一种海洋真菌_裂殖壶菌的营养成分分析_朱路英

一种海洋真菌——裂殖壶菌的营养成分分析朱路英1,2，张学成2,*，王淑芳1，常林瑞1(1.鲁东大学生命科学学院，山东 烟台 264025；2.中国海洋大学海洋生命学院，山东 青岛 266003)摘 要：为评价海洋真菌裂殖壶菌的营养价值，测定该菌的基本营养成分、氨基酸组成及脂肪酸组成。

结果显示，在两种不同的氮源条件下，裂殖壶菌的总蛋白、总脂、总糖及灰分分别为9.35%、42.83%、5.27%、4.85%(豆粕水解物为氮源)和42.51%、18.98%、6.38%、5.72%(酵母提取物为氮源)。

以轮虫蛋白的必需氨基酸(EAA)为标准，裂殖壶菌的必需氨基酸指数EAAI ＞0.9，为轮虫的优质蛋白源，但精氨酸或异亮氨酸不能完全满足轮虫需要。

而以牡蛎蛋白的EAA 为标准，该菌的EAAI 为0.78～0.79，为牡蛎的可用蛋白源。

该菌中含有高水平的DHA ，含量可达14.29%，是一种优质的DHA 强化饵料。

另外，培养基中氮源种类的不同直接影响该菌的基本营养成分、氨基酸及脂肪酸组成。

关键词：裂殖壶菌；氨基酸组成；脂肪酸组成；营养价值Analysis of Nutritional Components of a Marine Fungus: Schizochytrium limaniumZHU Lu-ying 1,2，ZHANG Xue-cheng 2,*，WANG Shu-fang 1，CHANG Lin-rui 1(1. College of Life Sciences, Ludong University, Yantai 264025, China ；2. College of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)Abstract ：In order to evaluate nutritional values of a marine fungus, Schizochytrium limanium , its basic nutritional components,amino acid and fatty acid compositions were analyzed. Results indicated that the contents of proteins, lipids, carbohydrates and ash in Schizochytrium limanium were 9.35%, 42.83%, 5.27% and 4.85% using soybean hydrolysates as nitrogen resource and 42.51%,18.98%, 6.38% and 5.72% using yeast as nitrogen resource, respectively. Using rotifer protein as the reference, essential amino acid index (EAAI) in Schizochytrium limanium were more than 0.90; using oyster protein as the reference, EAAI in Schizochytrium limanium were 0.78－0.79, which suggested that Schizochytrium limanium was the best quality protein material for rotifer and oyster. However, Schizochytrium limanium had limited amino acids such as Arg and Ile for rotifer. Totally 14.29% DHA was determined in Schizochytrium limanium , which also suggested it was a good DHA source. Moreover, nitrogen sources exhibited a direct effect on contents of nutritional components, amino acid and fatty acid compositions.Key words ：Schizochytrium limanium ；amino acid composition ；fatty acid composition ；nutritional value中图分类号：S963.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)24-0272-04收稿日期：2009-06-28基金项目：鲁东大学学科建设经费资助项目作者简介：朱路英(1974－)，女，讲师，博士，研究方向为生物化学。

E-mail ：ly zh u @123.co m *通讯作者：张学成(1939－)，男，教授，研究方向为海洋生物学。

E-mail ：xczhang@在水产养殖业中，饵料所含的营养对水产动物种苗的成活率、生长速率及抗逆、抗病能力有很大影响[1-2]。

目前，轮虫和卤虫无节幼体是广泛使用的海洋仔稚鱼的重要天然饵料。

但是，常用的几种轮虫和卤虫体内普遍缺乏海洋仔稚鱼必需的n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)，因此，生物饵料营养强化技术在海洋鱼类育苗生产中受到关注，以轮虫和卤虫无节幼体为载体，增加仔稚鱼对 n-3 PUFA 的摄入量[3]。

目前，大量培养轮虫的常用饵料有微藻，如小球藻、酵母类、乳化鱼油微粒或微囊等。

小球藻含有高水平的二十碳五烯酸(EPA)和二十碳四烯酸(AA)但缺乏二十二碳六烯酸(DHA)[3]；一些酵母类所含的n-3 PUFA 由于含量的限制仍然满足不了仔稚鱼的需要[3]。

因此，寻找天然的更有效的生物饵料添加剂已成为人们研究热点之一。

日本研究者从西太平洋红树林地区分离到了一株富含D H A 的海洋真菌—裂殖壶菌(S c h i z o c h y t r i u m l i m a n i u m )。

该菌属于真菌中的卵囊菌纲、破囊壶菌属，营养体为单细胞，球形，直径7～15μm [4]。

目前人们对裂殖壶菌的研究主要集中在DHA的生产上[5-6]，而在其他方面做的研究非常有限。

鉴于裂殖壶菌有望被作为一种直接或间接的生物饵料进行开发应用，因此，有必要对裂殖壶菌的营养成分进行分析。

确定生物饵料的营养价值，通常把其所含的必需氨基酸的量以及n-3 PUFA作为主要选择指标[7]。

本研究分析了裂殖壶菌的主要生化组分、氨基酸组成和PUFAs的种类及含量，并对两种不同氮源条件下培养的裂殖壶菌的营养成分做比较，以期为评价裂殖壶菌作为生物饵料的营养价值及质量管理提供理论数据。

１　材料与方法1.1材料与培养基裂殖壶菌菌株(Schizochytrium limacinum)为日本大阪发酵研究所提供的菌株S. limacinum SR21经紫外诱变后得到。

基本培养基：60g/L的葡萄糖，20g/L酵母提取物，天然海水/蒸馏水50%(V/V)，pH7.0。

1.2方法1.2.1不同氮源对裂殖壶菌营养成分的影响测定的两种氮源分别为40g/L的豆粕水解物和20g/L 的酵母提取物，其他成分同基本培养基。

将两种含不同氮源的培养基培养的裂殖壶菌进行营养成分比较，观察氮源对裂殖壶菌营养成分的影响。

1.2.2样品处理将菌种置于基本培养基中，28℃条件下振荡培养4d，离心后冷冻干燥，得干燥的菌粉进行以下各节的分析。

1.2.3营养成分分析105℃常压干燥，重量法测定水分；烧灼氧化，重量法测定灰分；凯氏定氮法测定粗蛋白含量(粗蛋白质=总氮×6.25)；索氏抽提法测定总脂；硫酸-苯酚法测定总糖。

1.2.4氨基酸组分分析样品用6mol/L HCl水解24h，以氨基酸自动分析仪进行测定。

1.2.5氨基酸数据分析必需氨基酸指数是指饵料蛋白质的必需氨基酸组成与参比蛋白质的必需氨基酸组成的加权比较值：EAAI= a/A×b/B×c/C×……i/I式中：a、b、c、…、i分别代表饵料蛋白质的某种必需氨基酸在总氨基酸中的百分含量；A、B、C、…、I分别代表轮虫或牡蛎蛋白质中某种必需氨基酸在其总氨基酸中的百分含量；n为计算式中涉及到的必需氨基酸的数目。

1.2.6脂肪酸(FA)分析应用脂肪酸甲酯的气相色谱分析法，采用安捷伦6890气相色谱仪对样品进行脂肪酸测定，再通过外标法计算出各脂肪酸的含量。

色谱条件为：氮气为载气，起始柱温为170℃，1min后以15℃/min的速度升至230℃，保持23min。

进样口温度为250℃，检测器温度为260℃。

采用不分流进样，进样量为1μl。

２　结果与分析2.1裂殖壶菌的主要营养成分注：样品A表示以豆粕水解物为氮源培养出的裂殖壶菌；样品B表示以酵母提取物为氮源培养出的裂殖壶菌。

下同。

营养成分细胞中的含量(%)样品A样品B 总蛋白9.3542.51总脂42.8318.98总糖 5.27 6.38灰分 4.85 5.72表１ 裂殖壶菌的主要营养组分Table 1 Basic nutritional components in Schizochytriumlimacinum从表1可以看出，裂殖壶菌菌体中主要为蛋白质和脂类。

而且，裂殖壶菌的生化组分与培养条件直接相关，不同氮源条件下生长的裂殖壶菌其生化组分明显不同。

在氮源为豆粕水解物的条件下培养的裂殖壶菌其细胞内主要成分是脂类，含量达42.83%，蛋白含量较低，为9.35%；而以酵母提取物为氮源培养的裂殖壶菌细胞中蛋白含量高达42.51%，而脂类含量相对较低，为18.98%。

两种氮源条件下产生的总糖和灰分含量也有所差别。

2.2氨基酸组成分析两种氮源条件下培养的裂殖壶菌蛋白质中氨基酸的组成相同，但相对含量差别明显(表2)。

以豆粕水解物为氮源，裂殖壶菌细胞中总氨基酸为7.38%，含有常见的16 种氨基酸(色氨酸因酸处理而被破坏)，包括必需氨基酸10种及非必需氨基酸6种(表2) ，其中，必需氨基酸占总氨基酸的42.41%；从氨基酸组成上看，谷氨酸含量最高，为总氨基酸的20.87%，其次为天冬氨酸(14.91%)、缬氨酸(9.35%)和亮氨酸(6.91%)，含量最低的依次为精氨酸和组氨酸。

在以酵母提取物为氮源的条件下，氨基酸总量较高为39.7%，氨基酸的种类与前者相同，其中，总氨基酸中谷氨酸含量最高，为33.63%，其次为精氨酸(13.35%)、天冬氨酸(7.15%)、赖氨酸(5.79%)和亮氨酸(5.57%)，而蛋氨酸和组氨酸含量最低；总氨基酸中必需氨基酸含量为43.31%。