GGT 文档,γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒标准操作规程
γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程
γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程1、用途：测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
2、检验原理：其在GGT的作用下，生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸，后者在405nm波长处有最大吸收，其生成量与血浆中GGT活性成正比。
根据测定405nm波长下吸光度增加的速率，即可测出血清中GGT活性。
3、适用仪器：AU480奥林巴斯全自动生化分析仪。
4、样本要求：4.1、样本种类：新鲜无溶血血清。
4.2、样本采集：常规静脉采血约3ml，不抗凝。
置普通管中，或采用含有分离胶的真空采血管。
4.3、样本干扰：对反映吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存：血清样本2℃—8℃可稳定7天，-20℃可保存一个月，忌反复冻融。
5、检测方法：5.1、试剂的准备：试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤：1cm）2、全自动生化分析仪操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准：用K因素进行试剂空白校准，也可使用Roche公司校准品进行校准操作，当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。
5.4、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
6、参考范围：（各医院应该根据本地区实际情况建立自己的参考范围）7、注意事项：7.1、试剂具有一定的酸碱性，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处乱扔，防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品，或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂，不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献：陆永绥、李清华、张伟民主编，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江大学出版社，2006.王惠萱、李雪梅、王冈，临床检验操作手册，云南科技出版社，2008.中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程（第三版），东南大学出版社，2006。
谷氨酰转移酶测定
谷氨酰转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐在上述反应中， 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比，通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。
3 标本：3.1 病人准备：无特殊。
3.2 类型：血清或EDTA血浆。
3.3 标本存放：室温可保存8小时；2～8℃可保存3天；-20℃保存至少可稳定1周。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液100mmol/L甘氨酰甘氨酸 125mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液100mmol/LL-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺14.5mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存:2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求百奥泰康
γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）测定试剂盒（GCANA底物法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
1.1 产品规格试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5；试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1；试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2；试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1；试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4；试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1；试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2；试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1；试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3；试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1；试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1；试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2；试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1；试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1；试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1；试剂1:40mL×1，试剂2:；8mL×1；试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1；试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1；1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲溶液≥50.0mmol/L 双甘肽≥100.0mmol/L 试剂2：L-g-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺≥3.0mmol/L2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。
γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4494
γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4494规格:50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二液体12.5mL×1瓶4℃保存试剂三液体44.5mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、工作液（在试剂一瓶中配制）：临用前配制，把试剂二倒入试剂一瓶中，充分溶解（室温过低时可以40℃水浴促进溶解）；然后把试剂三倒入试剂一瓶中，混匀后室温保存。
产品说明：γ-GT是γ-谷氨酰循环中的关键酶，催化GSH降解。
γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基转移到受体。
也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解，产生谷氨酸盐，在细胞外谷胱甘肽新陈代谢中起了重要的作用。
γ-GT催化谷氨酰对硝基苯胺中γ-谷氨酰基转移给N-甘氨酰甘氨酸，生成对硝基苯胺，在405nm有特征光吸收；通过测定405nm光吸收增加速率，来计算γ-GT酶活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000rpm4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：称取约0.1g样本，加提取液1.0mL充分研磨，于4℃，10000rpm离心15min，取上清液待测。
血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定
血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定1.实验原理GGTGlupa-C+gly-gly ——→Glu-gly-gly+5-氨基-2-硝基苯甲酸在波长405nm处测定5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率，计算出GGT活力。
2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。
4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：中生谷氨酰转移酶试剂盒（试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂空白吸光率A405nm(1.0cm)>0.8，或有混浊和可见颗粒时，请不要再使用。
6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品：使用Cfas提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪操作规程.SOP 文件。
9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以OLYMPUS多项校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以U/L报告。
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求科美
γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）的活性。
1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分：双甘肽125mmol/L 试剂2主要组分：L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺14mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度值，应不大于0.7。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.005。
2.4分析灵敏度测试50U/L的γ-谷氨酰基转移酶时，吸光度变化率应不小于0.01。
2.5准确度测定国家标准物质GBW（E）090283，相对偏差应不超过15%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（50±5）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（50±5）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围GGT试剂盒在（10，450）U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；在(10，50］U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；在(50，450)U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
在GGT试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
(完整版)SOP标准操作程序-GGT
SOP标准操作程序GGT γ-谷氨酰转移酶（货号：OSR6119，OSR6219）实验原理：γ-谷氨酰转移酶的测量用于诊断和治疗肝脏疾病，如，酒精性肝硬变和初级和次级肝肿瘤。
升高的血清γ-谷氨酰转移酶（GGT），有时称作GGTP（EC2.3.2.2）可出现在所有的肝脏疾病中。
在检测阻塞性黄疸，胆管炎和胆囊炎时，它比碱性磷酸酶，转氨酶和亮氨酸氨肽酶（LAP）更灵敏。
GGT水平在肝病中升高较快，比LAP或5’-核苷酸酶水平有较高的值1。
中等程度的升高在传染性肝炎中可看到。
但是，升高的GGT水平也可以在慢性酒精中毒，糖尿病和某些神经系统疾病中注意到。
GGT的正常水平可出现在骨骼疾病中，因此，血清GGT可用于确定疾病是骨骼的，还是肝胆的。
方法奥林巴斯AU640 GGT程序是基于Szasz程序的修改方法2，3。
GGT催化水溶性底物，γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺中的γ-谷氨酰到甘氨酰甘氨酸中，生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在410/480nm时吸光度的改变是由于5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的形成，它的形成与标本中GGT的活性成正比。
GGTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+ 甘氨酰甘氨酸-------------﹥L-γ-谷氨酰-甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐标本：病人准备：无特殊要求。
类型：标本最好是无溶血的血清。
如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是EDTA。
肝素化血清可能会在反应混合物中变得浑浊；柠檬酸盐，草酸盐和氟化物可使活性降低10%到15%。
标本稳定性：GGT测定应在标本收集后尽快进行。
血清中的GGT在4℃下可稳定一月，在-20℃稳定一年4。
仪器与材料:仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪材料：奥林巴斯AU640 γ-谷氨酰转移酶（GGT）参与反应成份的最终浓度：Tris缓冲液（pH7.95）100mmol/L甘氨酰甘氨酸100 mmol/LL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 4.0 mmol/L其中含有保护剂。
谷氨酰转肽酶GGT测定标准操作程序SOP文件
嗜酒或长期接受某些药物如苯巴比妥、苯妥因钠、双苯内酰脲、安替比林等者，血清γ-GT活性常常升高。口服避孕药会使γ-GT值增高20%。
在隐性酒精中毒时，该指标也很灵敏，可以用作筛查试验。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-16
GGT测定
版序：ABCD
页码：第4页，共4页
GGT参数设置表
9注意事项
9.1血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。
9.2换算公式：U/l×0.0167=ukat/l。
9.3仅应用于体外诊断。
9.4扔弃废物应符合当地的法规。
10抗干扰能力：
10.1标准：回收率在90％－110％之间。
10.2黄疸：黄胆指数达到44时不会有明显干扰。（直接和间接胆红素浓度约为44mg/dl）。
S1:0.9%NaCl
S2:C.f.a.s
贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备：直接使用。
定标频率：A试剂盒上机28天后
B试剂批号更换后
C由质控结果决定
4.3质控物
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
贮存条件WAVELENGTH(PRIMARY) [ 415 ]
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1、方法依据：
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）测定试剂盒测定方法
2、适用范围：
适用于人血清γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）的测定。
3、试剂仪器：
3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2 试剂储存：未打开的试剂盒避光保存于2℃～8℃，有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.
4、操作程序
4.1方法原理
γ-GT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。
本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物，将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽，生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。
在405 nm进
行吸光度检测，吸光度升高的速率与标本中γ-GT 活力成正比。
γ-GT
L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽
4.2样本要求
新鲜血清样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
血清样本于20℃～25℃保存可稳定6天
4.3上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2 校准：
4.3.2.1 标准液的准备：标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，
复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：
1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数
4.4参考范围
女：9～39 U/L
男：11～61 U/L（37℃）
（注：各实验室应有自己的参考范围。
）
4.5 方法评价
线性范围：4～650 U/L。
样本中含量超出可报告范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。
反应曲线异常时应进行重复测定确认。
精密度：批内变异系数：CV ≤ 3.0%；
批间变异系数：CV ≤ 4.5%。
分析灵敏度：本试剂盒的检测低限4U/L。
5、临床意义
GGT 主要存在干细胞膜和微粒体上，参与谷胱甘肽的代谢。
肾脏、肝脏和胰腺含量丰富，但血清中 GGT 主要来自肝胆系统。
升高：肝胆疾病：病毒性肝炎、原发性或转移性肝癌、梗阻性黄疸、急、慢性酒精性肝炎、肝硬化失代偿期或伴有炎症、进行性纤维化。
其他：系统性红斑狼疮、单核细胞增多症等患者血清 GOT均可轻度增高；抗癫痫药（扑癫酮）、镇静药（巴比妥、苯妥英钠）、三环类抗抑郁药、对乙酰氨基酚或其他能诱导肝微粒体生物转化系统的药物均可致 GGT 升高
6、参考文献
1.J.Clin.Chem.Clin.Biochem.14,421(1976)
2.Z.Klin.Chem.Klin.Biochem.12,228(1974)
3.Persijn,J.P.,van der Slik,W.,J.Clin.Chem.Clin. Biochem.14, 421(1976)
7、相关文件
《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》
8、其他
仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。