土壤中性磷酸酶(S-NP)活性测定试剂盒说明书
土壤中性转化酶(S-NI)活性检测试剂盒 微量法
土壤中性转化酶（S-NI）活性检测试剂盒微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC4045规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，4℃保存，10mg无水葡萄糖。
临用前加入1mL试剂一溶解,制备10mg/mL葡萄糖标准液备用。
产品简介：S-NI在中性条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。
S-NI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与NI活性成正比。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水、50目筛（或更小）、甲苯。
操作步骤：一、样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤及加样表：1、分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至540nm，蒸馏水调零。
2、标准液的稀释：将10mg/mL葡萄糖标准液用试剂一稀释至0.4、0.3、0.2、0.1、0.08、0.06、0.04mg/mL 的葡萄糖标准溶液备用。
3、加样表：试剂名称测定管对照管标准管空白管土样（g）0.020.02--试剂一（μL）-160-160试剂二（μL）160---标准液（μL）--160-甲苯（μL）4444混匀，37℃准确水浴1h后，煮沸10min左右（盖紧，以防止水分散失），流水或冰浴冷却后充分混匀（以保证浓度不变），10000rpm，常温离心10min，取上清。
上清液（μL）140140140140试剂三（μL）60606060混匀，煮沸10min左右（盖紧，以防止水分流失），流水冷却后充分混匀，540nm处蒸馏水调零，记录各管吸光值A，记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4025规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明：S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。
S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器：天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛（或更小）。
操作步骤：一、样本处理土样自然风干，过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。
2、加样表：测定管对照管土样（g）0.030.03甲苯（μL）1515震荡混匀，室温静置15min。
试剂一（μL）255255试剂二（μL）30-30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。
流水冷却至室温。
试剂二（μL）-3014000g常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式（1）按微量比色皿计算：酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性（U/g）=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。
ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10-4L；W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4028
土壤β-木糖苷酶（S-β-XYS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：UPLC-MS-4028规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体3mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四液体60mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：甲苯自备。
2、试剂三：临用前取1瓶加入10mL蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存4周。
3、标准品：5mmol/L的对硝基苯酚溶液。
产品说明：β-木糖苷酶（EC3.2.1.37，β-XYS）存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。
另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在400nm处有特征吸收峰，测定400nm光吸收增加速率，可计算S-β-XYS活性。
S-β-XYSP-Nitrophenol-β-D-Xyloside P-Nitrophenol（400nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min，波长调至400nm，蒸馏水调零。
2、标准溶液的稀释：临用前取20μL5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL试剂二，充分混匀，配制成100μmol/L标准液使用，现用现配。
土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0270规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用；试剂四：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体2mL×1支，0.2μmol/mL酪氨酸溶液，4℃保存。
产品说明：土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。
土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。
中性条件下，土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿、蒸馏水、50目筛（或更小）。
样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
操作步驟：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、样本测定：第1页，共2页试剂名称测定管对照管标准管空白管风干土样（g）0.10.1--试剂一（μL）100100--试剂二（μL）200----混匀后，37℃反应24h，期间振荡5-6次，使土样与反应液充分接触。
试剂三（μL）200200--试剂二（μL）-200--混匀，10000rpm室温离心10min，取上清液--上清液（μL）220220--标准液（μL）--220-蒸馏水（μL）---220试剂四（μL）650650650650试剂五（μL）130130130130混匀，40℃水浴10min，10000rpm室温离心10min，取上清液于680nm下读取各管吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
【精品】土壤磷酸酶活性的测定
【关键字】精品土壤磷酸酶活性的测定【摘要】在植物的土壤磷素营养中，有机磷化合物占有一定的比例，而有机磷往往要在土壤磷酸酶的酶促作用下，才能转化成为植物可能利用的形态。
所以，土壤磷酸酶的活性直接影响土壤中磷的有效性。
研究土壤的磷酸酶活性，对于弄清土壤中磷的转化过程、方向及强度具有重要意义。
磷酸酶根据PH不同，分为酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和中性磷酸酶。
本文主要讲述磷酸酶的活性的测定。
【关键词】土壤磷酸酶活性碱性磷酸酶活性酸性磷酸酶活性中性磷酸酶活性pH5醋酸盐缓冲液pH7柠檬酸盐缓冲液pH9.4硼酸盐缓冲液标准曲线的测定酸性磷酸酶标准曲线的测定碱性磷酸酶标准曲线的测定中性磷酸酶标准曲线的测定【正文】在植物的土壤磷素营养中，有机磷化合物占有一定的比例，而有机磷往往要在土壤磷酸酶的酶促作用下，才能转化成为植物可能利用的形态。
所以，土壤磷酸酶的活性直接影响土壤中磷的有效性。
研究土壤的磷酸酶活性，对于弄清土壤中磷的转化过程、方向及强度具有重要意义。
1.酸性磷酸酶活性的测定（一）实验原理本法基于以磷酸苯二钠为基质，酶解释放出的酚，使其与氯代二溴对苯醌亚胺试剂反应生色。
用比色法测定出游离的酚量，用以表示酸性磷酸酶活性。
（二）试剂配制（1）0.5％磷酸苯二钠（用缓冲液配制）；（2）pH5醋酸盐缓冲液；（3）氯代二溴对苯醌亚胺试剂：取0.125g 2,6-二溴苯醌氯酰亚胺，用10mL 96％乙醇溶解，贮于棕色瓶中，存放在冰箱里。
保存的黄色溶液未变褐色之前都可使用；（4）酚的标准溶液：酚原液——取1g重蒸酚溶于蒸馏水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中；酚工作液——取10mL 酚原液稀释至1L（每毫升含0.01毫克酚）；（5）甲苯；（6）0.3％硫酸铝溶液。
（三）实验步骤（1）标准曲线绘制取1、3、5、7、9、11和13mL酚工作液，置于50mL容量瓶中，每瓶加入5mLpH5醋酸盐缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂，显色后稀释至刻度，即得0.0002、0.0006、0.0010、0.0014、0.0018、0.0022和0.0026mg·g-1浓度的酚标准溶液梯度。
土壤纤维素酶活性测定试剂盒说明书(分光光度法)使用说明
土壤纤维素酶活性测定试剂盒说明书(分光光度法)货号:BC0150规格:50管/24样产品说明：S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
试剂组成：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml 蒸馏水溶解，配制成10mg/ml葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/ml。
加样表和测定步骤：对照管测定管标准管风干土样（g）0.250.25-试剂一(μL)125125-煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min-试剂二（μL）250250-试剂三（μL）10001000-蒸馏水（μL）250250-振荡混匀，40℃水浴糖化1h后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）,得糖化液糖化液(μL)505050试剂四(μL)150150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却蒸馏水（μL）105010501050混匀，540nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值A。
以浓度（y）为纵坐标，吸光度A（x）为横坐标建立标准曲线。
活力计算：根据标准曲线，将ΔA带入公式中（x）计算样品浓度y（mg/mL）。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（U/g）＝y×V反总÷W÷T=156×yT：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：1.625mL；W：样本质量，0.25g。
土壤纤维素酶活性测定试剂盒说明书
货号：QS2936 规格：50管/24样土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理：
采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存；
加样表和测定步骤：
第1页，共2页
混匀，550nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。
S-CL活力计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 0.3356x - 0.012；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.012) ÷0.3356×V反总÷W÷T =465×(ΔA+0.012)
T：反应时间，1h=1/24d； V反总：反应体系总体积：1.625mL；W：样本质量，0.25g。
第2页，共2页。
中性、碱性土壤速效磷含量检测试剂盒说明书 微量法
中性、碱性土壤速效磷含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2965规格：100T/96S产品内容：提取液：液体125mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入5mL双蒸水，溶解后4℃保存一周。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加入5mL双蒸水，溶解后4℃保存一周。
试剂三：液体5mL×1瓶，室温保存。
标准品：10μmol/mL标准磷贮备液1mL×1支，4℃保存。
工作液：35mL棕色空瓶×1瓶。
O：试剂一：试剂二：试剂三=2:1:1:1的比例配制，配好的工作液应为工作液（定磷剂）的配制：按H2浅黄色。
若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、一部分微溶性的无机磷和易矿化的有机磷等，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
用弱碱法提取酸溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质，通过测定660nm 光吸收，即可计算磷含量。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、20目筛、漩涡震荡仪、EP管、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理：新鲜土样风干，过20目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：10-20的比例（建议称取约0.05g 土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g，25℃离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。
2、将10μmol/mL标准液用提取液稀释为6、4、2、1、0.5、0.25μmol/mL的标准溶液备用。
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货号：MS2901 规格：100管/96样土壤中性磷酸酶（S-NP）活性测定试剂盒说明书
微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
土壤磷酸酶是催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。
磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的显著影响，根据最适PH范围，一般把土壤磷酸酶分为中性、酸性和碱性三种类型。
测定原理：
中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出NP活性。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
用前加100mL蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1支，4℃避光保存。
临用前加576μL无水乙醇（自备），24μL蒸馏水充分溶解。
（变褐色后不能再使用）
标准品：液体×1支，0.5 μmol/mL酚标准液，4℃保存。
催化反应：
称取风干混匀土壤约0.1g，加入50μL甲苯（自备），轻摇15min；加400μL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。
8000g，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。
显色反应：
1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。
2. 空白管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10μL蒸馏水，20μL试剂三，4μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后25℃静置30min，于660nm测定吸光度，记为A 空白管。
3. 标准管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10μL标准液，20μL试剂三，4μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后25℃静置30 min，于660nm测定吸光度，记为A 标准管。
4. 测定管：取微量玻璃比色皿/酶标板，加入10μL上清液，20μL试剂三，4μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水166μL，混匀后室温25℃30 min，于660nm测定吸光度，记为A 测定管。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
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S-NP活性计算：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放1nmol酚为1个酶活单位。
S-NP（nmol/d/g 干重）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W÷T
= 725×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷W
b.使用96孔板测定的计算公式如下
活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放1nmol酚为1个酶活单位。
S-NP（nmol/d/g 干重）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总÷W÷T
= 725×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷W
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