蔬菜中硝酸盐含量的测定(精)
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
硝酸盐和亚硝酸盐在一些地区的日常食物中存在，如蔬菜和肉类。
它们也被添
加到食品中，如香肠和酱油，以改善口感和保鲜时间，可以减少有害微生物的生长。
硝酸盐和亚硝酸盐在高浓度下有毒，所以监管机构和食品安全官员必须密切监测它们在食品中的含量，以确保食物安全。
为了确定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，原理是用水解和酸解的方法，然后
用标准的分光光度法进行测定分析。
首先解冻样品，采用乙醇或其他适当的溶剂消化；消化液可以用酸浓度调节器进行调节，如HCl或NaOH；然后将消化液向容易
对比度测量物体中添加适量氧化铌，水解时加热蒸发；最后添加分光光度滴定液，如凯氏滴定液，测量出总硝酸盐摩尔浓度，并建立比例。
以上是硝酸盐和亚硝酸盐在蔬菜样品中的分析测定方法。
硝酸盐和亚硝酸盐的含量可以通过上述方法利用标准的分光光度法确定。
这一
测定方法简单容易，重点是精确度较高，可以准确检测出不同样品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，从而提高食物的安全性。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
3种常用野菜的硝酸盐含量和主要营养成分的测定
3种常用野菜的硝酸盐含量和主要营养成分的测定野菜一直以来都是人们饮食中不可或缺的一部分。
它们不仅具有丰富的营养成分，而且有助于人体健康。
然而，因为野菜通常生长在大自然中，所以与人工种植的蔬菜相比，其硝酸盐含量可能较高。
因此，了解我们所吃的野菜中的硝酸盐含量以及主要营养成分的测定非常重要。
首先，让我们来了解一下三种常见的野菜：马兰头、苋菜和蕨菜。
这三种野菜在很多地方都广泛生长，被人们用于烹饪各种美味菜肴。
为了确定这些野菜中的硝酸盐含量，我们可以通过实验室测试、蔬菜检测或使用专业仪器进行分析。
硝酸盐是一种常见的无机盐，可以通过测量蔬菜中硝酸盐的浓度来确定其含量。
一般而言，硝酸盐含量较高的野菜会被认为是不安全的，因为摄入过多的硝酸盐会对人体健康造成负面影响。
除了硝酸盐含量，了解野菜的主要营养成分也是非常重要的。
马兰头富含维生素C、维生素A和膳食纤维，有助于增强免疫系统、维护眼睛健康和促进消化。
苋菜含有丰富的维生素K、维生素C和铁元素，这对于保持心血管健康和血液循环至关重要。
蕨菜是一种富含维生素B、维生素E和钾的野菜，可以帮助提高脑力和维持正常的血压水平。
了解野菜的硝酸盐含量和主要营养成分对于我们正确选择和烹饪这些野菜至关重要。
尽管硝酸盐可以通过烹饪降解，但我们仍然应该选择人工种植的蔬菜，并且不要过量食用含有高硝酸盐的野菜。
在我们享受野菜带来的美味和营养的同时，我们也要注意适量摄入并合理搭配其他食物，以保持均衡的饮食。
在购买和准备野菜时，一定要注意清洗和处理，以确保尽量减少硝酸盐的摄入。
总之，了解野菜的硝酸盐含量和主要营养成分是十分重要的。
通过正确的选择、烹饪和搭配，我们可以让野菜成为我们饮食中美味又健康的一部分。
长春菜市场中26种蔬菜硝酸盐含量测定
表 2 各类蔬菜中硝酸盐
蔬菜类别
硝酸盐含量平 均值（mg/kg）
蔬菜类别
硝酸盐含量平 均值（mg/kg）
叶菜类
858.62
瓜类
300.97
根茎类
325.55
葱蒜类
243.66
茄果类
68.73
鲜豆类
35.58
硝酸盐及大量施用氮肥有关。其它为根茎类、瓜类、葱
蒜类、茄果类和鲜豆类。
2.3 蔬菜中硝酸盐污染评价
2017 年 9~10 月，随机采自市场的各种新鲜蔬菜 26 个品种，每种蔬菜各取 5 个样品。 1.2 测定方法
取蔬菜的可食部分，用自来水洗净、再用无离子水 冲洗，然后吸干表面水分。取蔬菜样品若干，匀浆、称 重、提取、过滤后，分别用离子色谱法测定蔬菜中硝酸 盐含量。 1.3 生菜、黄瓜、芹菜等样品制备及分析步骤
依据分级标准，对检测菜处于严重污染
状态，应引起足够的重视。
表 3 蔬菜中硝酸盐含量的分级
级别（mg/kg） 样品数（个） 百分比（%） 污染程度
1 级（≤432）
162
62.31
轻度
2 级（≤785）
51
19.62
中度
3 级（≤1234）
类别
名称 蔬菜样 硝酸盐含 类 品个数 量（mg/kg） 别
名称
蔬菜样 硝酸盐含 品个数 量（mg/kg）
液相色谱法测定蔬菜中的硝酸盐
液相色谱法测定蔬菜中的硝酸盐、亚硝酸盐1材料与方法1.1试剂亚硝酸钠、硝酸钾、磷酸、氢氧化钠和过二硫酸钾均为分析纯；磷酸二氢钾(pH 缓冲标准物质)；乙腈为色谱纯；实验用水均为18兆欧的超纯水。
1.75mol/L KH2PO4-0.2mol/L H3PO4缓冲液：将缓冲液稀释100倍[加体积分数7.5%(V/V)的乙腈]为流动相；用亚硝酸钠、硝酸钾配制各含100mg NO2-N、NO3-N/L混合标准储备溶液，逐级稀释为混合标准工作液；5%碱性K2S2O8溶液；环境标样根据实验需要做稀释处理；氢氧化钠溶液(20g/L)。
1.2方法1.2.1色谱条件柱温30℃；泵压2.94MPa；灵敏度为0.04AUFS；检测波长204nm；流速0.6ml/min；进样体积10μl；流动相17.5mmol/L KH2PO4-2mmol/L H3PO4缓冲液(pH3.5)+乙腈(92.5:7.5，V/V)，使用前过滤并超声脱气。
1.2.2样品处理采用比色法1.2.3 HPLC操作称取约5.00g经绞碎混匀试样，置于250ml容量瓶中，加12ml氢氧化钠溶液(20g/L)，用超纯水定容至250ml，静置0.5h，取上清液100ml溶液加3ml缓冲液至酸性，定容1000ml，过0.45μm滤膜，直接进样10μl测定NO2、NO3。
同时，选取含NO2和NO3较低的蔬菜分别加标作回收率实验。
2结果与分析2.1 HPLC法分离、检测NO2与NO3采用上述实验条件可完全分离、检测NO2与NO3，分离度大于1.5，分离效果见图1。
混合标准溶液4℃低2.2 NO2和NO3的校正曲线及检出限将混合标准储备溶液逐级稀释以氮计(1:1):0.1、0.5、1.0、5.0、7.0、8.0mg/L的NO2、NO3混合标准工作液，分别进样10μl，进行5次HPLC/UV测定。
以峰面积为纵坐标，标准样品的检测氮的质量为横坐标制作校正曲线。
按选定的色谱条件和检测方法测得NO2和NO3的线性检测范围为0～8mg/L。
蔬菜中硝酸盐含量的测定
NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。 测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
关键词：蔬菜; 硝酸盐; 紫外分光光度法 前言：蔬菜( 尤其叶菜类) 是一种容易累积硝酸盐的作物，硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用,而且有些蔬菜生产者采用工业废水和 生活污水浇地,造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高,已证明,硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐,它可与人体血红蛋白 作用, 使之失去载氧功能,造成高铁血红蛋白症, 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害[ 1]。因此,蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标[ 2]。 蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多，如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法, 但由于干扰因素多，操作步骤过于繁琐，很难满足批量 常规分析之需要，而其它几种方法则需要精密仪器， 测定条件较为 严格，不适宜作常规监测分析[3]。本实验采用操作简单、准确度高 的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
0.2664
0.8943
0.5871
1.9639
小瓜
0.3476
0.4843 1.1653
1.6211 354.91
0.5182
1.7342
0.2270
0.7631
土豆
0.1497
0.1495 0.5052
0.6546 68.43
实验七 蔬菜中硝酸盐含量的测定(紫外分光光度法)
实验七蔬菜中硝酸盐含量的测定（紫外分光光度法）1、实验目的掌握蔬菜中硝酸盐的测定原理，熟悉取样方法、样品的处理、测定和仪器的使用方法，了解各种试剂的配制方法。
2、实验原理用pH9.6～9.7的氨缓冲液提取样品中硝酸根离子，同时加活性炭去除色素类，加沉淀剂去除蛋白质及其他干扰物质，利用硝酸根离子和亚硝酸根离子在紫外区219nm处具有等吸收波长的特性，测定提取液的吸光度，其测得结果为硝酸盐和亚硝酸盐吸光度的总体，鉴于新鲜蔬菜、水果中亚硝酸盐含量甚微，可忽略不计。
测定结果为硝酸盐的吸光度，可从标准曲线上查得相应的质量浓度，计算样品中硝酸盐的含量。
3、仪器与试剂3.1 仪器（1）紫外分光光度计（2）分析天平：感量0.01g，0.0001g。
（3）研钵（4）可调式往返震荡机（5）pH计3.2 试剂（1）盐酸。
（2）氢氧化铵。
（3）氨缓冲溶液（pH9.6～9.7）：量取20ml盐酸，加到500nl水中，混合后加入50ml氢氧化铵，用水定容至1000ml。
用精密pH计调pH到9.6～9.7。
（4）活性炭（粉末）。
（5）正辛醇。
（6）亚铁氰化钾溶液{ω[K4Fe(CN)6.3H2O]=15%}：称取150g亚铁氰化钾溶于水，定容至1000ml。
（7）硫酸锌溶液[ω(ZnSO4)=30%]：称取300g硫酸锌溶于水，定容至1000ml。
（8）硝酸盐标准溶液：称取0.2039g经110±5℃烘干至恒重的硝酸钾（优级纯），用水溶解，定容至250ml。
此溶液硝酸根质量浓度为500mg/L，于冰箱内保存。
4、实验步骤4.1 取样选取一定数量的生菜，先用自来水冲洗，再用蒸馏水清洗干净，用吸水纸吸干表面水分，剪碎后充分混匀，称取5.0g于研钵中充分捣碎。
4.2 提取将匀成浆后的样品少量多次共20ml水洗净研钵，将样品全部转移到50ml容量瓶中，加1滴正辛醇消除泡沫，再加入3ml氨缓冲溶液，0.5g粉末状活性炭。
放置于可调式往返振荡机上（200次/min）振荡30min，加入亚铁氰化钾溶液和硫酸锌溶液各1ml，充分混合，加水定容至100ml，充分摇匀，放置5min，用定量滤纸过滤。
紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量的不确定度评定
（ Ｌ 液 ）００ ３√ ： ．０ ７ 移 管＝ ．０ ／ ３ Ｏ０ １ ，计算 得 出 ｌ
Ｕ ｅ （ ２ Ｌ ０． Ｉ ｏ ） ｍ ００８５ Ｕｒ （ ｍ ） Ｏ． ｅ ｏ Ｌ ｌ ４ ００４２ Ｕ ｅ （ ｍ ） ｒｌ ０ Ｌ ６ ００ ２ ｒ ㈣ ｍ ）＝０．０２１Ｕ （ｏ Ｌ ０ ０ ７ ．０ ８Ｕｅ ｌ Ｌ ０ Ｉ１ ｍ ）＝ ．０１ ；
的测定 紫外分光光度法》 对蔬菜样品进行清洗、 粉 碎与制备 ，并配制所需试剂。
１ ． 提 取 与 测 定 ．２ ３
笔者根据 Ｊ ５ — １９ 《 Ｊ １ ９ ９９（ Ｆ０ 测定不确定度评定与标 示 中的有 关规 定 ，以硝 酸盐 为例 。建立 紫外 分光
光 度 法 测定 硝 酸 盐 含 量 的 不确 定度 计 算 模 型 ，对
到 ５ ｍＬ容量 瓶 中，定容 ，得 到浓度为 ０ ．、４０ ０ 、２ ０ ．、
６ 、８ 、ａ． ｇ ｆ ． ． ０ ￣ ｉ ０ ０ ０ ｍ 酸钾工作液。查移液管、容量瓶 的检定证书 ，得 出以下 兀 ． 个不确定度 ：
将 上述 不确 定度 分量 合成 得 ：
ｕ ＝ （ｏ Ｃ ０ １７ ＋ ． ２３ ＋ ． ６ ００ ２ ￣ ， ＵＣ ／ｏ ． ０ ０ ０２ ０ ０１ ＝ ．１ ５ ￣ ） ＝４ ０ ０ ０
量轻 且基 质保 水保 肥能 力强 ，适 宜 长途运 输 ，成苗 率高 ，定植 后不 伤根 ，无缓 苗期 ，抗逆 性强 ，是近 几年 来 出现 的一项 先进 技术 ，具有 显著 的节 本增 效
室进行 了一系列设施改造 ， 并在改造温室 中进行常 规育苗试验 。 试验结果表 明， 改造后的温室增温、 保
体积 ； 为 吸取滤 液体 积；’为 待测 液定 容体 积； ／ ３ ｍ 为样 品质 量 。
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蔬菜中硝酸盐含量的测定
摘要 :基于硝酸根在 219 nm处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取液的吸光度,
从标准曲线上查得相应浓度。
提取液用 pH=9.6-9.7的氨缓冲液,从待测样品中提取硝酸根离子。
此法测定的结果表明回收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。
操作方法简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。
关键词:蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法
前言:蔬菜 ( 尤其叶菜类是一种容易累积硝酸盐的作物,硝酸盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。
由于当前我国蔬菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用工业废水和生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过
高 , 已证明 , 硝酸盐在人体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会造成智力迟钝等危害 [ 1]。
因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 [ 2]。
蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多,如镉柱还原分光光度法、离子色谱法。
其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国家标准方法 , 但由于干扰因素多, 操作步骤过于繁琐, 很难满足批量常规分析之需要,而其它几种方法则需要精密仪器, 测定条件较为严格,不适宜作常规监测分析 [3]。
本实验采用操作简单、准确度高
的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。
1 实验仪器与材料
1.1 主要仪器与试剂
1.1.1仪器
紫外分光光度计 ; 容量瓶;乳钵
1 .1.2试剂
①氨缓冲液(pH=9.6~9.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中,混合后再加入 5ml 浓
氨水, 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。
②粉末状活性炭(除去待测样品中的色素。
③蛋白质沉淀剂Ⅰ,蛋白质沉淀剂Ⅱ (除去蛋白质及混浊物。
④溶液Ⅰ:15克铁氰化
钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中, 定容于 100ml 。
⑤溶液Ⅱ:30g 硫酸锌 (ZnSO4 溶于 60ml 蒸馏水中,定容于 100ml 。
⑥硝酸盐标准液:称 0.722g 在 110℃条件下烘
干的 KNO3用蒸馏水溶解后定容至 1000ml 。
此溶液为 100ug/ml标准贮液,放入冰
箱内保存。
1.1.3样品材料
京白菜 (Brassica campestris L. ssp. chinensis (L. Makino. var. communis Tsen et Lee、小瓜(Cucurbita moschata、胡萝卜 (Daucus carota 、莲花白 (Brassica oleracea L. var.capitata 、土豆 (Solanum tuberosum L 、黄瓜 (Cucumis sativus Linn. (以上各蔬
菜均在昆明蒜村农贸市场购买,产地昆明茨坝,高海拔的冬天摘取。
2 实验方法
2.1 标准曲线的绘制
依次配制 NO 浓度为 0.4ug/ml, 0.8ug/ml, 1.2ug/ml, 1.6ug/ml, 2.0ug/ml, 2.4ug/ml, 2.8ug/ml的溶液,以重蒸馏水做空白,用石英比色皿在 219nm 处测定吸光度(A 。
以
标准溶液浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
如图 2, 得回归方程为 A = 0 . 00919 +0 . 0596C,相关系数 r = 0 . 9996( n = 5。
2.1.1 材料处理方法
将样品经自来水、去离子水洗净 , 用滤纸擦干后选取有代表性的可食部分 , 将其切碎、混匀 , 并于研钵中捣碎 , 处理后放入烧杯中。
2.1.2样品测定
准确称取蔬菜样品 0.5100g ,放入研钵中加入少量蒸馏水, 研磨成匀浆, 用 30ml 蒸馏水将研磨好的匀浆冲入 100ml 容量瓶中, 同时用蒸馏水 30ml 放入另一 100ml 容量瓶中做空白校正,两瓶分别加 5ml 氨缓冲液(pH=9.6 ,30ml 蒸馏水, 0.5g 粉末状
活性炭,摇动均匀,静置 20min ,加入蛋白质沉淀剂溶液Ⅰ 1ml 和蛋白质沉淀剂Ⅱ 2ml, 充分混合,用蒸馏水定容到 100ml (V ,摇匀,放置 5~10min,定量滤纸过滤;取滤液用石英比色皿在紫外分光光度计 219nm 处测定吸光度 (A 。
如
吸光度太高, 可用蒸馏水稀释 5~10倍后再测 (空白同样稀释 [4]。
3 结果与分析:
六种蔬菜的吸光度(A 和硝酸盐浓度 (C
表一
0.0890 胡萝卜 0.3097 0.2274 0.2087 0.3026 1.0389 0.7644 0.7020 140.39 表二：各种蔬菜的硝酸盐含量 400 350 300 250 硝酸盐含量 200 150 100 50 0 京白菜小瓜土豆种类黄瓜莲花白胡萝卜系列1 由表可看出六种蔬菜硝酸盐含量大小为：小瓜>京白菜>黄瓜>胡萝卜>土豆>莲花白。
3.1 共存离子的干扰及消除按实验方法,对于硝酸盐溶液, 以相对标准偏差 ( RSD 小于 5 %为限, 少量的 K+, Na+、Ca2+、Mg2 +、SO42 -、F-不干扰测定; 而 NO-2、CO2-3 有干扰。
实验证明,加入 1 mo l/L 盐酸溶液 2 mL 可消除碳酸盐的干扰,再加 1%氨基磺酸铵 0.1 mL 能很好消除 NO-2 的干扰。
NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处，NP3-、NO2-具有等吸收特征。
测定结果为 NO3-和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中 NO2-，从而从总和中扣除。
由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2找出等吸收波长，再进行测定。
3.1.1 结论利用本法测定蔬菜中硝酸盐含量,方法回收率在 95.1 % ~ 100 . 9 %之间,相对标准偏差在 1 . 55 % ~4 .
14 %之间,准确度和精密度较高, 且操作简便, 尤其适用于检测大批量样。
参考文
献 [ 1] 李静娜,王红珠,梁高道. 28 种蔬菜中亚硝酸盐含量随贮存时间的变化[ J]. 中国公共卫生, 2002, 18( 4: 474 [2] 中华人民共和国国家标准 GB/T15401- 94. 水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定[ S]. 北京:中国标准出版社, 2002. [ 3] 国家环保局和《水和废水监测分析方法》编委会. 水和废水监测分析方法[M]. 北京: 中国环境科学出版社, 2002: 266268. [ 4] 叶尚红,等《植物生理生化实验教程》第二版，云南科技出版社出版，2007,90-92.。