关于胶回收
胶回收dna注意事项
胶回收DNA注意事项①切胶回收DNA片段是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
所以为了减少胶的体积，我们就可以用相对比较薄的胶来跑电泳，通常只要够点样即可，或是采用薄而宽的梳子来跑胶。
这样可减少回收试剂引起的一些后续麻烦。
②主要还是DNA的浓度, 如果DNA浓度不够, 想胶小点也不可能。
③紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时，要衬以干净的塑料薄膜，使用无DNA污染的新刀片，其目的在于防止外源DNA的污染。
④利用凝胶回收试剂盒DNA回收效率较低或者未回收到目的片段可能有以下几个原因：胶块未完全溶解，可适当延长水浴时间，并增加上下颠倒次数辅助溶解；胶块体积太大，应先将其切为小块，分多次回收；电泳缓冲液pH太高，硅基质膜在高盐低pH结合DNA，如pH太高，应作适当调整；漂洗液中未加入无水乙醇。
⑤可以改用去离子水洗脱。
但是实验室所用纯水一般pH偏低，可利用NaOH适当调高其pH 值，以增加洗脱得率。
⑥洗脱产物含有残留的乙醇会影响后续酶切实验，请确保彻底去除漂洗缓冲液，具体方法参见回收效率低的解决方案。
⑦不可以使用更小洗脱体积（小于说明书提供的最小洗脱体积）进行洗脱以提高浓度，因为说明书提供的最少洗脱体积是能完全覆盖吸附膜的最小体积，若减少体积则不能将DNA完全洗脱下来。
⑧电泳检测只有一条目的带，可以选用凝胶回收试剂盒。
如果后续实验对片段纯度要求较高，建议即使只有一条带，也可以切胶纯化，其回收得到片段的纯度可能要比直接回收高一些。
⑨琼脂糖凝胶胶块不溶可能是下述原因：琼脂糖质量不好；含目的片段的凝胶再空气中放置过久，使胶块失水、干燥，建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4℃或-20℃；制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。
关于胶回收切胶的一点注意事项1. 电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。
2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。
胶回收 PPT
➢ 丙烯酰胺电泳凝胶产物回收的方法之一。
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2.1.5 DEAE纤维素膜纸片法
➢ 将DEAE纤维素膜裁成小条活化处理。电泳后在 目的条带前切一刀，将比条带略宽的DEAE 纤维 素膜插入切口，不留气泡，继续电泳，条带上的 DNA被膜片截留，取出膜片冲洗后转移到离心管 中加缓冲液65℃保温洗脱，直到膜上DNA被完 全洗脱，将溶液用酚氯仿抽提沉淀。
2
向吸附柱CA2中 加入μL漂洗液PW
12000rpm, 离心30~60sec
3
弃废液，将吸附 柱重新放回收集管 中。重复操作1,2,3
注：1.漂洗液PW使用前先检查是否已加入无水乙醇。 2.如果回收的DNA是用于盐敏感的实验，例如平末端连接实验或
直接测序，建议PW加入后静置2~5min再离心。
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4.1 实验流程
4.1.6 去除漂洗液
1
2
将吸附柱CA2放回 收集管中
12000rpm, 离心2min
3
将吸附柱CA2置于 室温放置数分钟，
晾干
注：1.尽量除尽漂洗液，以防止残留的漂洗液中的乙醇影响下一步的 实验（如酶切、PCR等）。
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4.1 实验流程
4.1.7 收集DNA
1
2
将吸附柱CA2放到 一个干净离心管中
胶回收
目录
一 胶回收基础知识 二 方法及应用 三 试剂耗材与设备 四 操作流程 五 常见问题解答
目录
一 胶回收基础知识 二 方法及应用 三 试剂耗材与设备 四 操作流程 五 常见问题解答
1.胶回收的概念 2.胶回收的原理
1.1 胶回收概念
➢ 从电泳后的凝胶中回收目的DNA的过程，其目的 是将目标DNA重新利用。
胶回收
除了选择合适的方法外,实验中还要注意以下几点:(1)防止抽提过程中污染DNA酶与回收片段接触的试剂与器皿等都应进行灭菌(酶)处理,即使是不能用干热或湿热法灭菌的器皿也要用乙醇浸泡以灭杀活菌与DNA酶,不然可能发生回收片段部分降解的现象,有时甚至一无所获.即使是轻微的降解反应——当发生在粘性末端时也会导致严重的连接困难.(2)紫外照射选择长波段回收过程往往需在紫外等监测下进行,与一般观察电泳结果不同的是这时应用长波紫外灯.因为短波紫外线(254nm)会引起DNA的断裂或是形成TT二聚体,前者会使以后的连接与转化等实验失败,后者可能造成基因突变,给克隆工作带来麻烦.即使是使用了长波紫外照射,回收DNA时也要尽量短时照射,避免连续长时间照射.(3)实验操作要轻柔特别在处理较大片段时应防止机械剪切作用DNA对的破坏,如吸取液体,转动离心管等操作均应缓慢,轻柔.综上所述,只有在合适的回收方法基础上注意具体操作步骤是才能有效回收所需片段,为以后的酶切,连接,标记等工作打下良好基础.3 实验步骤一、试剂盒法(Kit回收法,以上海申能博彩生物科技有限公司生产的试剂盒为例)(1)从电泳板上切割含目的DNA片段的凝胶块(割胶尽可能的小,提供后续回收效率)(2)凝胶称重后并将其放入1.5ml管中,将其适当切小,加速溶解.每100mg凝胶加入400μl solution SN.(若称重省略,一般加入400μl SN)(3)凝胶溶解:55-60℃,保温5-10分钟,每2分钟混匀一下,使凝胶溶解,胶完全融化后每400μl solution SN中加入solution B 100μl,混匀.(4)将3S柱装入2ml洗管,将上述混合液转移至3S柱,室温放置2min.室温10 000 rpm离心1分钟,稳定45秒.(5)取下3S柱,倒掉收集管中的废液,将3S柱放入同一收集管中,加入600μl Wash Solution,室温10 000 rpm离心1分钟.(6)重复步骤5一次.(7)取下3S柱,倒掉收集管中废液,将3S柱放入同一收集管中,室温10 000 rpm离心2分钟.(8)将3S柱放入新的离心管中,在3S柱子膜中央加30μl ddH2O,不加盖室温放置2分钟.(9)盖上离心管,室温10 000 rpm离心1分钟,离心管中的液体即为回收的DNA片段.胶回收一. 提高胶回收量的办法：1) 增加电泳时的上样量。
axygen胶回收说明书
axygen胶回收说明书1.介绍Axigen胶是一种环保型的胶水，它具有出色的粘性和耐久性，适用于多种材料的粘接。
Axigen胶的独特之处在于，它可以被回收再利用，减少了对环境的负面影响。
本说明书将详细介绍Axigen胶的回收方法和操作步骤。
2. Axigen胶的回收原理Axigen胶属于热熔胶，其回收原理是通过加热将已干固的胶水重新融化成液态，并进行再生处理，使其能够再次使用。
回收后的Axigen胶具有与原始胶水相同的性能和粘接能力。
3. Axigen胶的回收设备进行Axigen胶回收所需的设备包括：- 融化器：用于加热和融化Axigen胶-滤网：用于去除杂质和颗粒- 冷却器：用于将重新融化的Axigen胶迅速冷却固化- 再生剂：用于恢复Axigen胶的黏度和性能- 称重器：用于测量回收的Axigen胶的重量4. Axigen胶的回收步骤以下是Axigen胶的回收步骤：步骤1：准备回收设备，确保设备干净并符合卫生标准。
步骤2：将需要回收的Axigen胶切成小块，以便更好地加热和融化。
步骤3：将Axigen胶块放入融化器中，加热到适宜的温度。
具体的温度应根据Axigen胶的配方和要求确定。
步骤4：在加热过程中，使用搅拌器将Axigen胶块搅拌均匀，以确保完全融化。
步骤5：一旦Axigen胶完全融化，将其通过滤网过滤以去除杂质和颗粒。
步骤6：将过滤后的Axigen胶迅速注入冷却器中，使其迅速冷却和固化。
步骤7：在固化过程中，根据需要添加再生剂以恢复Axigen胶的黏度和性能。
步骤8：冷却和固化后，取出回收的Axigen胶。
步骤9：使用称重器进行称重，记录回收的Axigen胶重量。
步骤10：将回收的Axigen胶进行包装或存储，以备再次使用。
5. Axigen胶回收的注意事项在进行Axigen胶回收时，需要注意以下事项：-遵守安全操作规程，确保操作人员的人身安全。
-确保回收设备的正常运行和维护。
- 确保Axigen胶的加热温度和时间在适宜范围内，以防止过热和损坏。
切胶回收的原理
切胶回收的原理咱来聊聊切胶回收这事儿。
这就像是从一堆宝藏里挑出咱想要的那一件宝贝，然后把它单独拿出来好好保存起来。
先说说凝胶电泳吧。
想象一下，各种大小的分子就像一群小伙伴在参加一场马拉松比赛，跑道就是琼脂糖凝胶。
那些小的分子啊，它们身子轻，跑起来就快，能在凝胶里跑得老远；而那些大的分子呢，就像背着重重行囊的人，跑得慢，没跑多远就被落下了。
这样一来，不同大小的分子就按照自己的速度在凝胶里拉开了距离，形成了一条条不同的条带。
这就好比是小伙伴们按照不同的速度在跑道上分散开来，各自在自己的位置上。
然后呢，咱就看到了那凝胶里的条条带带，这里面就有我们感兴趣的那部分。
这时候切胶回收就登场了。
就好像我们在那跑道上，看到了那个我们一直在找的小伙伴，然后把他所在的那一小段跑道给切下来。
那凝胶里的目标条带就像是藏着宝藏的那一小块地方。
那切下来的胶块里可都是宝贝啊。
可是怎么把这宝贝拿出来呢？这就涉及到切胶回收的核心原理啦。
有一种办法呢，是利用溶胶液。
这溶胶液就像是一个超级魔法溶剂。
把切下来的胶块放到溶胶液里，就像把那藏着宝贝的小盒子放到一个能打开它的魔法池子里。
溶胶液会把凝胶慢慢溶解掉，那些原本被困在凝胶里的DNA分子就被释放出来了。
这就好比是把宝贝从那个锁住它的小盒子里解救出来了。
还有一种情况呢，是和吸附有关的。
就像小磁石吸引小铁屑一样。
有些材料可以专门吸附DNA分子。
当把切下来的胶块处理后，那些DNA 分子就被吸附到特定的材料上了。
这时候其他的杂质就被留在一边了，就像把沙子和金子分开一样。
然后再通过一些特殊的溶液把吸附着的DNA 分子从材料上洗脱下来，这样就得到了比较纯净的我们想要的DNA分子啦。
在这个过程中，温度有时候也很关键。
就像不同的花朵需要不同的温度来生长一样。
合适的温度能让溶胶的过程更顺利，也能让吸附和洗脱的效果更好。
如果温度不合适，就像花儿在不合适的温度下长不好一样，切胶回收的效果可能就会大打折扣。
咱再从一个更形象的角度看。
胶回收试剂盒成分及作用
胶回收试剂盒成分及作用
小伙伴们！今天咱们来唠唠胶回收试剂盒的那些事儿。
首先呢，胶回收试剂盒里有结合缓冲液。
这东西可重要啦！它的作用就是为了让咱们从琼脂糖凝胶里切下来的DNA片段能够很好地结合到硅胶膜上。
你想啊，如果没有这个结合缓冲液，那DNA片段就像没头的苍蝇似的，到处乱飘，根本没法好好进行下一步回收工作呢！我感觉这个结合缓冲液的量得控制好，不过具体多少有时候也得根据实际情况来定，多一点少一点可能不会有太大影响，但也别太离谱啦。
还有洗脱缓冲液。
这是干啥用的呢？它就是把吸附在硅胶膜上的DNA给洗下来。
我就这么跟你说吧，要是没有洗脱缓冲液，咱们千辛万苦把DNA吸附上去了，结果却拿不下来，那不是白忙活了嘛！一般来说按照试剂盒的说明加就好，但是呢，我试过稍微改变一点洗脱缓冲液的量，好像也能得到不错的结果，当然啦，这只是我的一点小经验哈。
另外，试剂盒里肯定有硅胶膜啦。
这个硅胶膜就像是一个小小的“DNA捕捉器”。
DNA片段经过结合缓冲液的作用后，就乖乖地被吸附在这个硅胶膜上了。
不过要注意哦，在操作的时候千万别把硅胶膜弄破了，一旦破了，那整个回收过程可能就会出问题啦！这一步一定要小心谨慎呀！
有些胶回收试剂盒可能还含有一些特殊的试剂成分，虽然我不太清楚具体每一个都是干啥的，但是它们肯定都是为了让胶回收这个过程更加顺利而存在的。
胶回收攻略
胶回收攻略一、这个回收小片断,我还比较在行,我以前的片断只有100bp市售的试剂盒常常有小片断回收效率很低的问题。
PCR产物经过酶切、回收等步骤后，损失太大。
进入连接反应的PCR片断量太小常常是试验失败的原因。
我的做法是，简化步骤、减少核酸在处理过程中的损失，让较多量的PCR产物和质粒片断进入酶连反应——以量取胜。
我的做法是很粗放型的，但是成功率很高。
如果愿意，你可以试试。
大致的做法是：制作100微升PCR产物；酒精沉淀回收PCR产物；PCR产物及载体酶切；跑回收胶；将回收胶上的PCR产物和载体片断切下，回收到一个试管中；冰冻、碎胶，酚、氯仿抽提，酒精沉淀；加入8微升水、1微升连接酶和1微升连接buffer，4度过夜；转化涂板。
具体的操作：PCR产物回收1. 制备100μL PCR产物。
2. 将100μL PCR产物加入一1.5mL离心管中，再加入400μL双蒸水，颠倒混匀。
加入 900μL 预冷无水乙醇、20μL 3M的醋酸钠。
颠倒数次混匀。
（提示本方法使用的醋酸钠量较小，但足够沉淀核酸，并且无需洗盐。
）3. 4℃静置30分钟，以利于核酸沉淀。
4. 12000rpm 4℃离心15分钟，沉淀核酸。
5. 弃上清，将离心管倒置于干净吸水纸巾上5分钟。
室温下吹风干燥。
（提示可将试管至于超净台吹风干燥。
如果管底有较多液体聚集，可盖好管盖后，轻弹管底数次，将液体分散挂在管壁上，再打开管盖吹风。
）酶切直接在回收PCR产物的试管中配置酶切体系：PCR产物酶切－制作插入片断10×Buffer 6μLSal I 5μLPCR产物——双蒸水 49μL合计 60μL要将PCR产物接入的质粒载体A，取A质粒（小提的质粒即可）3μL进行酶切。
A质粒酶切－制作载体片断10×Buffer 3μLSal I 1μL质粒 3μL双蒸水 23μL合计 30μL混匀。
37℃，酶切3小时。
1%琼脂糖回收胶回收（碎胶、酚氯仿抽提法）1. 酶切产物加入10％量的上样Buffer，混匀。
割胶回收实验报告
割胶回收实验报告【割胶回收实验报告】一、实验目的1. 了解割胶回收的原理及方法；2. 探究割胶回收对胶水质量的影响；3. 讨论割胶回收的应用价值。
二、实验原理胶水在固化后会形成固态胶块，割胶回收利用物理方法将固态胶块切割成小颗粒或粉末状，以便于再利用。
主要包括以下步骤：1. 将固态胶块放置在切割设备中，通过切割刀进行切割；2. 切割后的碎片经过筛网筛选出所需颗粒大小；3. 经过处理的胶粒可以进行再利用或进行再加工制成其他产品。
三、实验步骤1. 准备实验材料和设备：割胶刀、固态胶块、切割设备、筛网等；2. 将固态胶块放置在切割设备中，启动设备进行切割；3. 调整切割设备的刀片角度和速度，以获得所需颗粒大小；4. 将切割后的胶粒经过筛网进行筛选；5. 收集筛选后的胶粒，并进行相关分析和测试。
四、实验结果与分析通过实验得到的割胶回收的胶粒质量较好，具有较高的粒度均匀性和颗粒度适宜性。
在调整切割设备的刀片角度和速度时，发现角度过小会导致切割过程困难，角度过大则可能影响切割后的颗粒形状。
速度过快会导致切割不充分，速度过慢则可能导致切割割度不匀。
通过筛网筛选后的胶粒具有较好的颗粒分布和筛选效果。
五、实验讨论割胶回收可以将废弃胶水固态块进行有效利用，减少资源浪费和环境污染。
通过合理调整切割设备的刀片角度和速度，可以获得理想的胶粒颗粒度和颗粒形状。
割胶回收的胶粒可以用于再利用或再加工制成其他产品，具有较高的应用价值。
六、实验总结割胶回收是一种有效的胶水再利用方法，可以将废弃胶水固态块变为可再加工的胶粒。
实验结果表明，合理调整切割设备的刀片角度和速度对割胶回收的胶粒质量有较大影响。
割胶回收具有较高的应用价值，可减少资源浪费和环境污染，值得进一步推广和应用。
七、实验改进1. 考虑引入自动化设备，提高割胶回收的效率和精准度；2. 进一步研究和优化割胶设备的切割参数，使得割胶回收的胶粒更加均匀和适宜；3. 割胶回收后的胶粒可以进行再利用或再加工，可以进一步研究开发具有特殊功能的胶粒产品。
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胶回收
一. 提高胶回收量的办法：
1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul （PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7）加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以
使乙醇充分挥发。
8）最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液
洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充
分洗脱结合在膜上的DNA。
9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴
10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10）将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
DNA胶回收实验技术总结
胶回收
一. 提高胶回收量的办法：
1）增加电泳时的上样量。
2）电泳缓冲液用新鲜配制的。
3）切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。
4）把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。
5）溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。
6）胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性（电荷）和疏水性使DNA与柱子结合，因此，若电泳缓冲液的PH偏高，可在溶胶液中加入10ul（PH 5.0，3mol/L的 NaAC）；为了使DNA分子更好的拦截在膜上，可以添加30％异丙醇在加热溶解胶后的液体里。
7）加洗脱液之前，将柱子在室温放置几分钟（大约需10分钟），以使乙醇充分挥发。
8）最后少加些洗脱液，尽量减少回收体积，一般用30-50μl洗脱液洗脱（不能太少，否则无法浸湿膜反
而不利于洗脱）；洗脱液滴在膜中央，以充分洗脱结合在膜上的DNA。
9）可以在加入洗脱液之后，可以在55度水浴5分钟或放在50度水浴10分钟以上再洗脱，或用封口膜密封4度过夜，第二天再离心回收，效果不错。
10）将离心后的洗脱液加回吸附柱，再次离心。
二. 几种PCR 产物回收的详方法和步骤
1）普通胶回收
如果要胶回收，最好还是用试剂盒，方便，回收率也略高，实在要手工回收，可以切胶后加入3倍体积TE，水浴熔化后，酚、酚／氯仿抽提干净，乙醇沉淀即可。
另外好像还有冷冻法，没作过，不是很清楚。
2）从低熔点凝胶回收DNA
纯化DNA片段加与凝胶体积相等的TE（10mmol/l Tris-HCl pH8.0，0.1mmol/l EDTA），置65℃水浴5
分钟保温，使凝胶完全溶解。
待放至室温，加等量酚（TE饱和，TE封在上层，取下层酚），轻轻混匀（不用混匀），12000rpm，3分钟离心。
反复1-2次。
取上层液，加0.1体积3mol/L醋酸钠（pH5.2）和2.5倍体积无水乙醇，进行乙醇沉淀。
将纯化的DNA加适量TE溶解，测定含量，备用（可用于目的基因结构分析，探针制备等）。
3）扩增特异性好的PCR回收
如果PCR扩增特异性好，只是简单的PCR产物纯化回收，可以在PCR产物中加入50ug／ml 的蛋白酶K，37度1h，酚／氯仿抽提一次，氯仿抽提一次，上清加入0.1体积的醋酸钠，2.5体积的无水乙醇沉淀回收。
三. 不需胶回收就可直接连接的方法。