实验三--穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离与鉴定
正交试验法优选薯蓣皂苷元萃取条件研究
正 交试 验 法优 选 薯 蓣 皂 苷 元 萃 取 条 件 研 究
王 凤 芝 荆 洪 英 孙 姝 岩 ， ，
（． １佳木斯大学 附属第一 医院 ， 黑龙江 佳木斯 １４ ０ ； ． 木斯市中医院 ， ５０ ２ ２ 佳 黑龙 江 佳木斯 １４ ０ ） ５０ ２
摘 要 目的 ： 为明确 薯蓣皂苷元的最佳提 取工 艺， 们采用超临界 ｃ ２ 我 ０ 萃取技术 ， 过正交试验优化 穿山龙 中薯 通
Ｒｅ ｕ ｔ Ｔ ｅ ｏ ｉ ｍ ｘｒ ｃ ｉｎ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓ ｗｅ ＿ ａ ｏｌ ｗｓ ｘｒ ｃ ｎ ｒ ｓ ｕ ｅ ３ ｓ ｌ ｈ ｐｔ ｓ： ｍｕ ｅ ｔａ ｔ ｏ ｄ ｔ ｎ Ｉ ｓ ｆｌｏ ：ｅ ｔａ ｔ ｇ ｐ ｅ ｓ ｒ ０ＭＰａ．ｅ ｔａ ｔ ｅ ｏ ｉ ｅ ｉ ｘｒ ｃｉ ｔｍ— ｎｇ ｐ ｒ ｔ ｒ ０ ｏ ，ｓ ｐａ ａｉ ｇ ｐ ｅ ｓ ｒ ａ，ｓ ｐａ ａｉ ｇ ｔ ｍｐ ｒ ｔｒ ０￣ ｅ ａ ｕ ｅ ５ Ｃ ｅ ｒ ｔｎ ｒ ｓ ｕ ｅ １ ＭＰ ３ ｅ ｒ ｔｎ ｅ ｅ ａｕ ｅ ４ Ｃ． Ｃｏ ｃｕ ｉｎｓ Ｔ ｅ Ｓ ｎ ｌ ｓｏ ： ｈ ＦＥ —ＣＯ２ ｅ ｔａ ｔ ｎ ｏ ｉ ｓ ｅ ｉ ｘ ｅｓ ｉ ｉ ｌ ｅ ｈ ｏ ｏ ｙ，ａ ｅ ｎ ｆ ｃｅ ｃ ． ｘ ｒ ｃ ｉ ｆｄ ｏ ｇ ｎ ｎ ｅ ｃ ｌ ｎ ｓｍｐ ｅ ｔ ｃ ｎ ｌ ｇ ｓ ｆｔ ａ ｄ ｅ ｉｎ ｙ ｏ ｙ ｉ
第２ ９卷第 ６期
２１ ０ ０年 ｌ ２月 ｄｉ１． ９９ ｊｉ ｎ １０ ９ ９ ．０ ０ ０ ． １ ｏ：０ ３ ６／．ｓ ．０６— ６Ｏ ２ １ ．６ ０ ６ ｓ
中 国 野 生 植 物 资 源
Ｃ ｉ ｅｅ 删 ｈｎｓ 尸 ｒ ｓ ｕ ｃ ｓ ｔ Ｒｅｏ ｒ ｅ ｔ
中药化学实验
中性药渣
自然晾干
干燥药渣
干燥药渣
置乳钵中研成细粉，置索氏提取器 中，以石油醚（60~90℃沸程）为 溶剂，连续回流提取4~5小时.
石油醚提取液
回收石油醚至剩10~15ml时， 迅速倾入小三角烧瓶中，放置 使充分冷却，过滤。
滤液
沉淀
用少量冷石油 醚洗二次抽干.
薯蓣皂苷元粗品
四、薯蓣皂苷元的鉴定
（1）化学检识： ①醋酐-浓硫酸反应（Libermann-Burchard反应） 取样品少许，置白瓷皿中，加冰醋酸0.5ml使 溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1 滴浓硫酸，液体则呈现紫红色，最后变成乌绿色。 ②氯仿-浓硫酸反应（Salkowski反应） 取样品少许，用1ml氯仿溶解，加入1ml浓硫酸 后，在硫酸层出现红或蓝色，氯仿层有绿色荧光出 现。
实验原理
提取原理：芦丁在冷热水中的溶解度差异 纯化原理：芦丁在冷热甲醇中的溶解度差异 制备原理：槲皮素为芦丁的苷元，因此可进 行酸水解得到槲皮素
[实验流程]
1、提取
槐米（20g）
加水煎煮两次，趁热过滤合并煎煮液
药渣
煎煮液
放置4~5h，抽滤
沉淀
自然干燥
粗品芦丁
2、精制
粗品芦丁
加甲醇15~20ml，水浴加热（空 气冷凝）溶解， 至无黄色物，趁 热过滤。
实验原理
提取原理：苦参生物碱有一定碱性，可与 酸结合成盐，因此采用酸水提取法。 纯化原理：总生物碱呈阳离子状态而被阳 离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后生物 碱游离以有机溶剂回流提取。 分离原理：利用总生物碱中氧化苦参碱在 乙醚中难溶而与其它生物碱分盐酸盐
渗漉液
通过装湿重60g（60ml）树脂的阳离 子交换树脂柱交换，交换速度1~2d/s。 注意测定不同交换时间pH值的变化。 （每隔15分钟）
穿山龙总皂苷提取方法研究
穿山龙总皂苷提取方法研究【摘要】目的探讨穿山龙中总皂苷的提取方法，为后续的提取工艺研究奠定基础。
方法以总皂苷含量和浸膏得率为指标，考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法，确定最佳提取方法。
结果超声提取法总皂苷含量8.67%，浸膏得率为3.66%；回流提取法总皂苷含量13.16%，浸膏得率为7.46%；索氏提取法总皂苷含量11.22%，浸膏得率为6.10%。
结论最佳提取方法为回流提取法。
【关键词】穿山龙；总皂苷；薯蓣皂苷元；提取方法穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣（dioscorea nipponica makino）的干燥根茎，味甘苦温，具有祛风湿，止痛，舒筋活血，止咳平喘祛痰功效[1]。
主治风湿性关节炎，筋骨麻木，大骨节病，跌扑损伤，慢性支气管炎、咳嗽气喘。
现代药理研究证明，其总皂苷类成分具有调节免疫、改善心血管功能、祛痰、抗肿瘤、抗炎镇痛等多种药理作用[2]。
穿山龙主要成分是甾体皂苷类，包括薯蓣皂苷（dioscin）、纤细皂苷（gracillin）和水溶性皂苷等[3]。
本品是近30年来从民间搜集而逐步广泛应用的，民间多用其浸酒或煎服，为治疗风湿病的三大常用药之一[4]。
有报道用穿山龙注射液治疗风湿和类风湿关节炎，有效率达89%[4]。
可见该药的用途是极其广泛的，开发利用穿山龙的前景广阔，因此其提取及含量测定的工艺方法至关重要。
本实验拟以总皂苷含量和浸膏得率为指标，考察超声提取法、回流提取法、索氏提取法，确定最佳提取方法。
为后续的单因素及正交相结合的方法确定穿山龙总皂苷最佳工艺研究奠定基础。
1材料与仪器穿山龙药材购于广州清平药材市场，经广东药学院中药鉴定教研室李书渊教授鉴定均为薯蓣科薯蓣属穿龙薯蓣（dioscoreanipponica makino）的干燥根茎。
uc-1800型紫外可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）；tc-15型恒温电热套（海宁市华星仪器厂）；dfy-400型摇摆式高速万能粉碎机（温岭市林大机械有限公司）；岛津ay120托盘电子分析天平；hh-6恒温水浴锅（江苏省金坛市宏华仪器厂）；上海亚荣生化仪器厂旋转蒸发仪。
薯蓣皂苷元的提取分离、检测方法及药理作用研究进展
薯 蓣 皂 苷 元 的提 取分 离 、 检 测方 法 及 药理 作 用 研 究进 展
盛芳 园， 何 忠梅 ， 陈 凯， 李成恩 ， 郜玉刚 ， 杨 鹤 ， 张连学
（ 吉林 农业 大学 中药材学 院 ， 吉林 长春 １ ３ ０ １ １ ８ ）
摘要 ： 薯蓣皂苷元是重要的医药化工原料， 在制药中应用广泛， 由于其较高的医用价值和经济价值而备受关注。文章对
时珍 国医国药 ２ ０ １ ３年第 ２ ４卷第 ４期
Ｌ Ｉ Ｓ Ｈ Ｉ Ｚ Ｈ Ｅ Ｎ Ｍ Ｅ Ｄ Ｉ Ｃ Ｉ Ｎ Ｅ Ａ Ｎ Ｄ Ｍ Ａ Ｔ Ｅ Ｒ Ｉ Ａ Ｍ Ｅ Ｄ Ｉ Ｃ Ａ Ｒ Ｅ Ｓ Ｅ Ａ Ｒ Ｃ Ｈ ２ ０ １ ３ Ｖ Ｏ Ｌ ． ２ ４ Ｎ Ｏ ． ４
ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈｅ Ｄｉ ｏ ｓ ｇ ｅ ｎｉ ｎ
Ｓ ＨＥＮＧ Ｆ ａ ｎ ｇ — ｙ ｕ ａ ｎ， ＨＥ ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ — ｍｅ ｉ ， ＣＨＥ Ｎ Ｋａ ｉ ， Ｌ Ｉ Ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ — ｅ ｌ ｌ ， ＧＡＯ Ｙｕ － ｇ ａ ｎ ｇ， Ｙ ＡＮＧ Ｈｅ， Ｚ ＨＡＮＧ Ｌ ｉ ａ ｎ— ｘ ｕ ｅ
Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ： Ｓ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ； Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ； Ｍｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｉ ｓ ｍ
穿山龙根茎叶不同生长期薯蓣皂苷元的含量测定
本实 验主要研 究Ａｓ ， 与ＤＤ 联合 治疗乳腺癌 裸 鼠 Ｏ Ｐ 移 植瘤 ， 果发 现 治疗 结 束 时联 合 用 药组 的抑 瘤 率为 结 ７ ．７ 明显高于单独 应用Ａ ， ， ６ ４ ％， ｓＯ 或ＤＤ 的抑瘤 率 ， 明 Ｐ 表
Ａｓ Ｏ 与ＤＤＰ联 合 应 用 有较 好 的 抗 人 乳 腺癌 细 胞 系 ， ＭＣ － 裸 鼠移植 瘤生长 的作用 。 Ｆ７ 电镜观察 发现 ， 合用 联 药 组 肿瘤 细 胞 呈典 型 的凋 亡形 态改 变 ， 明ＡｓＯ 与 表 ， Ｄ 联合 用药可 明显导致肿瘤 细胞 的凋亡 ， ＤＰ 从而抑 制肿
［． Ｊ 癌症 ，０ ２ ２ ， ）４ １ ４ ４ ］ ２ ０ ， １（ ：０ － ０ ． ４
（ 收稿 日期 ：０ ８ １ ０ ） ２ ０ －０ － ２
穿 山龙 根 茎 叶不 同生长期 薯 蓣皂 苷元 的含 量 测定
赵 春 颖 ， 继 铭 △ 刘 玉 翠 佟 ，
（ 承德 医 学院 中药 研 究所 ， 河北 承德
Ａ ｔ［ ．ｈ ｒ ｃ ｌ ｉｖ１９ ，０ １）１ １ －０ ４ ｖａＪ Ｐ ａｍａｏ Ｓｎ ９２ （１：０ ９ １２ ． ］ ９
［】 张兴 荣 ， ２ 蔡洪培 ， 邓志华 ， ． 等 三氧 化二 砷对 胃癌裸
鼠腹 腔 转 移 瘤 的 形 成 及 其 机 制 的 初 步 研 究 【 】 癌 Ｊ ．
ｈ ｍ ａ ｈ ｐａｏ ａｃ ｌ ｐ ｏ ｉｅ ａ ｏ ｎ ｄｒ ｄ ｆｅ ｅ ｔａｉｎ． ｕ ｎ ｅ ｔｍ ｅｌ ｒ ｌｆ ｒｔ ｎａ ｅ ｉｆ ｒ ｎｉｔ ｉ ｏ
不 可 逆性 肾 功 能损 害 及 严 重 的 胃肠 道 反 应 。 ， Ａｓ Ｏ 与
ＤＤ 联 合应用用于 乳腺癌 的治疗 尚未 见报道 ， Ｐ 本研 究欲 通 过Ａｓ ， 与ＤＤＰ 合应 用 的体 内实 验 ， Ｏ 联 探讨 ＡｓＯ 与 ， ＤＤ 联合 应用用于 治疗乳腺癌 的可行性 ， Ｐ 为筛选 与Ｄ Ｐ Ｄ 有效配 伍 的抗肿 瘤药 物提 供依 据 。
设计性试验 穿山龙薯蓣皂苷的提制和鉴识
设计性试验穿山龙薯蓣皂苷的提制和鉴识穿山龙为薯蓣科薯蓣属植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino的根状茎，又名穿龙薯蓣、野山药、串地龙，能舒筋活血，止咳化痰，祛风止痛。
中医用于腰腿疼痛、风湿关节痛、筋骨麻木、跌打损伤、气管炎、支气管炎。
穿山龙的有效成分主要是是甾体皂甙（薯蓣皂苷：dioscin C45H72O16；纤细薯蓣皂苷：gracillin C45H72O17）和水溶性皂苷。
其总皂苷含量在3%左右本实验经提取，可得到薯蓣皂苷。
他们的物理性质如下：薯蓣皂苷，白色粉末，熔点294～296℃，薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯，可溶于甲醇、乙醇、醋酸，微溶于丙酮、戊醇。
纤细薯蓣皂苷，白色粉末，熔点287～289℃(分解);298～302℃; 290～293℃。
纤细薯蓣皂苷不溶于水、石油醚。
一、实验目的1．掌握各种苷与苷元的分离纯化方法，包括水溶性苷与水难溶性苷分离，不同极性水难溶性苷的分离，水难溶性苷与苷元的分离。
2．学习苷与苷元的各种鉴识方法，包括：层析方法（TLC），沉淀反应等。
3．学习各种实验技能提取：超声提取分离：柱层析鉴识：层析法、化学法二、实验原理根据薯蓣皂苷不溶于水、石油醚、苯，可溶于甲醇、乙醇的特性，提取分离脂溶性总皂苷和水溶性蛋白质、多糖，利用薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷结构上的差别，用吸附柱层析分离二者。
本实验涉及的知识点有：溶剂提取法、色谱法等。
三、实验流程穿山龙药材总皂苷薯蓣皂苷四、实验步骤1.总皂苷的提取称取穿山龙药材200g ，研碎，量取80%乙醇溶液500mL ，浸泡20min,超声提取1h,T=70℃，减压抽滤至无醇味。
第二次提取，加400mL 乙醇，二次超声30min,减压抽滤至无醇味，合并滤液。
滤液用正丁醇萃取（50ml ×3），回收正丁醇，得穿山龙中总皂苷粗品。
2.总皂苷的分离（无水条件）干燥：烧杯（100ml,2个）、锥形瓶（500ml,1个、50ml,20个）、蒸发皿、玻璃棒（2支）、量筒（100ml,1个、10ml ，1个），色谱柱、滴管2支。
穿龙薯蓣皂苷的提取及其副产物的分离
穿龙薯蓣皂苷 的提取及 其副产物 的分离
袁 毅 ，张黎 明，王亮亮 ，马 妍
（ 天津科技 大学 生物 工程学 院 ， 天津市工业微生物重点实验室 ，天津 ３ ０ ５ ０４ ７） 摘 要： 采用改进后的“ 离法加工薯蓣植物” 分 分别得到 穿龙薯蓣水溶性皂苷及水不溶性皂苷 ， 同时分 离出淀粉及其 纤
（ ｏｌ ｅ ｆ ｉｔ ｈ ｏ ｇ， ｉ ｊ ｎｖｒｉ ｆ ｃ ｎ ｅ ｅｈ ｏｏｙ Ｔａｊ ｅ ａｏａ ｒ Ｃ ｌ ｇ ｏ ｃｎ ｌ ｙ Ｔａ ｉ Ｕ ｉ ｓ ｙ ｉ ｃ ＆Ｔ ｃ ｎｌｇ， ｉ ｉ Ｋ ｙ ｂ ｒｔ ｙ ｆ ｅ ｏＢ ｅ ｏ ｎ ｎ ｅ ｔ ｏＳ ｅ ｎｎ Ｌ ｏ ｏ Ｉｄ ｓ ａ Ｍｉ ｏｉｌ ， ｉ ｊ ０４ ７ Ｃ ｉａ ｎ ｕｔ ｌ ｃ ｂｏ ｇ Ｔａ ｉ ３ ０ ５ ， ｈｎ ） ｉ ｒ ｒ ｏ ｙ ｎ ｎ
穿 龙薯 蓣 （ ｏｃ ｒａｎ ｐ ｎｃ ｋｎ ，又 名 Ｄｉｓｏｅ ｉ ｏｉａＭａｉｏ） ｐ
酸液经碱 中和、 洗涤 、 干燥后用汽油或石油醚等有机 溶剂萃取药渣中的薯蓣皂苷元 ； 预发酵法是在常规酸 水 解 法前将 原 料 自然发 酵 ， 其余 步骤 同常规 水解 法．这些工艺的缺点是 ， 薯蓣根茎中的淀粉和部分纤
维普资讯
第２ ２卷 第 ３期 ２０ ０ ７年 ９月
天津科技大学学报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ ｉｎｉ ｎｖ ｒｉ ｆ ｃｅ ｃ ｏ ｒａ ａ ｊ Ｕ ｉｅｓ ｙｏ ｉｎ ｅ＆ Ｔ ｃ ｎ ｌｇ ｏＴ ｎ ｔ Ｓ ｅｈ ｏｏ ｙ
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薯蓣皂苷元的提取分离_检测方法及药理作用研究进展_盛芳园
近五年来薯蓣皂苷元的提取分离工艺、 检测方法及药理作用研究情况做以综述。
关键词： 分离工艺; 检测方法; 机理 DOI 标识： doi: 10． 3969 / j． issn． 10080805． 2013． 04． 069 0805 ( 2013 ) 04091404 中图分类号： Ｒ284． 2 文献标识码： A 文章编号： 100ZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 4
薯蓣皂苷元的提取分离 、 检测方法及药理作用研究进展
盛芳园， 何忠梅， 陈 凯， 李成恩， 郜玉刚， 杨 鹤， 张连学
*
（ 吉林农业大学中药材学院， 吉林 长春 130118 ） 摘要： 薯蓣皂苷元是重要的医药化工原料， 在制药中应用广泛， 由 于 其较 高 的医 用价 值 和经 济 价 值 而 备 受 关 注。 文 章对
Ｒesearch progress of the extraction separation， detection method and pharmacological action of the Diosgenin
yuan， mei， en， gang， xue SHENG FangHE ZhongCHEN Kai， LI ChengGAO YuYANG He ， ZHANG Lian*
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薯蓣皂苷元的提取、精制与鉴定
一、概述
穿山龙为薯蓣科穿龙薯蓣（Dioscorea nipponica Makino ）的干燥根茎。
具有活血化瘀、祛风除湿、清肺化痰等功效。
穿山龙中主要化学成分的结构及物理性质：
薯蓣皂苷（dioscin ）为无定形粉未或针状结晶，mp275～277℃。
可溶于甲醇、乙醇、甲酸，难溶于丙酮和弱极性有机溶剂，不溶于水。
薯蓣皂苷元（diosgenin ）为白色粉末，mp204～207℃，[]25
D α
-129。
（C ＝1.4三氯甲烷）。
可溶于有机溶剂及醋酸中，不溶于水。
薯蓣皂苷元 D －葡萄糖 L －鼠李糖
薯蓣皂苷
二、实验部分 （一）实验目的要求
1、掌握穿山龙中薯蓣皂苷元的提取和精制方法。
2、熟悉薯蓣皂苷及皂苷元的性质和检识方法。
（二）实验原理
薯蓣皂苷元在植物体内与糖结合成苷，经水解（酸水解、酶水解）可得薯蓣皂苷元和糖。
利用薯蓣皂苷元不溶于水，溶于有机溶剂的性质，用石油醚连续回流提取，将其从原植物中提取出来。
（三）实验药材、仪器与试剂 1、药材：穿山龙粗粉70g （每组）
2、仪器：电热套、圆底烧瓶、冷凝管、纱布、乳钵、PH 试纸、烘箱、试管、
HO
O
O
H O
CH 3OH
OH OH
O
OH
OH
OH CH 2OH
H,OH
H,OH
+
+
O O
O O O CH 3
OH OHOH OH
CH 2OH O CH 3
OH OHOH
O O
H +
水浴锅、索氏提取器等。
3、试剂: 浓H2SO
4、Na2CO3粉末、蒸馏水、95%乙醇、1%磷钼酸乙醇溶液、石油醚（60-90℃）、醋酐、浓硫酸、三氯甲烷、浓硫酸等。
（三）实验内容
1、薯蓣皂苷元的提取、分离和精制
穿山龙粗粉（70g）
置圆底烧瓶中，加水350ml、浓H2SO430ml，
室温浸泡24小时，文火加热回流4～6小时，
放冷，倾出酸水液
酸性药渣
用清水反复漂洗除去余酸，然后将药渣倒入
乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研
磨调PH至中性（用PH试纸测试）、水洗、抽干
中性药渣
低温（80℃）干燥12小时
干燥药渣
置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中，
以石油醚（60-90℃）150 ml为溶剂，连
续回流提取4-5小时
10-15ml，迅速倾入
48h），抽滤
用少量冷石油醚洗二次，抽干
薯蓣皂苷元粗品
置圆底烧瓶中，加50ml甲醇，在沸水浴上加热回流至
完全溶解，趁热抽滤，滤液放入冰箱析晶。
薯蓣皂苷元精品
2、鉴定
（1）检识反应
①醋酐－浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）
取样品适量，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边沿滴加1滴浓硫酸，观察并记录现象。
②三氯甲烷－浓硫酸反应（Salkowski反应）
取样品适量，加三氯甲烷1ml使溶解，沿试管壁加等量的浓硫酸，分别置可见光及紫外灯下，观察并记录现象。
（2）薄层色谱鉴定
吸附剂：硅胶G-CMC-Na薄层板
样品：1%自制薯蓣皂苷元的乙醇液
对照品：1%薯蓣皂苷元标准品的乙醇液
展开剂：苯-乙酸乙酯（8:2）
显色剂：1%磷钼酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。
实验结果记录：观察斑点颜色，记录图谱并计算Rf值。
（四）实验指导及注意事项
1．原料经酸水解后应充分洗涤呈中性，以免烘干时炭化。
2．在干燥水解原料的过程中，应注意压散团块和勤翻动，以利快干。
3．在连续回流提取过程中，由于使用的石油醚极易挥发损失，故水浴温度不宜过高，能使石油醚微沸即可。
此外可加快冷凝水的流速，以增加冷凝效果。
4．回收石油醚的蒸馏操作，不必另换蒸馏装置。
只将索氏提取器中的滤纸筒取出，再照原样装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待溶剂液面增加至高虹吸管顶部弯曲处1cm处，暂停回收，取下提取器，将其中石油醚移置另外容器中，如此反复操作，即可完成回收石油醚的操作。
5．在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取提取器中提取液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂，观察有无残留物，然后进行醋酐－浓硫酸反应。
若反应呈阴性，示已提尽。
（五）思考题
1．甾体皂苷可用哪些反应进行鉴定？
2．试设计一种从穿山龙中提取薯蓣皂苷的工艺流程，并说明提取、分离原理。
3．使用石油醚作提取溶剂时，操作中应注意哪些事项？。