SD大鼠主动脉瓣间质细胞自发钙化模型的建立及阿托伐他汀和氨氯地平的影响.doc
阿托伐他汀与自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的关系研究
阿托伐他汀与自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的关系研究【摘要】目的通过观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats, SHR）心肌细胞凋亡的影响，初步探讨高血压心室重塑的可能机制。
方法20只雄性SHR随机分为阿托伐他汀干预组（ATV组）和生理盐水组（NS组），以10只正常血压雄性WKY大鼠作为正常对照组（WKY组）分别给予阿托伐他汀和生理盐水灌胃，10周后进行心肌细胞凋亡等指标的测定。
结果NS组大鼠和ATV组大鼠与WKY组大鼠相比，左室心肌细胞凋亡指数、血清及左室心肌中TNF-α蛋白、AngⅡ蛋白和血清中ET-1蛋白表达明显升高(P＜0.05)，eNOS活性显著降低(P＜0.05)，而ATV组大鼠与NS组大鼠比较，eNOS 活性ATV组大鼠显著高于NS组大鼠(P＜0.05)，余各指标均显著低于NS组大鼠(P＜0.05)。
结论阿托伐他汀抑制高血压大鼠心肌细胞凋亡，减轻心室重塑和改善心功能可能与其抑制TNF-α、AngⅡ、ET-1的表达，提高eNOS活性有关。
【Abstract】Objective we aim at studying the mechanisms of atorvastatin to retard myocardiocyte apoptosis and improve left ventricular function in SHR.Methods Twenty healthy male SHR were randomly divided into atovastatin treatedment group （ATV group）and 0.9% NaCl diet control group（NS group）. At the same time, ten WKY rats to SHR, were used as normal control group（WKY group）. Rats in ATV group were treated with atorvastatin for 10 weeks, and rats in NS group and WKY group were treated with only 0.9% NaCl of the same volume in the same time. Treatment ten weeks later, myocardiocyte apoptosis indexes were examined.Results Compared with WKY group, the left ventricular myocardiocyte apoptosis index, the TNF-α, AngⅡ, andET-1 concentration in the serum and expression in the left ventricular myocardia of ATV group and NS group significantly increased (P＜0.05),these indexes in the ATV group significantly decreased (P＜0.05)compared with NS group, while the activity of eNOS significantly decreased (P＜0.05),the index in the ATV group significantly increased (P＜0.05) compared with NS group.Conclusions Atorvastatin inhibits myocardium apoptosis, retards cardiac remodeling andimproves left ventricular function of SHR, which may be related to these effects that it can decrease the expression of TNF-α, AngⅡand ET-1, and increase the activity of eNOS.【Key words】Atorvastatin;Hypertension;Rat ;Apoptosis高血压病是最常见的心血管疾病，高血压导致的心室重塑可导致心力衰竭和心律失常恶化，严重影响患者的预后。
阿托伐他汀钙片联合苯磺酸氨氯地平片改善高血压患者内皮功能
阿托伐他汀钙片联合苯磺酸氨氯地平片改善高血压患者内皮功
能
罗巍;周海依
【期刊名称】《实用医院临床杂志》
【年(卷),期】2017(014)004
【摘要】目的观察阿托伐他汀钙片、苯磺酸氨氯地平片合并对高血压患者血管内皮功能的影响以及降压作用.方法高血压患者120例,随机数字表法分为联合组和对照组各60例,对照组给予苯磺酸氨氯地平片;联合组在此基础上加用阿托伐他汀钙片,治疗3个月,比较两组治疗前后内皮素-1、血清一氧化氮(NO)、收缩压、舒张压,参照Celer-majer方法测定静息状态下肱动脉内径.结果两组治疗后内皮素-1、NO水平、收缩压、舒张压水平、肱动脉内径变化百分数较治疗前明显改善(P＜0.05),并且联合组较对照组数据更优(P＜0.05).结论阿托伐他汀钙片、苯磺酸氨氯地平片合并对高血压患者血管内皮功能有明显改善作用,高血压治疗效果显著,值得应用.
【总页数】3页(P219-221)
【作者】罗巍;周海依
【作者单位】湖南省人民医院,湖南长沙410000;长沙市中心医院胸一科,湖南长沙410000
【正文语种】中文
【中图分类】R544.1
【相关文献】
1.阿托伐他汀钙片联合苯磺酸氨氯地平片治疗冠心病合并脑梗死的疗效研究 [J], 吴玲; 席雅琳
2.苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗老年高血压伴血脂异常的疗效观察[J], 郭英魁
3.苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗老年高血压伴血脂异常的疗效观察[J], 郭英魁
4.苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗高血压伴高血脂的临床效果研究 [J], 张艳花
5.苯磺酸氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗高血压伴高血脂的临床效果研究 [J], 张艳花
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氨氯地平联合阿托伐他汀钙、氢氯噻嗪片治疗高血压病临床观察
ｉ ｒａｍｅ ｔｏ ｙ ｅｔｎ ｉｎ ＨＵ Ｎ ｕ －Ｊ ． Ｔ ｅＦｒｔ ｅｐｅ ＳＨ ｓｉ ｌｏ ｕｘｕＤｉｒ ｔｏ ｕ ｎｚｏ ， ｎ ｔｅｔ ｎ ｆｈ ｐ ｒ ｓ ｅ ｏ Ａ Ｇ Ｒ ｎｊａ ｎ ｈ ｉ ｏｌ’ ｏｐｔ ｆ Ｙ ｅ ｉ ｓ ｉ ｆ Ｇ ａｇｈｕ ｓＰ ａ ｔｃ
ｃ ｌｉ ｍ ａ ｄ ｙ ｒ ｃ ｌｒ ｔ ｉｚｄ ｔｂ ｅ ｓ ｉ ｈ ｒ ａｍｅ ｔ ｏ ｙ ｅ ｔｎ ｉｎ ｃ ａ ａ ｔ ｒ ｅ ｂ ｄ ａ ｔｌ ｌｏ ｐ ｅ ｓ ｒ ａｃ ｕ ｎ ｈ ｄ ｏ ｈｏ ｏ ｈ ａ ｉ ｅ ａ ｌｔ ｎ ｔ ｅ ｔｅ ｔ ｎ ｆ ｈ ｐ ｒ ｓ ｈ ｒ ｃ ｅ ｉ ｄ ｙ ｉ ｓ ｉ ｂ ｏ ｄ ｒ ｓｕ ｅ ｅ ｏ ｚ ｏｃ
【 关键 词 】 氨 氯地 平 ； 阿托伐他 汀钙 ； 氢氯噻嗪 片 ； 舒张压
Ｔｈｅ ａ ｕｔｃ ｅ ｃ ｙ ｏ ｍ ｌ ｉ ｎｅ ｔ ｅ ｓ ｏ ｂｉ ｅ ｗ ｉｈ ａｔ ｒ ｓａｔｎ ａ ｃｕｍ ｄ ｄｒ ｈ ｏ ｔ ａｚｄｅ ｔ ｂｌｔ ｒ ｐｅ ｉ ｆ ａｃ ｆ ａ ｏｄ ｐｉ ａｂｌｔ ｃ ｍ ｎ ｄ ｔ ｏ ｖａ ｔ ｉ ｃ ｌ ｉ ｉ ａｎ ｈｙ ｏｃ ｌ ｒｏ ｈｉ ｉ ａ ｅ ｓ
（ 州市越 秀 区第 一人 民 医院 ，广 东 广 州 ５０ ３ ） 广 １０ ０
【 摘要 】 目的 观察氨 氯地平联 合 阿托伐 他 汀钙 、 氢氯噻嗪 治疗 以舒 张压 升高 为表 现的 高血压 病 （ 高 ２级
将 高血 压 病 （ ２级 高 危 组 ） 患者 随 机 分 为 两 组 ， 察 组 ３ 观 ０例 在 使 用 氨 氯 地 平 片 ５ ｍ ｄ ｇｑ
１ ６
心血 管 病 防 治知 识 （ 学术 版 ） ２ １ ０ ２年 第 ５期 （ 、０月下半 月合 刊 ） ９１
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和心肌血管紧张素Ⅱ1型和2型受体表达的影响
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和心肌血管紧张素Ⅱ1型和2型受体表达的影响王安才;成蓓;谢晓竟;徐浩【期刊名称】《中国动脉硬化杂志》【年(卷),期】2005(13)1【摘要】目的观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和心肌血管紧张素Ⅱ受体 1和血管紧张素Ⅱ受体 2的调节作用。
方法采用免疫组织化学染色法检测心肌血管紧张素Ⅱ受体 1和血管紧张素Ⅱ受体 2蛋白表达 ,原位杂交法测定心肌血管紧张素Ⅱ受体 1和血管紧张素Ⅱ受体 2mRNA表达水平。
于给药前和给药后每两周测量大鼠尾动脉收缩压 ,并测定血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平。
结果实验前自发性高血压大鼠各组收缩压均显著高于Wistar kyoto大鼠组 (P <0 .0 1)。
给药后第 4周和第 6周 ,5 0mg阿托伐他汀组收缩压明显下降 (P <0 .0 1) ,总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平明显降低 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;自发性高血压大鼠对照组心肌血管紧张素Ⅱ受体 1和血管紧张素Ⅱ受体 2蛋白阳性表达及其mRNA表达均明显高于Wistar kyoto 大鼠组 (P <0 .0 1) ,6周后 ,5 0mg阿托伐他汀组血管紧张素Ⅱ受体 1蛋白和其mRNA表达明显降低 (P <0 .0 1) ,而血管紧张素Ⅱ受体 2蛋白和其mRNA表达明显高于自发性高血压大鼠对照组 (P <0 .0 1)。
结论阿托伐他汀能降低自发性高血压大鼠的血压 ,并对心肌血管紧张素Ⅱ受体有双重调节作用 ,即使血管紧张素Ⅱ受体 1下调、血管紧张素Ⅱ受体【总页数】5页(P40-44)【关键词】病理学与病理生理学;阿托伐他汀;自发性高血压大鼠;原位杂交法;血压;血管紧张素Ⅱ受体;免疫组织化学法【作者】王安才;成蓓;谢晓竟;徐浩【作者单位】华中科技大学同济医学院协和医院【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ水平及血管紧张素Ⅱ-1型受体表达的影响 [J], 冯敏超;康白;毛淑梅;唐胜建2.夏膝口服液对自发性高血压大鼠血压及心肌血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响[J], 陈颖;黄永生3.RNA干扰下调血管紧张素转换酶和血管紧张素Ⅱ1型受体对自发性高血压大鼠血压及肾脏损伤的影响 [J], 周华;张翠芳;陈瑞瑞;李瑾;高奋;杨志明4.清肝益气降压方对自发性高血压大鼠肾内小动脉血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达的影响 [J], 韩涛;郭炜;刘持年5.中西医结合对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ 1型受体mRAN和蛋白表达的影响 [J], 李浩;刘剑刚;刘龙涛;姚明江;韩淑花因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床疗效
氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的临床疗效殷音【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2024(18)5【摘要】目的分析氨氯地平联合阿托伐他汀钙片对高血压合并冠心病患者的康复所起到的积极作用。
方法 78例高血压合并冠心病患者,采用随机数字表法分为对照组与观察组,每组39例。
对照组采用氨氯地平治疗,观察组采用氨氯地平联合阿托伐他汀钙片治疗。
对比两组血压、血脂、临床治疗效果、并发症发生率、自我护理能力[自我护理能力量表(ESCA)评分]及生活质量水平[生活质量量表(QOL)评分]。
结果治疗后,两组收缩压和舒张压均较治疗前降低,且观察组收缩压(122.23±10.74)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和舒张压(87.58±9.86)mm Hg 低于对照组的(137.69±12.56)、(95.86±8.05)mm Hg,差异显著(P<0.05)。
观察组总胆固醇(3.06±0.36)mmol/L、低密度脂蛋白胆固醇(1.51±0.21)mmol/L、甘油三酯(1.54±0.14)mmol/L均低于对照组的(4.14±0.74)、(1.87±0.16)、(2.03±0.06)mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇(1.54±0.14)mmol/L高于对照组的(1.25±0.13)mmol/L,差异显著(P<0.05)。
观察组治疗总有效率94.87%显著高于对照组的74.36%,差异显著(P<0.05)。
观察组不良反应发生率7.69%显著低于对照组的28.21%,差异显著(P<0.05)。
治疗后,观察组ESCA评分(123.45±12.63)分及QOL评分(57.56±6.13)分高于对照组的(108.23±10.65)、(48.52±6.22)分,差异显著(P<0.05)。
氨氯地平片联合阿托伐他汀钙片治疗高血压合并冠心病的疗效分析
１ ． ３ 观察 指标
显效 ： 患者血压恢 复正常 ， 心绞痛发作次
作者简介 ： 吴新 富， 男， 硕士 ， 主治 医师。
病类 型中 ， 冠 心病最为常见 ， 高血压合 并冠心病 患者 的数量 目
组和干预组 ， 每组 ４ Ｏ例 。对 照组男 ２ ６例 ， 女１ ４例 ， 年龄 ４ Ｏ岁 ～ ７ ７ 岁； 干预组 男 ２ ７例 ， 女１ ３例 ， 年龄 ４ ｌ 岁～ ７ ５岁。２ 组 患者 一
般资料 比较无统计学差异（ 尸 ＞ ０ ． ０ ５ ） 。
服用 １ 次氨氯地平 片 ， 每次 ５ ｍ ｇ ， 阿托伐他 汀钙 片用法与对 照 组相同。若患者血压控制不佳 ， 氨氯地平剂量应增至每 日 １ ０ ｍ ｇ ，
连续服用 ２ 个 月为 １ 个基本疗 程 。２组患 者治疗过程 中若 心 绞痛发作 ， 需要 服用硝酸酯类药物 ， 每 日服用 ３次消心痛 ， 每 次
得到保证 ， 且会 出现不 良反应 。氨氯地平是 临床 常见 的钙拮抗 剂类药物之一 ， 其治疗特 点主要是 降压迅速 ， 效果 比较平稳 ， 患
者 的不 良反应较少 ， 通过对 患者的血管平 滑肌进行松 弛而 实现
降压 。 氨氯地平治疗冠心病的主要原理 为扩张患者的外周 动脉
及冠状 动脉 ， 增 加冠状动脉 的血 液流量 ， 从而有效 改善患者 的
５ ￣ １ ０ｍｇ 。
心肌供氧情况。阿托伐他汀可 以有效降低患者的血脂 ， 是一种
还原酶抑制剂类药物 。阿托伐他汀本身并不存在较强的活性 ，
但是患者在服药之后 ， 其水解产物 可以与相应 的还原 酶进行结 合， 以此抑制胆 固醇 ， 减少胆固醇合成 ； 增加低密度脂蛋 白受体 的进一步生成 ，确保患者体 内血胆 固醇及 Ｌ Ｄ Ｌ － Ｃ的合成量下 降， 从 而有效避免冠心病的发生。
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌细胞 PPAR－γ及 GLUT－4表达的影响研究
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌细胞 PPAR－γ及 GLUT－4表达的影响研究蒲丽君;罗勇;赵珂【摘要】Objective:To analyse affect of spontaneously hypertensive rat cardiomyocyte expression of PPAR-γand GLUT-4 with atorvastatin, in order to provide theoretical guidance for clinical application. Method:20 spontaneously hypertensive rats were randomly divided into group A(10) and group B(10), 10 healthy rats were selected as group C.Group A were feeded with atorvastatin in dose of 50mg・ kg-1・ d-1 by gavaging, group B and group C were feeded with the same amount of distilled water by gavaging.Systolic and diastolic blood pressure values of the three groups were measured every other week until 10 weeks;Lipid lev-els and left ventricular mass index of three groups were measured for 10 weeks, Lipid levels of three groups were compared;PPAR-γand GLUT-4 expression levels of three groups were detected by immunohistochem-istry and PT-PCR method.Result:Diastolic and systolic blood pressure levels in group A and group B rats were higher than group C rats ( P <0.05) , group A and group B median level of blood pressure had no sig-nificant ( P>0.05);lipid levels of TC, TG, HDL-C and LDL-C in group A and group B were lower than group C rats ( P <0.05) , lipid levels had no relatively difference between group A and group B ( P>0.05) . LVM1 levels among three groups were significant differences ( P <0.05), and group B was the highest,group A was Secondly higher,group C was the lowest; before the intervention, PPAR-γand GLUT-4 ex-pression of group A and group B was lower than group C ( P <0.05) , but group A and group B were not sig-nificant ( P>0.05); after the intervention, PPAR-γand GLUT-4 expression levels was significantly in-creased, there was not significant compared with group C, but there was significant different compared with group B ( P<0.05) .Conclusion:Atorvastatin fed spontaneously hypertensive rats, can reduce the level of left ventricular mass index, blood pressure, but no significant effect on blood lipid levels, which may in-crease PPAR-γand GLUT-4 expression levels, the specific mechanisms needed further study.%目的：分析阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌细胞P P AR－γ及GLUT－4表达水平的影响，为临床运用提供理论指导。
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压、循环和心肌血管紧张素Ⅱ水平的影响
阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压、循环和心肌血管紧张素Ⅱ水平的影响王安才;成蓓;谢晓竟;徐浩【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2005(021)011【摘要】目的:观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)血压、循环和心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响.方法:24只SHR随机分为4组(每组6只):SHR对照组、阿托伐他汀50mg组、阿托伐他汀10 mg组和缬沙坦组,6只WKY大鼠作为正常血压对照组(WKY组).给药前和给药后每两周测量大鼠尾动脉收缩压(SBP).测定血清脂质及血浆和心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平.结果:SHR各组SBP于给药前无显著差异(P＞0.05),但均显著高于WKY组(P＜0.01);给药后第4、6周,阿托伐他汀50 mg组SBP明显低于SHR对照组(P＜0.01),10mg组则不明显;缬沙坦组自给药后第2周,SBP进行性下降(P＜0.01).SHR对照组与WKY组血脂各项指标无显著差异(P＞0.05);阿托伐他汀50 mg组TC、TG及LDL-C水平明显低于SHR对照组(P＜0.05,P＜0.01),10mg组仅LDL-C水平明显下低于SHR对照组(P＜0.05).SHR对照组血浆AngⅡ浓度无明显差异,但心肌AngⅡ浓度明显高于WKY 组(P＜0.05);给药6周后,阿托伐他汀各剂量组和缬沙坦组血浆AngⅡ浓度显著高于SHR对照组(均P＜0.01),而心肌AngⅡ浓度在阿托伐他汀50mg组和缬沙坦组明显低于SHR对照组(P＜0.05).结论:阿托伐他汀能降低SHR的血压,机制可能与降低心肌AngⅡ浓度含量有关.【总页数】3页(P2277-2279)【作者】王安才;成蓓;谢晓竟;徐浩【作者单位】皖南医学院弋矶山医院,安徽,芜湖,241001;华中科技大学同济医学院协和医院,湖北,武汉,430022;皖南医学院弋矶山医院,安徽,芜湖,241001;皖南医学院弋矶山医院,安徽,芜湖,241001【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.“高原明珠”绿茶对自发性高血压大鼠血压、心肌超微结构及血管紧张素Ⅱ含量的影响（英文） [J], 罗显扬;周国兰;梁月荣;刘声传;郑文佳2.“高原明珠”绿茶对自发性高血压大鼠血压、心肌超微结构及血管紧张素Ⅱ含量的影响 [J], 罗显扬;周国兰;梁月荣;刘声传;郑文佳3.地龙耐热蛋白对自发性高血压大鼠心肌血管紧张素Ⅱ水平及血管紧张素Ⅱ-1型受体表达的影响 [J], 冯敏超;康白;毛淑梅;唐胜建4.阿托伐他汀对自发性高血压大鼠颈总动脉血管紧张素转换酶2表达的影响 [J], 曹晓霞;李俊;汪俊元;王安才5.阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和心肌血管紧张素Ⅱ1型和2型受体表达的影响 [J], 王安才;成蓓;谢晓竟;徐浩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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SD大鼠主动脉瓣间质细胞自发钙化模型的建立及阿托伐他汀和
氨氯地平的影响
钙化性主动脉瓣疾病是一个慢性进展性疾病,包括早期的主动脉瓣硬化(aortic sclerosis, ASc)和晚期的钙化性主动脉瓣狭窄(calcific aortic valve stenosis, CAS)。
在欧、美等发达国家,CAS己成为成人最常见的心脏瓣膜病；且患者一旦出现临床症状,预后较差。
随着研究的深入,对CAS的认识逐渐从“与年龄相关的退行性过程”过渡到认为其是“主动调节的慢性炎症过程”。
临床来源的的主动脉瓣标本数量有限,且钙化较严重；用猪、兔等建立的动物模型,耗时较长且较繁琐,故建立有效的体外疾病模型显得尤为重要。
主动脉瓣间质细胞(aortic valve interstitial cells,AVICs)在CAS发生发展中起重要作用。
目前用于CAS研究的AVICs多来源于猪,但由于缺乏相应一抗,使研究受限。
在有关CAS的体外研究中,多通过不同种类或浓度的钙化诱导剂或刺激因子诱导AVICs钙化,这使得试验间结论的可比性较差。
SD大鼠是一种常用的实验动物,具有体积小、易饲养、易购买等优点。
目前以SD大鼠为研究对象对CAS进行的研究较少,可能与大鼠主动脉瓣较小,不易分离培养有关。
本研究欲分离培养SD大鼠AVICs,并观察其在未给予钙化诱导剂或刺激因子的情况下,随着培养时间的延长是否自发形成钙化灶；并检测钙化过程中钙化相关因子的表达情况,同时观察阿托伐他汀及氨氯地平对自发钙化的影响。
第一部分SD大鼠主动脉瓣间质细胞分离培养目的：建立快速有效的SD大鼠AVICs体外培养方法。
方法：通过组织块法分离培养SD大鼠AVICs,观察细胞原代及传代后生长特性；并通过IF染色方法检测a-SMA及vimentin表达情况；通过SEM和TEM对细胞表面和内部结构进行观察。
结果：1原代培养2-3天后,部分组织块周边有细胞爬出,呈梭形、三角形或不规则形；原代培养7～8天后,细胞可达到70～80%融合,进行传代。
2AVICs经IF检测阳性,即SD大鼠AVICs表达a-SMA及vimentin。
3经SEM检测可见,细胞贴壁良好,多边形,体积较大,细胞膜较薄且充分伸展。
4经TEM检测可见,细胞体积较大,不规则形,可见绒毛；胞内细胞器丰富,可见大量扩张的粗面内质网及与细胞长轴平行的肌丝；细胞核不规则,可见核仁。
结论：1通过组织块法对SD大鼠AVICs进行培养,方法简单快速。
2经过形态学、细胞免疫学鉴定,SD大鼠AVICs为肌成纤维细胞。
第二部分SD大鼠主动脉瓣间质细胞自发钙化模型的建立目的：观察体外分离培养的SD大鼠AVICs是否可以自发形成钙化灶。
方法：通过组织块法分离培养SD大鼠AVICs,对不同培养时间的AVICs进行Von Kossa及茜素红染色、细胞内及其间质钙离子检测,’评价其是否可以自发形成钙化灶。
结果：1培养至4～6天时,AVICs逐渐聚集成团,称为“细胞灶”,此时细胞灶较小,散在分布；随着培养时间的延长,细胞灶体积逐渐增加,中心区亮度增加。
2Von Kossa染色显示,6天时细胞灶染色阳性,即细胞灶处有钙盐沉积；并且12天时阳性细胞灶个数及强度均大于6天组。
3茜素红染色显示,6天时细胞灶染色阳性,即细胞灶处有钙盐沉积；并且12天时阳性细胞灶个数及强度均大于6天级。
经统计分析显示,茜素红含量组间有统计学差异(F106.167,P<0.001),0天及6天组茜素红含量较低,12天组茜素红含量较高,即随着培养时间的增加钙盐沉积增加。
4细胞及间质钙含量经统计分析显示,钙离子含量组间有统计学差异
(F116.379,P<0.001),0天及6天组钙离子含量较低,12天组钙离子含量较高,
即随着培养时间的增加钙盐沉积增加。
结论：通过延长细胞培养时间能够诱导其自发形成钙化灶。
第三部分SD大鼠主动脉瓣间质细胞自发钙化模型的机制研究目的：检测AVICs在自发钙化过程中某些成骨相关基因的表达情况。
方法：通过组织块法分离培养SD大鼠AVICs,用RT-PCR和western-blot方法,检测不同培养时间细胞的ALP活性、成骨相关因子(a-SMA、Cbfal、Osteocalcin、ALP、BMP-2、BMP-4) mRNA及蛋白表达情况。
结果：1ALP活性检测结果表明,0天、6天、12天组ALP活性有统计学差异(χ
2=139.396,P<0.001),12天组ALP活性最低,0天组ALP活性较高,6天组ALP 活性最高,即随着培养时间的增加,ALP活性从0天开始逐渐升高,至第6天达峰,之后逐渐下降。
2Cbfal mRNA、Osteocalcin mRNA、BMP-4mRNA、ALP mRNA、BMP-2mRNA、α-SMA mRNA RT-PCR检测结果2.1Cbfal mRNA、Osteocalcin mRNA、BMP-4mRNA RT-PCR结果表明,0天、6天、12天组Cbfal mRNA、Osteocalcin mRNA、BMP-4mRNA 表达水平有统计学差异(F=410.106,χ2=7.200,F=38.463,P<0.005),0天组
最低,6天组较高,12天组最高,即随着培养时间的增力(?)Cbfal mRNA、Osteocalcin mRNA、BMP-4mRNA表达水平逐渐增高。
2.2ALP mRNA RT-PCR结果表明,0天、6天、12天组ALP mRNA表达水平有统计学差异(χ2=7.200,P=0.027),0天最低,12天较高,6天最高,即随着培养时间
的增加,ALP mRNA的表达水平先增加后下降。
2.3BMP-2mRNA RT-PCR吉果表明,0天、6天、12天组BMP-2mRNA表达水平有统计学差异(F=56.565,P<0.001),0天组较低,6天组和12天组较高,即随着培养时间的增加,BMP-2mRNA的表达水平逐渐增加。
2.4a-SMA mRNA RT-PCR结果表明,0天、6天、12天组a-SMA mRNA
表达水平有统计学差异(F=89.886,P<0.001),12天最低,6天较高,0天最高。
随着培养时间的增加a-SMA mRNA的表达水平逐渐下降。
3ALP、BMP-2、BMP-4western-blot结果3.1ALP western-blot结果表明,0天、6天、12天组ALP蛋白表达水平有统计学差异(χ2=7.261,P=0.027),0天组最低,12天组较高,6天组最高,即随着培养时间的增加,ALP蛋白表达先增高后降低。
3.2BMP-2、BMP-4western-blot结果表明,0天、6天、12天组BMP-2、BMP-4蛋白表达水平有统计学差异(χ2=7.200,F=452.482,P<0,05),0天组最低,6天组较高,12天组最高,即随着培养时间的增加BMP-2、BMP-4蛋白表达逐渐增高。
结论：AVICs向成骨细胞表型转化可能是自发钙化模型形成的细胞学基础。
第四部分阿托伐他汀和氨氯地平对SD大鼠主动脉瓣间质细胞自发钙化的影响目的：观察阿托伐他汀和氨氯地平对SD大鼠AVICs自发钙化的影响。
方法：采用组织块法分离培养SD大鼠AVICs,检测不同浓度的阿托伐他汀和氨氯对平对AVICs自发钙化程度及ALP活性的变化情况。
结果：1通过延长培养时间,各组均形成直径大小不同的钙化灶。
2Ato和Aml 对AVICs自发钙化程度的影响2.1在控制了组别因素的情况下,时间因素在不同水平有统计学差异：0天和6天较低,12天较高(F=116.379,P<0.001),髓着培养时间的增加各组Ca2+含量均逐渐增高。
2.2在控制了时间因素的情况下,组别间有统计学差异,10-6mol/L Aml组比10-6mol/L Ato组钙含量高,两组间有统计学差异(F=3.655,P=0.023),其他组间均无统计学差异,即在相同的培养时间情况下,除10-6mol/L Aml组和10-6mol Ato组Ca2+含量有差别外(10-6mol/L Aml
组Ca2+含量高于10-6mol/L Ato组),其余各组均无差别。
3Ato和Aml对ALP的影响3.1在控制了组别因素的情况下,时间因素在不同水平有统计学差异：12天最低,0天较高,6天最高(F=139.396,P<0.001),即
随着培养时间的增加各组ALP活性先增加后降低。
3.2在制了时间因素的情况下,组别间无统计学差异(F=0.515,P=0.675),即在培养时间相同的情况下,不同浓度的药物对ALP活性变哈无影响,结论：11×10-7～1×10-6mol/L浓度的Ato对SD 大鼠AVICs钙化无明显影响。
21×10-7～1×10-6mol/L浓度的Aml对大鼠AVICs 钙化无明显影响。