结合态淀粉合成酶(GBSS)活性检测试剂盒说明书 微量法
NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4365
NADP-苹果酸酶（NADP-ME）活性检测试剂盒说明书微量法货号：UPLC-MS-4365规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶4℃保存试剂一液体20mL×1瓶4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1支4℃保存试剂四粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、试剂二：用时加入10mL提取液充分溶解备用；2、试剂三：用时加入用时每支加1mL双蒸水充分溶解备用；3、试剂四：用时每支加500μL双蒸水充分溶解备用；4、工作液：在7.5mL试剂二中加入1mL试剂三和0.5mL试剂四，可以根据比例现用现配。
产品说明：ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中，尤其在植物组织中活性较高。
ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应，产生丙酮酸和CO2，以及伴随NAD(P)+的还原反应，是苹果酸代谢的关键酶。
ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。
近年来植物ME活性测定较多，已经成为抗氧化研究的热点。
根据辅酶专一性和对底物特异性的不同，可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
NADP-ME催化NADP+还原成NADPH，在340nm下测定NADPH增加速率。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清，按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次）。
α-淀粉酶测定试剂盒(CNPG3底物法)产品技术要求zhongshengbeikong
α-淀粉酶测定试剂盒（CNPG3底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中α-淀粉酶的活性。
1.1规格液体单剂型试剂(R)：60mL×2 ；试剂(R)：80mL×2。
1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分试剂盒由试剂（R）液体组成。
1.3.1 试剂（R）液体主要组分：2-（N-吗啉基）-乙磺酸（MES）50mmol/L2-氯-对硝基苯-α-D-麦芽三糖（CNPG3）1.8 mmol/LNaCl350 mmol/L醋酸钙 6 mmo/L 硫氰酸钾900 mmol/L 叠氮钠0.01% 2.1 外观试剂(R)应为无色或浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度在波长405nm(400nm～420nm)处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.350,试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.002。
2.4 准确度测定GBW(E)090593,相对偏差应不超过±10％。
2.5 分析灵敏度对应于浓度为 85U/L的淀粉酶所引起的吸光度变化率（△A/min）的绝对值应在0.006～0.040的范围内。
2.6 重复性重复测定血清样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7 批间差测定血清样本，批间差（R）应≤10%。
2.8 线性范围在[5，2000]U/L检测范围内，线性相关系数（r）应≥0.990。
在(50,2000]U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10％；在[5,50]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过± 5U/L。
2.9 稳定性2.9.1效期稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为12个月。
试剂有效期满后2个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2开盖稳定性试剂开盖后，在2℃～8℃避光保存，可稳定30天；开盖稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
α-淀粉酶测定试剂盒(EPS底物法)产品技术要求北京森美希克玛生物
α-淀粉酶测定试剂盒(EPS底物法)适用范围：用于体外定量测定人血清或尿液中α-淀粉酶的活性。
1.1规格a) 试剂1：2×50ml，试剂2：2×10ml；b) 试剂1：4×50ml，试剂2：4×10ml；c) 试剂1：2×400ml，试剂2：2×80ml；d) 试剂1：12×20ml，试剂2：12×4ml；e) 试剂1：1×50ml，试剂2：1×10ml；f) 试剂1：2×45ml，试剂2：2×9ml。
1.2 组成试剂主要组分见表1：表1 试剂主要组分2.1 外观试剂1应为无色透明溶液；试剂2应为淡黄色透明溶液。
2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度测定试剂空白吸光度，应≤0.35；2.3.2试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.002。
2.4 分析灵敏度测定浓度为1000U/L的样品，吸光度变化率△A/min应不低于0.01。
2.5 线性2.5.1在[5,2400]U/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；2.5.2测试浓度[200,2400]U/L的样品，相对偏差应不超过±10%；测试浓度[5,200)U/L的样品，绝对偏差应不超过±20U/L。
2.6 重复性2.6.1 批内重复性变异系数(CV)应不超过5%。
2.6.2 批间差对同一份样品进行重复测定，相对极差(R)应不超过10%。
2.7 准确度回收率应在85%～115%范围内。
2.8 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到18个月但未超过24个月的试剂检测，应符合本技术要求2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。
颗粒结合型淀粉合成酶研究进展
颗粒结合型淀粉合成酶研究进展时岩玲;田纪春【期刊名称】《麦类作物学报》【年(卷),期】2003(23)3【摘要】本文综述了小麦胚乳中合成直链淀粉的关键酶——颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)的研究进展,展望了GBSS的研究前景。
小麦中的GBSS基因在种子中特异表达;控制3个Waxy位点的基因Wx-A_1、Wx-B_1和Wx-D_1,分别位于7AS、4AL和7DS上;六倍体小麦和二倍体小麦中3个GBSS的DNA序列从起始密码子到终止密码子,Wx-A_1为2781bp,Wx-B_1为2794bp,Wx-D_1为2862bp。
基因的完全编码区含有11个外显子和10个内含子,在核苷酸序列上三个糯基因彼此之间有惊人的同源性;研究表明,直链淀粉含量和淀粉糊化特性受Wx-B_1的影响最大,其次是Wx-_D1缺失蛋白,Wx-A_1缺失蛋白的影响最小。
GBSS的鉴定技术包括I_2-KI染色、电泳和分子标记技术鉴定。
【总页数】4页(P119-122)【关键词】颗粒结合型淀粉合成酶;小麦;胚乳;直链淀粉;序列特征;签定技术;种类;基因表达【作者】时岩玲;田纪春【作者单位】山东农业大学小麦品质育种研究室【正文语种】中文【中图分类】S512.1【相关文献】1.淀粉颗粒结合蛋白质研究进展 [J], 罗明昌2.植物颗粒结合淀粉合成酶（GBSS）基因的表达调控机制研究进展 [J], 苗红霞;孙佩光;张凯星;金志强;徐碧玉3.玉米颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建 [J], 乔光明;张明浩;李忠诚;陈正华4.香蕉叶片颗粒结合性淀粉合成酶Ⅰ和可溶性淀粉合成酶Ⅲ基因的克隆与序列分析[J], 匡云波;赖钟雄5.不同颗粒结合型淀粉合成酶Ⅰ亚基组合对小麦淀粉含量及面条品质的影响分析[J], 邓志英;李文淑;郭迎新;赵云哲;陈广凤;王德华;王冠颖;田纪春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
淀粉含量检测试剂盒说明书__ 微量法UPLC-MS-4133
淀粉含量检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4133100T/96S试剂名称规格保存条件试剂一液体65mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体65mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、标准品：临用前加入1mL 蒸馏水使其溶解，制备10mg/mL 葡萄糖标准液，2-8℃保存两周。
2、工作液的配制：临用前取1瓶试剂三加入2.625mL 蒸馏水后，缓慢加入14.875mL 浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用，用不完的试剂可以2-8℃保存一周。
淀粉是植物中糖的主要储存形式，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。
利用80%乙醇可以把样本中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。
StarchH 2SO 4Glucose H 2SO 45-Hdroxymethylfurfural AnthroneFurfural Derivatives最低检出限：0.0074mg/mL 线性范围：0.008-0.7mg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿或者96孔板、研钵、冰、浓硫酸（不允许快递）、蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、称取约0.03g 样本于研钵中研碎，加入0.6mL 试剂一，充分匀浆后转移到EP 管中，80℃水浴提取30min ，3000g ，常温离心5min ，弃上清，留沉淀。
2、沉淀中加入0.3mL 双蒸水，放入沸水浴中糊化15min （盖紧，以防止水分散失）。
3、冷却后，加入0.6mL 试剂二，放入沸水浴中提取15min ，振荡3-5次。
4、冷却后，8000g ，常温离心15min ，取上清液待测。
土壤漆酶活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4009
土壤漆酶活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4009规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体30mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体3mL×1瓶常温保存溶液的配制：1、试剂二：临用前取1瓶加7.5mL试剂一溶解，现用现配，并且尽快使用，用不完的试剂2-8℃可保存一周；若试剂变色则不能使用。
2、试剂三：若有白色物质析出，放于37℃中溶解即可。
产品说明：土壤漆酶（SL）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。
漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。
SLABTS ABTS Radical(420nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、震荡仪、研钵、30-50目筛。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、测定步骤1.分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到420nm，分光光度计蒸馏水调零。
2.加样表：试剂名称测定管对照管土样（g）0.030.03试剂一（μL）135135试剂二（μL）150-置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱准确反应10min。
试剂三（μL）1515试剂二（μL）-1504℃，12000g离心15min，取200μL上清于420nm测定其吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管。
GBSS、SSS活性测定方法
（1）Hepes-NaOH（pH=7.5）1L的配法：50mM HEPES：11.915g Hepes；5 mM EDTA：1.4613g EDTA；1 mM DTT：0.1543g DTT；2mM KCl：0.149g KCl；1%PVP（K30）：10g PVP；0.2N NaOH：大约需要150ml用来调pH值为7.5。
尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( UDPGPPase) ,腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶( ADPGPPase) ,可溶性淀粉合成酶( SSS) ,淀粉粒结合淀粉合成酶( GBSS)。
1、不同小麦品种籽粒淀粉组分及相关酶活性的差异赵俊晔于振文* 孙慧敏马兴华孙强*【粗酶液的提取】取10~20个小麦籽粒，记数称重后加8 mL pH 7.5的Hepes-NaOH缓冲液，冰浴研磨。
取30 u L 匀浆液, 加 1. 8 mL 缓冲液1 000×g冷冻离心3 min, 沉淀物经Hepes-NaOH缓冲液悬浮后用于GBSS 活性的测定。
其余匀浆液20000×g 4℃离心10 min, 上清液用于测定UDPGP -Pase、ADPGPPase和SSS 的活性。
【UDPGPPase、ADPGPPase 活性测定】10μL 5 mmol/ L UDPG(或ADPG)加50μL 50 mmol/ LMgCl2, 100μL缓冲液, 20μL酶提取液(ADPGPPase活性测定用50μL) ,加100μL 20mmol/L PPi起始反应, 15 min 后,沸水浴1 min 终止反应, 冷却,加100μL 6 mmol/L NADP, 1.5 IU P -gucomutase, 0.25 IUG6P -dehydrogenase, 0.3 mL 缓冲液, 30℃反应10 min后, 340 nm 波长比色, 用G-1 -P做标准曲线。
【SSS、GBSS 活性测定】0.35mL反应介质(最终浓度50mmol/ L Hepes -NaOH, 16mmol/L ADPG, 15 mmol/ L DTT, 0.7 mg Amylopectin, pH 7. 5)30℃保温5 min, 加入50μL 酶提取液, 反应20 min后,沸水浴1 min 终止反应, 冷却后加入0.35 mLADP-ATP 反应介质(含50 mmol/ L Hepes -NaOH, 4mmol/ L PEP, 200 mmol/ L KCl , 10 mmol/L MgCl2, 1.2units Pyruvate Kinase, pH 7. 5) , 30℃反应30 min, 用FG -300 型发光光度计测定ATP 生成量。
直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法
直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法直链淀粉含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异⼤的样本做预测定。
货号：BC4265规格：100T/96S产品简介：直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着⾷品的⾷⽤品质和外观品质，与⾷品安全息息相关。
直链淀粉和碘形成蓝⾊络合物，利⽤⼄醇分开样品中的可溶性糖和淀粉，再⽤碘与其反应得到直链淀粉含量。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离⼼机、微量玻璃⽐⾊⽫/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、⼄醚、⽆⽔⼄醇、EP 管。
产品内容：试剂⼀：液体110mL×1瓶，4℃保存；试剂⼆：⼄醚100mL×1瓶，⾃备；试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存；O=9mL：91mL混匀，现⽤现配，4℃保存半年。
试剂四：将试剂三：H2试剂五：液体0.5mL×1⽀，4℃保存；粉剂⼀：粉剂×1瓶，4℃保存；粉剂⼆：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂六的配制：将粉剂⼀倒⼊粉剂⼆，⽤蒸馏⽔定容⾄10mL，4℃避光保存⼀个⽉。
标准品：10mg直链淀粉×1⽀，4℃避光保存。
临⽤前加⼊0.1mL⽆⽔⼄醇和0.9mL试剂三，混匀后封⼝膜封⼝，沸⽔浴⾄溶解，即10mg/mL的直链淀粉。
吸取0.1mL加⼊0.9mL蒸馏⽔配制为1mg/mL的标准溶液待⽤。
操作步骤：⼀、直链淀粉的提取：称取0.005g烘⼲样本于研钵中研碎，加⼊1mL试剂⼀，充分匀浆后转移到EP管中，80℃⽔浴提取30min，3000g，25℃离⼼5min，弃上清，留沉淀，加⼊1mL试剂⼆（⼄醚）振荡5min，3000g，25℃离⼼5min，弃上清，留沉淀，加⼊5mL试剂四充分溶解，90℃⽔浴10min，冷却后3000g，25℃离⼼5min，取上清待测。
⼆、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节双波长⾄550nm和485nm，蒸馏⽔调零。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
上清液体积，0.15mL；V 提取：加入提取液体积，1mL；ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×10-3mL/nmoL/cm； d：比色皿光径，1cm；T：反应时间，20min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g。 b.使用 96 孔板测定的计算公式如下： 1、按样本蛋白浓度计算：
试剂名称（μL）
测定管
样本
100
反应液Ⅰ
135
混匀，30℃保温 20 min，置沸水浴中 1 min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却
试剂八
75
混匀，30℃保温 30 min，置沸水浴中 1 min（盖紧，防止水分散失），冰浴冷却，10000g 常
温离心 10min，取上清液（如果一次性测定样本较多，可以将试剂四、五和六按比例配成混
V 测：测量体积，0.26m L； V 样：加入样本体积，0.1m L； V 反总：反应体积，0.31mL； V 上清：加入上清液体积，0.15mL； V 提取：加入提取液体积，1mL； ε：NADPH 摩尔消光系数，6.22×10-3mL/nmoL/cm； d：比色皿光径，1cm； T：反应时间，20 min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样品质量，g。
单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。 GBSS 活性（U/mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V 测]÷(Cpr×V 样÷V 反总×V 上清) ÷T =72×ΔA÷Cpr。 此法需要自行测定样本蛋白质浓度。 2、按照样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。 GBSS 活性（U/g 鲜重）=[ΔA÷（ε×d）×V 测]÷(W÷V 提取×V 样÷V 反总×V 上清) ÷T=72×ΔA÷W。
入试剂三混合溶解。这样可以分两批配制并且测定。
产品说明： GBSS（EC 2.4.1.21）以束缚态存在于淀粉体中，催化淀粉链的加长反应，主要负责直链淀粉的合成。 GBSS 催化 ADPG 与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上，同时生成 ADP；进一步通
过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和 6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化 NADP+还原为 NADPH，其中 NADPH 生成量与前一步反应生成的 ADP 数量呈正比，通过 340nm 下测定 NADPH 的增加量，可以计算 GBSS 活性。
第2页共3页
北京索莱宝科技有限公司
2、按照样本鲜重计算 单位的定义：每 g 组织在 1mL 反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
GBSS 活性（U/g 鲜重）=[ΔA÷（ε×d）×V 测]÷(W÷V 提取×V 样÷V 反总×V 上清) ÷T=43.2×ΔA÷W 。 V 测：测量体积，0.26m L；V 样：加入样本体积，0.1m L；V 反总：反应体积，0.31mL；V 上清：加入
1、按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每 mg 组织蛋白在 1mL 反应体系中每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
GBSS 活性（U/mg prot）= [ΔA÷（ε×d）×V 测]÷(Cpr×V 样÷V 反总×V 上清) ÷T=43.2×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
需自备的的仪器和用品： 紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、
研钵、冰和蒸馏水。
第1页共3页
北京索莱宝科技有限公司
操作步骤： 一、粗酶液制备
称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。10000g ，4℃离心 10min，弃上清，在沉淀中加入 1mL 提取液充分混匀，置冰上待测。 二、测定步骤 1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。 2、在 EP 管中按顺序加入下列试剂
合液）
上清液
150
试剂五
100
试剂六
5
试剂七
5
混匀后立即转移 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中， 340 nm 波长下记录初始吸光度 A1 和 2min
后的吸光度 A2，计算ΔA=A2-A1。
注意：试剂二如有沉淀，加入之前要使之充分溶Hale Waihona Puke 混匀。三、GBSS 活性计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下：
北京索莱宝科技有限公司
结合态淀粉合成酶（GBSS）活性检测试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。 货号：BC3295 规格：100T/96S
产品内容： 提取液：液体 100mL×2 瓶，4℃保存； 试剂一：30mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存； 试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃保存； 试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存；临用前加入 5mL 试剂一充分混匀备用； 试剂五：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 10mL 试剂一充分混匀备用； 试剂六：粉剂×2 支，-20℃保存；临用前加入 416μL 双蒸水，充分溶解备用； 试剂七：液体 250μL×2 支，-20℃保存； 试剂八：液体 12.5μL×2 支；每支临用前加入溶解好的 4mL 试剂四。 反应液Ⅰ的配制：临用前在试剂二中加入 14mL 试剂一，缓慢加热，逐渐升温使其溶解，冷却后将其加