布病虎红平板凝集试验

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布病的检测方法

布病的检测方法

虎红平板凝集试验(RBPT):实验原理:该试验又称为板式孟加拉红平板凝集实验。

由于所用的抗原是酸性(PH3.6—3.9)带色的抗原,该抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性,检查出的抗体是IgG类,因此提高了该项反应的特异性。

器材与试剂:虎红平板凝集抗原、载玻片、移液器、枪头方法:在载玻片上加抗原30μl,加入30μl被检血清,混匀。

在5min内观察结果,轻摇载玻片,出现凝集颗粒为阳性,否则为阴性。

试管凝集试验(SAT):实验原理:布鲁氏菌侵入机体后,会刺激机体产生特异性抗体,这种抗体可与相应的布氏菌抗原发生特异性结合,在电介质作用下,就会形成肉眼可见的凝集反应,也就是用已知抗原查未知抗体。

器材与试剂:布病试管凝集抗原、生理盐水、试管、移液管、移液器、小烧杯、枪头、试管架方法:1.准备试管:取9支试管放在试管架中编号。

1号管为血清对照管,2—8号为试验管,9号为抗原对照管。

2.血清稀释:1号管加入2.3ml生理盐水,2号不加,3号—9号各加入0.5ml生理盐水。

1号管加入0.2ml被检血清,混匀后各吸0.5ml加入2、3号管。

从3号开始做倍比稀释,8号吸0.5ml弃去。

3.加入抗原:10倍稀释抗原(用烧杯,1ml抗原9ml生理盐水),从2号开始每支加0.5ml稀释后抗原,从2号开始,血清被稀释浓度为1:25、1:50、1:100、1:200、1:400、1:800、1:16004.凝集试验标准比浊管的配制(判定透明程度的依据):取5支试管,编号,取稀释后的抗原再做2倍稀释。

盐水(ml) 清亮度标记管号抗原稀释液(ml)1 0.00 1.00 100% ++++2 0.25 0.75 75% +++3 0.50 0.50 50% ++4 0.75 0.25 25% +5 1.00 0.00 0% —充分混匀,将所有试管放入温箱中37℃培养20—22小时取出,在室温下放置1—2小时后观察结果。

布氏菌病虎红平板凝集试验抗原 新兽药证书

布氏菌病虎红平板凝集试验抗原 新兽药证书

布氏菌病虎红平板凝集试验抗原新兽药证书一、概述布氏菌病是一种由布氏菌引起的家畜和野生动物传染病,也可传染给人类。

布氏菌病的传播对动物养殖业和食品安全造成了严重威胁,因此对布氏菌进行有效的检测和防控至关重要。

其中,虎红平板凝集试验是一种常用的血清学检测方法,对布氏菌病的诊断具有重要意义。

二、布氏菌病虎红平板凝集试验抗原1. 抗原来源布氏菌病虎红平板凝集试验抗原主要来源于已知含有布氏菌的动物血清,如牛、羊、猪等。

这些血清样本需要通过严格的筛选和处理,以确保抗原的纯度和稳定性。

2. 制备方法虎红平板凝集试验抗原的制备需要严格按照相关技术规范进行操作。

首先需要从携带布氏菌的动物中提取血清样本,然后通过离心、超滤等手段去除杂质和细菌。

经过适当的稀释和加工处理,最终得到用于虎红平板凝集试验的抗原制剂。

3. 抗原质量控制为了确保抗原的稳定性和活性,需要对抗原制剂进行严格的质量控制。

包括对抗原的存储条件、保存期限、抗原效价等指标进行监测和管理,以确保虎红平板凝集试验的准确性和可靠性。

三、新兽药证书1. 申请流程布氏菌病虎红平板凝集试验抗原作为兽药的一种,需要获得新兽药证书才能在市场上合法销售和使用。

申请新兽药证书需要遵循相关政策和法规,提交包括临床试验报告、生产工艺流程、质量控制方案等材料,并经过相关部门的审批和认证。

2. 证书标注一旦获得新兽药证书,抗原制剂需要在包装、说明书等相关资料上标注证书编号、有效期限等信息。

这些信息对药品的合法性和可追溯性具有重要意义,也为用户提供了使用保障。

3. 证书更新新兽药证书的有效期通常较短,一旦过期就需要重新申请并通过审批,获得更新证书。

抗原生产企业需要及时关注证书的有效期限,提前做好证书更新工作,以保障产品的合法生产和销售。

四、结论布氏菌病虎红平板凝集试验抗原的制备和管理对于布氏菌病的检测和防控具有重要意义。

严格控制抗原的质量和规范生产流程、及时申请和更新新兽药证书,是保障抗原生产质量和市场合法的关键步骤。

虎红平板实验防控布病存在的问题及对策

虎红平板实验防控布病存在的问题及对策

虎红平板实验防控布病存在的问题及对策
魏文艳
【期刊名称】《畜牧兽医杂志》
【年(卷),期】2024(43)1
【摘要】布鲁氏菌病是一种人兽共患传染性病,过去主要在北方流行,进入2000年后随养殖业的发展,传播范围逐步扩大,现在已经波及全国。

该病是由布鲁氏菌感染引起的,一般由患病的牛、羊、猪等家畜传染给人。

家畜患布鲁氏菌病常常出现流产、不孕、空怀、繁殖成活率降低、使牲畜头数明显减少、产肉、产奶量下降。

直接影响着畜牧业的发展各农民致富。

布病的诊断以血清学诊断为主,基层常见的布病诊断方法为虎红平凝集试验,这种检测方法有价格便宜,方便等优点,但是也存在一些不足,我就不足之处说几点自己的看法,并提出改进的办法。

【总页数】2页(P140-141)
【作者】魏文艳
【作者单位】天水市动物卫生技术工作站
【正文语种】中文
【中图分类】S852.614
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虎红平板凝集试验原理

虎红平板凝集试验原理

虎红平板凝集试验原理虎红平板凝集试验是一种常见的血液凝集反应试验,用于检测人体血清中的抗凝血系统抗体。

试验原理:虎红平板凝集试验基于抗原-抗体反应中的凝集现象。

在试验过程中,首先将患者的血清样本与特定抗原反应,然后观察是否发生凝集的现象。

虎红平板凝集试验常用的抗原有:人红细胞凝集素(虎红)抗原、麦芽球蛋白原、系膜性肾炎合成物等。

试验步骤:1. 准备血清样本:从患者外周血中提取血清,并对血清进行稀释。

2. 准备虎红悬液:将虎红悬液与盐水溶解,制备成适当浓度的虎红悬液。

3. 加入抗原:将稀释后的患者血清和特定抗原(如虎红)混合,使其充分反应。

4. 等待反应:将混合液放置于试验管中,静置一段时间,观察是否出现凝集。

时间可根据需要确定。

5. 观察结果:通过肉眼观察凝集的形状和程度,判断血清中是否存在抗体。

凝集原理:虎红平板凝集试验中的凝集现象与抗原-抗体反应有关。

当抗原与相应抗体结合时,会形成抗原-抗体复合物。

这些复合物会在某一特定条件下发生凝聚或聚集,形成可见的凝集物。

凝集形成的机制有两种:1. 桥联凝集:当抗原的两个单元结合了两个相应抗体的结合部位时,抗体和抗原通过互相之间的连接桥联形成长链状结构,从而形成凝集。

这种凝集现象常见于多价抗原和多价抗体反应。

2. 网络凝集:当抗体与抗原的结合位点多于两个时,抗原-抗体复合物会在适当的条件下形成结网状结构,从而发生凝集。

这种凝集常见于多聚体抗原和多价抗体反应。

虎红平板凝集试验可用于以下情况的检测:1. 抗体检测:可以用于检测某些特定抗体的存在,如抗麻疹抗体、类风湿因子等。

2. 诊断:可用于一些疾病的辅助诊断,如自身免疫性疾病、风湿性疾病等。

3. 监测疗效:可用于评估治疗效果以及疾病进展情况。

4. 预防:有些疫苗接种后可以引起产生特定抗体,虎红平板凝集试验可以用于检测疫苗接种后人体是否产生了相应的抗体,从而判断免疫效果。

总结:虎红平板凝集试验是一种通过观察抗原-抗体反应的凝集现象来检测抗体的常用方法。

布氏杆菌病虎红平板凝集操作流程

布氏杆菌病虎红平板凝集操作流程

布氏杆菌病虎红平板凝集实验操作流程材料与试剂以布氏杆菌病平板凝集反应为例。

1.玻璃板、刻度吸管等。

2.布氏杆菌平板凝集抗原、布氏杆菌标准阳性血清。

操作方法1.取洁净玻板一块,用玻璃铅笔划成方格,并注明待检血清号码。

2.取0.2ml吸管分别吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格内。

大规模检验时,可只做2个血清量,大动物用0.04ml和0.02ml,中小动物用0.08ml和0.04ml。

每检一个样品需换一只吸管。

3.每格内加布氏杆菌平板凝集抗原0.03ml,滴在血清附近,而不要与血清接触。

用牙签(或火柴杆)自血清量最小的一格起,将血清与抗原混匀,每份血清用一根牙签。

4.混合完毕,将玻板置凝集反应箱上均匀加温或采用别的办法适当加温,使温度达到30℃左右。

3min~5min内记录结果。

结果判定++++:出现大的凝集块,液体完全清亮透明,即100%凝集。

+++:有明显的凝集片,液体几乎完全透明,即75%凝集。

++:有可见的凝集片,液体不甚透明,即50%凝集。

+:液体混浊,有小的颗粒状物,即25%的凝集。

-:液体均匀混浊,即不凝集。

以出现++凝集的血清最高稀释倍数作为该份血清的凝集价。

大动物(牛、马、骆驼等)以0.02ml出现凝集价判为布氏杆菌病血清阳性,0.04ml出现凝集价判为可疑。

中小动物(猪、山羊、绵羊等)以0.04ml出现凝集价判为该份血清为布氏杆菌病阳性血清,0.08ml出现凝集价判为可疑。

注意事项1.每次试验必须以标准阳性血清和标准阴性血清进行对照。

2.加抗原前必须摇匀。

3.反应温度最好保证在30℃左右,3min~5min内判定。

如反应温度偏低,可适当延长判读时间。

4.如用两个血清量作试验,任何一个血清量出现凝集反应时,则需要用四个血清量重检。

5.平板凝集反应最好是用于初筛,如出现阳性或可疑反应,再用试管凝集反应进行复检,以定性。

6.平板凝集反应与试管凝集反应的关系。

虎红平板凝集试验(检测布病初筛试验)—人畜检测法一样

虎红平板凝集试验(检测布病初筛试验)—人畜检测法一样

虎红平板凝集试验(检测布病初筛试验)—人畜检测法相同虎红平板凝集试验介绍:虎红平板凝集试验是用来诊断布氏杆菌病。

布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的人畜共患的急、慢性传染病。

因接触病畜或食用受染牛奶或奶制品而感染。

潜伏期1~3周,临床特点是缓慢起病,长期发热、多汗、虚弱、全身痛和关节痛,急性期症状多在3~6月内消退。

虎红平板凝集试验正常值:阴性虎红平板凝集试验临床意义:异常结果:阳性(50%)凝集:诊断布氏杆菌病符合率为95.92%。

需检测人群:感染,常发热,多汗,虚弱,全身痛者虎红平板凝集试验注意事项:不适合人群:没有检查前:使用前应充分摇匀样本,出现污染或有摇不散的凝块时不得使用检查时:抗原和血清应在室温中放置30~60分钟后,再进行试验虎红平板凝集试验检查过程:1 材料准备1.1 试剂:抗原、标准阳性血清、阴性血清。

1.2 受检血清应新鲜,无明显蛋白凝块,无溶血和无腐败气味。

1.3 洁净的玻璃板,其上划上4cm 2 的方格。

1.4 吸管或分装器,适于滴加0.03ml。

1.5 牙签或火柴杆,供搅拌用。

2 操作方法2.1 将玻璃板上各格标记受检血清号,然后加相应的血清0.03ml。

2.2 再受检血清旁滴加抗原0.03ml。

2.3 用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。

2.4 每次试验应设阴、阳性对照。

3 结果判定在阴阳性血清对照成立的条件下,方可对被检血清进行判定。

受检血清在4 分钟内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+),无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性(-)。

注:对出现阳性反应的动物须进一步作补体结合试验,或其他辅助诊断试验(试管凝集试验)。

布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原系用抗原性良好的布鲁氏菌菌株,接种于适宜培养基培养,收获菌体,经加热灭活,离心后用虎红染液染色,悬浮于乳酸缓冲液中制成。

反应强度的判定标准“-”无凝集,呈均匀粉红色。

“+”稍能查到凝集,稍有卷边形成,凝集物间液体呈红色。

“++”形成明显卷边,凝集块间液体稍清亮。

虎红平板凝集试验原理

虎红平板凝集试验原理

虎红平板凝集试验原理
虎红平板凝集试验是一种常用的实验方法,用于检测血液中的凝血功能。

该试验通过观察血浆在平板上的凝集情况来判断凝血功能的正常与否,对于诊断血液病变和评估凝血功能起着重要作用。

在进行虎红平板凝集试验时,首先需要准备好所需的实验材料,包括平板、虎红试剂和患者血浆。

接着,将平板放置在水平面上,滴加适量的虎红试剂在平板上形成一层薄膜。

然后,将患者血浆滴加到虎红试剂上,轻轻摇晃平板使血浆均匀分布。

在一定时间内观察血浆的凝集情况,可以根据凝集程度来判断凝血功能的好坏。

虎红平板凝集试验的原理是基于凝血蛋白在凝集过程中的相互作用。

当血浆中存在凝血功能异常时,凝血蛋白之间的相互作用会受到影响,导致凝集的速度和程度发生改变。

通过观察血浆在平板上的凝集情况,可以判断血浆中凝血功能的正常与否,进而指导临床诊断和治疗。

虎红平板凝集试验在临床中广泛应用于各种凝血功能异常的检测和评估。

通过该试验可以快速、准确地了解患者的凝血功能状态,为临床诊断和治疗提供重要参考。

同时,虎红平板凝集试验具有操作简便、结果可靠的特点,成为临床常用的凝血功能检测方法之一。

总的来说,虎红平板凝集试验是一种简便、可靠的凝血功能检测方法,通过观察血浆在平板上的凝集情况可以判断凝血功能的正常与
否。

该试验在临床诊断和治疗中具有重要意义,对于及时发现和处理凝血功能异常具有重要价值。

希望通过本文的介绍,读者能够更加了解虎红平板凝集试验的原理和应用,从而更好地应用于临床实践中。

布鲁氏菌虎红平板凝集试验

布鲁氏菌虎红平板凝集试验

布鲁氏菌虎红平板凝集试验
检验方法:依据GB/T18646-2002
1、材料准备
1.1 抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供,按说明书使用。

1.2受检血清应新鲜,无明显蛋白凝块,无溶血和无腐败气味。

1.3洁净的玻璃板,其上划分成4cm2的方格。

1.4吸管或分装器,适于滴加0.03 ml。

1.5牙签或火柴杆,供搅拌用。

1.6观察结果照明用光源
2、操作方法
2.1 将玻璃板上各格标记受检血清号,然后加相应血清0.03ml。

2.2 在受检血清旁滴加抗原0.03ml。

2.3 用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。

2.4 每次试验应设阴、阳性血清对照。

3、判定
3.1 在阴、阳性血清对照成立的条件下,方可对被检血清进行判定。

3.2 受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+),无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性(-)。

附:
阴性对照:
阳性对照:
品控中心
2013-4-22
操作流程图
为了便于观
察结果,辅
以光源照明。

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