优良酵母菌株的分离和筛选
发酵食品中菌种的选择和筛选方法研究
发酵食品中菌种的选择和筛选方法研究发酵食品是指利用可食用的微生物（如细菌、酵母菌、真菌等）的代谢过程，对食品中的成分进行转化和改造的食品。
而菌种的选择和筛选方法则是研究发酵食品中的关键环节之一。
本文将介绍一些常见的菌种选择和筛选方法，以及它们在发酵食品生产中的应用。
首先，菌种的选择方法是在众多潜在的菌种中，选择合适的菌种进行发酵。
常见的菌种选择方法包括：1. 文献调研法：通过查阅相关的文献资料，了解各种菌种在特定食品发酵过程中的应用情况和效果，以此为依据进行选择。
2. 试验筛选法：通过实验的方式，将不同的菌种与发酵基质结合，观察其生长情况、代谢产物以及对食品品质的影响，选出最佳菌种进行后续发酵。
3. 现有菌种的再利用法：在发酵食品生产中，已经存在一些被广泛应用的菌种，如酵母菌、乳酸菌等，可以直接利用这些已有的菌种，无需选择新的菌种。
接下来，菌种的筛选方法是从大量的发酵菌中，找出具有优良特性的菌株。
常见的菌种筛选方法包括：1. 菌株的生理生化特性筛选：通过测定菌株的生长速率、代谢产物、耐受性等生理生化特性，来筛选具有优良特性的菌株。
2. 抗菌活性筛选：利用菌株的抗菌活性来对菌株进行筛选。
例如，使用抗生素对菌株进行抗性测试，或者利用菌株的抗菌代谢物对其他菌种进行抑制。
3. 基因工程筛选：通过基因工程技术对菌株进行改造，使其具有更好的发酵特性。
例如，通过引入外源基因来提高菌株的产物产量或改善发酵过程中的抗性。
在实际的发酵食品生产中，菌种选择和筛选方法的应用十分广泛。
以乳酸菌在乳制品发酵中的应用为例，菌种选择主要考虑到菌株在发酵过程中的代谢特性和产物品质。
例如，乳酸菌的菌株要具有低酸和低丁酸生成量的特性，以使乳制品口感更佳。
而菌株的筛选则可以通过酸奶的发酵试验，观察不同菌株的发酵速率、产酸量以及乳酸呈异构体的比例等指标，选择出最佳的菌株进行扩大生产。
总结来说，菌种的选择和筛选方法对于发酵食品生产至关重要。
微生物菌种分离__筛选与育种
3.1 细菌的杂交育种
细菌的杂交可以通过细菌接合、F因子转导、 R因子转移、转化和转导等方法促使基因重组。
3.2 放线菌的杂交育种
放线菌的杂交包括混合培养法、平 板杂交法和玻璃纸转移法三种：
金霉素、新霉素、红霉素和新生霉 素等抗生素产生菌的杂交育种中，都 有成功的报道。
3.3 霉菌的杂交育种
1．准性生殖 准性生殖是指真菌不通过有性生殖
融合后的原生质体具有生物活性， 但由于缺少细胞壁，不是正常的细胞， 不能在普通培养基上生长。所以要涂 布在高渗培养基上令其再生。可以增 加高渗培养基的渗透压或添加蔗糖来 增加再生率。
3) 融合子的检出
融合子是在选择性培养基上检出， 即通过两个遗传标记互补确定的，如 利用营养缺陷型互补，在基本培养基 上识别融合子。
2．3 突变菌株的筛选
诱变后，正向突变的菌株通常较少，菌 种性能有可能发生各种各样的变异，如营 养、抗性、代谢、形态、生长繁殖和温度 等。这些变异菌种可用各种方法筛选。
通过初筛和复筛后，还要经过发酵条件 优化研究，确定最佳发酵条件，使高产菌 株生产能力充分发挥出来。
1）．营养缺陷型突变菌株的筛选
一般来说，优良的生产菌种应该 具备如下的基本特性：
①具有在较短的发酵周期内产生大量发 酵产物的能力。
②在发酵过程中不产生或少产生与目标 产品性质相近的副产物及其他产物。
③生长繁殖能力强，生长速率快。
④能够高效地将原料转化为产品。 ⑤有广泛利用不同来源原材料的能力，
并对发酵原料成分波动敏感性较小。 ⑥对需要添加的前体物质有耐受能力，
自然选育是一种简单易行的选育方 法。但是自然选育的效率低，因此经 常与其它育种方法交替使用，以提高 育种效率。
自然选育程序:
刺葡萄酿酒酵母菌株的分离与筛选
ａ ｎ ｄ ｓ ｕ ｌ ｆ ｕ ｒ ｄ ｉ ｏ ｘ ｉ ｄ ｅ ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｃ ｅ ， ｗ ｅ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｅ ｄ ｏ ｎ ｅ ｙ ｅ ａ ｓ ｔ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ（ Ｂ ５ ４ ） ｗ ｉ ｔ ｈ ｆ ｅ ｍｅ ｒ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｅ ｆ ｒ ｏ ｍａ ｒ ｎ ｃ ｅ ｅ ｘ ｃ ｅ ｌ ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｎ ｌｌ ａ ｙ ． Ｂ ５ ４
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酿 酒 的专 用菌株
关键 词 ： 刺 葡萄 ； 酿 酒酵母 ； 分 离； 性 能
Ｔｈ ｅ Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ｏ ｆ Ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｏ ｍｙ ｃ ｅ ｓ ｃ ｅ ｒ ｅ ｖ ｉ ｓ ｉ ａ ｅ Ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｏ ｆ ｄ ａ ｖ ｉ ｄ ｉ ｉ Ｆ ｏ ｅ ｘ
保 鲜 与 加 工
加 工 研 究
Ｓ ｔ ｏ ｒ ａ ｇ ｅ ａ ｎ ｄ Ｐｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ
２ ０ １ ３ ， １ ３ （ ３ ） ： ４ ７ — ５ ０
刺葡萄酿酒酵母菌株 的分 离与筛选
王瑞 琛 ， 伍 婧 ， 刘 静 ， 吴 静 ， 秦 丹 ， 胡 亚 平
（ １ 瑚 南农业大学食品科学技术学院 ， 湖南 长沙 ４ １ ０ １ ２ ８ ； ２ ． 食 品科学与生物技术湖南省重点实验室 ， 湖南 长沙 ４ １ ０ １ ２ ８ ； ３ ． 湖南省发酵食 品工程技术研究 中心 ， 湖南 长沙 ４ １ ０ １ ２ ８ ）
葡萄自然发酵过程中酵母的分离鉴定及优良葡萄酒酵母筛选
葡萄自然发酵过程中酵母的分离鉴定及优良葡萄酒酵母筛选葡萄酒是一种以葡萄为原料经过发酵工艺制成的酒类，其口感和品质与所用酵母菌种密切相关。
在葡萄自然发酵过程中，酵母菌会附着在葡萄皮上，并参与发酵过程。
本文旨在分离鉴定这些酵母菌，并筛选出优良的葡萄酒酵母。
材料与方法1. 材料（1）原料：葡萄（品种为赤霞珠）、酵母粉、发酵桶、过滤器、实验室用显微镜等。
（2）试剂：麦芽汁、琼脂糖、葡萄糖、蛋白胨、氯化钠、孟加拉红、美蓝等。
2. 方法（1）葡萄皮上酵母菌的分离与纯化将葡萄皮放入麦芽汁培养基中，于30℃培养3-5天。
每天观察并记录菌落形态和数量。
将分离得到的菌株进行纯化，直至获得单一菌株。
（2）酵母菌的鉴定采用形态学和分子生物学方法对酵母菌进行鉴定。
形态学方法包括显微镜观察、革兰氏染色、芽孢染色等；分子生物学方法包括PCR扩增、序列分析等。
（3）优良葡萄酒酵母的筛选将分离纯化得到的酵母菌株分别接种到葡萄汁培养基中，于适宜温度下培养。
观察并记录不同菌株的生长情况、产酒精度等指标。
筛选出发酵性能优良的菌株。
结果与讨论1. 结果经过分离鉴定，我们共得到10种不同的酵母菌株。
通过形态学和分子生物学方法对这些菌株进行鉴定，确定它们分别属于酿酒酵母属、毕赤酵母属等不同种类。
在葡萄酒发酵性能测试中，发现某些菌株具有较高的发酵活性和酒精产量。
具体数据如下表所示：2. 讨论本研究从葡萄皮上分离得到了10种不同的酵母菌株，并对其进行了鉴定和发酵性能测试。
结果表明，这些菌株在葡萄酒发酵中具有不同程度的活性。
其中，S3、S7和S10菌株的发酵活性和酒精产量较高，具有作为优良葡萄酒酵母的潜力。
后续研究可以进一步探讨这些菌株在不同酿造条件下的表现和遗传特性，为实际生产中的酵母选育提供理论依据。
同时，对于筛选出的优良菌株进行基因组学和蛋白质组学方面的研究，有助于深入了解其代谢机制和生物学特性，为葡萄酒品质的提升提供技术支持。
酵母筛库操作流程
酵母筛库操作流程酵母是微生物领域中非常重要的一类微生物，它们用于生产各种工业酶、面包、啤酒、酒精等等。
为了寻找优良的酵母菌株，酵母筛库就应运而生。
那么酵母筛库的操作流程具体是怎么样的呢？下面我们就来详细了解一下：1. 筛选酵母菌株酵母筛选源于自然环境，因此有许多不同类型的酵母菌株。
在进行筛选之前，我们需要先收集不同来源的酵母样品。
这些样品包括来自水、土壤和植物等的酵母菌。
通过对这些酵母菌样品进行筛选和筛选，可以得到许多具有特殊性质（如产生特定酶的酵母菌株）的酵母菌。
2. 酵母分离为了分离出单个的酵母菌株，我们需要对样品进行处理，例如，将样品沉淀后，将沉淀重新悬浮在含有营养物质的培养基中。
接着，我们可以通过连续的尝试将单个细胞分离出来以获得它的一个单克隆。
3. 建立酵母筛库建立酵母筛库前，我们需要确定在筛选中使用的诱导剂。
在我们的实验室中，这些诱导剂通常为基因对（例如，Δ顺式样氨酸酶和顺式样氨酸酶等）。
当酵母菌株在这些诱导剂存在下生长时，它们会表现出特殊的生物活性。
这些生物活性包括诸如产生特殊酶类、对特定药品的敏感性、产生有用的代谢产物等属性。
建立酵母筛库需要我们使用插入了不同报告基因的表达载体来转化每个酵母菌菌株。
这些报告基因可以提供我们对诱导剂反应的定量分析能力，并且筛选酵母筛选库时起到很重要的作用。
4. 进行筛选筛选是最重要的部分，它是确定合适株的过程。
在筛选中，我们将确定针对我们研究重要的报告基因是否会受到特定诱导剂取向的表达，如果存在，则将其挑选出来进行进一步深入研究。
在酵母筛选库中，有多种酵母菌菌株，我们需要确定优先选择哪些酵母菌菌株，因为每种酵母菌都有其专有的性质和特性，需要根据我们的应用目的选择。
饲用酵母菌的筛选鉴定及抗逆性分析
饲用酵母菌的筛选鉴定及抗逆性分析陈秀秀，孙洪浩，孙小涵，吕福军*（辽宁波尔莱特农牧实业有限公司，沈阳110000）摘要：为了筛选出可作为微生态制剂及用于发酵饲料的优良菌株，试验以蜂蜜及水果酵素为原料，进行菌株的分离鉴定，并对分离出的酵母菌进行抗逆性研究。
结果显示：从蜂蜜中分离出7株菌（A、H、I、J、K、L、M），从苹果酵素中分离出2株菌（DM和DS），从葡萄酵素中分离出2株菌（E1和E3），通过细菌形态学及26S rDNA 序列鉴定，确定A是假丝酵母，DM、DS是毕赤酵母，E1是假鲁氏接合酵母，E3是鲁氏接合酵母，H、I、J、K、L和M是酿酒酵母。
6株酿酒酵母菌中K的产气能力最强，发酵15h后产气达到满管，其次是I、J和L；在葡萄糖含量为100~500g·L-1条件下，6株菌均可以生长，其中J的耐糖性最好；当pH值为1~5时，6株菌均可生长，耐低pH性由高到低为J>L>I>H>M>K；H的高温耐受性最好，I、J和L较好，K和M略差；胆盐浓度为0.03%~0.3%时，I、J和M完全耐受且存活率可达100%。
本研究为发酵饲料生产提供具备耐高糖、耐低pH、耐高温、耐胆盐等应用潜力的菌株。
关键词：酿酒酵母；筛选鉴定；抗逆性研究中图分类号：S816.6文献标志码：A文章编号：1001-0084（2022）01-0001-06Screening,Identification and StressResistance of Feed YeastCHEN Xiuxiu,SUN Honghao,SUN Xiaohan,LYU Fujun*（Liaoning Powerlight Agricultural and Animal Husbandry Enterprise Co.,Ltd.,Shenyang110000,China) Abstract:In order to screen superior strains as microecologics,and aimed to use for fermented feed.Natural honey and friut were taken as the materials,isolation and identification were carried on.Meantime,the isolated forage yeasts were carried on the stress resistance.The result showed that seven strains were isolated from natural honey(A,H,I,J,K,L and M),and two strains(DM and DS)were isolated from appleenzyme,two strains(E1and E3) were isolated from grape enzyme.A was Starmerella sorbosivorans,DM and DS were Pichia deserticola,E1was Zygosaccharomyces pseudorouxii,E3was Zygosaccharomyces rouxii,H,I,J,K,L and M were Saccharomyces cerevisiae through the analysis of morphological and26S rDNA gene sequences identified.Among the six strains of Saccharomyces cerevisiae,K had the strongest gas production and reached full gas production after15h of fermentation,followed by I,J and L;under the condition of glucose content of100-500g·L-1,all the six strains could grow,among which J had the best sugar tolerance.When the pH value was1-5,all the six strains could grow, and the high temperature tolerance from high to low,pH was J>L>I>H>M>K;H,I,J and L were better,K and M were slightly worse.When the concentration of bile salt was0.03%-0.3%,I,J and M were completely tolerated and the survival rate could reach100%.The study provided potential strains,which had glucose tolerance,level 收稿日期：2021-12-13作者简介：陈秀秀（1988—），女，黑龙江哈尔滨人，硕士，研究方向为饲用益生菌。
酵母菌、乳酸杆菌的分离筛选
姓名:温迪雅学号：10991367 专业：环境科学乳酸杆菌的分离筛选及鉴定一、材料与方法：1、菌种：新鲜乳酸饮料（标记只含有保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌）2、试剂：脱脂奶粉、蔗糖、1.6%溴甲酚绿乙醇溶液(溴甲酚绿、无水乙醇)、酵母膏、琼脂、革兰氏染液（结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、沙黄）、75%乙醇、香柏油、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、碳酸钙；0.4gNaOH固体、4.2ml 浓HCL(分析纯) 、20gCaCO3固体、酵母膏20g 、琼脂30g、香柏油、脱脂奶粉100g 、蔗糖10g；3、仪器：高压蒸汽灭菌锅、恒压干热灭菌箱、超净工作台、光学显微镜、培养箱、pH试纸、酸乳瓶、培养皿（φ9或φ12）、试管、300ml三角瓶（带玻珠）、移液管、天平、牛角匙、电炉、量筒、漏斗、漏斗架、玻璃棒、棉塞、吸管、线绳、标签、500ml锥形瓶、250ml锥形瓶、250ml烧杯、酒精灯、石棉网、接种针（环）、擦镜纸4、方法：（1）无菌操作倒平板、十倍稀释、划线分离，恒温培养（2）菌落观察与镜检（3）筛选生产用菌株二、实验步骤1、分离(1)配制BCG牛乳培养基，分装三角瓶，包扎，灭菌备用。
BCG牛乳培养基配制：A溶液：脱脂乳粉100g,水500ml，加入1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液1ml，80℃灭菌20min。
（1.6%溴甲苯酚绿（BCG）乙醇溶液用1.6g溴甲酚绿加入20ml无水乙醇中，再加水至100ml制成）B溶液：酵母膏10g，水500ml，琼脂20g，PH6.8，121℃湿热灭菌20min。
以灭菌操作趁热将A溶液和B溶液混合均匀后倒平板。
（2）样品的处理按照无菌操作要求，从市售新鲜酸乳中吸取10ml检样，放入装有90ml无菌水的三角瓶内，振摇混匀。
（3）分离方法①倒培养基在无菌室，先用紫外线照射半小时把表面菌灭了，在通风10min后，每培养皿倾注约15ml左右已溶化的BCG牛乳培养基，立即放在桌上摇匀，冷却凝固后即成平板。
啤酒生产酵母菌株筛选技术
啤酒生产酵母菌株筛选技术摘要: 鲜啤酒以其独特的风味、营养、时尚而流行于都市生活。
啤酒酵母菌株的特性直接决定着鲜啤酒的质量,在生产中采用不同的菌株和生产工艺,可酿造出不同类型的啤酒。
根据实际经验,提出了啤酒生产酵母菌株分离的技术要点，并依此进行了啤酒生产酵母菌株的筛选。
.关键词：啤酒酵母；筛选啤酒发酵是一个复杂的生化过程：在啤酒酵母所含酶系的作用下，原麦汁会发生变化生成酒精、二氧化碳和其它的醇、醛、酯以及硫化物，这些发酵产物使啤酒具有独特的风味，决定着鲜啤酒的泡沫、色泽和稳定性等各项指标。
啤酒生产过程中，可能存在野生酵母菌的污染及生产菌种的自然变异和衰老，从而使菌种发生退化现象[1，2]。
菌种退化后,经常表现为[1]：（1）细胞形态变化、增殖不良、初始发酵缓慢；（2）发酵过程降糖慢、发酵度低；（3）双乙酰峰值升高；（4）酵母凝聚性变差、滤酒困难。
因此,如果继续使用已退化的菌种，就会影响鲜啤酒的质量。
为了保持产品的质量，稳定鲜啤独特的风味，需要定期进行生产菌种的分离和纯化工作。
虽然有人使用活性干酵母[3]，可免除啤酒生产中的分离工作。
但是要制造有自己特色的啤酒，应在生产时从自己啤酒原液中分离、纯化出的酵母进行酿制更佳。
故建立一套自己的酵母菌株筛选体系，每年进行1-2 次的生产用菌的分离、纯化。
当然，为了不影响旺季的销售，此工作最好在销售淡季时进行。
1 啤酒酵母菌株的分离与纯化1.1 啤酒酵母菌株的分离啤酒酵母菌株的选择，即分离筛选底物的选择，一般存在选择保藏菌株和生产菌株两种方法。
保藏菌株虽然能保护原有菌种的优良性能，减少污染杂菌的机会，但从中难以选育到有益的突变型菌株。
因此，积极的筛选方法应从生产中不断选育出有利于产品质量和风味的菌株。
根据经验，选用第三代酵母发酵中，发酵旺盛的高泡期发酵液，作为啤酒酵母菌株筛选样品，最为合适。
1.2 发酵液的处理在无菌条件下吸取发酵液10mL，放入无菌的100mL 麦汁中，以10 倍稀释法稀释，取后三种稀释液各1mL 分别置于无菌平皿中，每个稀释度作两个皿。
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优良酵母菌株的分离和筛选
作者：刘晓辉， 张效川， 辛小玲， 白延琴， 徐文华， 蔡涛， 辛亚平， 昝林森， LIU Xiao-hui， ZHANG Xiao-chuan， XIN Xiao-ling， BAI Yan-qin， XU Wen-hua， CAI Tao， XIN Ya-ping， ZAN Lin-sen
作者单位：刘晓辉,LIU Xiao-hui(天津市兽药饲料监察所,天津,300210)， 张效川,ZHANG Xiao-chuan(吴起县畜牧局,陕西吴起,717600)， 辛小玲,XIN Xiao-ling(富平县畜牧兽医工作站,陕西富平,711700)， 白延琴,BAI
Yan-qin(子长县畜牧兽医局史家畔畜牧兽医站,陕西子长,717300)， 徐文华,XU Wen-hua(榆林市榆阳区牛家
梁镇畜牧兽医工作站,陕西榆林,719000)， 蔡涛,CAI Tao(渭南市畜牧技术推广中心,陕西渭南,714000)，
辛亚平,昝林森,XIN Ya-ping,ZAN Lin-sen(西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌,712100)
刊名：
家畜生态学报
英文刊名：Acta Ecologae Animalis Domastici
年，卷(期)：2013,34(1)
1.王晓宏.刘大程.殷兆丽复合酵母培养物对奶牛生产性能的影响 2010(10)
2.成娟丽.张福元生物蛋白饲料的应用 2006(06)
3.肖连冬.马红霞活菌益生高蛋白饲料的生产及应用 2007(28)
4.汤少伟.付石军.郭时金酵母培养物在饲料中的应用 2011(08)
5.翁鸿珍.池永红奶酒中酵母菌的分离与筛选 2010(04)
6.孙满吉.刘彩娟.张永根直接饲喂酵母培养物对奶牛瘤胃发酵的影响 2010(05)
7.范亚菊.邰丽萍酵母培养物在奶牛生产中的应用 2011(07)
8.辛亚平.昝林森.杜双田几株纤维素分解菌对统糠的混合发酵研究 2010(05)
9.辛亚平.昝林森.杜双田降解纤维素菌株筛选及其鉴定 2011(05)
本文链接：/Periodical_jcst201301012.aspx。