一）微生物检验标本采集环节不合理据相关研究显示，约有60~70%的微生物检验标本不合格原因与其采集过程中采集步骤不合理有关。
在这一问题上，研究人员指出，在微生物检验标本采集过程中，由于患者和基层采样人员对于相关检验知识缺乏合理了解，因此，其对样本进行提取时往往容易受到多种因素影响，进而导致微生物检验标本受到污染，继而不利于检验工作准确性的合理保障，且对于后续检验工作的开展造成了极大影响。
微生物的采集人员应作相应的防护着装，严禁从采样用品中携带目标微生物，方便现场消毒可重复使用的器具如每采一个样前后均需要合理消毒处理；不能现场消毒可重复使用器具采样前多准备。
对于简单的采集样本由患者或普通医护人员采集，由于缺乏相应的常识，部分患者和基层采样人员在对痰液¸尿液以及环境等标本进行采集的过程中往往难以合理实现对于简单采集方式的科学管控，从而导致相关标本的采集质量受到极大影响。