补体介导的细胞毒试验
补体依赖的细胞毒实验原理(一)
补体依赖的细胞毒实验原理(一)补体依赖的细胞毒实验1. 介绍补体依赖的细胞毒实验（complement-dependent cytotoxicity assay，CDC）是一种常用的实验技术，用于评估抗体对细胞的毒杀效应。
该实验可用于研究抗体依赖的细胞毒杀机制、药物研发以及免疫治疗等领域。
2. 实验原理补体系统补体是机体免疫系统的重要组成部分，由多种蛋白质组成。
在免疫应答中，当抗原被抗体结合后，激活的补体系统可以诱导细胞溶解、炎症反应以及免疫调节等生物学效应。
补体的有效结合和活化是补体依赖的细胞毒实验的基础。
实验流程1.准备目标细胞：这里使用靶细胞，如癌细胞，可以通过培养得到。
2.添加待测抗体：将待测抗体添加至与靶细胞共同培养的细胞培养基中，使其与靶细胞形成复合物。
3.洗涤：以洗涤液洗去未结合的抗体。
4.添加补体：添加激活的补体，使其与复合物结合。
5.孵育：在适当的条件下（如体外孵育培养），让复合物和补体相互作用。
6.毒杀效应评估：观察细胞活力、溶解程度或细胞的其他形态学变化，评估抗体的毒杀效应。
3. 应用领域免疫治疗补体依赖的细胞毒实验可用于评估抗体依赖性细胞毒杀（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）效应，帮助筛选和优化免疫治疗药物，如单克隆抗体。
抗体研究该实验可以评估不同抗体的效应，分析抗原-抗体相互作用、抗体亚类、特异性和亲和力等对细胞毒杀的影响，促进抗体研究和开发。
免疫学研究研究补体依赖细胞毒杀机制有助于深入理解免疫应答过程中的细胞间相互作用、信号传导、炎症过程等免疫学基础问题。
4. 结论补体依赖的细胞毒实验是一种权威且可靠的实验方法，可用于评估抗体对细胞的毒杀效应。
通过该实验，可以深入研究抗体的毒杀机制，从而为免疫治疗和抗体研究提供重要参考。
参考文献： [1] Pandey JP, et al. Complement-dependent cytotoxicity (CDC) assays for anti-HLA antibodies. Methods Mol Biol. 2013;1034:59-67. [2] Chiu ML, et al. Assay development for the detection of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) activity of anti-influenza neuraminidase antibodies. J Vis Exp. 2014;(88):e51241.。
改良一步法微量淋巴细胞毒交叉试验
淋巴细胞毒交叉试验也称补体依赖细胞毒试验（cdc）。
它是检查器官移植受者体内有无针对供者，或者供者针对受者的hla抗体，在器官移植前一定要进行cdc检测。
如果受者血清中检出针对供者的hla抗体，一般认为是配合禁忌，移植后受者会发生超急性排异反应，导致移植失败。
由于试验是在施行器官移植术前临时进行匹配的试验，要求在短时间内报告结果，因此我们对该技术作了改良并与传统方法进行比较，收到满意效果。
现报告如下：一、材料和方法1.被检对象：标本来源于我院近10个月住院和门诊280例拟做肾移植待诊病人和其他器官移植待诊病人，采静脉血2 ml不抗凝待测。
2.试剂：免疫磁珠、荧光染液由美国o l公司提供，抗全淋巴细胞抗体试剂购自武汉生物制品研究所。
3.方法：(1)改良一步法：采用免疫磁珠3～5 μl分离出淋巴细胞，在terasaki板上每孔加入无菌矿物油5 μl，每排第1孔加生理盐水1 μl做阴性对照，第2孔加抗全淋巴细胞抗体1 μl做阳性对照，第3～6孔各加受者血清1 μl(即重复4孔试验)，每孔各加供者淋巴细胞1 μl(细胞浓度为2 000个/μl)，每孔各加补体1 μl，置22～25℃室温下反应45 min左右，每孔加荧光染液5 μl，倒置荧光显微镜下观察细胞毒性反应，分析判断结果。
(2)传统常规法见参考文献［1］。
二、结果采用改良一步法进行了400次淋巴细胞毒交叉试验，有9次检出阳性(阳性率为2.25%)。
其中1例患者反复多次cdc阳性，后进行hla抗体检测，特定细胞群反应抗体 (panel reactive antibody， pra) 阳性率为53.5%，提示抗hla-a2抗体增多，故放弃移植。
一步法与传统法试验比较：样本用量一步法1 μl，传统法40 μl；试验全过程一步法1.5 h内完成，传统法需2.5～4 h；补体用量一步法1 μl，传统法40 μl；30例标本用双盲法同时试验，结果一致。
三、讨论改良一步法cdc缩短和简化了试验时间、操作步骤，整个试验过程在1.5 h内完成。
免疫学练习题7
免疫细胞的分离与检测一、选择题（一）单项选择题（A型题）1．外周血中的单个核细胞主要是指A．淋巴细胞 B．嗜酸性粒细胞 C．单核细胞淋巴细胞D．单核细胞 E．中性粒细胞2．分离人外周血淋巴细胞分层液的最佳密度为A．1.030 B．1.035 C．1.092 D．1.020 E．1.0773．用Ficollhypaque分层液分离PBMC，分离的PBMC层位于试管的A．血浆层之上 B．血浆层之中 C．血浆层与分层液之间D．分层液之中 E．试管底部4．用玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10柱分离细胞时，从柱上洗脱下的细胞主要是 A．粒细胞 B．淋巴细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．B细胞5．能与SRBC结合形成E花环的细胞主要是A．T细胞 B．B细胞 C．单核细胞 D．粒细胞 E．血小板6．用小鼠抗人CD3单克隆抗体检测T细胞，其结果代表的是A．T细胞总数 B．Th细胞数 C．Ts细胞数 D．CD4 + 细胞数 E．CD8 + 细胞数 7．用尼龙棉柱分离细胞时，不易黏附尼龙棉纤维而被洗脱的细胞是：A．粒细胞 B．B细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．血小板8．表示淋巴细胞的活力常用A．活淋巴细胞占总淋巴细胞的百分比 B．活细胞浓度 C．淋巴细胞浓度D．活细胞和总细胞的比值 E．T细胞和B细胞的比例9．用腹腔渗出法可从动物的腹腔渗出液中分离出A．血小板 B．B细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．巨噬细胞 10．活细胞经台盼蓝染色后呈A．蓝色 B．棕色 C．红色 D．不着色 E．天青色11．荧光标记法计数外周血B淋巴细胞，检测的特有的表面标志是A．CD19 B．CD20 C．补体受体 D．SmIg E．FcR12．NK细胞特有的表面抗原是A．CD2 B．CD16 C．无特异的表面抗原 D．CD23 E．CD56 13．仅能使T细胞发生淋巴母细胞转化的因子是A．PHA B．PWM C．LPS D．ConA E．EBV14．能使B细胞和T细胞发生淋巴母细胞转化的因子是A．PHA B．PWM C．LPS D．SPA E．EBV15．检查体液免疫功能最常用的方法是A．血清免疫球蛋白定量测定 B．溶血空斑试验 C．B淋巴细胞计数D．淋巴母细胞转化试验 E．SmIgG测定16．溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能？A．T细胞 B．B细胞 C．中性细胞 D．吞噬细胞 E．NK细胞 17．测定T淋巴细胞功能的体内试验是A．锡克试验 B．狄克试验 C．结核菌素试验D．天然血型抗体滴度 E．血清IgG测定18．正常人外周血T淋巴细胞转化率为A．＜40% B．40~50% C．60~80% D．80% E．＞90%19．常用检测细胞毒效应的方法是A． 3 HTdR掺入法 B． 125 I释放法 C． 51 Cr释放法D．形态学检测法 E．CD8检测法20．包被有抗Ig抗体的亲和板，其吸附的是A．T细胞 B．B细胞 C．NK细胞 D．NKT细胞 E．吞噬细胞 21．Ficollhypaque液分离淋巴细胞是一种A．不连续密度梯度离心法 B．连续密度梯度离心法 C．亲和层析法D．离子交换层析法 E．自然沉降法22．Ficollhypaque淋巴细胞分离液的主要成分是A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇D．聚蔗糖+泛影葡胺 E．聚蔗糖+聚乙二醇23．Percoll分离液的主要成分是A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇D．聚乙烯吡咯烷酮 E．经聚乙烯吡咯烷酮处理的硅胶颗粒24．检测中性粒细胞杀菌功能的方法是A．NBT还原试验 B．白细胞计数 C．溶血空斑试验D．淋巴母细胞转化试验 E．补体介导的细胞毒试验25．MTT比色法检测IL2活性，下列哪项是错误的？A．需要IL2依赖细胞株B．增殖细胞具有吸收MTT的能力C．颜色的深浅代表细胞代谢活性的强弱D．可反映B细胞的功能E．可反映T细胞的功能（二）多项选择题（X型题）1．淋巴细胞分离液要求符合的条件有A．对细胞无毒 B．高渗 C．不溶于血液 D．无色 E．有合适的比重 2．与T细胞计数有关的表面抗原是A．CD2 B．CD3 C．CD4 D．CD8 E．CD193．与B细胞计数有关的表面标志是A．SmIg B．CD19 C．CD20 D．CD21 E．CD24．符合淋巴母细胞转化的形态学特征有A．细胞体积变小B．核仁明显、核染质疏松C．可见有丝分裂D．胞浆极少，呈天青色E．胞内可见空泡5．用酶联免疫斑点试验检测B细胞功能的优点有A．稳定、特异B．可检测抗体分泌细胞C．可检测抗体的分泌量D．可同时进行B细胞计数E．可同时检测不同抗原诱导的不同抗体的分泌6．细胞免疫功能测定包括以下哪些？A．T细胞计数 B．B细胞计数 C．T细胞功能测定D．Tc细胞效应测定 E．细胞因子测定7．检测淋巴细胞亚群常用的方法有A．免疫荧光法 B．流式细胞仪测定 C．酶免疫组化法D．放射免疫法 E．免疫金染色法8．细胞免疫功能体内试验方法有A．细胞毒试验 B．混合淋巴细胞反应 C．皮肤试验D．淋巴细胞增殖试验 E．接触性过敏试验9．T细胞增殖试验常用的检测方法有A．流式细胞仪法 B．形态学方法 C． 51 Cr释放法D．MTT检测法 E． 3 HTdR掺入法10．检测吞噬细胞功能的方法有A．吞噬试验 B．杀菌试验 C．NBT还原试验D．化学发光测定法 E．趋化功能测定法11．淋巴细胞亚群的分离方法有A．E花环分离法 B．尼龙棉柱分离法 C．亲和板结合分离法D．免疫磁珠分离法 E．超速离心分离法12.T细胞数量检测包括A. T细胞增殖试验B.间接荧光免疫法C.酶免疫组织化学法D.微量细胞毒试验E.花环技术13.检测T细胞数量的花环试验有A.酵毌菌花环试验B.补体C3b花环试验C.E花环试验D.葡萄球菌花环法E.抗体致敏细胞花环法14.B细胞表面具有A.mIgB.CD抗原C.Fc受体D.补体受体E.EB病毒受体15.B细胞数量检测的方法包括A.mIg的检测法B.CD抗原检测法C.Fc受体检测法D. 补体受体检测法E.小鼠红细胞受体检测法16.B淋巴细胞功能的测定方法有A.B细胞增殖试验B.溶血空斑试验C.酶联免疫斑点法D.体内测定法E.形态学检查法17.中性粒细胞吞噬和杀菌功能的测定方法A. 形态学检查法B. 显微镜检查法C. 溶菌法D. NBT还原试验E. 化学发光测定法18.巨噬细胞功能的检测方法包括A.炭粒廓清试验B.吞噬功能检测C. 巨噬细胞溶酶体酶测定D.细胞毒作用测定E. 巨噬细胞促凝血活性测定二、填空题1．PBMC包括 和 。
细胞毒实验的分类原理性检测方法与应用上课课堂
最大释放均值（Max）=最大释放孔cpm均值-最大释放对照孔cpm均值 自发释放均值（S自发）=自发释放孔cpm均值-培养基对照孔cpm均值
无菌取脾 研磨成单细胞悬液+2ml 1640
（无FBS)
细胞计数 【?/ml】 取20ul细胞+980ul的1640 混匀后取出20ul细胞+20ul台盼蓝
操作流程
行测定。
• 因此多年来人们一直试图寻找可以替代51Cr释放法的 CTL活性测定方法，如采用荧光标记、流式细胞分析 和报告基因等技术的灵敏可靠、简单易行的非同位素 测定法。
MTT（或MTS）还原法
本法根据细胞代谢活动与活细胞数直接成比例的原理，通过测定靶细 胞代谢活性的减少来反映效应细胞所致靶细胞的死亡。氧化型MTT进 入细胞后被线粒体脱氢酶还原生成蓝色formazan颗粒，经溶剂溶解后 比色定量，其颜色深浅直接与活细胞数有关，与靶细胞对照孔比较可 计算效应细胞杀伤靶细胞%。本法简便易行，无需预标靶细胞，与 51Cr释放法比较相关性好，还可测定淋巴细胞增殖活性和NK细胞活性。 MTT类似物MTS在细胞内还原的formazan产物具有水溶性，性质较稳定， 其测定简单快捷，特别适合于大批量测定。微生物污染可导致本法假 阳性结果。
验记录本上。
要对结果进行分析，写出影响结果的因素，及注意事项。
SI
50 40 30 20 10
0 100:1
Excel 作 图
NK杀伤实验
50:1 E：T
25:1
检测方法
1.1.1 alamarBlue一步荧光测定法 alamarBlue为活细胞代谢指示剂，易溶于水，进入细胞后经线粒体
酶促还原产生荧光及颜色变化，可用以定量。本法与51Cr释放法纺织 厂较有以下特点：①特异性相当但灵敏度更高，重复性好，组内及组 间差异很小。②使用方便，无需预先标记靶细胞及离心和洗涤步骤， 适用于大批量样品的高准确性自动测定。③alamarBlue的使用浓度不 影响细胞正常代谢及基因表达，可在无菌条件下测定后继续培养扩增 细胞，有利于对培养细胞的连续监测及深入研究。④还可测定淋巴细 胞增殖或化学物质的细胞毒性及细胞凋亡。⑤多种粘附或非粘附细胞 系、细菌、真菌等可用作靶细胞，所需效应细胞数较少（3×105/孔 即可）。⑥含胎牛血清（FCS）及酚红的培养液也不干扰测定结果
医学免疫学实验报告
医学免疫学实验报告
免疫考试终于结束了，终于可以和补体抗体抗原细胞因子适应性免疫应答固有免疫应答say goodbye了，真的是好开心，在持续一天的开心快乐之后，莫名觉得好空虚，可能长大了，发现快乐没有来得那么容易，像是被掏空了自己，但是还是要坚持，毕竟真的不是小孩子了，要对自己做的事情负责，感觉我又开始废话连篇了，还是直接进入主题吧
我们这学期做了三个免疫实验，实验内容、实验原理相对简单，其中两个实验是关于免疫学检验技术的，
1、补体介导的细胞毒试验：
2、沉淀反应与凝集反应（凝集与双扩）
3、酶联免疫吸附测定（ELISA）
在写实验报告时的一些建议：
1、写实验步骤时，尽量使用流程图的方式来展示，这样可以使自己的实验步骤简洁、明了；
2、在实验过程中，尽管实验比较简单，但是还是要注意记录好实验的数据（实验时间、实验药剂用量）、实验现象，并在实验报告中记录出来；
3、在写实验结果、结论的时候，对实验过程、实验结果要有所思考，可以采用问答的方式展现自己的思考（这是最重要的，含金量最重）。
浙江医学检验科模拟题2021年(96)_真题-无答案(44)846
浙江医学检验科模拟题2021年(96)(总分97.XX02,考试时间120分钟)A1/A2题型1. 酶免疫技术中将抗原抗体包被后再用下列何种物质进行封闭可以消除非特异性显色导致的本底偏高A. 1%～5%牛血清白蛋白B. 1%～10%牛血清白蛋白C. 10%牛血清白蛋白D. 10%～15%牛血清白蛋白E. 15%～25%牛血清白蛋白2. 酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否要分离结合的与游离的酶标记物而分为下述哪几种类型A. 均相异相B. 同相均相C. 异相固相D. 固相均相E. 固相异相3. 免疫测定的基础是A. 免疫原和抗血清的制备B. 沉淀反应C. 凝集反应D. 抗原和抗体的特异性结合反应E. 受体与配体之间的结合4. 微粒子化学发光免疫分析最常用的方法是A. 捕获法B. 竞争法C. 双抗体夹心法D. 间接免疫法E. 以上都包括5. 电化学发光免疫分析(ECLIA)常采用的标记物是A. 吖啶酯B. ALPC. HRPD. 三联吡啶钌E. 三丙胺6. 导致AIDS患者死亡最主要的原因是A. 继发肿瘤B. 吞噬细胞功能缺陷C. 肾功能衰竭D. 慢性肉芽肿E. 机会感染7. 免疫缺陷病按病因可分为A. 原发性免疫缺陷病和继发性免疫缺陷病B. 细胞免疫缺陷和联合免疫缺陷C. T细胞缺陷和B细胞缺陷D. 体液免疫缺陷和细胞免疫缺陷E. 吞噬细胞缺陷和补体缺陷8. AIDS免疫学异常的特征是A. 选择性T细胞缺乏，CD4+／CD8+比值下降B. 迟发性皮肤的过敏反应减弱或丧失C. 血清中IgG升高D. 血清中IgG下降E. 补体检测不出9. 混合淋巴细胞反应可用于A. 体外评价B淋巴细胞的功能B. 体外评价T淋巴细胞的功能C. 体内评价T淋巴细胞的功能D. 体内评价B淋巴细胞的功能E. 测定外周血T淋巴细胞的数目10. 炭粒廓清试验中，能吞噬清除小鼠体内90%炭粒的细胞是A. 小鼠肝脏中的库普弗细胞B. 脾巨噬细胞C. 中性粒细胞D. 尘细胞E. 淋巴细胞11. 关于微量细胞毒试验，下列说法错误的是A. 试验依赖补体介导的细胞毒作用B. 试验无需补体的参与C. 目的细胞伊红染色，着染红色D. 非目的细胞伊红染色，不着色E. 该方法简便易行准确性较高12. 关于生物学检测法哪项不正确A. 刺激细胞增殖B. 维持细胞生长C. 保持细胞活性D. 抑制细胞生长E. 以上均不对13. 细菌感染病人的NBT试验阳性百分率表现为A. 8%B. 明显下降D. 10%E. 9%14. Percoll分层液法常用来分离A. 单核细胞和淋巴细胞B. 白细胞C. T细胞和B细胞D. 红细胞E. 单个核细胞15. 对淋巴细胞亚群测定的临床意义描述错误的是A. 了解机体的免疫状态B. 探讨免疫调节功能的状况C. 是自身免疫疾病和肿瘤发生发展的监控指标D. 了解体液免疫情况E. 诊断免疫缺陷或免疫增生病16. 用Ficoll分层液分离外周血中的单个核细胞其分布由上而下依次为A. 血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞B. 血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞C. 血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 红细胞、粒细胞、单个核细胞、血浆E. 粒细胞、单个核细胞、红细胞、血浆17. 何种细胞表面具有小鼠红细胞受体A. 中性粒细胞B. 巨噬细胞C. T淋巴细胞D. B淋巴细胞E. NK细胞18. 体液中的溶菌酶的主要分泌细胞是A. 中性粒细胞B. 巨噬细胞C. B细胞D. T细胞E. NK细胞19. 酶免疫技术中的酶结合物是指A. 酶标记抗原B. 酶标记抗体C. 酶标记抗原或抗体D. 结合在固相载体上的酶E. 酶与底物的结合20. 检测HBV血清学标志物最常用的方法为A. 免疫荧光法B. ELISAC. 中和试验D. 免疫印迹试验21. 速率散射比浊法测定是在A. 抗原抗体反应的稳定阶段B. 终点比浊C. 抗原抗体反应的第一阶段D. 抗原抗体反应的第二阶段E. 以上均不对22. 速率散射比浊法测定的时间为单位时间内A. 抗原-抗体复合物形成的最长时间段B. 抗原-抗体复合物形成的最快时间段C. 抗原-抗体复合物形成最大量的时间段D. 抗原-抗体复合物形成的最稳定时间段E. 抗原-抗体复合物最初形成的时间段23. 发光物吖啶酯标记的化学发光反应体系应在何种环境中进行A. 酸性B. 碱性C. 中性D. 酸性或中性E. 碱性或中性24. DiGeorge综合征细胞免疫功能缺陷的原因是A. T细胞内在缺陷B. TCR功能缺陷C. B细胞内在缺陷D. 先天性胸腺发育不全E. 树突状细胞内在缺陷25. T细胞分化抗原主要是检测A. CD9B. CD10C. CD3、CD4、CD8D. CD19E. CD2026. 对选择性IgA缺乏症的特点叙述中，错误的是A. 食物过敏症的发病率较高B. 血清中IgA和sIgA均减少C. 常伴有消化道和呼吸道感染D. 自身免疫性疾病的发生率较常人高E. 用丙种球蛋白替代治疗有较好疗效27. 目前最为常用的基因多态性检测方法是A. PCR-SSCPB. PCR-测序C. PCR-RFLPD. 荧光PCRE. 原位PCR28. 下列哪种是NK细胞特有的表面抗原A. CD2B. CD16C. CD56D. CD69E. 以上均不是其特有的表面抗原29. 鉴定T细胞和亚群的酶免疫组化法中APAAP法的原理是A. 底物+APAAP+抗T细胞单克隆抗体+T细胞抗原B. 底物+碱性磷酸酶+兔抗鼠IgG+抗T细胞单克隆抗体+T细胞抗原C. 底物+抗碱性磷酸酶+兔抗鼠IgG+抗T细胞单克隆抗体+T细胞抗原D. 底物+APAAP+兔抗鼠IgG+抗T细胞单克隆抗体+T细胞抗原E. 底物+APAAP+兔抗鼠IgG+T细胞抗原30. CLA主要表达于A. B细胞B. 记忆T细胞C. 巨噬细胞D. 树突状细胞E. 单核细胞31. 通常免疫学实验最常用的细胞群是A. 单核细胞B. 淋巴细胞C. 单核细胞和淋巴细胞D. 中性粒细胞以外的细胞E. 吞噬细胞32. 采用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞，第二层是A. 淋巴细胞层B. 血浆与血小板层C. 单个核细胞层D. 粒细胞层E. 红细胞层33. 长期保存细胞的温度为A. -196℉B. -85℉C. -196℃D. -85℃E. 20℃34. 测定人NK细胞活性多以哪种作为靶细胞A. K562细胞株B. YAC细胞株C. 致敏的羊红细胞D. CRBCE. 以上都不对35. NBT还原试验中反映中性粒细胞杀菌功能的指标是A. NBT阳性细胞百分率B. 计数中性粒细胞内有浅黄色的NBT颗粒的细胞所占比例C. 计数中性粒细胞内有蓝色的NBT颗粒的细胞的数目D. 计数中性粒细胞内有浅黄色的NBT颗粒的细胞的数目E. 中性粒细胞内有蓝色的NBT颗粒的细胞的数目与中性粒细胞内有浅黄色NBT颗粒的细胞的数目之比36. 关于ELISA的底物OPD的特点哪一条不正确A. 具有致癌性B. 灵敏度高C. 比色方便D. 配成应用液后稳定性好E. 与酶反应后显橙黄色37. 酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用A. 抗原稀释法B. 抗体稀释法C. 酶标记物稀释法D. 棋盘滴定法E. A+B38. 辣根过氧化物酶的酶活性基团为A. 糖蛋白B. 亚铁血红素C. 活跃糖基D. 醛基E. 羟基39. 定时散射比浊分析中代表待测抗原浓度的信号峰值是指A. 第一次检测的信号值B. 第二次检测的信号值C. 第一次检测的信号值加上第二次检测的信号值D. 第二次检测的信号值减去第一次检测的信号值E. 以上均不对40. 在速率散射比浊分析中，不出现第二峰值信号则提示A. 结果准确B. 被测定抗原量太低，应取上一个稀释浓度C. 第一峰值信号是由全部待测抗原产生D. 第一峰值信号是由部分待测抗原产生E. 第一峰值信号是由全部抗体产生41. 生物传感器中决定传感器的功能与质量的关键元件是A. 生物敏感膜B. 热敏元件C. 光敏管D. 荧光计E. 阻抗计42. 慢性肉芽肿病(CGD)属于哪一类免疫缺陷病A. 原发性B淋巴细胞缺陷病B. 原发性T淋巴细胞缺陷病C. 原发性联合免疫缺陷病D. 原发性吞噬细胞缺陷病E. 原发性补体缺陷病43. 临床除外B细胞免疫缺陷，通常检测的Ig是A. IgG、IgD、IgAB. IgG、IgA、IgEC. IgG、IgD、IgED. IgG、IgA、IgME. IgA、IgD、IgE44. 实验动物新生期摘除胸腺A. 脾脏红髓区T细胞缺乏B. 淋巴结副皮质区T细胞缺乏C. 脾脏白髓区B细胞缺乏D. 淋巴结浅皮质区T细胞缺乏E. 以上均错误45. 标本为组织切片的细胞表面粘附分子最常用的测定方法是A. 酶免疫组织化学方法B. 免疫荧光方法C. 流式细胞仪D. 化学发光免疫测定方法E. 时间分辨荧光免疫测定方法46. B细胞表面可能有的标志性抗原不包括下列哪项A. CD20B. CD2C. CD22D. CD21E. CD1947. E花环分离法分离淋巴细胞时，能形成E花环的细胞是A. 单核细胞和淋巴细胞B. T细胞C. 单个核细胞D. B细胞E. 白细胞48. 参与特异性免疫的免疫细胞是A. 吞噬细胞B. 淋巴细胞C. 单核细胞D. NK细胞E. T细胞、B细胞和APC49. 硝基四氮唑蓝还原试验主要用于检测A. 中性粒细胞趋化能力B. 中性粒细胞胞内杀菌能力C. 中性粒细胞产生胞外酶的能力D. 巨噬细胞吞噬能力E. 巨噬细胞趋化能力50. 不属于人B淋巴细胞膜上的表面标志有A. 膜表面免疫球蛋白分子(SmIg)B. Fc受体C. 补体受体D. 丝裂原受体E. SRBC受体51. 介导体液免疫的细胞是A. T细胞B. B细胞C. 巨噬细胞D. 肥大细胞E. 嗜碱性粒细胞52. 下列关于NK细胞的叙述正确的是A. NK细胞形态具有异质性，所有的LGL细胞均为NK细胞B. 具有非特异杀伤作用，但无MHC限制性C. 对所有肿瘤细胞均有作用D. NK细胞发源于骨髓干细胞，其发育、成熟依赖胸腺微环境E. NK细胞不具有细胞介导的细胞毒作用53. 尼龙毛柱分离法是利用了哪种细胞具有易黏附于尼龙纤维表面的特性A. B细胞B. 单核细胞C. T细胞D. NK细胞E. B细胞和单核细胞54. 关于硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验，下列描述不正确的是A. NBT试剂实际是一种丝裂原B. 细胞在吞噬杀菌过程中耗能剧增，其耗氧量亦随之增加C. 细胞内磷酸己糖旁路代谢活性增强，葡萄糖-6-磷酸酶氧化脱氢D. 加入NBT可接受所脱的氢，使原呈淡黄色的NBT还原成点状或块状颗粒，沉积于胞质内E. 硝基四氮唑蓝是受氢体55. 与双抗体夹心法相比，ELISA间接法的主要优点是A. 有较大的放大作用B. 减少了操作步骤C. 减少了冲洗次数D. 可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体E. 缩短反应时间56. 不影响酶活性测定的因素为A. 底物浓度B. 样品杯直径C. 温度D. pH值E. 缓冲液的离子强度57. 速率散射比浊分析的抗原过量检测时，不出现第二次速率峰值信号表示A. 被测定抗原量过高，应稀释重测B. 被测定抗原量太低，应取上一个稀释浓度C. 第一次速率峰值信号是由全部的待测抗原产生D. 第一次速率峰值信号不是由部分的待测抗原产生E. 以上均不对58. 在定时散射比浊分析中，如果预反应时间段抗原-抗体复合物的光散射信号超过预设阈值，提示问题是A. 抗原过量（样本过量）B. 抗体过量C. 试剂过期D. 仪器故障E. 以上均错59. 为了保证速率散射测定分析的准确性和精密度，该类型仪器中特有的设计是A. 抗体过量检测系统B. 抗原过量检测系统C. 样本自动稀释系统D. 信号处理及数字转换系统E. 人工智能设计60. 遗传性血管神经性水肿的发生机制是A. C2a产生过少B. C2a产生过多C. C3a产生过少D. C3a产生过多E. C4a产生过多61. 原发性免疫缺陷病中发病比例最高的是A. 原发性B细胞免疫缺陷B. 原发性T细胞免疫缺陷C. 原发性联合免疫缺陷D. 补体系统缺陷E. 吞噬细胞缺陷62. 抵御化脓性细菌感染的非特异性免疫细胞是A. 单核细胞B. 巨噬细胞C. 中性粒细胞D. TCRγδ+细胞E. 肥大细胞63. 目前细胞因子最常用的免疫学测定方法是A. ELISAB. 流式细胞分析法C. 酶联免疫斑点试验(ELISAPOT)D. RIA法E. 免疫印迹法64. 与HIV受体有关的抗原是A. CD3B. CD19C. CD8D. CD4E. CD2065. 淋巴细胞功能体内试验的方法主要是A. 淋巴细胞转化试验B. 淋巴细胞计数C. 对异物排斥反应的能力D. 迟发型超敏反应E. 血清中Ig浓度的检测66. 正常人外周血经PHA刺激后，其T细胞转化率是A. 50%～70%B. 60%～80%C. 30%～50%D. 70%～90%E. 10%～30%67. 关于酶联免疫斑点试验检测B细胞功能的优点，下列哪项不是A. 可检测抗体分泌细胞B. 可检测抗体的分泌量C. 稳定、特异、抗原用量少D. 可同时进行B细胞计数E. 可同时检测不同抗原诱导的不同抗体的分泌68. 细胞介导免疫的效应细胞是A. Tc细胞B. Ts细胞C. Th细胞D. NK细胞E. TD细胞69. 用淋巴细胞分层液(Ficoll)分离外周血时，其中处于最上面的是A. 死细胞层B. 单个核细胞层C. 粒细胞层D. 稀释的血浆层E. 红细胞层70. 由PHA诱导的淋巴细胞转化实验中正常人群的转化率为A. 30%～50%B. 40%～60%C. 50%～70%D. 60%～80%E. 70%～90%71. 下列有关转化的淋巴细胞形态描述中，错误的是A. 细胞变大B. 出现空泡C. 核仁消失D. 染色质疏松E. 胞质扩大72. ABC法中的桥是指A. 生物素B. 亲和素C. 生物素化的抗体D. 与生物素结合的酶E. 三抗73. 下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术A. 化学发光免疫测定B. 免疫电泳法C. 放射免疫法D. 荧光免疫法E. 酶免疫法74. 患者，男性，36岁。
临床检验技术士《专业知识》预测试卷四
临床检验技术士《专业知识》预测试卷四[单选题]1.检测中性粒细胞杀菌功能的方法是A.白（江南博哥）细胞计数B.NBT还原实验C.溶血空斑实验D.淋巴母细胞转化实验E.补体介导的细胞毒实验参考答案：B参考解析：NBT还原试验可以检测中性粒细胞的胞内杀菌能力。
细胞在杀菌过程中耗能剧增，胞内磷酸己糖旁路代谢能力增强，加入NBT后被还原为蓝黑色颗粒。
[单选题]2.125I标记物检测的放射线为A.α射线B.β射线C.x射线D.γ射线E.μ射线参考答案：D参考解析：记忆型题。
不同的放射线检测仪器不一样。
[单选题]3.下列何种测定属于凝胶扩散试验A.透射比浊法B.双向扩散试验C.环状沉淀试验D.絮状沉淀试验E.散射比浊法参考答案：B参考解析：凝胶扩散试验主要分为单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验及免疫电泳、对流免疫电泳和火箭电泳等。
[单选题]4.下列各组合中正确的是A.乙型肝炎-HBsAg阳性B.AIDS-T细胞数量增高C.SLE-ANA皆阴性D.过敏性休克-IgE常降低E.原发性肝癌-AFP常降低参考答案：A参考解析：掌握各种疾病与免疫检测结果的关联性。
[单选题]5.关于RIA的叙述中，错误的是A.以放射性核素作为标记物B.是一种定量检测技术C.主要用于检测抗原D.定量分析时需同时作标准管E.最后形成的免疫复合物中的放射性强度与标本中的待测抗原量成正比参考答案：E参考解析：RIA中待测Ag量与结合的免疫复合物放射强度成反比例关系，与游离的标记抗原成正比例关系。
[单选题]6.反映肾小管早期功能的检查项目为A.血肌酐B.血尿素C.血β2-微球蛋白D.尿α1-微球蛋白E.血尿酸参考答案：D参考解析：LMWP可自由透过肾滤，95%～99%在近曲小管（PCT）重吸收，只有微量从终尿排出。
肾小管损伤发生时重吸收障碍而导致尿中LMWP排出增加。
肾小管吸收功能损伤时尿α1-微球蛋白即增加。
[单选题]7.尿中可以把糖测定出来时的最低血糖浓度为A.6.11mmol/LB.7.0mmol/LC.7.8mmol/LD.8.9～10mmol/LE.11.1mmol/L参考答案：D参考解析：考查肾糖阈的定义，血糖越高尿糖也越多，能够出现糖尿的最低血糖水平即为肾糖阈。
补体依赖的细胞毒实验报告
补体依赖的细胞毒实验报告篇一：补体依赖的细胞毒性创新助手报告——主题分析报告创新助手平台提供北京万方软件股份有限公司2014-06-28报告目录报告核心要素................................................................. ........................................ I一、主题简介................................................................. (1)二、主题相关科研产出总体分析................................................................. . (1)文献总体产出统计............................................................... (1)学术关注趋势分析............................................................... .. (2)三、主题相关科技论文产出分析................................................................. . (2)中文期刊论文............................................................... . (2)近十年中文期刊论文分布列表 (2)中文期刊论文增长趋势 (3)发文较多期刊............................................................... .. (4)发文较多的机构............................................................... . (4)发文较多的人 (4)核心期刊分布数量对比 (4)最近相关中文期刊论文 (7)被引较多的相关期刊论文 (7)学位论文............................................................... (8)近十年学位论文年代分布列表 (8)学位论文增长趋势............................................................... (9)硕博学位论文数量对比...........................................................10发文较多的机 (10)发文较多的人物............................................................... .. (10)最近相关学位论文............................................................... . (11)中文会议论文............................................................... .. (11)近十年中文会议论文年代分布列表 (11)中文会议论文增长趋势...........................................................12中文会议论文主办单位分布 (13)发文较多的机构............................................................... .. (13)发文较多的人 (13)最近相关中文会议论文............................................................13外文期刊论文............................................................... .. (14)近十年外文期刊论文年代分布列表 (14)外文期刊论文增长趋势...........................................................14最近相关外文期刊论文...........................................................15外文会议论文................................................................. ...................... 15 I篇二：CDC ADCC细胞毒性1 Antibody-dependent cellular cytotoxicity 抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用In antibody-dependent cellular cytotoxicity , Fc gammareceptors on the surface of immune effector cells bind the Fc region of an antibody, itself specifically bound to a target cell. The cells that can mediate ADCC are nonspecific cytotoxic cells such as natural killer cells, macrophages, monocytes and eosinophils. UponFCGR binding to the antibody, the FCGR ITAM is phosphorylated, which triggers the activation of the effector cell and the secretion of various substances that mediate the destruction of the target cell.The level of ADCC effector function is high for human IgG1 and IgG3, low for IgG2 and IgG4, and for these last two subclasses, the level of binding depends on the FCGR isotype and on the cell type.2 Complement-dependentcytotoxicity 补体依赖的细胞毒性作用In complement-dependent cytotoxicity , the C1q binds theantibody and this binding triggers the complement cascade which leads to the formation of the membrane attack complex at the surface of the target cell, as a result of the classical pathway complement activation.The level of CDC effector function is high for human IgG1 and IgG3, low for IgG2, and null for IgG4.篇三：医学免疫学实验第一章免疫学概要1.2.机制。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验结果
高倍镜下计数200个细胞中死细胞的百分数。死 细胞呈红色,无光泽且肿胀变大;活细胞不着色,有光泽 且形态正常。
试验管死细胞%-细胞对照管死细胞% 阳性率= -------------------------------------------- ×100% 100%-细胞对照管死细胞%
细胞。
实验方法
1、小鼠脾细胞悬液的制备:
1）4～6周龄小鼠拉颈椎处死,取出脾脏放入已加入
4ml左右的冷Hanks’液的平皿中，用100目的不锈钢
网研磨后，经尼龙布过滤，放入试管。 2）离心1000 rpm 5分钟，洗1次。 3）将沉淀重悬于6ml冷Hanks’液中，配成1×107/ml 细胞浓度。
2、取试管3支,标明顺
补体对照
细胞对照
1×107/ml小鼠脾细胞
抗小鼠脾细胞抗体
0.1ml
0.1ml
0.1ml
---
0.1ml
---
Hanks’液
1:3补体(经脾细胞吸收) 1%伊红-Y染料
--0.1ml 2d
0.1ml
0.1ml 2d
0.2ml
--2d
混匀, 37℃, 30分钟
补体介导的细胞毒试验
实验原理
带有特异抗原的淋巴细胞(靶细胞)在体外与相
应抗体结合后,• 在补体的参与下,引起靶细胞的死
亡。靶细胞的杀伤与否可借助染料(伊红y)排斥现象
判定。利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原,亦可鉴
定抗体的特异活性。 抗原是小鼠脾细胞，在体外利用抗小鼠脾细胞
抗体通过补体的协同作用,可杀伤95%以上的小鼠脾