ABO疑难血型鉴定
ABO疑难血型三步鉴定法

ABO疑难血型的三步分析鉴定法
第一步:排除人为因素或操作失误。
1.重新采集血样重新规范化采集抗凝血和不抗凝血两管。
2.核对试剂,器材核对试剂,仔细阅读试剂说明书和有效期;检查离心机及其他器材
3.复查AB0血型,排除人为因素或操作失误造成的AB0正、反定型不一致。
第二步:查阅临床资料,逐条分析对照可能导致ABO正反定型结果不一致的原因(表一),或逐条分析排除不可能的原因,然后归纳总结不能排除的原因。
1.患者年龄、性别。
2.家系。
3.临床治疗用药史、输血史、造血干细胞移植史。
4.临床诊断。
第三步:根据逐条分析排除不可能的原因,归纳总结不能排除的原因,或最可能的原因,设计针对性验证实验。
表一ABO正反定型结果不一致的分类。
ABO疑难血型三步分析法

ABO疑难血型三步分析法在血型分类中没有疑难血型,迄今为止在文献中也查不到“疑难血型”的定义,因为“疑难血型”是1种血型难以检定或判定的“现象”,而不是1种型别。
检定1份标本是否属“疑难血型”,除了标本本身的特殊性外,还与实验室的设备、技术人员的水平、经验等多种因素有关,例如1份ABO亚型标本,在基层医院血库可能因为正定型与反定型不一致而分析不出原因被认为是“疑难血型”,但在血液中心血型参比实验室该问题可能就易于迎刃而解。
在检定血型时,标本如果受多种因素干扰使结果难以判定,便呈现“疑难血型”现象。
一、干扰ABO血型正确判定的因素(一)生理性因素1.年龄老年人(ABO抗原或ABO抗体减弱),6个月前的婴儿(ABO 抗原或ABO抗体不成熟),可能导致ABO血型误定。
2.ABO亚型包括A(B)型、B(A)型,ABO抗原减弱导致细胞定型(正定型)受干扰,或血清中出现不规则抗体干扰血清定型(反定型)。
3.冷凝集素有些健康人血清中含有冷凝集素,且在<4℃才有活性,不干扰ABO血型检定,如果冷凝集素效价升高,或在室温以上反应,致敏自身红细胞可能干扰ABO正定型,存在于血清可能干扰ABO反定型。
4.“先天性”无ABO抗体近年有“先天性”无ABO抗体的个案报告,原因有待研究。
5.双精子授精红细胞呈嵌合体。
6.个体特异性个别人血清中ABO可溶性血型物质过高,ABO正定型红细胞凝集减弱。
(二)实验技术原因1.标本混淆如采错被检者,红细胞和血清非同一人,记录结果与标本编号不对应。
2.静脉输液处采样ABO抗体被输液稀释,干扰ABO反定型。
3.采样不规范用凝血块洗下红细胞检定血型,其中混有凝集程度不一的红细胞;用血浆做ABO反定型,操作过程中纤维蛋白析出凝集试剂红细胞。
4.试剂质量问题或漏加试剂定型试剂过期失效,未达标准,被污染。
操作中未遵循“先加血清后加细胞”的原则,大批量样本试验时漏加试剂血清或试剂红细胞。
5.实验操作不规范被检红细胞未洗涤,非特异性粘附血浆蛋白,或被检红细胞悬液过浓或过稀。
abo血型鉴定实验内容

abo血型鉴定实验内容
ABO血型鉴定是一种常见的实验方法,用于确定一个人的血型属于A型、B型、AB型还是O型。
该实验的内容主要包括以下几个步骤:
1. 血液采集:在实验开始前,需要使用适当的采血器具采集被测试
者的血液样本。
合理的消毒措施和采样技巧是确保实验结果准确性的
重要因素。
2. 血清和抗血清制备:在实验过程中,需要制备出几种关键的试剂,包括血清和抗血清。
血清是指经过离心等处理后分离出的含有抗体的
液体,而抗血清则是指针对某特定抗原产生的抗体。
3. 血型鉴定反应:将被测血液样本与A、B、AB、O型抗血清分别
混合,进行凝集反应观察。
如果血液样本中存在与抗血清相应的抗原(例如A型抗原与抗A血清),则会发生凝集反应,表明被测血液样
本中存在与该抗血清相对应的血型。
4. 结果判读:根据实验中的凝集反应结果,结合正反对照的观察,
可以判断被测血液样本的血型。
比如,如果被测血液样本与A型抗血
清和O型抗血清发生凝集反应,但与B型抗血清不发生凝集反应,则
可以判定该血液样本为A型血。
需要注意的是,在进行ABO血型鉴定实验时,实验操作人员务必
严格遵守实验室安全指导,并正确运用各种实验仪器和试剂。
同时,
实验者需要准确记录实验过程和结果,以便分析和总结实验数据。
ABO血型鉴定实验是一种简单而有效的方法,可用于临床血型鉴定、输血配型等实践中。
通过这种实验方法,我们能够更好地了解个体的
血型特征,为医学诊治以及研究提供有价值的信息。
ABO疑难血型鉴定和新生儿溶血病

第一页,共57页。
输血(shū xuè)前免疫学检测
? 输血(shū xuè)前检测: 血型(xuèxínAg)B鉴O血定型:(正反定型)、 RhD血型 抗体筛选 交叉配血:主侧、次侧
? 目的:准确定型,选择相容血液。
? 意义:输血安全、及时、有效。
2
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新生儿溶血(rónɡ xuè)病的症状
? 流产、早产(zǎochǎn)、死胎 ? 黄疸(huángdǎn)、贫血、肝脾肿大 ? 胆红素脑病 (核黄疸):智力发育不全或死亡 ? HDN检测已被列为孕妇围产期保健的重要内容。
第三十一页,共57页。
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高胆红素血症
? 指新生儿血清(xuèqīng)总胆浓度超过220μmol/L(13mg/dL),以间
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高胆红素血症
? 感染(gǎnrǎn)、围产因素、母乳性黄疸
? 败血症、肺炎(fèiyán)、早产、新生儿溶血病等
第三十三页,共57页。
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新生儿溶血(rónɡ xuè)病的分类
? ABO HDN:第 1胎即可发病,通常临床(lín chuánɡ)症状较轻 ? Rh HDN :一般(yībān)发2生胎在或第多次妊娠后 ,黄疸出
Ay 0 0 0 ++++ 0
0 ++++ 0 A/H
Am 0/ ± 0 0/± ++++ 0
0 ++++ 0 A/H
Ax 0/± 0 + ++++ 0 0/+ ++++ 0 H
ABO疑难定型

ABO疑难定型一、ABO疑难血型鉴定的方法(一)正反定型:正定型:-A, -B,-AB, -H, -A1反定型:Ac, Bc, Oc, 自身对照1. ABO正定型中各种试剂用途疑难定型中正定型用抗血清抗-A及抗-B抗-AB:确认弱A和弱B抗原,与弱A及弱 B抗原亲和力强,会产生强反应抗-H:用于检查亚型及孟买型, A亚型红细胞上的H抗原多于正常A型抗-A1: 用于A亚型(如A2, A3)检测2. H抗原在红细胞上的分布3. ABO反定型中各种试剂的用途反定型中试剂红细胞的意义A及B细胞: 确认抗-A或抗-B抗体O型红细胞:检查是否存在ABO系统以外抗体干扰ABO反定型自身对照: 用于确认正反定型结果的有效性,排除自身抗体对定型的干扰(如冷凝集等)A2细胞: 用于亚型的鉴定, 尤其是在怀疑是A亚型且又存在抗-A1抗体的情况下(二)型物质测定型物质准备:1~2ml唾液,沸水煮10分钟,离心后得到的上清。
标清的调制:标清用盐水稀释至其效价为1:16中和:将0.5ml型物质与调制后的标清0.5ml等体积混合,室温放置30分钟检测:用Ac检测中和后的抗-A, Bc检测中和后的抗-B.结果判断:如果抗-A被中和,则被检者为A型,如果抗-B被中和,则被检者为B 型。
(三)吸收放散吸收用RBC:盐水洗涤5次的被检者压积RBC 1ml。
吸收用的标准血清将压积RBC和标清按等体积比例混合,在相应的温度条件下(4℃)孵育1小时,每隔15分钟混匀一次用盐水洗涤孵育后的细胞6次,得到压积RBC,加入等量盐水。
56℃水浴震荡10分钟,离心获得上清即为放散液。
用标准试剂红细胞检测放散液。
(四)O型筛选红细胞的应用抗原组成:三组合细胞,要求必须具备全部的Rh因子I: O型R1R1(CDe/CDe); II:O型 R2R2(cDE/cDE); III: O型rr(cde/cde)用途: 用于受血者、献血员及孕产妇等的ABO系统以外不规则抗体的筛选目的: 在配血之前,有针对性、按比例的去寻找与带有抗体的病人相配合的血(五)自家冷凝集血样的ABO定型正定型用红细胞的准备:血样采集后,立即离心,获得压积红细胞用37℃温盐水洗涤红细胞45℃热放散3分钟巯基试剂处理: 破坏IgM抗体自家冷凝集血样的ABO定型反定型用血浆或血清的准备血样采集后放置4℃冰箱静置24小时,使红细胞充分吸收自身冷凝集抗体用自身红细胞吸收去除自身冷抗体用O型红细胞吸收去除ABO系统以外的非特异性及特异性抗体(六)获得性B1. 获得性B及多凝集现象获得性B:肠紊乱及感染病人, 细菌酶影响A抗原的受体肠内壁通透性增加,而后细菌多糖吸附在红细胞表面多凝集现象:异常或变形的RBC被所有正常人的血清凝集(微生物酶作用暴露或激活膜隐蔽受体多凝集血样中的血清不与自身反应)2. 获得性B产生的主要机理二、ABO正反定型不符的问题分析(一)ABO定型问题经常发生的情况为:1. 明显缺失应该出现的抗-A或抗-B:(1) 新生儿血样(2) 免疫缺陷、免疫紊乱(3) 前带现象(4) 血型型物质过多(5) 抗原太弱,常规方法检查不出来,相应血清中无抗体(6) 亚型,反应是混合视野2. 由于试剂被污染,或试剂中有额外抗体3. 明显多出抗原(或多出抗体)(1) 亚型,如A2型可能血清中有抗-A1(2) 自家凝集(3) 获得性B(二)引起ABO正反定型不一致的原因分析1. 技术因素:(1) 试剂贮存不当(2) 使用技术错误(3) 使用错误的试剂(4) 使用污染或失效的试剂(5) 离心速度不当2. 存在IgM性质的自家冷抗体由于自家冷抗体(冷凝集病,CHD)而导致自家溶血的病人,在低于37℃时血细胞自发凝集,影响正反定型。
ABO疑难血型鉴定中的临床应用价值评估

ABO 疑难血型鉴定中的临床应用价值评估【摘要】目的讨论ABO疑难血型鉴定的分析与研究。
方法选取2022年1月~2023年2月我院住院患者1000例血标本中疑似ABO疑难血型的血液标本8例作为研究对象,而后对其观察不同检测方法对血液标本检测结果的符合情况及盐水试管法检测ABO疑难血型血液标本符合率低的原因进行探析。
结果 8例疑似ABO疑难血型血液标本中,与单纯实施盐水试管法与在此基础上加用聚凝胺法相比,盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验检测方式的符合率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。
盐水试管法检测ABO疑难血型血液标本符合率低的原因有AB 亚型、无抗-B抗体A型、弱A抗原、弱B抗原、无抗体O型、不规则抗体阳性、低抗-B效价、低抗-A效价、低抗-B效价及B亚型。
结论盐水试管法+聚凝胺法+吸收放散试验检测方式的实施对于血型正、反型鉴定的符合率最高,值得在临床推广。
【关键词】ABO疑难血型;鉴定;分析血型是人体的一种遗传性状。
ABO血型鉴定主要用于:①临床输血:当循环血量不足或大失血或贫血需进行输血治疗,在输血前必须先选择血型相同的供血者,再进行交叉配血,完全相同后才能输血。
②在皮肤、肾移植等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体。
③不孕症和新生儿溶血症病因的分析。
④亲子鉴定等。
在正常情况下,每个人的血型和抗原强度终生不变[1]。
但在某些病理条件下(如恶性血液病及肿瘤),红细胞上的血型抗原物质或强度会发生改变,从而使血型发生相应的变化。
血液病患者常需要输注血液制品,而正确选择血型鉴定方法和血液制品对输血安全具有至关重要的作用。
本研究将8例血液病患者疑难血型的鉴定过程及输血策略分析过程报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2022年1月~2023年2月我院住院患者1500例血标本中疑似ABO疑难血型的血液标本8例作为研究对象,其中,男4例,女4例,年龄22~50岁,平均年龄(34.6±6.0)岁;标本来源:医院送检标本血液科有5例、普通内科标本有2例、ICU病区送检1例。
abo疑难血型鉴定和新生儿溶血病教学稿件

通过深入探讨 ABO 疑难血型鉴定和新生儿溶血病的诊断、治疗和预防等方面的 知识,为临床医生和实验室技术人员提供实用的指导和建议,促进对这两种疾 病的有效处理和预防。
02
abo血型系统的基本知识
abo血型系统的定义和分类
定义
ABO血型系统是人类血型系统中 的一种,是根据红细胞表面的A、 B抗原的不同来分类的。
新生儿溶血病的主要症状包括黄疸、贫血、肝脾肿大等,严重时可能导致胆红素 脑病,威胁患儿生命。
新生儿溶血病的原因
母子血型不合
这是新生儿溶血病的主要原因, 常见于母亲为O型血,胎儿为A 型或B型血的情况。此时,母亲 体内产生A或B型抗体,通过胎盘
进入胎儿体内,导致溶血。
红细胞酶缺乏
某些新生儿体内缺乏红细胞酶, 如葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏,
案例二:新生儿溶血病的案例分析
总结词
新生儿溶血病早期发现与治疗
详细描述
本案例介绍了一例新生儿溶血病患儿的早期发现与治疗过程,通过及时诊断和有效治疗,患儿病情得 到控制并顺利出院。
案例三:成功治疗的案例分析
总结词
成功治疗的关键因素
详细描述
本案例介绍了一例成功治疗的案例,患者为新生儿溶血病合并肺炎,通过综合治疗和护 理,患儿病情得到有效控制并康复出院。
药物治疗
对于溶血引起贫血严重的新生儿,可以考虑输注红细胞或使用铁剂 等药物治疗。
换血治疗
对于溶血严重或出现严重并发症的新生儿,可能需要采用换血治疗, 以清除体内的抗体和致敏红细胞。
新生儿溶血病的护理和康复
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护理措施
对于患有新生儿溶血病的新生儿,应加强护理, 注意保暖、喂养和卫生,同时密切监测黄疸和贫 血等症状。
ABO血型鉴定操作规程

ABO 血型鉴定操作规程1. 原理根据红细胞上和血清(或者血浆)中有无 A 抗原和(或者)B 抗原及其抗体,将血型分为A 型、B 型、AB 型及O 型。
可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型鉴定ABO 血型。
正定型是指用已知抗正定型-A、抗-B 血清来检测受检红细胞上有无相应的 A 抗原和(或者) B 抗原;反定型是指用已知反定型A1 型、B 型红细胞来检测受检血清 (或者血浆) 中有无相应的抗-A 和(或者)抗-B。
2. 原始样品要求5 mL 静脉全血。
3. 样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂样品容器和添加剂真空试管,EDTA.K2 抗凝/普通试管,不抗凝。
4. 检测环境要求检测环境要求检测环境要求检测环境要求温度:18℃~27℃,湿度:30%~70%。
5. 所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备所需材料和设备5.1 设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。
5.2 材料抗-A、抗-B 血清、ABO 标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水(NS)、干净空试管。
6. 检测操作过程检测操作过程检测操作过程检测操作过程6.1 将受检标本以1000g 离心5min,使标本血浆/血清与红细胞分离,吸取红细胞,用NS 洗涤三次后,配成3%~5%红细胞悬液。
6.2 取6 支小试管,分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。
6.3 在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A 和抗-B 血清各50 μL ,其余管加入受检血浆/血清各100 μL 。
6.4 在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者3%~5%红细胞悬液各50 μL ,摇匀。
6.5 在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O 红细胞试剂各50 μL ,摇匀。
6.6 1000g 离心15sec,轻轻悬浮红细胞,观察结果并记录。
6.7 根据实验需要,除室温下观察结果外,另可增加在4℃、37℃下观察结果。
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ABO正、反定型不合疑难血型三步分析法”
ABO正反定型不符定义:
①ABO正反定型不符,即正定型与反定型提示的血型结果不一致
②ABO正反定型相符,但为弱反应,正定型反应强度<3+,或反定型反应强度<2+
③正定型为O型,反定型与A细胞、B细胞凝集强度差别≥2+
凡是遇到ABO正、反定型不合的病人
第一步: 排除人为因素/操作失误
1,重新采集血样
⑴分抗凝,不抗凝两管
⑵排除采错人,输血/输液处采样……
2,核对试剂,器材
仔细阅读试剂效期,说明书,操作方法,注意事项
3,规范化操作复检
复检ABO 血型仍然正、反定型不合,就确定为疑难血型进入三步法第二步
第二步:凡是ABO正、反定型不合的病例
按下面方法,分析病人的抗原、抗体是“变多?还是变少?”
正、反定型结果判断
1,正定型AB, (两种抗原) 抗原变多
正定型O, (无抗原) 抗原变少
2,反定型O, (两种抗体) 抗体变多
反定型AB, (无抗体) 抗体变少
3,正定型A, 或B (一种抗原) ①抗原变多;
②抗原变少
反定型A, 或B (一种抗体) ①抗体变多;
②抗体变少
★不要过问“真滴变多变少没有”,你依样画葫芦就是了
规律很好记,不管是抗原/抗体:两种→肯定是变多
没有→肯定是变少;一种→可能是变多,也可能是变少
归纳ABO正,反定型不合的“五大类30种原因”
知道有个“五大类30种原因”就可以了
不要记,书上有这些表,现用现翻书
★用排除法
(1)红细胞抗原变少7种(2)红细胞抗原变多7种
①<6月,老年(临床)□①自身凝集素(临床诊断)□
②白血病(临床诊断)□②红细胞粘附大量蛋白(RBC未洗)□
③输异型血(输血史)□③样本含试剂反应物(RBC未洗)□
④造血干细胞移植(病史)□④造血干细胞移植(病史)□
⑤血型物质↑□⑤获得性B抗原(类B)(临床感染)□
⑥急性大失血(临床病史)□⑥B(A)表型□
⑦ABO亚型□⑦输异型血(输血史)□
注意:每条的临床提示
(3)血清抗体变少6种(4)血清抗体变多7种
①<6个月/老年(临床)□①自身抗体(临床诊断AIHA)□
②ABO亚型□②同种抗体(抗筛)□
③低丙种球蛋白血症(化验)□③对试剂反应的物质□
④造血干细胞移植(病史)□④血清蛋白异常(化验)□
⑤先天性ABO抗体缺失□⑤输异型血浆(输血史)□
⑥大量输液(输血史)□⑥造血干细胞移植(病史)□
⑦输含血型抗体Ig(输血史)□注意:每条的临床提示
5)混合凝集(mf)3种
①3个月内输异型血(输血史)□
②造血干细胞移植(病史)□
③双精子受精/嵌合体(问家系)□
注意:每条的临床提示
归纳剩下不能排除的原因:
第三步: 实验验证
针对剩下几种不能排除的原因, 选择针对性实验验证,如何选择针对性实验呢?
翻看书本:
《输血免疫血液学实验技术》人民卫生出版社,2011 .1; P131。