高灵敏度化学发光仪
警惕化学发光检测中的“钩状效应”
警惕化学发光检测中的“钩状效应”化学发光法具有高灵敏度和高特异性，可以定量检测多种激素、肿瘤标志物、感染性疾病标志物等，为很多疾病的诊治提供了极大的便利。
近年来，在我国各级医院中化学发光分析仪逐渐得到普及，使其与血液分析仪、生化分析仪等一样，成为检验科的标配和主力仪器。
化学发光仪及其配套试剂的生产厂商中，既有各大国外品牌，也有诸多国内后起厂商。
笔者所在医院，虽地处西北小城，但也赶上了这股“春风”，除了原有的罗氏电化学发光分析仪e411和e602外，最近又新添了一台国产化学发光分析仪（以下称“A仪器”），其主要用于性激素六项和感染性疾病标志物的检测。
化学发光法的普遍应用，虽然为疾病的诊治提供了强有力的支持。
但是，与许多实验室检测方法一样，化学发光法在实际应用中会受到一些因素的明显干扰，检验人员和临床医师如不能对这些潜在的干扰因素存在认知，就很有可能导致误诊误治，使患者权益受损，并为医疗纠纷埋下隐患。
下面就对近期笔者遇到的一例异常结果，及其背后的干扰因素叙述如下，希望能对诸位读者起到一点警示作用。
案例描述一份妇科住院患者的血清人绒毛膜促性腺激素（HCG）标本，在罗氏e602上第一次测得的结果为>10000mIU/mL, 进而选择1:20仪器自动稀释后，结果为>200000mIU/mL。
为了看一下对于这样高值的标本，装机时间不长的A仪器表现如何，我们把原血清放到了A仪器上检测，却测出HCG为6647 mIU/mL。
同一份标本怎么会有如此大的差异呢？通过查询得知，该患者的临床诊断是葡萄胎，那么HCG浓度明显偏高是很有可能的。
因此，在e602上对该标本进一步稀释后，最终得到HCG浓度是1246970mIU/mL，我们将此结果报告临床。
之后在A仪器上，选择自动1:100稀释后，也测得HCG为553951mIU/mL。
可见A仪器在未稀释时，测出的6647mIU/mL是一份“虚假”的低值结果。
六天后，该患者复查HCG，结果为8565mIU/mL（未稀释，E602测得）。
化学发光测定仪在药品质量控制中的应用研究
化学发光测定仪在药品质量控制中的应用研究引言：药品质量控制对于保障人们的生命安全和健康至关重要。
化学发光测定仪作为一种快速、高灵敏度、高选择性的分析技术，在药品质量控制中得到了广泛应用。
本文将就化学发光测定仪在药品质量控制中的应用进行研究和讨论。
一、化学发光原理及基本分析流程1. 化学发光原理化学发光是指在反应中产生的化学能转化为光能，从而使样品发出可见光的现象。
该原理是通过激发光敏物质分子的电子，使其跃迁到激发态能级，并在跃迁回基态时释放出能量，产生发光。
化学发光的发光机制包括电解促发光、酶促发光、荧光物质发光等。
2. 基本分析流程化学发光测定仪的基本分析流程包括样品的准备、荧光标记、反应系统构建、化学发光测定和数据处理等步骤。
首先，样品经过适当的前处理，使得待测成分转化为适合进行化学发光测定的形式。
然后，选择合适的荧光标记物与样品反应，使样品中的目标成分与荧光物质结合。
接下来，构建适当的反应系统，调节反应条件，以获得最佳的发光信号。
最后，通过化学发光测定仪对荧光强度进行测定，并利用数据处理方法得出结果。
二、化学发光测定仪在药品质量控制中的应用1. 药物含量测定化学发光测定仪在药品质量控制中常用于药物含量的测定。
传统的测定方法如高效液相色谱法和紫外光谱法存在操作复杂、分析时间长等问题，而化学发光测定仪则具有快速、灵敏度高等优点。
通过合适的前处理和标记技术，药物样品中的目标成分可以与特定的荧光标记物结合，并利用化学发光测定仪测定荧光强度，从而确定药物的含量。
2. 高效筛选活性成分药品研发过程中，需要快速、高效地筛选出具有治疗作用的活性成分。
化学发光测定仪在活性成分的筛选中具有重要的应用价值。
通过构建适当的反应系统，可以选择特定的信号响应反应，将样品与潜在的治疗物质进行反应，并通过化学发光测定仪测定荧光强度，从而筛选出具有显著活性的成分，为药物研发提供了便利。
3. 药效评价药物的药效评价对于确定其疗效和安全性具有重要意义。
冷光仪 LuminMaxC Luminometer
7. Solid Packaged: （固体的包装） The system is packaged in metal case; it prevents components damage or microwell mis-alignment during shipping or transportation. 系统是用金属容器包装的，
© 2005-2009 必和国际贸易(香港)有限公司 版权所有，并保留所有权利。 上海市长乐路989号2006室，邮编：200031，电话：021-60896520,13661956095，, info@
file:///D|/bihecpdf/冷光仪 LuminMaxC Luminometer化学发光分析仪.htm[2010-1-9 0:59:02]
技术参数： LumiMax（冷光仪）技术简介 一、冷光仪- 技术说明 盘形式: 微光度测定盘 (96 well) 光辐射探测: 化合光 灵敏度: 光电计数器 操作: 自动扫描所有的wells 可调节integration时间 (0.01-10.0 秒)
化学发光法elisa
化学发光法elisaELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的生物化学分析方法，通过检测化学发光信号来定量分析样品中的目标物质。
它是一种高灵敏度、高特异性的实验技术，广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
化学发光法ELISA的原理是利用酶标记抗体与待测物质结合，然后通过酶催化反应产生化学发光信号。
ELISA分为直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等多种类型，根据实验需要选择不同的方法。
在ELISA实验中，首先需要将待测物质固定在试验板上，然后加入酶标记抗体与待测物质结合。
接着，加入底物溶液，底物与酶催化反应产生化学发光信号。
最后，使用专用的发光仪器测量发光强度，根据发光强度的大小可以定量分析样品中的目标物质含量。
化学发光法ELISA具有许多优点。
首先，ELISA方法具有高灵敏度，可以检测到非常低浓度的目标物质。
其次，ELISA方法具有高特异性，可以准确地区分目标物质与其他物质的结合。
此外，ELISA方法操作简单、快速，可以同时处理多个样品，提高实验效率。
最重要的是，ELISA方法可以应用于多种样品类型，包括血清、尿液、细胞培养液等，具有广泛的应用前景。
化学发光法ELISA在医学领域有着重要的应用。
例如，ELISA可以用于检测血液中的病原体抗体，如HIV、乙肝病毒等。
ELISA还可以用于检测肿瘤标志物，帮助早期发现肿瘤并进行治疗。
此外，ELISA还可以用于检测药物浓度，指导药物治疗的调整。
除了医学领域，化学发光法ELISA在生物学、环境科学等领域也有广泛的应用。
例如，ELISA可以用于检测植物中的激素含量，研究植物生长发育的调控机制。
ELISA还可以用于检测环境中的污染物，如重金属、农药等，评估环境质量。
尽管化学发光法ELISA具有许多优点，但也存在一些局限性。
首先，ELISA方法对样品的处理要求较高，需要进行样品预处理、稀释等步骤，增加了实验的复杂性。
迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统性能验证
迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统性能验证1. 引言1.1 背景介绍迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪是一种高性能的自动化检测仪器，广泛应用于医学临床检验、生物学研究以及药物开发等领域。
传统的免疫分析技术需要较长的分析时间，且存在操作复杂、易受干扰等缺点。
而化学发光免疫分析技术利用化学发光产生的光信号进行检测，具有灵敏度高、特异性强、快速准确等优点，逐渐成为各个领域的首选检测方法。
随着我国医疗事业的快速发展和人们对健康的关注日益增强，对于高效、精准的医学检测需求也日益增长。
迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪的性能验证显得尤为重要。
通过对仪器性能参数、实验方法和材料、实验步骤等方面的系统验证，可以确保仪器的可靠性和检测结果的准确性，为临床诊断和科研工作提供有力支持。
本文将对迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统的性能进行验证，为其在医学检验和科研领域的应用提供参考依据。
1.2 研究目的本研究的目的是通过对迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪检测系统性能验证的实验，评估该仪器在临床化验中的实际应用价值。
具体来说，本研究旨在验证仪器的性能参数，探讨不同样本类型在该仪器上的检测表现，评估其在性能稳定性和准确性方面的表现，并分析仪器在实验条件下的适用范围和局限性。
通过本研究，我们希望为迈瑞CL-6000I化学发光免疫分析仪的临床应用提供参考依据，为临床化验结果的准确性和可靠性提供保障，最终提高医疗诊断的水平和效率。
2. 正文2.1 仪器性能参数仪器性能参数是评价仪器性能的重要指标，对于免疫分析仪而言，主要包括灵敏度、精密度、线性范围、检出限等参数。
首先是灵敏度，即仪器能够检测到的最低浓度的物质。
通常用信号噪音比来表示，较高的信噪比代表较高的灵敏度。
其次是精密度，即在一定条件下，仪器对重复性样品的测量结果一致程度。
常用的参数包括相对标准偏差（RSD）和系数（CV）。
线性范围是指仪器对测量样品浓度范围的适应能力，可以通过绘制标准曲线来评估。
化学发光检验仪器的技术特点及临床应用
化学发光检验仪器的技术特点及临床应用化学发光检验是一种高灵敏度的检测方法，该方法利用光化学反应模拟生物人体内某些生化反应产生的化学发光信息，通过测定发光强度反映样品中目标分子的含量。
化学发光检验仪器是一种专门用于化学发光检测的设备，广泛应用于临床、生物技术等领域。
本文将介绍化学发光检验仪器的技术特点及其在临床应用中的优势。
高灵敏度：化学发光检验具有高灵敏度的特点，可以达到10-18mol/L的检测灵敏度，特别适用于检测低浓度的生物分子，如微量蛋白、激素等。
快速性：化学发光检验可以在短时间内完成检测，通常只需要几分钟到十几分钟的时间，远远快于传统方法的检测速度。
无需检测区间：与传统的免疫学检测方法相比较，化学发光检测不需要任何溶液或试剂在检测区间反应，因此不受试剂浓度和反应时间限制。
高度特异性：化学发光检测用于分析分子可达到非常高的特异性，因为化学发光反应产生的是光信号，不会受到其他信号干扰。
这使得化学发光检测成为非常优秀的生物分析方法。
临床应用化学发光检测在临床应用广泛，例如：肝功能的检测：丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）是衡量肝功能的重要因素，高ALT和AST值往往会提示肝脏损伤，而化学发光技术可以快速地测定血清中ALT和AST含量。
肿瘤标志物的检测：组织胺酸脱羧酶（TPH）和前列腺特异性抗原（PSA）是常用于指标诊断肿瘤的标志物，化学发光检测可以通过检测TPH和PSA的含量，快速诊断肿瘤患者。
感染性疾病的检测：例如乙型肝炎、人类免疫缺陷病毒（HIV）等，化学发光检测可以通过检测患者血样中病毒特异性抗体或病毒核酸，诊断患者是否感染。
总之，化学发光检验仪器以其高灵敏度、快速性、特异性和无需检测区间等特点，在临床应用中获得了广泛的应用。
随着科技的不断进步，化学发光技术将更加成熟，其进一步发展推动医学诊断水平的提高。
化学发光检测仪的优点
化学发光检测仪的优点化学发光检测仪是一种常用的检测分析仪器，其检测原理是利用化学发光反应产生光信号进行分析。
化学发光检测仪在农业、食品、医药、环境等领域均有广泛应用，具有以下优点：1. 灵敏度高化学发光检测仪能够检测到微小的物质变化，通常灵敏度达到10^-16 ~ 10^-18 mol/L级别。
这超过了传统检测方法，如紫外光谱和荧光谱，对极微小的变化也能发现并且量化。
2. 特异性强化学发光检测仪采用化学反应发光的原理进行检测，可以针对特定的化学反应进行分析，最大程度地避免非特异或交叉反应的发生，所以检测结果更准确。
3. 操作简便化学发光检测仪操作简单，使用方便。
只需按照仪器说明书上的步骤将试剂加入反应池中，开始检测即可。
不需要复杂的前处理和高级计算机技能即可开展分析。
4. 检测时间短化学发光检测仪可以在几秒钟到几分钟之间检测出结果，比传统的检测方法如高效液相色谱法等所花费的时间少得多。
短时间内可进行多次测试，提高了检测效率。
5. 安全性高化学发光检测仪采用化学发光反应原理进行检测，大多数试剂使用量小，反应体系相对稳定，不会产生有害气体等，保证了实验人员的安全性。
6. 检测范围广化学发光检测仪可检测的物质种类广泛，可应用于农业、食品、医药、环境等领域。
可对常规化学物质、生物化学物质、环境毒素、生物标志物等进行分析。
7. 数据存储方便化学发光检测仪通常有自带数据存储设备，检测结果可自动转化为数字保存，便于查阅和统计分析。
此外，化学发光检测仪还支持数据的导出和打印，便于实验结果的分享和交流。
结论综上所述，化学发光检测仪具有高灵敏度、强特异性、操作简便、检测时间短、安全性高、检测范围广以及数据存储方便等优点。
因此，化学发光检测仪在各行各业都有广泛应用，在科学研究、产品开发、环境监测等方面发挥着重要作用。
罗氏ECL2010电化学发光分析仪及部分检测项目介绍
4、甲胎蛋白(AFP,a1-fetoprotein)
AFP来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道。70~95%的原发性肝癌患者的AFP升高，越是晚期，AFP含量越高。但尚未发现AFP含量与肿瘤大小、恶性程度等有关系。AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌。在转移性肝癌中，AFP一般低于350-400IU/ml。AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者。不推荐将AFP用于普通人群的癌症筛查。孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂,无脑症,食管atresia或多胎,AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down’s综合征的危险性.
7、CA 72-4
CA72-4检测方法用于血清中粘蛋白样肿瘤相关糖蛋白，TAG72，的检测。采用了二种单克隆抗体：B72.3和CC49（后者是CA72-4特异性抗体）。它们可与以下几类组织反应：乳腺癌，结肠癌，非小细胞肺癌，上皮性卵巢癌，子宫内膜癌，胰腺癌，胃癌及其它种类的癌。可与胎儿组织如结肠，胃和食管反应，但与正常的成人组织无反应。良性疾病：血清CA72-4升高可见于以下几种疾病：胰腺炎,肝硬化,肺病,风湿病,妇科病,卵巢良性疾病，卵巢囊肿,乳腺病和胃肠道良性功能紊乱等。与其它标志物相比，CA72-4最主要的优势是其对良性病变的极高诊断的特异性。胃癌：诊断敏感性为28-80%，通常为40-46%。而对良性胃肠疾病的诊断特异性达95%以上。CA72-4升高与疾病的分期有关系。外科手术后，CA72-4水平可迅速下降至正常值。如果肿瘤组织完全切除，CA72-4可持续维持在正常水平。在70%的复发病例中，CA72-4浓度首先升高，或在临床诊断为复发时也已升高。有研究结果提示，术前的CA72-4水平可作为预后判断的参考值。卵巢癌：诊断敏感性为47-80%。对粘液样卵巢癌的诊断敏感性高于CA125。二指标结合起来可使首次诊断敏感性提高到73%（CA125单指标：60%）；动态监测的诊断敏感性可提高到67%（CA125单指标：60%）。结直肠癌：诊断敏感性为20-41%。而对良性结肠疾病的诊断特异性是98%。完全切除后CA72-4可显著下降。当体内存留癌组织时CA72-4持续升高。CA72-4与CEA结合起来可使术后监测的诊断敏感性从78%提高到87%。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
室温孵育 1 小时。 一般采用 HRP 标记的二 抗，稀释比例为 1:2000。
二抗的稀释比例不能太低，否则容易导致非特 异性的结合。
注意：孵育二抗之前一定要用 TBST 将膜洗 三次，每次五分钟，时间一定要够。
四、曝光
本实验室选用威格拉斯 “western 发光检测 试剂盒”，如采用 Bio-Rad 公司的 Immun-Star WesternC 化学发光试剂盒（已针对 CCD 成像做 了优化），可获得更好的效果。
下一页 返回
能需要更长的成像时间，当然更好的方法是选择能 快速产生强烈信号的化学发光试剂，如 Bio-Rad 公司的 Immun-Star WesternC 化学发光试剂盒。
相关仪器及试剂订货信息
170-8251
Molecular
ChemiDocXRS+ System PC
Imager
化学发光下目的蛋白条带（ARC）
白测光下获取的 marker 图像（ERK）
白测光下获取的 marker 图像（圆珠笔标记 43KD）
化学发光下目的蛋白条带 蛋白上样量：80μg 分离胶浓度：12%
化学发光下目的蛋白条带（β-actin）
白测光下获取的 marker 图像（圆珠笔标记 26KD）
第 18 页，共 25 页
（6）marker 与目的条带的比对：用 window 自带的“图片和传真查看器”软件打开 jpeg 格式的 marker 图片，用手在屏幕上点住刚刚用圆珠笔画 的印记，手不要松开，此时还用“图片和传真查看 器”打开 jpeg 格式的目的条带的图片，手点的地方 就是刚才 marker 的位置。
蛋白上样量：120μg 分离胶浓度：12%
170-7950 White Light Transilluminator, universal hood
170-5070
Immun-Star
WesternC
Chemiluminescent Kit, includes 50 ml
(2) 在加有转移液的搪瓷盘里放入转膜用的 夹子、两块海绵垫、两张滤纸和浸过的 PVDF 膜。
(3) 打开夹子将黑的一面放入转膜液中，从下 往上依次放入海绵、滤纸、分离胶、PVDF 膜、滤 纸、海绵。
注意：1 整个过程在转膜液中进行在铺每一层 时要用刮子赶气泡，尤其是胶与膜之间一定不能留 有气泡。
2009年7月9日第六十四期
第 17 页，共 25 页
下一页 返回
选择比较满意的图片，按如上所说转换至 jpeg 格式。
例如，Caveolin-3、AKT、ERK、GSK 等比较 好曝的，可以调至 10s 一张，一般 10 张之内就可 得到好的效果。其他不太容易出条带的，可以适当 延长时间。
对于内参来说，在曝第一张之前，让发光液倒 在膜上静置反映 20-30 秒，有时会得到理想的效 果。
缓冲能力
槽转印 可灵活选择电压设 置、转印时间和冷却 方法；可灵活更换电 极位置（Trans-Blot 和 Trans-Blot Plus 印迹槽） 小分子量范围可以 提供高效而定量的 蛋白转印
宽分子量范围
可以在不耗尽缓冲 液时延长转印时间 到 24h；高强度转印 只需 15-60min 冷却芯和循环冷却 水，可以在很低的温 度进行转印 （4-10℃），例如原 酶转印 缓冲液 10-12L （Trans-Blot 槽）或 450ml（Mini Trans-Blot 槽）缓冲 液不限制转印时间
电泳转印过程中，凝胶和印迹膜平行放置于两
极间。根据欧姆定律（Ohm's）：V=I*R，R 为两
极间物质的电阻值，（即转印缓冲液、凝胶、印迹
膜、滤纸的电阻值），当电极两端加有电压时，就 会在上述物质间产生电流，蛋白样品便发生转印。
由于两极间的电场强度（V/cm）是蛋白转移 的驱动力，因此两极间的电压和距离称为凝胶上蛋 白转印的关键参数。同样其他参数包括蛋白的大 小、形状、所带电荷多少，电转印缓冲液的 pH 值、 黏度、离子强度、以及凝胶密度也影响着蛋白的电 转印效率。
170-8182 XciteBlue Conversion Screen and viewing goggles for SYBR Green/SYBR Safe/ GFP/ Flamingo Fluorescent Gel Stain
170-8184 Gel Alignment Templates
常用的电泳转印系统有槽转印系统和半干转 印系统，前者是将凝胶和印迹膜浸入转印缓冲液 槽，然后加电压进行转印；后者是将凝胶和印迹膜 放置于滤纸间形成三明治结构，而后在电极平板间 进行转印。两种系统间的比较见表 1.1
表 1.1 电泳转印系统的比较
灵活性 定量和定 性结果 分子量范围 转印时间 温度控制
本室主要以湿转进行转印，因此本文就湿转为 例，对化学发光和 ChemiDoc XRS 的应用进行叙 述。
一、转膜（湿转）：
(1) 转一张膜需准备 2 张 6.5*10cm 的滤纸和 1 张 5.5*8.5cm 的 PVDF 膜。切滤纸和膜时一定要 戴手套，因为手上的蛋白会污染膜。将切好的 PVDF 膜浸于甲醇中不少于 15 分钟才可使用。
蛋白上样量：50μg
分离胶浓度：15%
结论：采用 Bio-Rad 的冷 CCD 化学发光成像 系统进行化学发光的检测，比传统的暗室曝光方法 更为简便，也大大缩短了实验时间。但在成像时需 要注意选择合适的化学发光试剂，以适合 CCD 的 成像检测。且大部分的化学发光试剂均对应暗室曝 光的方式，因此在进行检测需要进行调整，如对发 光液不能进行稀释，而必须要使用原液。同时如果 条带的表达比较弱的情况下，如使用常用发光液可
度的持续光信号 24 小时，因此用户可以进行多次 曝光，最低可检测至 10-19mol，配合 Bio-Rad 屡 获大奖的化学发光成像系统 ChemiDoc XRS 或 VersaDoc 系统能得到得到高质量的印记信号。
我们实验室从 05 年开始采用 Bio-Rad 的 ChemiDocXRS 进行化学发光的检测，目前已经形 成一套较为成熟的技术路线，取得大批的实验数 据。本文将就 Western Blotting 的关键步骤及使用 ChemiDocXRS 的一些心得体会与大家一起分享。
化学发光 Western 杂交检测，是同位素检测 的一种高度灵敏的替代方法。酶标记抗体取代了放 射性标记抗体， 当它作用于底物时，可产生光信 号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶 (HRP)或碱性磷酸酶(AP) 二级抗体 耦联物为基 础。信号可通过感光胶片或专用的成像设备来采 集。化学发光底物用于免疫印迹技术已有十几年的 历史，目前大部分实验室做转印时都会采用化学发 光技术进行检测。随着冷 CCD 化学发光检测技术 的发展，现在越来越多的实验室都开始采用冷 CCD 的凝胶成像系统进行化学发光的检测，胶片 成像虽然比自然发光法灵敏度更高，但也有很多缺 点：耗时，需要暗房，显影剂和胶片，胶片较贵且 为需持续购买的消耗品。同时由于胶片的线性范围 较窄，因此用胶片上的条带（特别是表达量较低的 条带）进行定量几乎不可能。冷 CCD 技术与 X 胶 片相比具有瞬时影像处理、高灵敏度和高分辨率、 动力范围广等优点，因此能对条带进行精确定量。 当然这项技术要求底物能产生高强度长持续时间 的信号，以保证信号能被冷 CCD 的凝胶成像系统 捕获。在这方面多家公司都提供了相应的化学发光 底 物 或 试 剂 盒 ， 特 别 是 Bio-Rad 公 司 提 供 的 Western-C 化学发光检测试剂盒，底物可产生高强
(5) 250 毫安恒流转膜 2 小时。
(6) 2 小时后，将膜取出，用 TBST 洗膜 5 分 钟。
(7) 用 5%脱脂奶粉室温封闭。
封闭是为了使抗体仅仅只能跟特异的蛋白质 结合而不是和膜结合。
脱脂奶粉要用 TBST 配置，要在干净的容器里 进行封闭，且足以覆盖住膜。
二、孵育一抗
一抗用 BSA 溶解，根据抗体说明书上的要求 稀释抗体（大部分稀释度为 1：1000），4℃过 夜。 也可根据抗体量和膜上抗原量适当延长或缩 短时间。（有些一抗室温孵育一小时也可得到满意 的结果）
ChemiDoc XRS system 了解ChemiDoc XRS系统的更多信息！
二．转印过程
2009年7月9日第六十四期
第 15 页，共 25 页
下一页 返回ຫໍສະໝຸດ 转印蛋白的方法有多种，最常用的是电泳转印 方法，该技术具有快速、有效、并保持蛋白在凝胶 中高分辨率的特性。电泳转印技术是指在凝胶中分 离的蛋白质向印迹膜载体转印的过程。由于该技术 可以准确、快速、高效的将蛋白转印到膜上，并可 以保持蛋白在凝胶中高的分辨率，而被广泛的应用 于转移印迹技术中。
在转印过程中将产生大量热量，因此对电场强 度要有一定的限制。转印中产生的焦耳热（Joule） 与电源参数 P 成正比，P=I*V=I2R。电泳转印缓冲 液的温度随着焦耳热的增加而升高，此时其电阻却 明显下降。电阻的降低将会使转印过程和电场强度 发生变化，从而影响电转印缓冲液的缓冲能力。同 时，系统过热还会引起凝胶的损坏或与印迹膜发生 粘连。从而槽体的散热能力将直接影响电泳转印效 率。
高灵敏度化学发光仪 ChemiDoc XRS 应用心得
作者：黄磊
一．概述
化学发光 (ChemiLuminescence ，简称为 CL) 分析法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是 依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器 对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本质 区别是体系产生发光 ( 光辐射 ) 所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光，必须具有一个产生可检信 号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。
第 16 页，共 25 页