英骏载体引物对照表
载体通用引物序列
5'-GGC AAC TAG AAG GCA CAG TC-3'
PCDNA3.1F
5'-CTA GAG AAC CCA CTG CTT AC-3’
PCDNA3.1R
5'-TAG AAG GCA CAG TCG AGG-3’
pCEP Frorward
5'-AGC AGA GCT CGT TTA GTG AAC CG-3'
P31430
5'-CGT TTT AAAACCTAAGAGTCAC-3'
P12584
5'-TTT TCA GTA TCT ACG AT-3’
P17110
5'-TAC CAC TAC AAT GGA TG-3’
PAS2-1F
5'-TCA TCG GAA GCG AGT AG-3'
PAS2-1R
5'-CGT TTT AAA ACC TAA GAG TCA C-3'
PQE30R
5'-GTT CTG AGG TCA TTA CTG G-3'
pTARGET-SEQ
5'-TTA CGC CAA GTT ATT TAG GTG ACA-3’
PTRC99C-F
5'-TTG CGC CGA CAT CAT AAC-3’
PTRC99C-R
5'-CTG CGT TCT GAT TTA ATC TG-3’
PEGFP-C-3’
5'-TAT GGC TGA TTA TGA TCA GT-3'
PEGFP-C-5’
5'-CAT GGT CCT GCT GGA GTT CGT G-3'
引物合成订购表模板-zhaxi
提拱量 (O.D)
分装要求 纯化方式
3'末端修饰
5'末端修饰
其他修饰
备注
目的基因
申请人
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共7页，第5页
共7页，第6页
共7页，第7页
ID*
Primer名称
序列(5'to3')
IL33F1 IL-33R1 IL-33F2 IL33R2
Hale Waihona Puke CGCTCGGTCCCGCCTTGCAA TTCCCCTGCGGTGCTGCTGA GAGTTCCATCAAAGACACAGACAT ATGTTCACCATCAGCTTCTTCCCA
共7页，第1页
共7页，第2页
英骏生物技术有限公司引物合成订购表
订购日期: 客户姓名: 客户单位： 发票抬头： 客户地址： 客户电话： 客户Emial： *包装要求： *订单类别 *客户ID： *订单号：
査希 苏州大学生物医学研究院熊思东实验室 苏州大学 苏州市工业园区仁爱路199号，苏州大学独墅湖校区703号楼3305室 18862131525 charcy.529@
共7页，第3页
上海英骏生物技术有限公司 上海合成部：synsh@ 北京合成部：synbj@ 客户服务部服务电话：8008208181 订单要求： 1.此表格仅针对E-mail订单使用，传真订单请勿使用。 2.因此订单是电脑自动处理，订单发送前请仔 细核对信息, 订单接收4小时后将不能再更改 。
客户送样登记表上海英骏生物技术有限公司-ThermoFisherScientific
*为必填测序服务客户送样登记表(生产填写)订单号
测序引物备注：1.如用他人引物，请注明他人姓名及引物名称；2.如片断长度大于800，仅填写“通用引物”但没有选择测通，默认两个反应3．自备引物如为插入片断中序列，请备注说明。
需合成测序引物信息（g小写，C/T/A字母大写；长度在17-25之间）：
引物名称引物序列
引物名称引物序列
引物名称引物序列
引物名称引物序列
客户签字确认/日期：取样员签字/日期：
测序样品送样要求
友情提醒：1. 所有样品和引物均保存1个月，超过期限恕不提供加测以及返还服务。
2. 投诉期为一个月，如果对测序结果有任何异议，请及时联系；超过期限恕不接受。
3. 一般情况下：菌液和PCR未纯化48小时内完成测序，质粒和PCR已纯化24小时内完成测序。
载体与引物表1
Psiren-shuttle pSUPER pTRE2 PtriEX-1 pTrcHisA pTRC99a-c pTARGET TM Ptriplex2
Psiren-shuttle.F T7 pTRE2-F T7 F pTRC99C-F pTarget.F(在T7前面）/T7 T7 T3 pTRE2.R Ptriex-1.R R pTRC99C-R pTarget.R P11751
T3 T3 M13R PYES2.R SP6 p3XFlag-R(没有） AD) BD) BD) pACT2.R P31430 pAS2-1.R pB42ADR BAC2
pBR322.R在客户没有确认情况下不能用 pBR328.R在客户没有确认情况下不能用
TRXF 35S-P. 3' P17110 P10 pAD-GAL4-2.1.R P20
pBV220 PCANTB5E pcDNA3.0 pcDNA3.1 pcDNA4 pShuttle-CMV
pShuttle (stratagene公司)
PBV220F S1/M13R CMV-F/T7 pcDNA3.1-F/pcDNA3.1F/T7 T7/CMV-F(在T7前面） CMV-F pShuttle-F pCEP-F pCMV-F T7 T3 /PFLAG-CMV-F pCMV-F Pcmv5f Pcmv5f P1 M13R(-48) pEGFP-N1-5' pEGFP-N-5’ pEGFP-N-5’ pEGFP-N-5’ pEGFP-C-5’
PBV220R S6 BGH/SP6 pcDNA3.1R BGH pShuttleCMV.R 无反向引物 EBV-R pCMV-R SP6/M13R T7 pCMV-R Pcmv5r Pcmv5r P2 M13F(-47) pDSRED-N1-R pEGFP-N-3’ pEGFP-N-3’ pEGFP-N-3’ pEGFP-C-3'
载体及其上下游引物
载体名称上游引物（5'primer）下游引物（3'primer）P3*FLAG-CMV CMV-30(825-854)CMV-24(1129-1152)pAc5.1/V5-His(_A,_B,_C) pAc5-5 BGH revpAcG2T pGEX-5 not availablepACT T7EEV T3/EBVrevpACT2GAL4 ADfor pGAL4-ADrvpACT2p17110p12584pACYC184(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBampACYCDuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1 Primer DuetDOWN1 pACYCDuet-1(MCSII) DuetUp2 T7-TerminatorpAdEasy-1 not available not availablepAdTrack-CMV not available not availablepAS2-1GAL4 Bdfor/P24990pGAL4-BDrv/P31430pB42AD pB42ADF PB42ADRpBABE pBMN_5' pBacPAK8BAC1BAC2pBAD pBAD-F pBAD-RpBAD/HisABC pBAD-5' pBBR1MCS T3/M13rev T7/M13forpBD-GAL4pBD-GAL4-F PBD-GAL4-RpBI12135S NOSpBIND GAL4-Bdfor T3,EBVrevpBK-CMV M13F/T7M13R/T3 pBluescriptIIKS(+/-) T3/M13rev T7/M13for（优先用M13F）pBluescriptIISK(+/-) T3/M13rev T7/M13for pBluescriptKS(+/-) T3/M13rev T7/M13for pBluescriptSK(+/-) T3/M13rev T7/M13forpBR322(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBampBR322(EcoRI/HindIII-sites) pBRforEco pBRrevHindpBR325(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBampBR329(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBampBridge(MCSI) GAL4-Bdfor3'BDpBridge(MCSII) not available not availablepBS-T II T3/M13rev T7/M13forpBS（AMP）T7T3pBSR T3T7terpBudCE4.1(MCSI) CMV-Profor,T7 c-mycrev,EBVrevpBudCE4.1(MCSII)EF-1α Fwd BGHpBudCE4.1/lacZ/CAT CMV-Profor,T7 c-mycrev,EBVrevpBV220pBV220F PBV220RpCAL-c T7/Tac-Profor T7-TerminatorpCAL-n T7/Tac-Profor T7-Terminator pCAMBIA1301(1300)pCAMBIA1301-5'(ECORI)/M13R pCAMBIA1301-3'(HindIII) pCAMBIA1304pCAMBIA1301-5'(ECORI)pCAMBIA1301-3'(HindIII) pCAMBIA2300M13R(-48)M13F(-47)/M13F(-49) pCANTB5E S1S6pCAT3-enhancer RVP3此载体无反向引物pCDFDuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1 Primer DuetDOWN1 pCDFDuet-1(MCSII)DuetUP2T7TERpcDNA1.1 CMV-Profor,T7 pCDM8-3pcDNA2.1 M13for/T7 M13rev/Tac-Profor pcDNA3 T7/CMV-Profor BGH rev/SP6pcDNA3.1(+/-) pcDNA3.1F/T7/CMV-Profor BGH revpcDNA3.1/His(_A,_B,_C) T7/CMV-Profor BGH revpcDNA3.1/myc-His(_A,_B,_C) T7/CMV-Profor BGH rev/c-mycrev pcDNA3.1/V5-His(_A,_B,_C) T7/CMV-Profor BGH rev/V5revpcDNA3.1/Hygro(+,-) T7/CMV-Profor BGH rev/V5revpcDNA3.1/Zeo(+.-) T7BGHrevpcDNA3.3TOPOTA CMV-Profor TKPAreversepcDNA4/HisMax(_A,_B,_C) Xpressfor BGH revpcDNA4/HisMax-TOPO Xpressfor BGH revpcDNA4/HisMax-TOPO/lacZ Xpressfor BGH revpcDNA4/myc-His(_A,_B,_C)T7,CMV-Profor BGH rev,c-mycrev pcDNA4/TO TREfor/CMV-Profor BGH revpcDNA4/V5-His(_A,_B,_C) CMV-Profor,T7 BGH rev,V5revpcDNA4-TET/ON/AMP+CMV-Profor pcDNA5/FRT T7/CMV-Profor BGH revpcDNA6/myc-His(_A,_B,_C) CMV-Profor,T7 BGH rev,c-mycrev pcDNA6/V5-His(_A,_B,_C) CMV-Profor,T7 BGH rev,V5revpCEP4pCEP-F/CMV-Profor EBVrevpCI T7（17BASE） EBVrevpCI-neo T7（17BASE） EBVrev,T3pCMS-EGFP T7 T3pCMS-EGFP T7 EBVrev,T3pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7pCMV5pCMV5F PCMV5RpCMV6 CMV-Profor pCMV6-3、HGHrev pCMV6-XL4 CMV-Profor/T7 pCMV6-3、HGHrev pCMV-HA PCMV-F,CMV-Profor,TREfor PCMV-R，EBVrev pCMV-MYC(AMP+)PCMV-F PCMV-R, EBVrev pCMVmyc/nuc CMV-Profor BGH rev,c-mycrevpcmv-scriptEXVector T3 T7pCMV-Sport6 T7/M13for SP6/M13rev pCOLADuet-1(MCSI)ACYCDuetUP1 Primer DuetDOWN1pCOLADuet-1(MCSII)DuetUP2T7TERpCR2.1 T7,M13for M13revpCR2.1-TOPO M13for,T7 M13revpCR3.1 T7 BGH revpCR3.1-Uni T7 BGH revpCR4 T3/M13rev T7/M13forpCR4-Blunt T3/M13rev T7/M13forpCR4-TOPO M13rev,T3 M13for,T7pCR-Blunt M13rev T7,M13forpCR-BluntII M13rev/SP6 T7/M13forpCR-BluntII-TOPO M13rev/SP6 M13for/T7pCRII M13rev/SP6 T7/M13forpCRII-TOPO M13rev/SP6 M13for/T7pCR-ScriptSK(+) T7/M13for T3/M13revpCR-XL-TOPO M13rev T7,M13forpCS2+(MCSI) SP6 EBVrev,T7?pCS2+(MCSII) T3 pSG5-3pDB_GAL4cam T7P pDB_leu PDBLeu-5 PDBLeu-3pDEST22DEST22F DEST22RpDEST15 pGEX-5 T7-TerminatorpDEST20 pGEX-5 pFastBac-3pDEST26 TREfor/CMV-Profor T7/M13forpDisplay T7/CMV-Profor c-mycrevpDNR-LIB(MCS_A) M13for,T7 pSG5-3,M13RpDonar M13F M13RpDONR201PDONR-F PDONR-RpDONR207PDONR-F PDONR-RpDONR223M13F M13RpDrive T7/M13rev SP6/M13forpDsRED1-C1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-rpDsRed1-N1 CMV-Profor RFP-Nrev,CMV-R? pDsRed2-N1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-rpDsRed2-C1(DsRed1-N-f)DsRed1-C-rpDsRED2-C1(KAN+)pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’pDsRed-Express dsRed1_N_primer/CMV-F dsRed1_C_primer/CMV-R pDSRED-monomer-N1(KAN+)dsRed1_N_primer pDSRED-N1(KAN+)pEGFP-N-5’ pDSRED-N-RpEASY-Blunt M13F T7/ M13RpEASY-BluntSimple M13F T7/ M13R（距离插入位点合适，优先安排）pEASY-T1 Simple M13F M13R（距离插入位点合适，优先安排）pEASY-T1M13F/T7M13RpEASY-T3M13F/T7M13R/SP6pECFP-N(C)PECFP-N-5.PECFP-N-3,pEF/myc/cyto/ER/mito/nuc pEF-5Pcdna3.1R/BGH revpEF1(4,6/myc-His) T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH revpEF1(4,6/V5-His) T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH revpEF1(4;6/His_A;_B;_C) T7/Xpressfor Pcdna3.1R/BGH revpEF5/FRT/V5-D(-TOPO) T7/pEF-5Pcdna3.1R/BGH rev pEGFP M13rev EGFP-NrevpEGFP-1 not available EGFP-Nrev/ PEGFP-N-3′pEGFP-C PEGFP-C-5′PEGFP-C-3′pEGFP-C1 EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-C2 EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-C3 EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-F EGFP-Cfor SV40-pArevpEGFP-N PEGFP-N-5′PEGFP-N-3′pEGFP-N1 CMV-Profor EGFP-NrevpEGFP-N2 CMV-Profor EGFP-NrevpEGFP-N3 CMV-Profor EGFP-NrevpENTR M13F M13RpET-11(-a,-b,-c,-d) T7 T7-TerminatorpET-12(-a,-b,-c) T7 T7-TerminatorpET-14b T7 T7-TerminatorpET-15b T7 T7-TerminatorpET-16b T7 T7-TerminatorpET-17b T7 T7-TerminatorpET-17xb T7 T7-TerminatorpET-19b T7 T7-TerminatorpET-20b(+) T7 T7-TerminatorpET-21(-a,-b,-c,-d)(+) T7 T7-TerminatorpET-22b(+) T7 T7-TerminatorpET-23(-a,-b,-c,-d)(+) T7 T7-TerminatorpET-24(-a,-b,-c,-d)(+) T7 T7-TerminatorpET-25b(+) T7 T7-TerminatorpET-26b(+) T7 T7-TerminatorpET-27b(+) T7 T7-TerminatorpET-28a(-b,-c)(+) T7 T7-TerminatorpET-29a(-b,-c)(+)S.tag/T7 T7-TerminatorpET-3(-a,-b,-c,-d) T7 T7-TerminatorpET-30_Ek/LIC T7 T7-TerminatorpET-30_Xa/LIC T7 T7-TerminatorpET-30a(-b,-c)(+)S.tag/T7 T7-TerminatorpET-31b(+) not available T7-TerminatorpET-32_Ek/LIC TRXfor T7-Terminator pET-32_XA/LIC TRXfor T7-Terminator pET-32a(-b,-c)(+)S.tag/TRXfor T7-Terminator pET-33b(+) T7 T7-Terminator pET-34b(+)S.tag T7-Terminator pET-35b(+)S.tag T7-Terminator pET-36b(+)S.tag T7-Terminator pET-37b(+)S.tag T7-Terminator pET-38b(+) not available T7-Terminator pET-39b(+)S.tag T7-Terminator pET-40b(+)S.tag T7-Terminator pET-41_Ek/LIC GST-Cfor T7-Terminator pET-41a(-b,-c)(+) S.tag/pGEX-5 T7-Terminator pET-42a(-b,-c)(+)S.tag/pGEX-5 T7-Terminator pET-43.1a(-b,-c)(+)S.tag coliDOWNpET-43.1a_EK/LIC S.tag not availablepET-44a(-b,-c)(+)S.tag T7-Terminator pET-44a_EK/LIC S.tag not availablepET-45b(+) T7 T7-Terminator pET-46_Ek/LIC T7 T7-Terminator pET-5(-a,-b,-c) T7 T7-Terminator pET-52b(+) T7 T7-Terminator pET-7 T7 T7-Terminator pET-9(-a,-b,-c,-d) T7 T7-Terminator pETcoco-1 T7 T7-Terminator pETDuet-1(MCSI)pETUP1DuetDOWN1 pETDuet-1(MCSII)DuetUp2T7-Terminator pET-T4 T7 T7-Terminator pEYFP-C1pEGFP-C-5’ pEGFP-C-3' pEYFP-N1pEGFP-N-5’,CMV-Profor pEGFP-N-3’ pFLAG-ATS N26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG-CTC N26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG1N26for pTrcHis-rv；C24rev pFLAG-CMV(-2)CMV-30；CMV-Profor CMV-24pFLAG-CMV1CMV-30CMV-24pGAD424GAL4_ADfor3'ADpGADGH GAL4_ADfor3'ADpGADT7T7/GAL4_ADfor3'ADpGADT7-Rec T7/GAL4_ADfor3'ADpGADT-T T73,BDpGAD10GAL4_ADfor3'ADpGAPZa-A a-FACTOR3'AOXpGBKT7T73,BDpGBT9MATCHMAKER5'DNA-BD/GAL4BD MATCHMAKER3'DNA-BDpGEM-1 T7 SP6pGEM-3 T7 SP6pGEM-3Zf(+)(-) SP6/M13rev T7/M13for pGEM-4 T7 SP6pGEM-4Z T7/M13for SP6/M13rev pGEM-5Zf(+)(-) SP6/M13rev T7/M13for pGEM-7Zf(+)(-) SP6/M13rev T7/M13for pGEM-9Zf(+)(-) T7/M13for SP6/M13rev pGEM-T T7/M13for SP6/M13rev pGEM-T_Easy T7/M13for SP6/M13rev pGene/V5-His_A(_B,_C) pGENE-5 BGH rev,V5rev pGEX-2T pGEX-5 pGEX-3 pGEX-2TK pGEX-5 pGEX-3 pGEX-3X pGEX-5 pGEX-3 pGEX-4T-1(-2,-3) pGEX-5 pGEX-3 pGEX-5X-1(-2,-3) pGEX-5 pGEX-3 pGEX-6P-1(-2,-3) pGEX-5 pGEX-3pGL2GLP1 GLP2pGL3RVP3GLP2(RVP4)(没有特别说明用GLP2)pGL3-Basic(MCSI) RVP3(PGL3+)? GLP2(PGL3-)?pGL3-Basic(MCSII) RVP4, PLXSN-3'?pGL4 pGlow(-TOPO) T7 pGlow-3pGM-T T7SP6pGWC SP6T7pHook-2 T7/CMV-Profor not availablepIND/V5-His_A(_B,_C) not available BGH rev,V5rev PinpointTMVector PinpointPrimer SP6pIRES(MCSI) T7 pIRES-3pIRES(MCSII) not available T3,EBVrevpIRES2-EGFP CMV-Profor,pIRES2-EGFP.P5’ IRESrev,pIRES2-EGFP.P3’pIRES-hrGFP-2a CMV-Profor,T3 pIRES-hrGFP-3 pIRESneo2 T7/CMV-Profor pIRES-3pIVEX(all) T7/pBRrevBam T7-TerminatorpLEXA pLEXA-F pLEXA-RpLNCX pLNCX-F pLNCX-RpLNCX2CMV-Profor pRevTRE-3pLVTHM（H1启动子下游）H1primer SP6pLXSN pLXSN-F pLXSN-RpMALc MalE primer M13F(-47)pMAL-c2E MalE primer M13F(-47)pMAL-C2x Pmal-c2x-F(P5’)Pmal-C2X-R(P3’ ) pMALd MalE primer M13F(-47)pMALe MalE primer M13F(-47)pMAL-P4X MalE primer M13F(-47)pMAL-p2X MalE primer M13F(-47)pMET A/B/C AUG1F AUG1RpMD18-T M13R(-48)ECORI M13F(-47)(HINDⅢ) pMD19-T M13F47M13R48pMD20-T M13F47M13R48 pMOSBlue T7/M13rev M13forpMSCV-puro pLXSNfw pMSCVrevpMT/V5-His_A(_B,_C) Mtfor BGH rev,V5rev pNTAP T3T7pCTAP pCTAP5'primer T7pOTB7 M13rev/T7 M13for/SP6 pOptiVEC-TOPO TA CMV-F/CMV-Profor EMCVIRES reverse pPC86PPC86-F PPC86-RpPC97PBD-GAL4-F PBD-GAL4-RpPIC3.5K5'AOX3'AOXpPic9k(A+,Z+)5’AOX(Ppic9k-f)/a-factor3’AOX(Ppic9k-R) pPICZa5'AOX/PPICZa-F3'AOX pPROEXHTA M13R(-48)无反向引物pProEX-HTa(b,c)M13R48/ Tac-Profor pBADrv/pTrcHis-3 pPD129.36 M13F20/M13FpQE30or40or60(AMP+)PQE30-F PQE-30RpRC/CMV2/CAT CMV/T7 pRECEIVER CMV-F 此载体无反向引物pRECEIVER-M03pRECEIVER-M03F pRECEIVER-M03R pREP4pREP4 forward primer EBV reverse primer pRK5 SP6 pSG5-3pRSET T7/Xpressfor T7terpRSFDuet-1(MCSI)DuetUP1DuetDOWN1 pRSFDuet-1(MCSII)DuetUP2T7TERpSecTac2 T7/CMV-Profor BGH rev/c-mycrev pSG5 pSG5-5,/T7PSG5-R(SV40) pSHlox1 T7 SP6pSHUTTLE-CMV PSHUTTLE-CMV-F PSHUTTLE-CMV-R pSI T7 EBVrevpSilencer1.0-U6 T7 T3pSilencer2.0-U6 T7 M13forpSilencer2.1-U6neo T7 M13forpSilencer3.1-H1hygro M13F(-47) 3.0REVpSilencer4_1-CMVneo pSilener4.1-5' CMV-Profor pSILENCEV2.0-U6T7 2.0REVpSIneo T7 EBVrev,T3Psit T7 T7TpSK01-T M13F M13RpSK-CMV(KAN+)T7 T3pSOS Psos5'Psos3'pSP64 SP6 M13revpSP64/65SP6 此载体无反向引物pSP65 SP6 M13revpSP70 SP6 T7pSP71 SP6 T7pSP72 SP6 T7pSP73 SP6 T7pSport1SP6/M13F(-47)T7/M13R pSPORT1 SP6/M13for T7/M13revpSPT18 SP6 T7pSTBlue T7/M13rev SP6/M13for pSUPER.Basic T7/M13F M13RpSUPER T7T3pSURE-T M13F M13RpSURE-Tsimple M13F-47M13R-48 pSuperCos pBRforEco T7pT3T7 M13rev/T3 M13for/T7pT7-7 T7 not availablepT7Blue®T7 M13F(-47)pT7T3_18U M13rev/T7 M13for/T3pT7T3D-PAC M13rev/T7 M13for/T3pTA2M13F/T7(优先使用M13F）T3/M13RpT-Adv M13rev T7,M13forpTAg T7/M13rev M13for pTARGETTM pTarget.F(在T7前面）/T7 pTarget.RpTG19-T M13F(-47)M13R(-48) pTARGETTM T7/M13F PTARGET-SEQ pThioHisA,B,andC Trx Forward Trx Reverse / M13for pTO-T7T7 T7TERpTRC99A PTRC99A-F pTrcHis-rvpTrc99a-c PTRC99C-F PTRC99C-RpTRC99a-c PTRC99C-F PTRC99C-R pTrcHisB PTrcHisA-F/Xpressfor PTrcHisA-R pTrcHisA PTrcHisA-F PTrcHisA-RpT-REX-DEST30 TREfor T7pTriEx1 T7/TriExup TriExdownpTriEx1.1 T7/TriExup TriExdownpTriEx1.1_Hygro T7/TriExup not availablepTriEx1.1_Neo T7/TriExup IRESrevpTriplEX1 TriplEx-LD-5 T7,TriplEx-LD-3pTriplEX2 TriplEx-LD-5；pTR5‘ T7,TriplEx-LD-3pTWIN-1T7 T7TERpTXB1 T7 MxeInteinrevpTXB2 T7 MxeInteinrevpTXB3 T7 MxeInteinrevpTYB1 T7 InteinrevpTYB2 T7 InteinrevpTYB3 T7 InteinrevpTYB4 T7 InteinrevpTZ_18U T7/M13rev M13forpUB6/V5-His UB-F BGH rev,V5revpUC13 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUC18 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUC18(19)/118(119)M13F(-47)M13R(-48)/PUC19(HINDⅢ) pUC19 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUC57 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUC8 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUC9 M13rev/M13rev(-48) M13for/M13for(-49)pUM-T M13F(-20)M13R(-20)pUCm-T(AMP+)M13F/T7M13RpUNI/V5-His not available BGH rev,V5revpVAX1T7 T7/CMV-Profor PCDNA3.1R/BGHRpVP22/mycHis VP22-Cfor BGH rev,c-mycrevpVP22/mycHis2 T7/CMV-Profor VP22-NrevpWE15 pBRrevHind T7pYES2 T7pYes2.RpYES-DEST52 T7/GAL1-Profor V5rev/CYC1-Terminator pYEX_4T_1 Clontech pYEX_4T-3pYEX_4T_2 pGEX-5 pYEX_4T-4pYEX_4T_3 pGEX-5 pYEX_4T-4pYEX_4T_4 pGEX-5 pYEX_4T-4pZeoSV2+/hu-Tyr T7 not availablepZERO-1 M13rev/SP6 T7/M13forpZERO-2 M13rev/SP6 M13for/T7pZome-1-C Zome-F Zome-RpZome-1-N Zome-F Zome-RYCp50(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBamYEp13(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBamYEp24(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBamYIp5(BamHI-site) PBRforBam PBRrevBam RNAi-ReadypSIREN-RetroQ-U6ZsGreen U6 菌PCDB T7BGH天为时代TA载体T7T3m13（+）T7？T3？pMSCV-neo pMSCV-5'pMSCV-3'。
载体及其上下游引物
BGH rev/c-mycrev
pcDNA3.1/V5-His(_A,_B,_C)
T7/CMV-Profor
BGH rev/V5rev
pcDNA3.1/Hygro(+,-)
T7/CMV-Profor
BGH rev/V5rev
pcDNA3.1/Zeo(+.-)
T7
BGHrev
pCAMBIA1301(1300)
pCAMBIA1301-5'(ECORI)/M13R
pCAMBIA1301-3'(HindIII)
pCAMBIA1304
pCAMBIA1301-5'(ECORI)
pCAMBIA1301-3'(HindIII)
pCAMBIA2300
M13R(-48)
M13F(-47)/M13F(-49)
pACT2
GAL4 ADfor
pGAL4-ADrv
pACT2
p17110
p12584
pACYC184(BamHI-site)
PBRforBam
PBRrevBam
pACYCDuet-1(MCSI)
ACYCDuetUP1 Primer
DuetDOWN1
pACYCDuet-1(MCSII)
DuetUp2
T7-Terminator
pDEST26
TREfor/CMV-Profor
T7/M13for
pDisplay
T7/CMV-Profor
c-mycrev
pDNR-LIB(MCS_A)
M13for,T7
pSG5-3,M13R
pDonar
M13F
3个水稻RNAi载体的构建与应用
3个水稻RNAi载体的构建与应用柯建浩;廖耀平;王骆艺;穆虹【摘要】利用RNAi(RNA interference)干扰技术,构建了启动子和干涉区域不同的3种水稻干涉载体,通过农杆菌介导转化水稻粳稻品种中花11.表型和分子分析表明,3种载体都能有效降解靶基因OsUGP2,暗示pRNAi-ubi-UGP2载体能同时沉默OsUGP2家族基因,pRNAi-ubi-UGP2PRO载体能特异沉默OsUGP2,pRNAi-IP-UGP2载体对OsUGP2基因的沉默不具特异性,但其沉默具有人为可调控性.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2011(038)009【总页数】4页(P1-3,封2)【关键词】水稻;RNAi;载体构建;OsUGP2【作者】柯建浩;廖耀平;王骆艺;穆虹【作者单位】广东省农科院水稻研究所,广东广州510640;华南农业大学生命科学学院,广东广州510640;广东省农科院水稻研究所,广东广州510640;广东省农科院水稻研究所,广东广州510640;华南农业大学生命科学学院,广东广州510640【正文语种】中文【中图分类】S511;Q785水稻是世界上最重要的粮食作物之一，全球一半以上的人口以稻米为主食。
水稻是我国最重要的粮食作物，总面积、总产量及单位面积产量均居全国粮食作物首位。
同时，水稻也是单子叶植物研究的模式植物，其基因组在禾谷类作物中是最小的，约由4.3亿个碱基对组成[1-2]。
目前，水稻全基因组测序已基本完成，对其基因进行功能分析已成为世界研究热点。
对基因功能进行分析可采取正向遗传学和反向遗传学两种策略[3-4]。
其中，RNAi 作为反向遗传学策略的一种方法，已成为揭示水稻基因功能的一件重要利器。
植物中常用的 RNAi技术包括转录后基因沉默技术（posttranscriptional gene silencing，PTGS）和转录基因沉默技术（transcriptional gene silencing，TGS）[5]。
常用载体测序引物列表
常用载体测序引物列表常用载体测序引物列表载体名称正向引物反向引物pACT T7 T3pACT2 GAL4 AD(5’AD) 3'AD/pACT2-R PACYCDUET-1(MCSII) DuetUP2 T7TERpAD/pl-DEST CMV-FpAD-Track pAD-Track-F 无pAS2-1 5’BD M13-26/48 PB42AD PB42ADF PB42ADR PBAD PBAD-F PBAD-R pBABE pBABE5’ pBABE3’ PBACPAK8 BAC1 BAC2 pBK-CMV T7/M13-20 T3/M13-26 PBS(SK/KS)/M13- M13F/T7T3/M13R pBV220 PBV220F PBV220R pBI121需根据酶切位点确认需根据酶切位点确认 pCAMBIA 1301(1300) 需根据酶切位点确认需根据酶切位点确认pCAMBIA 2300 需根据酶切位点确认需根据酶切位点确认PCANTB5E S1/M13R S6pCAT3-enhancer pGL3+pcDNA3.0 pEGFP-N5/T7 SP6/BGHpcDNA3.1 pEGFP-N5/T7 BGHpcDNA4 T7/pEGFP-N5 BGHpcDNA6 T7/pEGFP-N5 BGHpcDNAII T7SP6 pCE2.1 M13FM13R pCEP4 pCMV5R/PCEP-F pEGFP-N5/EBV-R pCF-T M13FM13R pCIT7（17Base ） pCMV5R pCI-neo T7（17Base ） T3pCMS-EGFP T7T3 pCMV-3Tag-4A T3 /pFlag-CMV-F T7pCMV5 pCMV5F pCMV5R pCMV5-Flag pCMV5FpCMV5R pCMV-MYC/NUC pCMV5FpCMV5R PCMV-HA pCMV5FpCMV5R pCMV-SportSP6/M13RpCMV-Tag T3T7 pCMV-TNT T7/SP6pCMV5R pCR2.1-TOPO M13F/T7M13R pCR3.1 T7BGH pCS2 SP6T7PDNR-LIB M13F M13RpDonar M13F M13R pDONR201 pDONR-F pDONR-R pDONR221 M13F M13RpDrive T7 SP6 pDRIveR T7 SP6pDsRED1-C1 pDsRED-C1-F pECFP-C-3 pDsRed1-N1 pEGFP-N-5 RFP-NrevpDsRed-Monomer-N1 pEGFP-N-5 pDsRed1-NpDsRED2-C1 pDsRED-ex-C1-F pEGFP-N-3’pEGFP-N-5 pDsRed1-N pDSRED2-N1pDSRED-N1 pEGFP-N-5’ PDSRED-N-R pEASY-BLUNT M13F/T7 M13RTerpEASY-E1 T7 T7pEASY-T1 M13F/T7 M13RpEASY-T3 M13F/T7 M13R/SP6 pECFP-C pEGFP-C-5’ pECFP-C-3' pECFP-N1 pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’pEF/myc/ER pEF-F pCDNA3.1R pEGFP-C pEGFP-C-5’ pEGFP-C-3' pEGFP-N pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’ pENTR/D-TOPO M13F M13RTerpET-*(His) T7 T7pET22(a,b,c) T7 T7TerTerpET28,30,24,49 T7 T7TerpET32(a,b,c) T7/S.tag T7pET-42a (-b, -c)(+) Stag T7 TerpET50 T7/s.tag T7TERpET44 T7/s.tag T7Ter pEYFP-N1 pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’ PETBlue M13-20 PETBlueDOWN PETDUET-1(MCSI) PBRrevBam DuetDOMN1 PETDUET-1(MCSII) DuetUP2 T7TERpEYFP-C1 pEGFP-C-5’ pEGFP-C-3' pEYFP-N1 pEGFP-N-5’ pEGFP-N-3’ pFastBac pFastBac-F pFastBac-R pFastBac HT_A,B,C pFastBac-PH pECFP-C-3 pFastBac1 pFastBac-PH pECFP-C-3 pFastBac Dual (MCSI) pFastBac-PH pECFP-C-3 pFLAG-CMV CMV30/pFLAG-CMV-F CMV-24/pFLAG-CMV-Rp3xFlag-CMV-7.1 CMV-F/CMV24 CMV30pGAD424 5’AD 3'ADpGADGH 5’AD 3'ADpGADT7-Rec 5’AD/T7 3'ADpGAPZa-A/B/C a-FACTOR 3'AOXforward 3'AOXpGAPZ-A/B/C pGAPpGBKT7 T7 3'BDpGEM-T(-Easy) M13F/T7 SP6/M13RpGEX-(*)T pGEX-5’ pGEX-3’pGL2 pCMV5R PGL3-Pgl3-BASIC pGL3+ PGL3-pGL3-Enhancer pGL3+ PGL3-PinPoint TM PinPoint Primer SP6pIRES PIRES-F/T7 T3/PIRES-RpIRES2-EGFP pIRES2-EGFP.P5’pIRES2-EGFP.P3’ pLenti6/v5-Dest pEGFP-N-5’PLEXA PLEXA-F PLEXA-R PLNCX PLNCX-F PLNCX-R pLXSN pLXSN-F pLXSN-RPjc1-tac T7pJet.1.21.Blunt T7primer M13F(-47) pMAL-c2E MalEP3/PMAL-C2X-R pMAL-C2x P5/PMAL-C2X-Fprimer M13F(-47) pMAL-p2X MalEPMD18-T M13R(-48) M13F(-47) PMD19-T M13F(-47) M13R(-48) pMIR-report M13FPPC86 PPC86-F PPC86-R3’AOXpPIC9K 5’AOX/a-factor3'AOX pPICZa 5'AOX/PPICZa-FpPROEXHTA M13R(-48)pQE30or40 pQE30+ pQE30- pRECEIVER CMV-FpRSET T7 T7TER PRSFDUET-1(MCSI) DuetUP1 DuetDOWN1 PRSFDUET-1(MCSII) DuetUP2 T7TERpShuttle-CMV pShuttle-CMV-F pShuttle-CMV-R PSILENCE-1.0-U6 T7 T3pSilencer3.1-H1 hygro M13F(-47) 3.0revpSILENCEV2.0-U6 T7 2.0revpSK01-T M13F M13RpSK-CMV T7 T3Psos H1PSP64/65 SP6pSP72 T7 SP6T7/M13RpSport1 SP6/M13F(-47)pSTBlue-1 T7 SP6pSUPER T7 T3pT7Blue(R) T7 M13F(-47)pTA2 M13F/T7 T3/M13R/T7 M13RpT-Adv M13FpTARGET TM pTarget-F/T7 arget-R PTHIOHISA,B,C TRX-FORWARD TRX-REVERSEpTO-T7 T7 T7TERPBV220-/PTRC99C-R pTRC99a-c PQE30+/PTRC99C-F pTriPLEx2 PT5/5'TriplEx2 T7pTz57r/t M13+ M13-pTWIN-1 T7 T7TERpUC18(19)/118(119) M13F(-47) M13R(-48)M13F(-47)/M13F pUC57 M13R(-48)/M13RpUCm-T M13F/T7 M13RpVAX1 T7 BGHT3/M13R/M13R(-48) pWSK29 T7/M13F/M13F(-47) pXT7 T7 SP6pYES2 T7 pYes2.R。