鸡蛋生产环节沙门氏菌检测及洁蛋对蛋品质影响的研究
沙门氏菌检测实验报告
沙门氏菌检测实验报告沙门氏菌检测实验报告一、引言沙门氏菌是一种常见的细菌，可以引起人类和动物的食物中毒。
为了确保食品安全，及时检测沙门氏菌的存在非常重要。
本实验旨在通过检测食品样品中的沙门氏菌，探究食品安全的保障措施。
二、实验材料和方法1. 实验材料：- 食品样品：我们选取了市场上常见的鸡蛋作为实验样品。
- 培养基：使用含有沙门氏菌生长所需营养物质的培养基。
- 实验器材：培养皿、移液管、显微镜等。
2. 实验方法：- 样品处理：将鸡蛋表面消毒后，取一部分样品涂抹在培养皿上。
- 培养：将培养皿置于恒温培养箱中，以适宜的温度孵育。
- 观察：观察培养皿上是否有沙门氏菌的生长。
- 显微镜观察：将培养皿中的细菌取出，放在显微镜下观察其形态特征。
三、实验结果经过一段时间的培养，我们观察到培养皿上出现了一些类似沙门氏菌的菌落。
为了确认这些菌落是否真的是沙门氏菌，我们进行了显微镜观察。
结果显示，这些菌落具有沙门氏菌的典型形态特征，包括短而粗的杆状细胞和鞭毛等。
四、讨论通过本实验，我们成功地检测出了食品样品中的沙门氏菌。
这一结果表明，市场上的鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
沙门氏菌是一种能够在人体内引起食物中毒的致病菌，因此，我们需要采取相应的措施来确保食品安全。
目前，食品安全已成为社会关注的焦点之一。
为了减少沙门氏菌的污染，我们可以从以下几个方面入手：1. 加强食品生产环节的卫生管理，包括饲养环境的清洁和规范、饲料的质量监控等。
2. 提高消费者的食品安全意识，教育大众正确处理和烹饪食品的方法，避免生食或未煮熟的食物。
3. 增加食品检测的频率和范围，加强对食品生产企业的监管，及时发现和处理存在问题的食品。
综上所述，沙门氏菌检测实验的结果表明鸡蛋存在沙门氏菌的污染风险。
为了保障食品安全，我们需要加强对食品生产环节的管理和监督，提高消费者的食品安全意识，并加强食品检测的力度。
只有通过全社会的共同努力，才能确保食品的安全和健康。
鸡蛋中沙门氏菌的快速检测
陈 飞等 :鸡蛋中沙门氏菌的快速检测
— 285 —
来源地
盐城 苏州 无锡 扬州 合计
表 1 鸡蛋沙门氏菌的样品检测结果
样品数 (枚 )
196 60 20 20 296
PCR 检测
阳性数 (枚 ) 38 9 3 4 54
百分率 (%) 19. 39 15. 00 15. 00 10. 00 18. 24
收稿日期 : 2009 - 07 - 22 基金项目 :江苏检验检疫课题 (编号 : 2007KJ06) 。 作者简介 :陈 飞 (1970—) ,男 ,江苏射阳人 ,兽医师 ,主要从事出入
境检验检疫 。 Tel: ( 0512) 56302700; E - mail: bainui@126. com。 通讯作 者 : 成 大 荣 ( 1971—) , 男 , 副 教 授 。 Tel: ( 0514 ) 87892598;
沙门氏菌是一类对人类和动物健康构成极大危害的革兰 氏阴性致病菌 [1 ] ,是食品 、水源及畜产品的重要污染菌 ,可引 起人食物中毒 、急性肠胃炎和动物腹泻等疾病 [2 - 4 ] 。蛋 、肉 、 奶等畜产品营养丰富 ,夏秋季节极易污染沙门氏菌 ,人类一旦 摄入了含有大量沙门氏菌的畜产品 ,就会引起细菌感染 ,进而 导致食源性中毒 [5 ] 。在引起沙门氏菌中毒的食品中 ,约 90% 是蛋 、肉 、奶等畜产品 [6 ] ,因此沙门氏菌的快速检测对公共卫 生 、食品卫生 、畜牧兽医和口岸检疫等都具有重要意义 。本研 究建立了基于 SP I - 3的 m g tC基因的 PCR 快速检测方法 ,并 对来自江苏省部分地区的鸡蛋进行了沙门氏菌检测 ,为预防 食源性沙门氏菌感染提供借鉴材料 。
食品鸡蛋及死胚蛋中沙门氏菌的检测
２ １ 年第 ７ ０１ 期
收稿 日期 ：２ １— ３ ０ ０ ０ — ７ １
４ ．％ ，中毒人 数 ２７ ９人 ，死 亡 ４人 ＿ ０ 年 美 ４成 ５ 多颗鸡蛋被 召 亿 回 ，由此带来 了巨大 的经济损失。这一事件 引起 了 各 国对鸡蛋生产安全 的高度重视。鸡蛋因其 营养丰 富 、均 衡 而备 受 青 睐 。对 于 鸡 蛋 中 沙 门 氏 菌 的感 染
Ｚ ａ ｇＷ ｅ， Ｃ ｅ ａ ｐｎ ， ‘Ｘｕ Ｇ ｉｕ ， Ｚ ｅ ｇＪａ ｇ ｉ ｈ ｎ ｉ ｈ ｎＸｉｏ ｉｇ ｕｙ ｎ ｈ ｎ ｉｎ ｘａ，Ｙａ ｇＮｉｇ ｎ ｎ
（ ｏｅｅｏ ｎｍ ｌ ｃ ｎｅａｄＴ ｃ ｎｌ ｙ ｈｎ ｇｉ ｈ ｒｌ ｎｖｒｔ，Ｂ ｉｎ ０ ３ ｈｎ） Ｃｌ ｇ ｆ ｉａ Ｓｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏ ｇ ，Ｃ ｉａＡ ｒ ｕ ｕａ Ｕ ｉ ｓｙ ｅｉｇ１０ ，Ｃ ｉ ｌ Ａ ｅ ｏ ｅ ｅｉ ｊ １ ９ ａ
作者简介 ：张 伟 （ ８ 一 ） １ ５ ９ ，女 ，四川人 ，在读硕士 ，研究方 向：食 品安全 。Ｅ ｍ ｉ ａｅ６ ９ ｇ ａ ． ｒ － ａ ：ｃ ８ ＠ ｒ ｉｃ 。 ｌ ｅ ｌ ｎ ｌｏ ｎ 为通讯作者 ：徐桂云 ，教授 ，硕士生导师 ， 研究方 向：家禽遗传育种与品质检测 。Ｅ ｍ ｉ ｎｐ ｔ ｃｕ ｄ ． 。 － ａ ： ｃ ｐ ａ ． ｕ ｎ ｌ ＠ ｅ ｃ
面的细菌和沙 门氏菌渗入 蛋内容物而对人类 的健康 造成危害 ， 必要进行 洁蛋加工 。对 于毛蛋 中沙门氏菌 的检测 ， 有 发 现破壳毛蛋沙门氏菌的检出率显 著高于完 整毛蛋。 因此 ，蛋壳 在防止沙门氏菌入侵 的过程 中起 到 了重要作用 。此
外 ，由于毛蛋中沙门 氏菌的检 出率较高 ，在鸡蛋生产过程 中需要 加强孵化场的环境控制 以降低雏鸡感染沙 门氏菌所
沙门氏菌的实验报告
沙门氏菌的实验报告沙门氏菌的实验报告引言：沙门氏菌是一种常见的细菌，广泛存在于自然环境中，尤其是在动物体内。
它是引起人类食物中毒的主要病原菌之一。
为了更好地了解沙门氏菌的特性和对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验。
实验一：沙门氏菌的分离与培养我们从市场购买了一份新鲜鸡蛋，并在实验室中进行了分离与培养的操作。
首先，我们将鸡蛋表面进行消毒处理，然后用无菌的工具将鸡蛋壳上的细菌刮取到培养基上。
接着，我们将培养基置于恒温箱中，控制温度和湿度，以促进沙门氏菌的生长。
经过一段时间的培养，我们成功地分离出了纯净的沙门氏菌菌落。
实验二：沙门氏菌的形态观察为了观察沙门氏菌的形态特征，我们使用了光学显微镜对其进行了观察。
在显微镜下，我们发现沙门氏菌呈杆状或球状，大小约为0.5至1.5微米。
沙门氏菌具有鞭毛，使其能够在液体中快速移动。
此外，我们还观察到沙门氏菌菌落呈灰白色或淡黄色，有时会形成粘液。
实验三：沙门氏菌的生长条件为了确定沙门氏菌的适宜生长条件，我们进行了一系列的实验。
首先，我们将沙门氏菌接种于不同温度的培养基上，发现其最适宜生长的温度为37摄氏度。
此外，我们还研究了沙门氏菌在不同pH值下的生长情况，结果显示其最适宜生长的pH值为6.5至7.5。
这些实验结果为控制沙门氏菌的生长提供了重要的参考。
实验四：沙门氏菌的致病机制为了研究沙门氏菌对人类健康的影响，我们进行了一系列的实验来探索其致病机制。
首先，我们将沙门氏菌接种于小鼠体内，并观察其对小鼠的影响。
结果显示，被感染的小鼠出现了食欲不振、腹泻和发热等症状。
进一步的实验表明，沙门氏菌通过侵入人体细胞并释放毒素来引起病症。
这些实验结果为预防和治疗沙门氏菌感染提供了重要的依据。
实验五：沙门氏菌的控制方法为了控制沙门氏菌的传播和感染，我们进行了一些实验来研究其控制方法。
首先，我们发现煮沸可以有效地杀死沙门氏菌，因此在食物加工过程中要确保充分的加热。
此外，我们还研究了一些抗生素对沙门氏菌的抑制作用，结果显示某些抗生素可以有效地抑制其生长。
冀南地区鸡蛋细菌检测及抑菌保鲜膜的研制
冀南地区鸡蛋细菌检测及抑菌保鲜膜的研制随着人们生活水平的提高，鸡蛋成为了人们日常饮食中必不可少的一部分。
然而，随着养殖规模的不断扩大，饲料、环境等方面的问题也逐渐浮出水面。
这些问题直接关系到鸡蛋的质量与卫生安全。
因此，对鸡蛋进行细菌检测，以及研制抑菌保鲜膜，已经成为当今的研究热点。
一、冀南地区鸡蛋细菌检测1.研究目的为确保冀南地区鸡蛋的卫生质量，本研究旨在对该地区的鸡蛋进行细菌检测，分析各类细菌的污染状况，为制定提高冀南地区鸡蛋卫生质量的措施提供依据。
2.样品的收集与准备本次实验共采集了冀南地区的50个鸡蛋样品。
在取样过程中，先对蛋壳进行清洗，去除表面的污物，再用75%的酒精消毒。
随后，通过冷却法，使蛋壳上的细菌渗出到鸡蛋的内部。
最后，取出卵黄和卵白，分别进行污染检测。
3.细菌的检测方法在上述样品准备完成后，运用万能培养基、波兰斯基培养基、血琼脂培养基和马丁-劳埃德培养基，对鸡蛋中常见的十二种细菌进行检测。
其中，检测的单元包括总菌落、金黄色葡萄球菌、肠球菌、乳酸菌、普通链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、浮游酵母、放线菌属、铜绿假单胞菌、草绿色病毒、耐热芽孢杆菌等。
4.结果分析本次实验共检测出了九种细菌，分别为总菌落、肠球菌、金黄色葡萄球菌、普通链球菌、大肠杆菌、浮游酵母、放线菌属、草绿色病毒、耐热芽孢杆菌。
其中，总菌落最高值为5.91×10^3CFU/ml，肠球菌最高值为1.86×10^3CFU/ml，大肠杆菌最高值为7.93×10^2CFU/ml。
根据检测结果分析，本次实验样品中各类细菌均有不同程度的污染，但总体水平为可控范围。
二、抑菌保鲜膜的研制1.研究目的传统的鸡蛋包装方式往往容易受到细菌污染，影响鸡蛋的保鲜期。
因此，本次研究旨在针对这一问题，研制一种以抑菌保鲜膜为主的包装材料，提高鸡蛋的保鲜期，减少浪费。
2.材料与方法（1）材料：乳清蛋白、甲基纤维素、明胶、甘油、核黄素、羧甲基纤维素钠。
蛋品中的卫生问题
蛋品中的卫生问题
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鲜蛋贮藏过程中的变化
鲜蛋产出后，要及时收集，以减少蛋壳表面微生物数量， 并且应在适宜的条件下贮存。
鲜蛋的腐败过程是：鲜蛋气室较小，随着贮存期水分的缓 慢蒸发，气室逐渐增大。当气室增大到超过蛋的直径的1/3时， 即有可能腐败变质。
一般贮存过程中，由于酶和微生物的作用，首先是蛋白质 分解导致蛋黄移位；其次是蛋黄膜破裂，形成散黄蛋；进而， 蛋黄与蛋清混为一体，称浑汤蛋，这种蛋带恶臭味，不能食用； 霉菌侵入蛋内，在适宜条件下可形成霉斑，有恶臭味和霉臭味， 称黑斑蛋。
（2）化学物质的污染：人为地向蛋品中添加一些化学物质，
以达到以假乱真等目的。
如：人造蛋是用碳酸钙做蛋壳，蛋黄和蛋清则是用海藻酸钠、明 矾、明胶、食用氯化钙加水、色素等制成。
蛋品中的卫生问题
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蛋品中的卫生问题
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“红心”鸭蛋曾以其好“卖相”而热销， 这是不法商人在鸭饲料中添加致癌物“苏丹 红四号”所致 。
c、畜禽的生活环境及设施条件：养殖场内的卫生状况及设施条 件直接影响蛋品的质量安全，环境中有害物质可在畜禽体内蓄 积；
d、畜禽的饮用水、食物的卫生。
蛋品中的卫生问题
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2.2、蛋的形成和产蛋时：微生物污染是蛋形成时及产蛋过程存 在的主要问题。这与畜禽健康状况和产蛋时外界环境均有关。
2.3、鲜蛋的收集和贮藏：鲜蛋收集应及时，且避免收集过程中 对蛋的污染，收集后的鲜蛋要保存在适宜的温度条件下。
蛋品中的卫生问题
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二、影响蛋类安全的潜在因素
从蛋品的原料到加工过程分析影响蛋品安全的潜在因 素：
2.1、产蛋畜禽的健康状况：产蛋畜禽本身的健康情况直接 关系到产出蛋的品质。
a、若畜禽本身带致病菌或是病毒，则会垂直传播到蛋品中；
沙门氏菌,巴氏消毒鸡蛋食品质量实验检测食品安全冷知识
沙门氏菌，巴氏消毒鸡蛋食品质量实验检测食品安全冷知识
沙门氏菌（Salmonella）是一种常见的细菌，可以引起食物中毒。
它存在于某些动物体内，特别是家禽及其蛋壳表面，所以对鸡蛋的检测至关重要。
巴氏消毒是一种常见的消毒方法，用于杀灭食品中的细菌和病毒。
它是通过加热食品至高温，然后迅速冷却来实现的。
食品质量实验可以用于检测食品是否符合卫生安全标准。
常见的实验包括细菌检测、物理和化学指标检测等。
食品安全是指确保食品不会对人体健康产生危害的一系列措施。
这些措施包括食品的生产、加工、储存和运输等环节的卫生管理，以及检测食品中有害物质的存在。
冷知识是指平时鲜为人知或者较为冷门的知识。
食品安全方面的冷知识通常涉及到一些不太为人知的细节、实验结果或统计数据等。
了解这些冷知识能够帮助我们更好地理解食品安全问题，从而更好地保护自己的健康。
鸡蛋生产环节沙门氏菌检测及洁蛋对蛋品质影响的研究
第3卷第5期食品安全质量检测学报Vol. 3No. 5 2012年10月Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2012鸡蛋生产环节沙门氏菌检测及洁蛋对蛋品质影响的研究段忠意1, 秦宇辉1, 刘燕荣1, 袁正东2, 杨宁1,2, 徐桂云1,2*(1. 中国农业大学动物科技学院, 畜禽育种国家工程实验室, 农业部动物遗传育种重点实验室, 北京 100193;2. 国家蛋品工程技术研究中心, 北京 100081)摘要: 目的对鸡蛋生产过程中沙门氏菌污染环节进行研究, 探明规模化蛋鸡养殖场鸡蛋生产中沙门氏菌污染状况和洁蛋效果。
方法选择规模化蛋鸡场一个, 对可能造成鸡蛋沙门氏菌污染的水、饲料、蛋网、传输带等环节的样本进行采样, 并取清洁前后的鸡蛋各60个, 分为两组, 每组中30个蛋用于当天检测, 另外30个, 在室温环境下放置10 d后检测。
所有样品经前增菌和选择性增菌后, 提取细菌DNA进行鉴定。
结果水、饲料和清洁后的鸡蛋表面未检出沙门氏菌, 蛋网、传输带、未清洁的鸡蛋表面检出沙门氏菌, 进一步检测表明, 检出的沙门氏菌均不是肠炎沙门氏菌和伤寒沙门氏菌。
鸡蛋放置10 d后检测, 未清洁组的蛋白高度和哈氏单位显著低于清洁组的蛋白高度和哈氏单位, 二者均显著低于当天检测的结果, 而各组的蛋壳强度差异均不显著。
结论鸡蛋清洁涂膜处理后可以有效减少蛋壳表面沙门氏菌污染, 并延长鸡蛋的保存时间。
关键词: 鸡蛋; 清洁; 沙门氏菌; 蛋品质Study on detection of Salmonella in egg production and influenceon egg qualityDUAN Zhong-Yi1, QIN Yu-Hui1, LIU Yan-Rong1, YUAN Zheng-Dong2,YANG Ning1,2, XU Gui-Yun1,2*(1. Department of Animal Genetics and Breeding, National Engineering Laboratory for Animal Breeding, Key Laboratory ofAnimal Genetics and Breeding of MOA, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 2. National Egg EngineeringResearch Center, Beijing 100081, China)ABSTRACT: Objective To study Salmonella contamination in egg production of scaled farm and effects of egg cleaning. Methods Drinking water, feed, net, conveyor belts, 60 cleaned and 60 uncleaned eggs were sampled in a scaled farm. A half of cleaned and uncleaned eggs and all the other samples were detected on the same day, and the other half of cleaned and uncleaned eggs were detected after they were placed under room temperature for 10 d. The DNA of all samples was extracted for detection after pre-enrichment and selected enrichment of bacterium. Results Salmonellae was detected on the surface of net, conveyor belts and uncleaned eggs, except water, feed and cleaned eggs, and further detection proved them neither Salmonellaenteritidis nor Salmonella typhi. Albumen height and Haugh units of uncleaned eggs were significantly lower than those of cleaned eggs after placed for 10 d, which of cleaned and uncleaned eggs were both significantly基金项目: 国家蛋鸡产业技术体系(CARS-41)、教育部长江学者与创新团队发展计划“禽蛋及禽肉检测技术研究”( IRT 0945) *通讯作者: 徐桂云, 教授, 硕士生导师, 主要从事家禽遗传育种与品质检测技术研究。
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第3卷第5期食品安全质量检测学报Vol. 3No. 5 2012年10月Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2012鸡蛋生产环节沙门氏菌检测及洁蛋对蛋品质影响的研究段忠意1, 秦宇辉1, 刘燕荣1, 袁正东2, 杨宁1,2, 徐桂云1,2*(1. 中国农业大学动物科技学院, 畜禽育种国家工程实验室, 农业部动物遗传育种重点实验室, 北京 100193;2. 国家蛋品工程技术研究中心, 北京 100081)摘要: 目的对鸡蛋生产过程中沙门氏菌污染环节进行研究, 探明规模化蛋鸡养殖场鸡蛋生产中沙门氏菌污染状况和洁蛋效果。
方法选择规模化蛋鸡场一个, 对可能造成鸡蛋沙门氏菌污染的水、饲料、蛋网、传输带等环节的样本进行采样, 并取清洁前后的鸡蛋各60个, 分为两组, 每组中30个蛋用于当天检测, 另外30个, 在室温环境下放置10 d后检测。
所有样品经前增菌和选择性增菌后, 提取细菌DNA进行鉴定。
结果水、饲料和清洁后的鸡蛋表面未检出沙门氏菌, 蛋网、传输带、未清洁的鸡蛋表面检出沙门氏菌, 进一步检测表明, 检出的沙门氏菌均不是肠炎沙门氏菌和伤寒沙门氏菌。
鸡蛋放置10 d后检测, 未清洁组的蛋白高度和哈氏单位显著低于清洁组的蛋白高度和哈氏单位, 二者均显著低于当天检测的结果, 而各组的蛋壳强度差异均不显著。
结论鸡蛋清洁涂膜处理后可以有效减少蛋壳表面沙门氏菌污染, 并延长鸡蛋的保存时间。
关键词: 鸡蛋; 清洁; 沙门氏菌; 蛋品质Study on detection of Salmonella in egg production and influenceon egg qualityDUAN Zhong-Yi1, QIN Yu-Hui1, LIU Yan-Rong1, YUAN Zheng-Dong2,YANG Ning1,2, XU Gui-Yun1,2*(1. Department of Animal Genetics and Breeding, National Engineering Laboratory for Animal Breeding, Key Laboratory ofAnimal Genetics and Breeding of MOA, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 2. National Egg EngineeringResearch Center, Beijing 100081, China)ABSTRACT: Objective To study Salmonella contamination in egg production of scaled farm and effects of egg cleaning. Methods Drinking water, feed, net, conveyor belts, 60 cleaned and 60 uncleaned eggs were sampled in a scaled farm. A half of cleaned and uncleaned eggs and all the other samples were detected on the same day, and the other half of cleaned and uncleaned eggs were detected after they were placed under room temperature for 10 d. The DNA of all samples was extracted for detection after pre-enrichment and selected enrichment of bacterium. Results Salmonellae was detected on the surface of net, conveyor belts and uncleaned eggs, except water, feed and cleaned eggs, and further detection proved them neither Salmonellaenteritidis nor Salmonella typhi. Albumen height and Haugh units of uncleaned eggs were significantly lower than those of cleaned eggs after placed for 10 d, which of cleaned and uncleaned eggs were both significantly基金项目: 国家蛋鸡产业技术体系(CARS-41)、教育部长江学者与创新团队发展计划“禽蛋及禽肉检测技术研究”( IRT 0945) *通讯作者: 徐桂云, 教授, 硕士生导师, 主要从事家禽遗传育种与品质检测技术研究。
E-mail: ncppt@476 食品安全质量检测学报第3卷lower than those detected at the first day, but there were no significant difference among the four groups in egg strength. Conclusion The technique of egg cleaning could effectively reduce the Salmonella contamination on the surface of eggshell and extend the shelf life of eggs.KEY WORDS:eggs; egg coating; Salmonella; egg quality1 引言自1885年Smith和Salmon 首次分离出猪霍乱沙门氏菌以来, 不断有沙门氏菌新的血清型被发现, 目前已发现约2500种血清型[1], 广泛分布于世界各地, 已成为世界范围内难以控制的细菌。
在各种细菌性食物中毒中, 由沙门氏菌引起的食物中毒病例在食物中毒中屡居首位[2], 2010年, 美国因肠炎沙门氏菌污染问题而发生的鸡蛋召回事件, 更是引起了社会公众对沙门氏菌污染和食品安全问题的广泛关注。
随着人们生活水平的提高, 对禽类产品, 尤其是营养丰富而又廉价的蛋制品的消费比重日益增加, 被细菌污染的禽类产品越来越成为沙门氏菌感染的重要媒介[3], 由此引发的食品安全性问题也一直是长期困扰养禽业发展的一个重要原因[4]。
另外, 世界卫生组织(WHO)对肉鸡和蛋鸡群体中沙门氏菌感染的影响进行了风险评估, 肠炎沙门氏菌(SE)和鼠伤寒沙门氏菌(ST)是全世界流行的主要沙门氏菌[5]。
能够引发人类严重疾病的伤寒沙门氏菌, 近来仍常有报道[6-8], 发病率和死亡率虽逐年下降, 但伤寒疫情仍然严峻[9], 被污染的水和食品仍是其重要的传播媒介。
鸡蛋因其营养丰富, 适于微生物的生长, 极易受到沙门氏菌的污染, 未经清洗而直接上市的鸡蛋, 蛋壳表面常含有大量的细菌。
一些发达国家, 如美国和加拿大等, 提倡通过洗蛋来降低鸡蛋表面的细菌总量, 而我国市场上所销售的鸡蛋大部分都是未经清洗、灭菌处理的鲜蛋[4, 10-12], 这可能对公众健康构成潜在的威胁。
本试验选取清洁前后的鸡蛋, 对其蛋壳表面进行沙门氏菌检测, 并检测其常规蛋品质, 以了解对鸡蛋使用清洁技术是否能够减少细菌污染, 以及是否会影响蛋品质。
由于沙门氏菌可以通过垂直和水平两种方式污染鸡蛋[4, 13], 为了查明大型养殖场中可能造成鸡蛋污染的水平因素, 本试验对鸡舍内的水、饲料, 以及鸡蛋产出后与鸡蛋接触的蛋网和传输带进行了沙门氏菌检测。
2 材料与方法2.1 材料2.1.1 样品清洁前后的鸡蛋、水、饲料、蛋网和鸡蛋传输带棉拭子样本均取自德青源(北京)生态农场鸡舍内。
2.1.2 菌株伤寒沙门氏菌标准菌株(CMCC(B)50071)购自中国食品药品检定研究院; 肠炎沙门氏菌标准菌株(CVCC3377)由四川大学王红宁教授惠赠。
2.1.3 试剂缓冲蛋白胨水(BPW)、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)购自北京路桥有限公司; DM1000 DNA Marker 购自北京康为世纪生物科技有限公司, 2×Taq PCR MasterMix 购自北京百泰克生物技术有限公司。
2.2 方法2.2.1 样品的采取与处理用灭菌的培养管从采集鸡蛋的鸡舍内接鸡的饮用水10 mL, 在无菌操作台中吸取1 mL, 置于盛有9 mL BPW的培养管中, 做三个重复。
在采集鸡蛋的鸡舍养鸡笼的最上层和最下层的料槽内各取饲料约10 g, 在无菌操作台中取约 1 g, 置于盛有9 mL BPW的培养管中, 做三个重复。
蛋网棉拭子采样鸡舍内共有5列鸡笼, 在2、4列的最上层和最下层的前中后部位的蛋网上, 共12个采样点, 每点三个重复, 用无菌棉拭子擦拭蛋网表面, 然后将棉拭子置于盛有9 mL BPW的培养管中。
传输带棉拭子采样在运转中的集蛋传输带上, 每隔约 5 min, 用无菌棉拭子擦拭传输带表面, 然后将棉拭子置于盛有9 mL BPW的培养管中。
蛋壳棉拭子采样采集当天产清洁前后的鸡蛋各60个, 以保鲜袋相互隔离。
其中30个用于当天检测; 另外30个, 在室温环境下放置10 d后检测。
首先, 在无菌操作台中, 用无菌棉拭子擦拭蛋壳表面, 然后将棉拭子置于盛有9 mL BPW的培养管中。
第5期段忠意, 等: 鸡蛋生产环节沙门氏菌检测及洁蛋对蛋品质影响的研究 4772.2.2 前增菌与选择性增菌前增菌以上所有样品与9 mL BPW混匀后, 在37 ℃恒温培养箱中培养20 h。
选择性增菌取1 mL前增菌液, 加入9 mL选择性增菌液SC中, 在37 ℃恒温培养箱中培养20 h。
2.2.3 蛋品质检测棉拭子擦拭完蛋壳表面后, 所有鸡蛋进行蛋品质检测。
检测指标为: 蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位。
2.2.4 细菌DNA的提取取选择性增菌液2 mL, 置于Ep管中, 12000 r/ min 离心5 min, 超纯水洗涤2次, 用0.2 mL超纯水悬浮, 水浴煮沸15 min, 放入冰中冷却2 min, 12000 r/ min 离心15 min, 取上清液用作DNA 模板。
2.2.5 PCR检测2.2.5.1 引物用于检测伤寒沙门氏菌的引物, 采用Nagarajan 等[14]根据STY0312基因、STY0313基因至STY0316基因的序列设计的两对特异性引物, 扩增产物分别为384 bp和1.04 kb, 引物序列如下:第一对引物:STY0312/SPA2476 (forward): 5′-ATGTTCAGTA AAATAGTGTCATTGCTTTTG-3’;STY0312/SPA2476 (reverse): 5′-TTGTAGCGCC GGAAATGATATTCT-3′。